iNOS在喉癌中的表达及其临床意义

目的:探讨诱生型一氧化氮合酶（iNOS)在喉癌中的表达及其临床意义。方法：采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测40例不同病理分化程度、临床分期的喉鳞癌组织、癌旁组织及10例喉乳头状瘤、7例正常喉黏膜中诱生型一氧化氮合酶（iNOS)mRNA的表达。结果：喉癌组织iNOS mRNA阳性表达率为85．00％,较对照组癌旁组织（20．00％）、良性肿瘤组（40．00％）、正常人组（0／7）明显增高（P＜0．0001,P＜0．005,P＜0．0001）,有淋巴结转移组（19／19）显著高于无 淋巴结转移组（71．42％）（P＜0．05）,iNOS mRNA阳性表达与肿瘤原发部位及T分级无关,与细胞分化程度呈负相关。结论：喉癌组织中存在iNOS,它可能通过合成一氧化氮（NO）在分子水平参与了喉癌的发生、发展。     

细胞因子在气道上皮细胞iNOS表达中的作用研究

目的：探讨气道上皮细胞表达诱导型一氧化氮合成酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS)的能力及炎性细胞因子在气道上皮细胞一氧化氮（NO）产生中的调节作用。方法：取原代培养的大鼠气道 上皮细胞用IL－1β(10ng/ml)或TNF－α（5ng/ml)处理16小时，而后用特异性引物RT－PCR研究iNOS mRNA的表达，用特异性抗iNOS单克隆抗体免疫细胞化学方法研究iNOS蛋白的表达。NO的终末产物硝酸盐及亚硝酸盐水平的测定采用改良Griess法。结果：RT－PCR显示，经IL－1β及TNF－α处理16小时的大鼠气道上皮细胞表达iNOS mRNA。免疫组织化学提示，IL－1β及TNF－α可诱导大鼠气道上皮细胞iNOS蛋白的表达并刺激NO产生，其硝酸盐及亚硝酸盐水平较正常对照组增高（P＜0．01）。结论：气道上此细胞具有表达iNOS的能力。细胞因子IL－1β及TNF-α可诱导大鼠气道上皮细胞iNOS的表达及NO产生。     

肝硬化患者血浆和腹水中一氧化氮、白细胞介素—6和肿抗坏死因子α的研究

目的：研究肝硬化患者血浆和腹水一氧化氮（NO）、白细胞介素－6（IL－6）及肿瘤坏死因子α（TNFα）的变化及其意义。方法：用比色法、ELISA法分别测定50例肝硬化患者血浆和腹水的NO、IL－6及TNFα。结果：肝硬化组血浆和腹水NO、IL－6及TNFα水平均显著高于对照组（P＜0．01）。腹水渗出液中NO、IL－6及TNFα水平明显高于漏出液（P＜0．01或0．05）。结论：检测血浆和腹水中NO、IL－6及TNFα有助于肝硬化腹水的鉴别诊断。     

外周血TNFα、NO与慢性肾衰竭的相关性

目的：研究肿瘤坏死因子（TNFα）、一氧化氮（NO）在慢性肾衰竭（CRF）发病中的作用,及其与肾功能之间的关系。方法：检测CRF患外周血中TNFα、NO、SCr的水平,并与健康对照组比较。结果：CRF患外周血中TNFα、NO的含量明显高于正常对照组（P＜0．01）,TNFα与NO、SCr水平呈正相关（P＜0．01）,NO与SCr无相关性（P＞0．05）。结论：TNFα、NO参与CRF的发病,提示TNFα可作为CRF患预后的指标。     

胃癌患者血清中NO、T—SOD及TNF—α的水平变化及临床意义

目的：探讨胃癌患者血清中一氧化氮（NO）、总超氧化物歧化酶（T－SOD）及肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的含量变化。方法：用生物化学方法测定胃癌患者血清NO、T－SOD含量;用ELISA法测定胃癌患者血清TNF－α含量,并进行统计学分析。结果：胃癌患者血清NO及T－SOD含量均显著低于正常对照组（P值均＜0．05）,而血清TNF－α含量显著高于正常对照组（P＜0．05）。本实验还对胃癌患者中的10例进行了肿瘤根治术前及肿瘤根治术后10天左右标本的对比检测。结果表明,肿瘤根治术后该病患者血清NO及T－SOD含量较术前明显升高（P值均＜0．05）,但仍低于正常对照组（P值均＜0．05）,而血清TNF－α含量较术前明显降低（P＜0．05）,但仍高于正常对照组（P＜0．05）。结论：胃癌患者血清NO及T－SOD含量降低：TNF－α含量增高,多项指标的联合检测对其发病机理探讨,疗效观察和预后判断均有一定临床意义。     

细胞和体液免疫抑制对大鼠异种肝移植急性排斥中一氧化氮及其合酶、同功酶的影响

目的：探讨一氧化氮、一氧化氮合酶（NOS）及其同功酶在大鼠异种肝移植中的免疫学作用及其表达意义。方法：本实验共分5组：I组（同基因组）;Ⅱ组（急性排斥组）;Ⅲ组（细胞免疫抑制组）;Ⅳ组（体液免疫抑制组）;Ⅴ组（双重免疫抑制组）;应用血清学检测移植术后受体血清ALT、TNF－α及NO代谢终产物（NOx),应用NADPH黄递酶组化及免疫组化检测NO合酶及其同功酶（iNOS,cNOS)的表达。结果：Ⅱ、Ⅳ组血清ALT,TNF－α及NOx均较Ⅰ、Ⅴ组明显升高4－11倍（P＜0．01）,环孢素A（Ⅲ组）能抑制细胞免疫及NO的合成与表达,但不能延长受体的生存期。Ⅱ、Ⅳ组NO合酶及其同功酶（iNOS,cNOS)在异种肝移植急性排斥时明显表达。结论：肝细胞NO在低免疫反应状态下可能具有肝细胞保护作用,而在高免疫反应状态下iNOS的持续高表达可能是肝损伤的原因。     

通脑精胶囊对急性局灶性脑缺血胰岛素抵抗大鼠NO和TNFα的影响

目的：探讨通脑精胶囊对胰岛素抵抗大鼠急性局灶性脑缺血的保护作用及其机制。方法：高糖饲料喂复制胰岛素抵抗（IR）大鼠模型,再采用大脑中动脉复制急性局灶性脑缺血动物模型,观察急性局灶性脑缺血IR大鼠一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）和肿瘤坏死因子α（TNFα）含量和活性的变化。结果：通服精胶囊显降低缺血大鼠脑组织中NO含量和NOS活性及血浆TNFα的含量（P＜0．01）,增加脑组织中SOD活性（P＜0．01）,增加脑组织中SOD活性（P＜0．01）。结论：通脑精胶囊对IR大鼠急性局灶性缺血有保护作用,其机制与降低NO、TNFα含量和NOS活性及增加SOD活性有关。     

镁对人脐静脉内皮细胞一氧化氮和一氧化氮合酶亚型的影响

目的：观察镁对人脐静脉内皮细胞一氧化氮（NO）和一氧化氮梧酶（NOS）不同亚型的影响。方法：镀铜镉还原法测定培养液中NO2^-/NO3^-含量，免疫组织化学法观察内皮细胞型NOS（eNOS)和诱导型NOS（iNOS)的表达。结果：与正常对照组相比，Mg^2 各剂量组NO2^-/NO2^-含量较高，差异具有显著性（P＜0．05）；H2O2＋Mg^2 各剂量组NO2^-/NO3^-含量高于H2O2组，差异具有显著性（P＜0．05）。与正常对照组相比，H2O2组iNOS和NF－κB P65平均灰度下降，eNOS平均灰度升高，且均具有显著性差异（P＜0．05），Mg^2 各剂量组eNOS平均灰度下降，具有显著性差异（P＜0．05）；与H2O2组相比，H2O2＋Mg^2 各剂量组iNOS和NF－κB P65平均灰度显著升高（P＜0．01），eNOS平均灰度下降（P＜0．05）；H2O2＋Mg^2 各剂量组eNOS和iNOS平均灰度低于相应的Mg^2 剂量组，且具有显著性差异（P＜0．05）。结论：镁的抗氧化作用机制可能涉及调控细胞转录因子和一氧化氮合酶不同亚型。     

TNF—α对新生大鼠成骨细胞产生一氧化氮的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子α（TNF－α）对体外培养成骨细胞产生一氧化氮（NO）的影响。方法 体外培养新生大鼠成骨细胞内加入不同浓度的TNF－α（20、30、40ng/ml),培养24、48h,用亚硝酸盐法测量培养液内NO的变化。结果 在30．40ng/ml浓度的TNF－α作用48h,NO产生较对照组明显升高（P＜0．05）。结论 TNF－α可刺激成骨细胞产生NO,而NO作为一高效细胞毒效应分子与骨丢失有关。     

高胰岛素水平对血管平滑肌细胞NO生成的影响

培养大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）,检测高胰岛素（HI）对VSMC膜蛋白激酶C（PKC）活性的影响,并采用硝酸还原酶法和免疫印迹法检测HI加或不加PKC抑制剂－H7对脂多糖（LPS）＋γ－干扰素（γ－IFN）诱导NO生成和一氧化氮合酶（iNOS) 表达的影响。结果：HI预处理的VSMC,膜PKC活性明显高于对照（P＜0．05）,LPS＋γ－IFN诱导NO生成显著低于对照（P＜0．01）,加H7培育,NO的生成量较HI处理组明显提高,但低于对照（P＜0．01）。免疫印迹示HI处理的VSMC,iNOS表达下降,提示：高胰岛素血症可能通过激活VSMC膜PKC,部分抑制iNOS表达,减少NO产生。