木脂素类化合物的代谢研究进展

木脂素类化合物是药用植物中一类比较重要的活性成分,具有多样的结构和广泛的生物活性,应用前景广阔。本文对近年来国内外有关木脂素类化合物的代谢研究进展进行综述,旨在促进木脂素类化合物的进一步研究与开发。     

肝微粒体体外温孵法与基因重组P450酶系在药物体外肝代谢研究中的应用进展

目的 介绍肝微粒体体外温孵法与基因重组P450酶系在药物体外肝代谢中应用进展。方法 根据近几年的文献资料进行分析、综合、归纳，分别按肝微粒体体外温孵法与基因重组P450酶系进行介绍。结果与结论 两种方法在药物体外代谢研究上既有统一又可互补，二者相结合可更有效的应用于药物的高通量筛选、代谢物种选择及代谢物生成等研究领域。     

维吾尔药肉豆蔻衣中甘密脂素B的HPLC含量测定

摘 要 目的：建立维吾尔药 肉豆蔻衣中甘密脂素B的HPLC含量测定方法,以便控制其质量。方法: 色谱柱：SunFire^TM C₁₈,(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水（52∶48）,流速： 1.0ml·min^-1,柱温：30 ℃,检测波长 ：228.4 nm。结果: 甘密脂素B浓度在3.98～79.60 μg·mL^-1范围内线性良好（r=0.999 2）,甘密脂素B的平均回收率为99.89%, RSD=1.11%（n=6）。结论:该方法准确、可靠、重复性好,可作为维吾尔药 肉豆蔻衣的质量控制方法。     

左旋一叶碱的代谢转化

目的研究一叶碱［securinine,(-)SE］在大鼠体内外的代谢转化。方法采用大鼠肝微粒体体外温孵法对(-)SE的代谢转化进行了研究,优化了代谢体系,建立了反相HPLC法同时分离检测(-)SE及其体外代谢产物的分析方法。用液液萃取,制备TLC及半制备HPLC分离纯化了4个代谢产物并进行了光谱鉴定。在此基础上,建立了生物体液中(-)SE及其代谢物的反相HPLC分析方法,并用该法检测了ip给药后大鼠的胆汁、尿样及其经β-葡糖醛酸苷酶水解后的样品。结果代谢物分别鉴定为6-位羟基,6-位羰基及5-位α及β羟基取代的(-)SE,还证实了体内6-位羟基代谢物进一步形成了二相结合型产物。结论基本阐明(-)SE在大鼠体内外代谢转化的途径。     

左旋一叶萩碱的代谢转化

目的　研究一叶碱 [securinine ,( - )SE]在大鼠体内外的代谢转化。方法　采用大鼠肝微粒体体外温孵法对 ( - )SE的代谢转化进行了研究 ,优化了代谢体系 ,建立了反相HPLC法同时分离检测 ( - )SE及其体外代谢产物的分析方法。用液液萃取 ,制备TLC及半制备HPLC分离纯化了 4个代谢产物并进行了光谱鉴定。在此基础上 ,建立了生物体液中 ( - )SE及其代谢物的反相HPLC分析方法 ,并用该法检测了ip给药后大鼠的胆汁、尿样及其经 β 葡糖醛酸苷酶水解后的样品。结果　代谢物分别鉴定为 6 位羟基 ,6 位羰基及 5 位α及 β羟基取代的 ( - )SE ,还证实了体内 6 位羟基代谢物进一步形成了二相结合型产物。结论　基本阐明 ( - )SE在大鼠体内外代谢转化的途径     

五味子配方颗粒中木脂素成分分析

目的:建立测定五味子配方颗粒中主要木脂素类成分(五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素)含量的方法,分析不同厂家的五味子配方颗粒中木脂素成分的差异。方法:采用RP-HPLC法,并结合二极管阵列检测器(PDA)进行光谱分析。色谱柱:Hypersil ODS C18柱(4.6 mm×250 mm,10μm),流动相:A为乙腈,B为水,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温25℃,检测波长254 nm。结果:不同厂家五味子配方颗粒中五味子醇甲含量为0~1.292 3 mg/包、五味子酯甲含量为0~0.560 8 mg/包、五味子甲素含量为0~0.168 8 mg/包、五味子乙素均未检测出。结论:不同厂家产品五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素含量差异显著。     

RP-HPLC法测定牛蒡子中木脂素的含量

用RP-HPLC法分离并测定了牛蒡子中5种2,3-二苄基丁内酯型木脂素——牛蒡甙(Ⅰ)、牛蒡酚A(Ⅱ)、牛蒡酚F(Ⅲ)、牛蒡甙元(Ⅳ)、牛蒡素B(Ⅴ)。以安定为内标,分析柱C₁₈,甲醇-水-乙腈-四氢呋喃(57:49:11:1)为流动相,梯度流速,1.0～1.5m1/min。检测波长220nm,线性范围0.029～0.242μg,相关系数r=0.9993～0.9999,回收率96.14～104.99%。本法简便、快速、灵敏。     

药物体外肝代谢的研究方法

目的:为药物体外肝代谢研究方法在新药研发中的应用提供参考。方法:以药物代谢体外肝代谢肝微粒体体外温孵法肝细胞体外温孵法肝灌流技术肝组织切片技术基因重组P_(450)酶系Drug metabolismLiver metabolism in vitroMetabolism of liver microsome in vitroLiver perfusion techniqueLiver biopsy techniqueRecombination genetic cytochrome P_(450)等为关键词,组合查询1996年10月-2017年4月在Pub Med、Web of Science、中国知网、中国生物医学等数据库中的相关文献,对体外肝代谢研究方法进行综述。结果与结论:共检索到相关英文文献220余篇、中文文献750余篇,其中有效文献30篇。常见的体外肝代谢研究方法有肝微粒体体外温孵法、肝细胞体外温孵法、肝灌流技术、肝组织切片技术、基因重组P_(450)酶系等。药物体外肝代谢不能全面反映体内药物的综合代谢情况,与体内的真实代谢情况存在差异,今后需结合体内实验等方法来完善药物在体内外的药物代谢转运研究;目前肝灌流技术和基因重组P_(450)酶系等体外肝代谢研究方法对设备、实验操作成本、数据处理技术等要求较高,其运用和推广仍然受到一定的约束和限制,今后需建立简单、快速、经济、高效的科学技术方法和手段。     

高效液相色谱法测定内南五味子的木脂素含量

本文采用高效液相色谱法对药用植物内南五味子中的８种主要活性木脂素：五味子醇甲、五味子醇乙、戈米辛Ｇ、内南五味子素、五味子酯丁、内南五味子酯乙、一味子甲素和南五味子宁的含量进行了测定，在Ｃ１８柱上以甲醇一水（７０：３０）为流动相，检测波长２５４ｎｍ，８种木脂素的加样中嘏率９１．６－１００．９％，相对标准偏差小于４．３２％。内南五味子木脂素类成分的种类、含量因采收时间、雌雄、药用部位不同而有很大差别。     

RP－HPLC法测定牛蒡子中木脂素的含量

用ＲＰ－ＨＰＬＣ法分离并测定了牛蒡子中５种２，３－二苄基丁内酯型木脂素——牛蒡甙（Ⅰ）、牛蒡酚Ａ（Ⅱ）、牛蒡酚Ｆ（Ⅲ）、牛蒡甙元（Ⅳ）、牛蒡素Ｂ（Ⅴ）。以安定为内标，分析柱Ｃ１８，甲醇－水－乙腈－四氢呋喃（５７：４９：１１：１）为流动相，梯度流速，１．０～１．５ｍ１／ｍｉｎ。检测波长２２０ｎｍ，线性范围０．０２９～０．２４２μｇ，相关系数ｒ＝０．９９９３～０．９９９９，回收率９６．１４～１０４．９９％。本法简便、快速、灵敏。     

肉豆蔻的化学成分

目的对未经炮制的肉豆蔻(Myristica fragrans Houtt)干燥成熟种仁的乙醇提取物进行化学成分研究。方法利用多种色谱方法进行成分分离,根据物理化学性质和波谱学手段对化合物进行结构鉴定。结果分离得到8个化合物,分别鉴定为去氢二异丁香酚(dehydrodiisoeugenol,1)、利卡灵B(licarin B,2)、异香草醛(isovanillin,3)、肉豆蔻醚(myristicin,4)、榄香脂素(elemicin,5)、原儿茶酸(protocatechuic acid,6)、异甘草素(isoquiritigenin,7)、1(3甲氧基4羟基苯基)2(4烯丙基2,6二甲氧基苯氧基)1丙醇[1(3 methoxy 4 hydroxyp henyl)2(4 allyl 2,6 dimethoxyphenoxy)propan 1 ol,8]。结论化合物3为首次从肉豆蔻属植物分离得到;化合物6、7是首次从肉豆蔻植物中分离得到。     

肉豆蔻有效成分的提取及抗菌、抗氧化性研究

目的:研究肉豆蔻挥发油的提取工艺及其抗菌、抗氧化作用.方法:采用正交试验、抑菌试验及对DPPH -自由基清除能力试验等对肉豆蔻有效成分之-挥发挥油的提取工艺、抑菌、自由基清除能力等进行研究.结果:肉豆蔻与水配量比1∶10、浸泡时间8h、蒸馏时间5h为较佳挥发油蒸馏提取工艺;最低抑菌浓度(MIC):酵母菌＞31.25 mg·ml-1、霉菌＞ 125.00 mg·ml-1、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌＞ 15.63 mg·ml-1.对DPPH -自由基的清除能力随着浓度的增加而增强.结论:采用蒸馏法提取肉豆蔻挥发挥油工艺的较佳条件为A3 B3 C2,提取物均具有一定的抗菌和抗氧化作用.     

肉豆蔻中重金属和农药残留量分析

目的:分析中药肉豆蔻药材中重金属和有机氯农药残留量,为其质量控制和标准制定提供科学依据。方法:采用比色法测定总重金属含量,原子吸收法测定铅、镉、铜、砷的残留量,电感耦合等离子体质谱法测定汞的含量,气相色谱法测定有机氯农药六六六和滴滴涕残留量。结果:肉豆蔻药材中含总重金属小于100 mg·kg~(-1),其中铅、镉、砷、铜和汞的残留量分别为0.04～0.73,17.7×10~(-3)～85.4×10~(-3),0.01～0.09,11.0～13.5,0.06～0.34 mg·kg~(-1)。在所有样品中皆未检出滴滴涕;在某些样品中检出六六六,残留量为35.49～63.36μg·kg~(-1)。结论:肉豆蔻药材中含有一定量的重金属,其中,铜含量最高,其他重金属含量很低;10个样品中,4个样品的汞残留量稍超过国家行业标准——《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》(2001)。所有样品中皆未检出滴滴涕,某些样品中检出六六六。     

GC法同时测定肉豆蔻中丁香酚、异丁香酚、肉豆蔻醚和榄香脂素的含量

目的:建立同时测定肉豆蔻中丁香酚、异丁香酚、肉豆蔻醚和榄香脂素4个成分含量的气相色谱法。方法:样品用乙酸乙酯超声提取,采用GC法对肉豆蔻中丁香酚、异丁香酚、肉豆蔻醚和榄香脂素进行含量测定。气相色谱条件:HP-5 MS石英毛细管柱(0.25 mm×30 m×0.25μm);氢火焰离子化检测器(FID);进样口温度240℃;检测器温度250℃;柱温起始温度为40℃,保持1 min,以5℃.min-1的速率升高到220℃,保持1 min;载气为氮气,流速1 mL.min-1,分流比为10∶1;进样量1μL。结果:丁香酚、异丁香酚、肉豆蔻醚和榄香脂素4个成分在相应的浓度范围内呈现良好的线性关系;加样回收率(n=9)分别为99.4%,99.3%,98.2%,98.8%;肉豆蔻不同部位中丁香酚、异丁香酚、肉豆蔻醚和榄香脂素的含量有明显差异。结论:本法简便快速,可以用于肉豆蔻中丁香酚、异丁香酚、肉豆蔻醚和榄香脂素4个成分的含量测定。     

肉豆蔻挥发油化学成分的GC-MS分析

目的分析肉豆蔻科植物肉豆蔻Myristica fragrans Houtt.挥发油的化学成分。方法采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用气相色谱-质谱法分析和鉴定其化学成分,并采用峰面积归一化法计算各组分的相对含量。结果共分离出39个峰,并且确认了其中38个化合物。主要成分为4-亚甲基-1-(1-甲基乙基)-环己烯(27.55%),β-蒎烯(10.05%)和R-4-甲基-1-(1-甲基乙基)-3-环己烯-1-醇(7.96%)。结论实验结果为肉豆蔻的进一步研究及开发利用提供了科学依据。     

力达霉素的体外代谢

旨在研究力达霉素在血浆和肝微粒体中的体外代谢性质,指导临床合理用药。选择HPLC-MS/MS测定方法,通过测定力达霉素的活性成分,考察力达霉素在大鼠、比格犬、猕猴和人血浆及肝微粒体中的代谢稳定性以及在人肝微粒体中对细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)各亚型酶的抑制作用。结果表明,力达霉素在4个种属血浆中均有代谢,其代谢速率为大鼠>比格犬>人>猕猴;在4个种属肝微粒体中,只有在猕猴肝微粒体中代谢;在浓度为0.000 5～10 ng·mL-1时,对人肝微粒体中细胞色素P450各亚型酶几乎无抑制作用。可见力达霉素在人体内的代谢性质与比格犬体内较相似,而且临床上当力达霉素与通过CYP450酶代谢的药物合用时,不会导致这些药物的代谢减慢。     

In vitro identification of the human cytochrome p450 enzymes involved in the oxidative metabolism of loxapine

In vitro studies were conducted to identify the hepatic cytochrome P450 (CYP) enzymes responsible for the oxidative metabolism of loxapine to 8-hydroxyloxapine, 7-hydroxyloxapine, N-desmethylloxapine (amoxapine) and loxapine N-oxide. These studies included use of cDNA-expressed enzymes, correlation analysis with 12 phenotyped human liver microsomal samples, and use of selective inhibitors of cytochrome P450s. The resultant data indicated that loxapine was mainly metabolized by human liver microsomes to (i) 8-hydroxyloxapine by CYP1A2, (ii) 7-hydroxyloxapine by CYP2D6, (iii) N-desmethyloxapine by CYP3A4 and (iv) loxapine N-oxide by CYP3A4. The involvement of flavin-containing monooxygenase (FMO) in the formation of loxapine N-oxide was also observed.     

In vitro and in vivo characterisation of the metabolism and disposition of suvorexant in humans

1.?Suvorexant (MK-4305, Belsomra®) is a first-in-class dual orexin receptor antagonist approved in the USA and Japan for the treatment of insomnia. The current studies describe suvorexant’s absorption, disposition and potential for CYP-mediated drug interactions in humans.

2.?Following single oral administration of [¹⁴C]suvorexant to healthy human subjects, 90% of the radioactivity was recovered (66% in faeces, 23% in urine), primarily as oxidative metabolites.

3.?In plasma, suvorexant and M9 were predominant, accounting for 30 and 37% of the total radioactivity, respectively. Metabolite M17 became more prominent (approaching 10%) following multiple daily doses of unlabelled suvorexant. M9 and M17 are not expected to contribute to the pharmacological activity of suvorexant due to reduced orexin receptor binding affinity and limited brain penetration.

4.?CYP3A was determined to be the predominant enzyme mediating suvorexant oxidation. In vitro, suvorexant demonstrated reversible inhibition of CYP3A4 and 2C19 (IC₅₀ ～ 4–5 μM), and weak time-dependent inhibition of CYP3A4 (K_I?=?12 μM, k_inact?=?0.14 min^?1). Suvorexant was also a weak inducer of CYP3A4, 1A2 and 2B6. Given the low plasma concentrations at clinical doses, suvorexant was not anticipated to cause significant drug interactions via inhibition and/or induction of major CYPs in vivo.     

In vitro microsomal metabolism of imipramine under conditions mimicking the in vivo steady-state situation

A steady-state model is presented of the metabolism of imipramine. In this model, the N-demethylation and 2-hydroxylation rates of imipramine were measured with and without the presence of metabolites by using a tritium isotope of imipramine. At an imipramine concentration of 5 micromol/l, desipramine, in the concentration ratio 1:2, decreased the total metabolic rate by 70%. The 2-hydroxylation pathway was mainly inhibited, thereby increasing the N-demethylation pathway from 25% to 62% in the presence of desipramine. The additional presence of 2-hydroxy-imipramine did not change this situation. A study on the relative influence of CYP1A2 and 3A4 only revealed minor changes in the presence of desipramine. In conclusion, the presence of metabolites in metabolism studies undertaken in vitro may reflect the changes from the single- to the multiple-dose situation observed clinically and therefore constitute a better model for the clinical application of a drug.     

New inhibitors of nitric oxide production from the seeds of Myristica fragrans

Six dihydrobenzofuran type neolignans were isolated from the dried ripe seeds of Myristica fragrans Houtt. (family: Myristicaceae) and their chemical structures were identified as licarin B (1), 3′-methoxylicarin B (2), myrisfrageal A (3), isodihydrocainatidin (4), dehydrodiisoeugenol (5), and myrisfrageal B (6), respectively, on the basis of spectroscopic data analyses. Among them, compounds 3 and 6 are new compounds. Compounds 1–6 showed inhibition of nitric oxide production in lipopolysaccharide-activated murine monocyte-macrophage RAW264.7 with IC₅₀ values of 53.6, 48.7, 76.0, 36.0, 33.6, and 45.0 μM, respectively. These values were compared to those of the positive controls, indomethacin and L-N⁶-(1-iminoethyl)-lysine, which have IC₅₀ values of 65.3 and 27.1 μM, respectively. Further compounds 3, 5 and 6 suppressed LPS-induced iNOS mRNA expression in a does-dependent manner in RAW 264.7 cells assayed by real-time RT-PCR. Compounds 3, 5 and 6 may inhibit NO overproduction via inhibition of iNOS mRNA expression. The results provided valuable information for further investigation of compounds 1–6 as anti-inflammatory and chemopreventive agents.