正常生育男子和精索静脉曲张不育男子精子形态学分析

本文报道用改良巴氏染色法对144例生育男子和64例精索脉曲张不育者的精子形态学进行分析的结果。生育男子组和精索静脉曲张患者组正常形态精子的范围(均值±标准差)分别为:53-99％(79.7±12.5),5-90％(54.5±20.5)。后者显著低于前者。并随精索静脉曲张的严重程度而降低。精索静脉曲张者中精液内含有小头畸形精子的例数比例显著高于生育者,同时精子中大头、小头,尖头和不定型精子的比例也显著高于生育者。     

不同染色方法对精子形态学分析结果的影响

目的 探讨不同染色方法 对精子形态学分析结果 的影响.方法 选取20例人精液样本,每例样本制作2张涂片,分别采用改良巴氏染色方法 和Diff-Quik快速染色法进行染色,每例样本剩余精液经生理盐水洗涤后再制作2张涂片,也分别用上述两种染色方法 进行染色.染色后的所有涂片在精子形态自动分析软件上进行分析.结果 未经洗涤的精液涂片经改良巴氏染色和Diff-Quik快速染色正常形态精子百分率分别为7%(95%CI,5%～9%)、9%(95%CI,6%～12%),两者差异无统计学意义.洗涤后改良巴氏法和Diff-Quik法评估的精子正常形态百分率有明显提高,并且Diff-Quik法评估的精子正常形态百分率(15%,95%CI12%～18%)显著高于改良巴氏法(10%,95%CI 9%～11%).结论 未经洗涤的精子涂片两种评估正常形态精子百分率差异无统计学意义;精子洗涤后涂片染色对计算机精子形态学自动分析结果 有显著影响,且Diff-Quik法提高效果更明显.     

考马斯亮蓝染色法检测人精子形态和顶体反应

目的 :探讨考马斯亮蓝G2 5 0染色法在人精子畸形率、顶体完整率和顶体反应检测中的应用。　方法 :用瑞 吉染色法和考马斯亮蓝G2 5 0染色法分别对获能前后和孕酮诱导顶体反应后的人精子进行涂片染色 ,观察其形态 ,并计算精子畸形率、顶体完整率及顶体反应率。　结果 :瑞 吉染色法和考马斯亮蓝G2 5 0染色法在检测人精子畸形率和顶体完整率上差异无显著性 (P >0 .0 5 )。孕酮诱导顶体反应后的精子用考马斯亮蓝G2 5 0染色后呈现两种类型 :顶体区染成紫蓝色和不着色或染成淡紫色 ,后者随诱导时间延长而增加 ,可能代表了已发生顶体反应的精子。诱导 1h的顶体反应率为 (75 .1± 3.8) %。　结论 :考马斯亮蓝G2 5 0染色法可作为检测人精子形态和顶体反应的可靠而实用的方法     

少、弱精子症中精子形态缺陷类型及发生率的检查分析报告

目的 探讨在少、弱精子症中精子形态缺陷类型及其发生率.方法 对精液常规和改良巴氏染色检查的结果进行统计学分析.结果 （1）男性不育症中畸形精子症的发生率约为75%;精子头部缺陷的发生率约为70%,各种头部缺陷中空泡头畸形的发生率占首位,约为20%.（2）少精子症患者的正常形态精子百分率的中位数约为2.97%（P=0）,弱精子症患者的中位数为6.67%（P=0.003）.结论 （1）精子头部缺陷是精子畸形的主要类型;（2）少、弱精子症的畸形精子比例升高;（3）精子形态缺陷分析对选择辅助助孕方式具有应用价值.     

扫描电镜下畸形精子增多症患者的精子形态观察

目的 用扫描电镜对巴氏染色正常形态≤4％的畸形精子增多症患者的精子微细结构进行观察分析。方法 经改良巴氏染色后正常形态≤4％定为实验组，正常形态〉14％定为对照组。两组患者的精液标本在扫描电镜下观察，并将结果进行分析比较。结果 精子顶体表面光滑率对照组88．21％，实验组45．34％；顶体缺失率对照组0．30％，实验组3．00％：环状沟平滑对照组72．56％，实验组47．68％；环状沟呈波浪状对照组13．12％，实验组37．32％；线粒体鞘异常对照组12．75％，实验组53．22％：胞浆小滴对照组0．90％，实验组2．60％；尾部畸形对照组6．74％，实验组17．46％，两组比较差异均有显著性（P〈0．05）。结论 正常形态≤4％的畸形精子增多症患者精子除宏观结构有异常外，顶体、环状沟、线粒体、尾部等微细结构异常发生率增加。     

复方玄驹胶囊对少精子症患者的疗效观察

目的 探讨复方玄驹胶囊对少精子症患者精子密度、活力及形态的影响.方法 2007年2月-12月在门诊就诊的不育患者中,将少精子症患者72例随机分为治疗组和对照组,分别给予复方玄驹胶囊和五子衍宗丸口服,于服药前、服药3个月后,运用WLJY-9000伟力彩色精子质量计算机辅助精液分析系统(CASA)检测精子密度、活力.以改良巴氏染色法将精子染色后运用CASA检测精子形态变化.结果 复方玄驹胶囊治疗组精子密度、活力均较治疗前明显提高(P＜0.05):精子畸形率和精子头部畸形率降低(P＜0.01),并且与对照组比较有显著性差异.结论 复方玄驹胶囊能够提高精子密度、活力及活率,降低精子畸形率和精子头部畸形率,且效果优于中药传统复方五子衍宗丸.     

精索静脉曲张不育患者精子形态学分析及其治疗后的初步观察

应用改良巴氏染色法对５４例精索静脉曲张不育患者的精子形态学进行了分析并初步观察治疗后的效果。结果表明，精索静脉曲张Ⅰ度组、Ⅱ度组和Ⅲ度组的精子畸形率均显著高于正常生育力组（Ｐ＜０．０１），而且尖头精子、顶体异常、老化精子和不定形精子数都有较高的比率。经手术治疗后，初步观察到Ⅱ度组的精子畸形率显著减少（Ｐ＜０．０１），但是Ⅲ度组却无显著变化（Ｐ＞０．０５）。提示①精索静脉曲张导致不育的原因之一是正常     

四省一个直辖市精液分析外部质量控制网络建立的初步研究

目的在全国四省一市,建立精液分析外部质量控制网络。方法 2017年在辽宁省沈阳市、甘肃省兰州市、四川省成都市、吉林省长春市和北京市,开展精液分析外部质量控制网络建立方法的初步探索。主要参加实验室为各省市三甲医院的男科实验室、生殖中心实验室、精子库实验室和临床检验实验室,共106家单位。采用在指定实验室集中发放质控品,现场评估的形式。主要外部质量控制的方法采用《WHO人类精液检查和处理实验室手册(第5版)》精液分析标准化方法,包括改良Neubauer血细胞计数板评估精子浓度、活动力视频录像评估、精子活动力、伊红苯胺黑评估精子存活率、巴氏染色方法评估精子形态,分别用变异系数(CV)和Youden图评估外部质控的结果。结果精子存活率评估四省一市两个质控品的CV均在15%以下;而仅吉林省精子浓度和辽宁省精子活动力评估中两个质控品的CV在15%以下;精子形态学评估四省一市两个质控品的CV均在15%以上。Youden图分析精子浓度显示:23.53%、25.00%、36.84%、10.00%和18.18%的质控结果均在95%可信区间(95%CI)内;Youden图分析活动力显示:9.38%、25.00%、44.44%、12.50%和30.00%的质控结果均在95%CI内;Youden图分析精子存活率显示:8.33%、37.50%、47.37%、10.00%和20.00%的质控结果均在95%CI内。结论本研究证实外部质量控制网络的建立方法可行且结果可靠,其中精子存活率最容易质控,易于操作;精子浓度和活动力的外部质控方法还需进一步优化;而精子形态评估最难质控,使用桥连显微镜的方法便于质控。     

显示网状,胶原和肌纤维联合新染色法的研究

显示网状、胶原和肌纤维联合新染色法的研究孙幼芳，余景瑞网状、胶原和肌纤维的染色变化，对临床病理及研究工作起着重要的作用。我们应用Ｆｏｏｔ氏和Ｖ、Ｇ氏染色原理，简化程序，将改良的两种染色法联合用在一张组织切片上，获得良好染色效果。材料和方法一、染液配制...     

复发性流产与精子畸形率的相关性

目的探讨复发性流产与丈夫精子畸形率的相关性。方法按纳入标准将研究对象分成复发性流产患者丈夫组（流产组）（n=37）、孕前常规检查组（孕检组）（n=48）和正常生育男性组（生育组）（n=26）,采用改良巴氏染色法,按照严格Kruger标准检测对象精子畸形率,以及精液进行常规分析。结果三组年龄、禁欲时间、精液量、精子密度、精子活力以及颈部和中段畸形率、尾部畸形率等无统计学差异（P〉0．05）;三组间精子头部畸形率和总畸形率有显著性差异（P〈0．05）。三组问进一步两两比较,流产组与孕检组及生育组精子头部畸形率均有非常显著性差异（P〈0．01）,孕检组与生育组精子头部畸形率无显著性差异（P〉0．05）;流产组精子总畸形率与孕检组有显著性差异（P〈0．05）,与生育组有非常显著性差异（P〈0．01）,两孕检组与生育组无显著性差异（P〉0．05）。结论丈夫精子畸形率高与妻子复发性流产存在相关性,精子畸形率高与复发性流产的之间相关机理尚需进一步研究。     

人精子顶体反应3种检测方法的比较与评价

目的:寻找简便和准确的精子顶体反应检测方法。方法:正常人精液标本液化后混合,分成6组,分别用金霉素染色法、考马斯亮蓝染色法和酸性磷酸酶检测法对孕酮诱导顶体反应前后的人精子进行形态学观察并且对顶体反应率进行数据统计。结果:经考马斯亮蓝和金霉素染色后,发生顶体反应的精子和没有发生顶体反应的精子均有明显的形态差异;经考马斯亮蓝染色、金霉素荧光染色和酸性磷酸酶测试法检验,孕酮诱导组与阴性对照组的精子顶体反应率均有明显差异(P<0.05)。结论:3种方法均可作为顶体反应的检测手段,但考马斯亮蓝染色更为简便和稳定。     

精子核成熟性与少、弱、畸形精子症关系初探

目的探讨少、弱、畸形精子症以及精子头部形态缺陷和精子核成熟性的关系。方法2005年3月至2005年7月329例不孕不育患者(其中少精子症患者50例、弱精子症52例、畸形精子症83例)分别采用精液常规检查、精液改良巴氏染色检查以及精液苯胺蓝染色检查。结果①少精子症组患者精液苯胺蓝染色阳性率的中位数为12%(P=0.035),弱精子症组为8%(P=0.947),畸形精子症组为10%(P=0.033)。②少精子症患者精液苯胺蓝染色阳性率与锥形头畸形呈正相关(r=0.635),畸形精子症患者精液苯胺蓝染色阳性率与大头、小头呈正相关(r=0.368、0.304),而和梨形头畸形呈负相关(r=-0.396)。结论少精子症患者和畸形精子症患者中核未成熟精子比例增加,精子头部形态中大头、小头和锥形头畸形与核未成熟精子正相关。     

精子快速染色法

目前,精子染色方法较多,但操作至少需要1030ｍｉｎ。笔者在血细胞快速染色法[1]基础上进行改进,用于精子形态学观察,使其更为简便、快捷,现将结果报道如下。1　材料与方法1.1　快速染液　甲液　ＫＨ2ＰＯ46.64ｇ、Ｎａ2ＨＰＯ42.56ｇ、伊红丫4.0ｇ、石炭酸50ｍｌ、蒸馏水1000ｍｌ,先用蒸馏水溶解ＫＨ2ＰＯ4、Ｎａ2ＨＰＯ4,充分溶解后,再加入伊红丫、石炭酸,充分混匀,37℃放置24ｈ即可使用。乙液　ＫＨ2ＰＯ46.64ｇ、Ｎａ2ＨＰＯ42.56ｇ、亚甲蓝　4.0ｇ、蒸馏水1000ｍｌ,配法同甲液。1.2　瑞姬氏染液　按文献[2]配制。1.3　快速染色　把制备…     

237例意向生育二孩男性精液常规与精子DNA损伤的相关性分析

目的对40岁以上有意向生育二孩的男性精液常规参数与精子DNA损伤进行相关性分析。方法收集2015年11月至2016年9月来本中心就诊的40岁以上有二孩生育意愿的男性精液标本237例。分别利用计算机辅助方法进行精液常规分析,利用改良巴氏染色法进行精子形态学分析,通过染色质扩散法(SCD)检查精子DNA碎片率。依据年龄与精液常规主要参数进行分组,分析各组精子DNA损伤差异,探讨精液常规各参数与精子DNA损伤程度的相关性。结果 237例研究对象平均年龄为(43.7±3.4)岁,精液体积(3.2±1.5)ml,精子浓度(67.5±38.9)×106/ml,精子前向运动率(45.0±22.2)%,正常形态精子(9.6±5.5)%,精子DNA损伤程度(21.8±14.9)%;精子DNA碎片率与精子前向运动、精子正常形态成低度负相关(r=-0.333、r=-0.365),与年龄成极弱正相关(r=0.146),与精液体积、精子浓度无相关关系(r=-0.064、r=0.057)。结论精子DNA损伤随着年龄的增加而增加,与精子活力及形态成负相关,40岁以上有意向生育二孩的男性精液常规分析可与精子DNA碎片进行联合分析。     

数码显微摄影在精子形态学分析中的应用

目的 探讨数码显微摄影在进行精子形态学分析时的优缺点.方法 在进行传统光镜下形态分析的同时应用数码显微摄影图像,对20例精子形态涂片进行形态分析,比较数据的一致性.使用数码显微摄影得到的500个精子图象,统一形态分析标准,观察其在精子形态分析质量控制中的作用.结果 应用数码显微摄影进行形态分析的正常形态精子率为(16.9±6.2)%,传统光镜下形态分析的正常形态精子率为(16.54±6.3)%,P>0.05,使用数码显微摄影图像统一标准前后的人员评估正常形态精子百分率分别为(4.64±2.2)%和(2.0±0.8)%(P>0.05),差异无统计学意义.结论 应用数码显微摄影进行精子形态分析可视为传统的精子形态分析方法的改良和补充,是室内及室间质量控制不可缺少的媒介.     

精子DNA完整性与精液参数的相关性研究

目的 探讨精子DNA完整性与精液参数之间的相关性.方法 收集2009年3月至2009年7月在解放军105医院生殖中心就诊的220例男性患者的精液标本,采用吖啶橙荧光染色法(AOT)检测精子核DNA碎片指数(DFI).按DFI值分为DFI≤30%、30%50%3组,对DFI与各项精液参数的相关性进行分析.结果 精子活率、活力力、正常形态率随DFI值的升高逐渐降低,各组间均有显著性差异(P<0.05);DFI与精子活率、活动力、正常形态率均呈显著负相关(P<0.05),与精液量及密度无显著相关性.结论 精子DNA损伤可导致精子形态学异常和活力下降,精子DFI是评估男性生育力的一个较好的参考指标.     

不同浓度低渗肿胀试验结合伊红染色对精子质量的评估

本文应用不同浓度精子低渗肿胀试验九红染色法，对８例生育男性和１０例不育男性的精子膜功能进行评估。结果表明：１、活精子尾部低渗肿胀率均达到９０％以上，生育组与不育组无显著性差异；２、在１５０ｍＯｓｍ低渗溶液的稀释倍数为３－７倍之间，精子头部膜的损害程度在生育组与不育组之间存在显著性差异；３、在不同浓度的低渗溶液中，精子头部膜与精子尾部膜对低渗溶液的顺应性并不一致。实验证明不同浓度低渗肿胀试验结合伊红     

两种精子处理方法的卵细胞胞质内单精子显微注射结局的比较

目的:评价密度梯度离心和改良上游法两种处理活动精子的分离方法在卵细胞胞质内单精子显微注射(ICSI)中的效果,从而指导临床应用。方法:选取2004年10月~2005年4月在本中心完成的42例患者42个周期为研究对象,前瞻性比较了两种精子分离方法的受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、精子畸形率、精子回吸收率等。结果:两种方法分离精子所获得的ICSI胚胎移植(ICSI-ET)中,受精率、卵裂率、优胚率、临床妊娠率均无明显差异,但是改良上游法所获得的精子畸形率明显高于密度梯度离心法(P<0.01);重度少精子症密度梯度离心法回吸收精子优于改良上游法(P<0.01)。结论:在辅助生育技术ICSI-ET中,密度梯度离心法分离活动精子临床妊娠结局与改良上游法无明显差异;除对重度少精子症者外,均可以采用改良上游法。     

两种冷冻方法对形态正常精子百分率的影响

目前人类精液冷冻方法主要分为速冻和缓慢冷冻法两大类。精液冷冻保存过程中，精子经历了降温冷却、冻结、解冻复温，其中冰晶形成对精子结构不可避免造成损伤。精子形态是决定精子能否受精的重要因素。低温是否对精子形态产生影响，本研究比较了两种冷冻方法对人精子形态影响，现报告如下。     

凋亡精子DNA两种染色法的比较

目的:对荧光素Hoechst33342和Hoechst33342/碘化丙啶(PI)两种评价精子质量的染色法进行比较分析。 方法:将已分离提取的精子悬液与DNA拓扑异构酶抑制剂浓度为0、0.15、15μmol/L喜树碱(CAM)或浓度为0.37、 3.7mmol/Lgenistein(GEN)混合后,置37℃孵育4h。通过Hoechst3342单染或Hoechst3342/PI复染,荧光显微镜检 查,对具独立细胞周期的凋亡和坏死精子进行分析,以比较这两种染色方法的效果。　结果:单染法不能区分精子 活率;复染法能鉴定经不同剂量CAM和GEN处理后精子活率下降程度和坏死精子的增加量。CAM和GEN处理可 使凋亡精子数量增多两倍。　结论:精子凋亡和剂量依赖性坏死增多与两种拓扑异构酶抑制剂相关。Ho echst33342/PI复染比Hoechst33342单染法对精子的分析敏感度更高,并可对精子坏死和凋亡作出定量分析。