艰难梭菌感染C57BL/6小鼠模型的建立方法研究

目的 建立C57BL/6小鼠抗菌药物诱导艰难梭菌感染模型,为更有效地认识人类艰难梭菌感染性疾病的发病机制及治疗措施提供依据。方法 C57BL/6小鼠经抗菌药物混合液预处理3天后,进行克林霉素腹腔注射。之后给予高、中、低浓度艰难梭菌ATCC43255悬液灌胃,建立艰难梭菌感染诱导肠损伤和结肠炎的CDI模型。观察小鼠的病死率,平均相对体重、结肠组织病理学评分和粪便艰难梭菌A&B毒素变化。结果 小鼠经抗菌药物处理和艰难梭菌灌胃后,出现腹泻,体重下降,粪便艰难AB毒素检测阳性。结肠病理切片可见炎性细胞浸润和组织坏死等结肠炎表现。随着灌胃菌液浓度的增加,小鼠症状越重,粪便毒素值越高。造模后存活下来的小鼠即使再次给予艰难梭菌灌胃也不再出现症状。结论 C57BL/6小鼠艰难梭菌感染模型与人类CDI病程变化相似,可进一步用于CDI防治措施的研究。     

慢性应激联合孤养C57小鼠抑郁模型的研究

目的探讨C57小鼠慢性不可预见性温和应激（chronicunpredictablemildstress,CUMS）联合孤养建立抑郁模型的可行性和有效性。方法将30只雄性C57小鼠随机分为CUMS＋孤养组、CUMS＋孤养＋氟西汀组、对照组各10只,前两组CUMS＋孤养致抑郁模型3周,3周后对CUMS＋孤养＋氟西汀组进行氟西汀干预,观察小鼠应激前、应激后及干预后的摄食量／体质量、旷场实验和液体消耗实验变化。结果与对照组比较,建模21d后CUMS＋孤养组和CUMS＋孤养＋氟西汀组小鼠摄食量／体质量、糖水偏好、旷场总行程显著下降（P〈0．05）;经氟西汀干预14d后摄食量／体质量、旷场总行程与对照组比较无明显差异（P〉0．05）,但糖水消耗量明显提高（P〈0．05）,与CUMS＋孤养组比较也有明显改善（P〈0．05）。结论C57小鼠CUMS联合孤养制作抑郁模型的效果肯定,是研究抑郁症较为理想的动物模型。     

清洁级C57BL/6剖腹产小鼠两种分娩期判断方法比较研究

我部利用C57BL／6小鼠在半屏障系统环境设施条件下进行剖腹产术。采用触诊法、推算法判断妊娠小鼠分娩期获得剖腹产仔鼠成活率分别为89.52％、91.75％．两种方法结果十分接近,而在实际应用中。我们认为触诊法对半屏障系统下清洁级剖腹产小鼠分娩期的判断更为方便、实用。     

新生儿缺氧缺血脑损伤大鼠模型的制备

目的在高原低压环境模拟仓内,模拟新生儿在高原环境下缺氧缺血脑损伤的过程,制备不同海拔高度下高原脑损伤大鼠模型。方法 10日龄的SD新生大鼠32只,随机分为4组,即A组(对照组)和3个实验组:B组(2 000 m组)、C组(4 000 m组)、D组(6 000 m组)。对照组大鼠在屏障环境中饲养,实验组大鼠置于高原低压环境模拟仓结合运动的方法制作新生儿高原脑缺氧缺血模型,运动方式为在舱内游泳槽进行60 min/d的游泳运动,且在高原低压环境模拟仓内生活时间每天不得少于20 h。每组大鼠分别在第3、7、11、15天用Zea Longa 5分制评分标准进行行为学评分并且于第15天采集静脉血,在扫描电镜下观察红细胞形态。每组处死后取脑组织进行HE染色和TTC染色。结果 (1)神经病学评分:实验组B组、C组、D组行为学评分与对照组大鼠相比,行为学评分差异显著(P0.05),D组与对照组相比差异非常显著(P0.01)。(2)HE染色结果显示:与对照组大鼠相比,实验组大鼠均有炎症细胞浸润,且炎症细胞浸润程度与海拔高度成正相关。(3)TTC染色表明:在高原环境下大鼠的大脑皮质缺血明显。(4)电镜下观察红细胞形态显示:实验组B组呈帽状结构;C组呈不规则形;D组呈锯齿状。结论本研究采用高原低压环境模拟仓结合运动模拟高原环境制作新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的模型,该模型稳定、可靠,比其他方法更符合缺血缺氧脑损伤的发病机理,与临床贴近,可用于相关研究。     

小鼠缺血后肢移植瘤模型的制作

相对于正常细胞，肿瘤细胞的生存能力更强．在缺血缺氧等较为恶劣的内环境中也能够分裂增殖．侵袭周围组织并发生远处转移。为研究肿瘤生长的这一性状，国外的学者们建立了小鼠缺血后肢移植瘤模型。通过在小鼠缺血后肢上种植肿瘤．观察移植瘤的生长，可以研究缺血缺氧环境下肿瘤的生长情况，营养来源以及外环境对肿瘤血管生成的影响。     

C57BL/6小鼠非酒精性脂肪肝模型的建立研究

目的:利用D12492高脂饲料建立小鼠非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型,为NAFLD的研究提供参考依据。方法:选用健康雄性C57BL/6小鼠40只,随机分组,正常组20只采用普通饲料喂养,模型组20只采用高脂饲料喂养,建立NAFLD模型。分别在第4周、第8周、第12周、第16周进行体质量、肝质量、肝组织匀浆检测,观察血清丙氨酸氨基转移酶、总胆固醇、低密度脂蛋白及肝脏三酰甘油等指标变化,并进行肝脏病理学检查。结果:模型组小鼠体质量从第4周开始高于正常组小鼠（P<0.05~P<0.01）,而肝脏质量从第8周开始高于正常组小鼠（P<0.05）;与正常组小鼠比较,从第8周模型组小鼠丙氨酸氨基转移酶增高（P<0.05~P<0.01）;各时间点模型组血清总胆固醇、低密度脂蛋白均高于正常组（P<0.05~P<0.01）;从第12周模型组小鼠肝组织三酰甘油含量升高（P<0.05和P<0.01）。肝组织HE染色示:从第12周模型组小鼠肝组织见脂肪变,并散布全肝,肝细胞肿胀,细胞质易见脂肪空泡,肝细胞有炎性改变;至第16周模型组小鼠肝脏脂肪变性较前严重,且出现大量炎细胞的浸润。结论:通过高脂饮食诱导的非NAFLD小鼠模型是理想的动物模型,方法简单,重复性强,可为NAFLD的机制研究及药物治疗提供稳定的动物模型。     

C57black/6小鼠全脑缺血模型Fas-L和Caspase-3的表达

目的应用C57black/6小鼠制备全脑缺血模型,观察脑缺血后大脑皮质、丘脑、下丘脑杏仁核部位Fas-L和Caspase-3基因的表达。方法双侧颈总动脉夹闭(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)15 min,造成全脑缺血,24 h后取脑组织进行Fas-L和Caspase-3免疫组织化学染色。结果Fas-L阳性细胞广泛分布在大脑皮质、丘脑、下丘脑、杏仁核。除丘脑外,缺血组其他部位Fas-L阳性神经元细胞密度均显著高于假手术组(P<0.01);缺血组各区域细胞染色灰度值均显著低于假手术组(P<0.01)。Caspase-3阳性细胞在大脑皮质、丘脑、下丘脑均有表达,缺血组各区域阳性神经元细胞密度均显著高于假手术组(P<0.05,P<0.01);缺血组各区域细胞染色灰度值均显著低于假手术组(P<0.01)。结论双侧颈总动脉夹闭法可复制C57black/6小鼠全脑缺血模型,缺血再灌注24 h后,Fas-L和Caspase-3基因在多个区域表达增加。提示该全脑缺血模型中,神经元死亡信号传导需要Caspases基因家族成员表达的加强,且存在缺血后神经元死亡信号传导的外源性通路。     

细胞粘附分子在C57BL/6小鼠垂体的表达与分布

目的：观察几种不同细胞粘附分子（CAMs）（NCAM、L1和CHL1）在C57BL/6小鼠垂体的表达与分布。方法：C57BL/6小鼠经心脏灌注取垂体,行NCAM、L1和CHL1免疫荧光染色及蛋白质印迹检测。结果：蛋白质印迹分析显示垂体NCAM相对表达量显著高于L1（P〈0.01）,但未检测到CHL1。免疫荧光染色显示NCAM广泛表达于垂体前叶,L1选择性表达于垂体前叶细胞和神经垂体,CHL1荧光信号仅见于垂体中叶。结论：NCAM、L1和CHL1在C57BL/6小鼠垂体的表达量有显著差异,其在垂体组织中的分布亦有区别,提示这些CAMs在垂体中的作用不同。     

大鼠阴栓的实验观察和孕鼠模型鉴定方法的比较

目的 探讨大鼠阴栓形成和排放的机理；选择更加方便，快捷、准确的孕鼠模型鉴定方法。方法 采用托盘阴栓检查法，进行SD大鼠阴栓实验观察和孕鼠模型鉴定方法的比较。结果 发现SD大鼠是排多栓的即有多个阴栓型；阴栓数与孕鼠的仔胎数呈一定相关性；托盘阴栓检查法不仅与精子检查法的效果相当，而且还有其他的优点。结论 （1）大鼠是多次射精的；鼠间大鼠排栓差异较大，而阴栓间的差异不显著；阴栓数与受孕胚胎数有关。（2）托盘阴栓检查法完全可以替代精子检查法用于大鼠孕鼠模型的鉴定。（3）托盘阴栓检查法在大量提供孕鼠模型，选育良种强化种群，提高实验动物生产计划的准确性等方面具有实际意义。     

汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性抗原的检测

目的通过检测汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性病毒抗原,以建立汉坦病毒感染动物的评价体系。方法将汉坦病毒陈株按照原病毒液、10-1、10-2三个滴度经肌肉注射感染C57BL/6小鼠,在感染后的第3、6、9、12、15天,分别取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等组织研磨后制成病毒悬液,以ELISA法检测各组织中的病毒特异性抗原。结果 C57BL/6小鼠感染汉坦病毒后短期内在其肝脏和脾脏可以检测到特异性抗原,随着时间的延长,这些抗原逐步消失。结论上述结果为建立汉坦病毒感染动物的评价体系提供了一种参考。     

CCl4和PS两种SD大鼠模型肝纤维化进程时效关系对比研究

目的　比较CCl4 法和PS法两种肝纤维化制模方法在肝纤维化形成进程中时效关系和病理学特征。方法　采用CCl4 和PS法制作SD大鼠肝纤维化模型 ,分别观察在造模第 6、10、14、2 0周时肝脏组病学特征 ,Masson三色染色和计算机图像分析系统进行分析。结果　CCl4 法于制模第 6周即可见肝脏假小叶形成 ,于第 10周始最为典型 ;随着假小叶的形成和造模方法停止 ,肝脏病理结构变化趋于稳定 ;肝细胞脂肪变性尤为突出 ,与模型制作进程相平行。PS法于造模第 10周即造模结束时方见纤维间隔形成 ,造模虽已停止但肝纤维化进程加速完成 ,肝组织分隔严重 ,假小叶形成较多并进展到第 2 0周 ;制模自始至终 ,肝细胞未见明显脂肪变性。结论　CCl4 和PS两种制模方法在肝纤维化形成进程中所表现出的时效关系和病理特征有所不同 ,提示两种制模方法在形成肝纤维化机制方面有所不同。结合使用两种方法研究肝纤维化更为合理 ;以抗肝纤维化干预因子进行干预研究时 ,干预因子的持续时间宜延长至肝纤维化形成之高峰期或之后 ,持续时间至少 14周 ;预防和治疗用药干预研究时 ,其起始时间宜分别以造模开始前 4周和造模停止前 4周为宜     

两种2型糖尿病肾病动物模型的比较

目的:建立两种2型糖尿病肾病大鼠模型,比较两种模型的优缺点。方法:分别应用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射及单肾摘除加高糖高脂饮食加小剂量STZ腹腔注射制备2型糖尿病肾病模型。检测两种方法在空腹血糖、胰岛素、肾重/体重、血脂、24h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮、肌酐清除率等方面的差异。结果:单肾摘除组肾重/体重、血脂、24h尿蛋白定量及血肌酐、尿素氮、肌酐清除率较高糖高脂加STZ组有明显增加,其病理改变也较明显。结论:单肾摘除+高糖高脂+小剂量STZ组更符合糖尿病肾病的病理改变。     

老年生理性肾虚质大鼠牙周炎模型的建立

目的:建立符合中医理论的实验性肾虚质牙周炎动物模型,为研究牙周炎的中西医结合治疗奠定基础.方法:选用4月龄青年SD大鼠40只,12月龄老龄大鼠40只,随机分为4组:①青年对照组(YN,20只);②青年牙周病组(YP,20只);③老年对照组(ON,20只);④老年牙周病组(OP,20只).YN组、ON组氯胺酮(100 m...     

两种脑出血动物模型的制备和比较研究

目的 本研究制备两种脑出血动物模型：脑缺血后使用tPA诱导的出血转化模型（MCAO-HT）及胶原酶注射诱导的脑出血模型（cICH）,并比较两种出血模型的异同及可能的优缺点。方法 MCAO-HT模型：栓线经颈内动脉入颅,堵塞大脑中动脉,构建线栓法大脑中动脉堵塞模型,堵塞后5h静脉注射组织型纤溶酶原激活剂（tPA,10mg/kg）制备脑缺血后出血转化模型;cICH模型：利用脑立体定位技术,直接向纹状体注射0.05U胶原酶Ⅳ,诱导脑出血模型。结果 MCAO-HT模型小鼠较MCAO模型小鼠,24h患侧半脑血红蛋白含量显著升高,MCAO-HT模型小鼠血-脑脊液屏障（BBB）通透性显著高于MCAO模型小鼠;cICH模型小鼠,较假手术组小鼠,24h神经功能损伤、脑水肿、出血量和炎性水平都有显著升高。结论 MCAO-HT模型引起的出血为tPA诱导BBB通透性增加,导致的“渗血”,可能更适用于对血-脑脊液屏障及血管通透性的研究。而cICH模型引起的出血为胶原酶直接破坏小血管壁导致的“漏血”,可能更适用于出血诱导的水肿、炎性反应、细胞死亡和氧化应激的研究。     

C6大鼠脑胶质瘤动物模型建立及病理观察

目的建立简单易行、可靠稳定的大鼠C6脑胶质瘤模型,为研究脑胶质瘤的发病机制和防治方法提供操作平台。方法采用立体定向技术,将体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞浓缩悬置,2.5×10^6个.25μ^L-1接种于SD大鼠的右侧尾壳核区,种植后连续观察大鼠的生存状态,并分别于7、14、21 d处死大鼠,立刻取脑,制作病理切片,HE染色,光镜下观察。结果大鼠接种C6胶质瘤细胞后,7 d左右生存状态良好,14 d左右出现较为明显的颅内高压症状,21 d左右时多数处于濒危状态。大体标本检查,18只大鼠中除3只意外死亡外,其余成瘤率100%,瘤体随着鼠龄的延长,中线结构明显移位,占位效应愈来愈明显。HE染色可明显观察到大鼠脑组织胶质瘤的形成。结论建立的C6大鼠脑胶质瘤动物模型可靠、稳定,其肿瘤生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似,可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型。     

两种逆行胆胰管穿刺方法复制胰腺炎模型比较

目的　比较两种方法复制大鼠急性胰腺炎动物模型。方法　常规切开十二指肠降部直视下寻找胆胰管开口穿刺 ;和直接经十二指肠降部逆行胆胰管穿刺法复制急性胰腺炎模型。观察手术时间、1 2h后大鼠存活率、循环血容量、胃十二指肠大体改变。结果　经十二指肠穿刺和切开穿刺组复制急性胰腺炎大鼠 1 2h生存率分别为93 % (1 4 / 1 5) ,67% (1 0 / 1 5) ,P <0 .0 5 ;循环血容量 (6 .7± 0 .8)ml,(4.9± 0 .7)ml,P <0 .0 1 ;手术时间 (1 9± 3)min ,(2 5± 4)min ,P <0 .0 1 ;穿刺组十二脂肠壁轻度充血 ,肠管切开未见明显凝血块 ,胃无明显扩张 ,切开组十二指肠高度充血水肿 ,肠内有凝血块存在 ,同时伴有胃明显扩张 ,提示十二指肠狭窄。结论　经十二指肠壁胆胰管逆行穿刺复制急性胰腺炎方法明显优于切开法。     

大鼠长期脾虚和热证造模的舌象观察

观察大鼠长期 (2 6周 )脾虚造模和热证造模的活体舌象和舌组织病理。见舌背隆起前固有层乳头密度无变化 ,背隆起后固有层乳头密度热证组有增加趋势。基底层细胞核分裂相频数 ,热证组大于对照组和脾虚组。大鼠长期脾虚和热证模型表现出基本趋势相反的舌组织病理变化。     

SD大鼠与C57小鼠5/6肾切除慢性肾功能衰竭模型的比较

目的 比较SD大鼠、C57小鼠建立5/6肾切除(5/6 nephrectomy, 5/6NX)慢性肾功能衰竭动物模型的异同, 选择合适的实验动物以供慢性肾功能衰竭的防治研究。方法 将60只SD大鼠和60只C57小鼠分别随机、平均分成5/6肾切除组和假手术组, 分别于术后4周、8周、12周三个时间点处死各组老鼠, 收集血清和肾组织供肾功能、α-SMA检测分析。结果 大、小鼠模型组成活率不存在差异(P>0.05), 大鼠5/6NX组血清肌酐及尿素氮值于8~12周出现稳定状态, 异于小鼠5/6NX组。结论 C57小鼠5/6肾切除慢性肾衰模型建立成功。5/6NX大、小鼠组均于术后出现进行性肾功能减退的表现, 然其疾病进程不尽相同, 临床应根据监测周期长短选择合适的实验动物以准确地反应疾病状态。     

两种气道高反应大鼠模型的建立与比较

目的:从气道失稳态机制出发,臭氧应激大鼠,建立非变异气道高反应性模型,与经典变异性哮喘大鼠模型比较,寻找一种简易、可行的方法来建立气道高反应性模型。方法:24只SD大鼠随机分为4组:正常对照a组;臭氧应激组;正常对照b组;卵蛋白致敏组,每组6只。分别检测两种动物模型的呼气相气道阻力,支气管肺泡灌洗液中细胞计数、分类,总蛋白含量测定,粘蛋白总量测定,肺、支气管病理切片等指标比较两种气道高反应大鼠模型的稳定性和可靠性。结果:外源性损伤因子臭氧攻击支气管上皮细胞形成的非变异气道高反应性模型,与经典变异性哮喘大鼠模型比较,各项指标(气道反应性,总蛋白含量,粘蛋白总量,肺、支气管病理切片)的测定都证实了气道高反应性的存在。结论:臭氧吸入制备非变异性气道高反应性大鼠模型的方法简易并可行。     

C57BL/6J小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立及其病理特征

目的 探讨C57BL/6J小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型的可能性及其发病特点.方法 使用PLP139-151抗原及其C57BL/6J小鼠自制脑脊髓匀浆(spinal cord homogenate,SCH)免疫C57BL/6J小鼠,使用完全福(氏)免疫佐剂为免疫佐剂,并在尾静脉注射百日咳杆菌,建立EAE模型,与经典的PLP139-151免疫的SJL/J小鼠EAE模型进行对比.结果 PLP139-151免疫C57BL/6J小鼠仅有一只小鼠表现为尾部张力明显降低;自制SCH免疫C57BL/6J小鼠可见明显脱髓鞘改变.与PLP139-151免疫SJL/J小鼠组相比发病率较低(P<0.05),神经功能评分比较没有明显差异(P>0.05),但发病时间长于PLP139-151免疫SJL/J小鼠组(P<0.05).结论 SCH免疫C57BIJ6J小鼠的EAE动物模型,主要表现为急性单相病程,从临床表现和病理学特点来看符合人类MS的病理特点,值得在以后的研究中进一步研究探讨.