SPA痢疾杆菌分型试剂在实际应用上的价值

金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分 A 蛋白(Staphylococcal Protein A,简称 SPA)能与正常人及多种哺乳动物血清中 IgG 分子 Fc 段非特异结合,而 IgG 的 Fab 段则暴露于外,并保持其正常抗体的活性,当与特异性抗原相遇时,则抗原与 IgG 的 Fab 段相结合。如将含 A 蛋白葡萄球菌本身作为载体,用特异抗体致敏,如遇特异抗原,则能引起协同凝集反应。协同凝集反应已在细菌学上应用于细菌的分型,但大多属于实验室方面的研究,正式作为诊断试剂应用于临床的报告不多。     

特发性血小板减少性紫癜患儿血小板与正常单个核细胞反应的电镜观察

本实验应用放射免疫测定法测定血小板结合抗体IgG(PAIgG),并用电镜观察正常单个核细胞与特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿血小板的反应,以及SPA对血小板与单个核细胞反应的影响。观察到ITP与PAIgG增高有关,PAIgG存在于患儿血小板膜上,其机理有几种假设:①通过非特异性吸附结合;②通过其Fab段结合至血小板膜特异性抗原上;⑨通过其Fab段结合至吸附在血小板膜上的特异性抗原上;④通过其Fc段受体(免疫复合物)。本实验结果表明,约92％的ITP患儿PAIgG     

应用协同凝集反应快速诊断流行性脑脊髓膜炎的研究

<正> 金黄色葡萄球菌A蛋白(简称SPA)具有与许多哺乳动物IgG分子的Fc段结合的特性,结合后Fab段暴露于外并保持其抗体活性,当与特异性抗原相遇时,使已标记抗体的SPA菌相互连结引起协同凝集反应(简称COAG)。国内外已应用COAG进行脑膜炎球菌的鉴定和分群,检测脑脊液中的可溶性抗原,并利用此法与细菌培养法、对流免疫电泳法做     

抗体的分子结构及体液分布

所有免疫球蛋白的结构都基本相同,是由两条重链(Heavy,简写为 H)和两条轻链(Light,简写为 L)组成,外形象一个“Y”型的对称大分子。“Y”的干叫 Fc段,由两个重链多肽链的-COOH 基末端的那一半组成。两个重链的 Fc 段由一个或几个双硫键连在一起。“Y”的两个叉叫 Fab 段,每个叉由一整个轻链和重链的-NH_2基端的一半组成。每个叉的远端都有相同特性的抗原结合位点。这样的结构模式已由电子显微图所证实。同时,也证实一个完正抗体分子的Fc 段和两个 Fab 段是由一个绞链区连接在一起。绞链区的脯氨酸很多,结构极为疏松,具有坚韧柔曲的特性。它可以调节 Fab 段之间的角度,以适应抗原决定簇之间的空间变化,从而更有效的包被抗原。对于同一类型的抗体来说,构成每个免疫球蛋白分子最具特征性的特点表现于多肽     

治疗洋地黄中毒的新方法

在洋地黄过量和中毒的处理中,最令人鼓舞的进展是使用解毒剂,即特异性的抗地高辛抗体。这种抗体由羊体内产生,通过特异性的免疫吸附法分离出来。由于这种完整的免疫球蛋白的分子量很大,所以在体内的分布受到限制。即使与地高辛结合,也不能被肾脏排泄。但可用木瓜蛋白酶将这种IgG分子水解成3个片段;一个可结晶的片段(Fc段)为无作用部份;二个Fab段,每一个的分子量约为50,000,并具有能与抗原特异性结合的部位。     

Fcγ片段输入用于治疗儿童急性免疫性血小板减少性紫癜

用静脉输入免疫球蛋白(IVIG)治疗急性免疫性血小板减少性紫癜(ITP)可使患者产生部份或全部应答,血小板计数暂时或持续上升是有力的证据。临床疗效可能是由于Fcγ受体(FcγR)的阻滞:如果用IVIG阻断了这些细胞上的FcγR,那么,IgG致敏的血小板就不能被网状内皮系统的细胞所清除。为了证实上述假定的机制是否正确,研究人员用静脉内输入Fcγ片段对12例急性ITP患儿进行了治疗。     

协同凝集试验的应用进展

协同凝集试验是目前用于快速诊断,微生物定群或分型的一种新近发展起来的敏感而简便的方法。此种试验是根据金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)表面的A蛋白成分,能结合IgG的Fc段,但不影响IgG的Fab段与相应抗原反应的特性而建立的一种凝集试验。方法是将特异性抗体致敏含A蛋白的金葡菌(SPA),再与相应微生物或抗原接触,相应微生物则与菌体表面吸附的抗体Fab段相结合,从而使含A蛋白金葡菌通过抗体与特异性抗原结合而互相联结,起到扩大的作用,呈现出肉眼可见的凝集颗粒。这一试验的特点是不论是颗粒抗原,还     

免疫球蛋白的作用机制及临床应用研究进展

免疫球蛋白(Ig)是从健康人血液中提取的血浆制品,含有正常人血浆中所有的特异性抗体成分,其中主要是IgG及少许的IgA,IgM.Ig的应用始于原发性和获得性免疫球蛋白缺乏症的替代治疗,后因发现它具有免疫调节功能而被广泛应用于治疗其他疾病,如各种细菌和病毒感染性疾病及自身免疫性疾病.WHO制定的Ig制剂的基本质量要求如下:1)具有完整的Fab片断和Fc部位功能的IgG单体分子,至少含90%;2)抗体具有与献血人群相似的抗病毒抗原和抗细菌抗原的双重功能;3)存在IgG的4种亚类且含量正常;4)不含可激活补体的IgG多聚体和血管活性肽;5)生物半衰期正…     

SPA协同凝集反应快速检定痢疾杆菌的实验研究

1940年Verwey首先发现葡萄球菌A蛋白(Staphlococcal Protein A、简称SPA),以后经许多学者相继研究,证明它能与免疫球蛋白Ig~G FC段结合,结合后的IgG的Fab段仍能与特异性抗原结合,形成凝集,即协同凝集反应(Coaggulutination reaction,简称COA)目前已广泛用于很多微生物的鉴定和诊断。但作为快速     

用特异性抗体标记含A蛋白金葡菌(简称SPA菌)所作的钩体玻片凝集试验

本试验的原理是基于金黄色葡萄球菌表面的A蛋白(简称SPA)能非特异地结合IgG的Fc段,能与特异性抗原相结合的Fab段仍然具有抗体活性。以SPA菌作为载体,使特异性免疫血清结合于金葡菌上,然后再与相应的抗原(如钩体)在玻片上作用,从而出现肉眼可见的协同凝集反应(Co—agglutination)。在教学和科研工作中,对于钩端螺旋体的定型,迄今所用的可靠方法仍为显微镜凝溶试验,该试验敏感性和特异性虽高,但需用暗视野显微镜,所用抗原应为活的钩体,操作麻烦,     

氨甲喋呤标记抗体导向治疗自身免疫性血小板减少性紫癜的体外实验研究

目的 :将静脉注射用免疫球蛋白 (IVIG)与免疫抑制剂交联制备成标记抗体 ,使之对单核 -巨噬细胞产生特异的杀伤作用 ,为其临床治疗自身免疫性血小板减少性紫癜 (ITP)奠定实验基础。方法 :用间接交联法将 IVIG与 MTX制备成标记抗体 ,用间接免疫荧光法检测标记抗体的Fc段结合活性 ,以 Fc受体阳性的小鼠巨噬细胞和人单核细胞白血病细胞株 U937为靶细胞 ,用MTT法测定标记抗体的杀伤活性。结果 :标记抗体对巨噬细胞的杀伤作用明显大于游离 MTX;标记抗体对 Fc受体阳性细胞的杀伤作用明显大于 Fc受体阴性细胞。结论 :标记抗体在体外对单核 -巨噬细胞显示了高度特异的杀伤活性     

两种方法检测类风湿因子（RF）的敏感性探讨

类风湿园子(rhennatoid factur，Re)最初由Rose等(1948)在类风湿关节炎(RA)病人血清中发现，是一种以变性IgG的Fc段为靶抗原的自身抗体。作为一种抗体，其抗免疫球蛋白类型可分为IgG-Rr、IgMRF和IgA-Rr等，RF不仅与变性的IgG分子反应，也可同自身IgG或异体IgG分子反应，并且与其他抗原如核蛋白发生交叉反应。因为它是抗体(即IgG)的对应抗体，故又被称为抗抗体。RF产生于外周淋巴结、关节滑膜、扁桃体淋巴滤泡和骨髓等。     

类风湿因子及其临床意义

<正> 概述定义类风湿因子(RF)是针对 IgG的 Fc 片断的抗体。而针对 IgG 的轻链、Fab、F(ab′)_2片断以及针对其它免疫球蛋白的Fc 片断的多种抗免疫球蛋白抗体,虽然也出现于类风湿性关节炎(RA)病人的血清中,但均不是 RF。发现与命名 1937年 Frik Waaler 作补体消耗型梅毒诊断试验时发现有1份血清不使兔抗羊红细胞抗体所致敏的羊红细胞发生溶血而是出现凝集,并证明此凝集因子不是红细胞凝集素,也不是胶固素,该因子见     

新生儿Fc受体基础研究和临床应用进展

新生儿Fc受体（FcRn）是免疫球蛋白G（IgG）和白蛋白的特异性受体,通过酸碱度依赖的方式与两者结合,使IgG和白蛋白免于被溶酶体降解而拥有较长的血浆半衰期。FcRn具有实现IgG和白蛋白的跨膜转运及促进抗原提呈的作用。在自身免疫病中,抗FcRn抗体可以通过竞争性结合FcRn,促进致病性IgG的降解;在传染性疾病中,通过增加治疗抗体与FcRn的亲和力,可以延长药物半衰期,而将病毒抗原与IgG的Fc片段结合可以引起黏膜的局部免疫反应,用于疾病防治;在癌症中,FcRn的配体白蛋白作为抗癌药物的载体,可以实现高效给药,而FcRn本身或许可以作为肿瘤患者预后的预测指标。本文综述了FcRn的功能、相关药物研发机制及其在自身免疫病、传染性疾病和癌症中的作用,以期为FcRn的药物研发和临床应用提供参考。     

血清中免疫球蛋白的测定及其临床意义

原理免疫球蛋白(Ig)是具有抗体活性和结构相似的血清球蛋白。Ig的基本结构是四条肽链,二轻二重,肽链之间由二硫键相联结。各种Ig的轻链相同,但重链则不同。根据重链的抗原结构,可将Ig分为:IgG、IgA、IgM、IgD,和IgE五种。用木瓜酶处理,可将Ig分子裂解为氨基端二个Fab片段[(Fab)_2]与一个Fe片段。Fab是抗体与抗原结合的区域,一个Ig分子有二个Fab,所以抗体是二价的。Fe部分和Ig的其他特性(如结合补体,通过胎盘,亲细胞性和代谢特点等)有关(表1)。从表1还可看到正常健康人血清中Ig有一定含量,但在患某种疾病(如慢性感染、变态反应病、     

人和羊IgG对噬菌体展示细菌免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库的体外进化筛选

目的 使用人和羊不同物种IgG来诱导噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同的Fc段构像是否具有特异的结合优势,同时探索其优势结合序列的组合特点.方法 通过PCR获得金黄色葡萄球菌蛋白A(SpA)的A、B、D、E和链球菌(C和G群)蛋白G (SpG)的B2、B3各单结构域片段,构建...     

大剂量静脉注射免疫球蛋白在儿科临床应用的进展

静脉注射免疫球蛋白(IVIG)是含多价抗体的生物制品，主要成分为IgG，IgA及IgM极少。IVIG自70年代末问世以来，用于治疗各种感染性和自身免疫性疾病，效果满意。本文将IVIG在儿科临床应用现状介绍如下。     

静脉注射IgG的中和作用对Lambert-Eaton肌无力综合征患者的突触前效应

静脉注射免疫球蛋白(IVIg)治疗能改善Lam-bert-Eaton肌无力综合征(LEM S)患者的肌力,但其具体作用方式尚不清楚。本文报道了LEM S IgG对神经肌肉阻滞的作用模式。将6例LEM S的患者血清及提纯的IgG通过大膜片钳电极直接作用于大鼠膈运动神经末梢,并观测其诱发的量子释放。静注不同浓度的IgG或其Fab片段引发相应的效应之后,单独分析IgG对LEM S的作用。IVIg治疗前所提取的LEM S患者血清及提纯的IgG抑制诱发的量子释放,并且呈一定的剂量依赖性。LEM S IgG和IVIg制剂联合使用时,LM ES IgG突触前抑制效应减弱,并且呈剂量依…     

免疫球蛋白对HFMD合并AFP患儿的保护作用及机制

目的 研究静脉注射人血免疫球蛋白(IVIG)对手足口病(HFMD)合并急性弛缓性瘫痪(AFP)患儿的保护作用及免疫学机制.方法 受试者分为HFMD合并AFP免疫球蛋白治疗前组(治疗前组),免疫球蛋白治疗组(IVIG组),无免疫球蛋白治疗组(无IVIG组)和健康对照组(对照组),各30例.采用手法肌力评定法(MMT)检测患儿肌力,采用生物素双抗原夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组血清抗神经节苷脂M1(GM1)抗体、白细胞介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α).结果 IVIG组较治疗前组和无IVIG组的肌力恢复明显.同时,抗GM1抗体、IL-6、IL-8、TNF-α在3组HFMD合并AFP患儿中均较对照组高,而IVIG组抗GM1抗体、IL 6、IL-8、TNF-α较治疗前组和无IVIG组显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 IVIG对HFMD合并AFP患者有明显的治疗作用,其机制可能通过拮抗高水平抗GM1抗体、IL-6、IL-8、TNF-α等细胞因子,实现免疫调节作用.     

重组腺相关病毒Ⅰ型/大鼠肿瘤坏死因子受体:Fc(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc)的构建和在大鼠体内表达的初步研究

目的构建携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc),并对该病毒在Lewis大鼠体内的表达和生物学活性进行初步研究,探讨以该重组腺相关病毒载体应用于类风湿关节炎基因治疗的可行性.方法首先以RT-PCR分别从大鼠脾细胞和大鼠淋巴细胞总RNA中扩增出大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段基因,并以重叠延伸PCR的方法将二者融合后克隆入pSNAVⅠ载体质粒进行重组病毒生产.在获得重组病毒后于Lewis大鼠肌肉注射,于不同时间ELISA测定血清ratTNFR:Fc表达,并以TNF-α细胞毒中和实验测定重组病毒表达产物的生物学活性.结果所构建的重组病毒rAAVⅠ/ratTNFR:Fc基因结构与预期一致;病毒于Lewis大鼠肌肉注射后可表达ratTNFR:Fc蛋白,含有ratTNFR:Fc蛋白的血清可以有效中和大鼠TNF-α对L929细胞的杀伤作用.结论本研究所构建的携带大鼠肿瘤坏死因子Ⅱ型受体胞外区和大鼠免疫球蛋白IgG1 Fc段融合基因的重组Ⅰ型腺相关病毒(rAAVⅠ/ratTNFR:Fc)可以用来作为阻断TNF-α的手段于大鼠类风湿关节炎模型上进行基因治疗研究.