四逆汤有效部位抗心肌缺血/再灌注损伤神经酰胺机制的研究

目的:探讨四逆汤有效部位对心肌缺血再灌注过程中心肌细胞凋亡及神经酰胺含量的影响.方法:昆明种小鼠,随机分为对照组,模型组,四逆汤有效部位组,用垂体后叶素造模,取小鼠心肌测定SOD活性及MDA含量,通过DNALadder和Dapi荧光染色考察心肌细胞凋亡情况,通过高效薄层层析及薄层层析扫描,用随引标准曲线计算心肌组织中神经酰胺的含量.结果:模型组心肌细胞有凋亡特有的DNAladder,凋亡指数和神经酰胺含量及MDA含量均比正常组显著升高(P＜0.01),SOD活性比正常组显著降低(P＜0.01);与模型组相比,四逆汤有效部位组的凋亡指数和神经酰胺含量均显著降低(P＜0.01),SOD活性比模型组显著升高(P＜0.01);模型组神经酰胺含量与凋亡指数和MDA含量均呈明显正相关(r=0.970,P＜0.01;r=0.974,P＜0.001).结论:四逆汤有效部位可在一定程度上降低心肌缺血再灌注时增高的心肌神经酰胺的含量,减少心肌细胞凋亡,从而达到保护心肌的作用.     

四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤作用

目的考察四逆汤有效部位抗心肌缺血-再灌注损伤的作用。方法实验动物随机分为正常组、模型组、四逆汤组、四逆汤有效部位组。大鼠心脏进行L angendorff灌流,通过控制灌流液流量建立心肌缺血-再灌注损伤模型,用药组在灌流液中加入相应药液,测定再灌注后50 m in的冠脉流量、心肌收缩力和再灌注1 m in内心律失常发生率。小鼠ig给药3 d后ip垂体后叶素(20 U/kg)造模,记录0~8 m in的心电图,并取心肌测SOD活性、M DA及LA水平。结果四逆汤和四逆汤有效部位均可不同程度地提高大鼠心肌缺血-再灌注损伤心肌收缩力恢复率、降低再灌注1 m in心律失常发生率,四逆汤有效部位对心肌收缩力的恢复作用较好,四逆汤对心律失常发生的抑制较好;四逆汤和四逆汤有效部位均可明显地降低小鼠心肌缺血-再灌注损伤过程中的心电图J点抬高,明显提高心肌组织SOD活性,降低M DA和LA水平,四逆汤和四逆汤有效部位作用无明显差异。结论四逆汤有效部位可以显著地改善心肌缺血-再灌注损伤过程中的氧化损伤和抑制无氧酵解,改善心肌收缩功能和心律失常。     

四逆汤对阿霉素性心衰大鼠心肌线粒体功能的影响

目的:探讨四逆汤对阿霉素(ADR)诱导的心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体的保护机制.方法:SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃(3.75 g生药/kg/d),3周后测定大鼠心功能,线粒体丙二醛(MDA)含量,Mn SOD活性,肿胀程度及Na K ATP酶和Ca2 ATP酶活力,RT-PCR法检测Mn SOD mRNA表达.结果:四逆汤组可以显著改善心衰大鼠心功能,提高Mn SOD的活性及其mRNA表达,减少心肌细胞线粒体MDA的含量及肿胀程度,提高ATP酶活力.结论:阿霉素性心力衰竭心肌细胞线粒体存在明显的氧化应激反应,四逆汤可以通过减轻氧化损伤,改善线粒体功能,保护心肌组织.     

甘草酸二铵对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响

目的观察甘草酸二铵(DG)对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响.方法在大鼠心肌缺血10min再灌注30min损伤模型上,监测肢体II导联ECG.术后用分光光度法分别测定心肌组织中丙二醛(MDA)、Na -K -ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)及血清乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)含量.结果DG能显著降低再灌注心律失常发生率及评分(P<0.01),也能明显减少心肌组织MDA含量(P<0.01),增加SOD和Na -K -ATP酶活性,还能减少心肌CK、LDH的释放(P<0.01).结论DG具有抗心肌缺血再灌注心律失常的作用,可能与降低心肌脂质过氧化和增强氧自由基清除酶的活性有关.     

加味失笑散对家兔心肌缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

目的 研究加味失笑散对心肌缺血再灌注损伤保护的作用机理.方法 将日本大耳白家兔40只随机分为5组:假手术组、模型组、加味失笑散低剂量组、加味失笑散中剂量组和加味失笑散高剂量组.采用结扎左冠状动脉前降支的方法制备缺血和再灌注模型,通过检测缺血前、缺血30min和再灌注60min时血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和血清肌酸激酶(CK)的变化,探讨加味失笑散对心肌缺血再灌注损伤保护作用的机制.结果 缺血30min和再灌注60min 时模型组实验动物的SOD活力较假手术组明显降低而MDA和CK明显增高(P<0.01),各用药组动物血清中的SOD活力明显高于模型组,MDA和CK活力明显低于模型组(P<0.01),且呈明显的剂量依赖性.结论 加味失笑散对心肌缺血再灌注的损伤有保护作用,其作用机制是通过增强SOD的活力,清除自由基而减轻心肌的损伤.     

天山花楸叶黄酮提取物抗心肌缺血再灌注损伤作用机制研究

目的采用网络药理学方法,筛选天山花楸Sorbus tianschanica叶抗心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的活性成分及主要靶点,验证天山花楸叶黄酮化合物对离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法通过TCMSP等数据库辅助,筛选出天山花楸叶中具有保护MIRI作用的化合物;构建化合物-靶点-疾病网络及蛋白互作网络,定位关键靶点;建立Langendorff离体大鼠MIRI模型,给予黄酮提取物高剂量组(1.5 mg/L)、低剂量组(0.5 mg/L)与4′-chlorodiazepam(CDZ,1μmol/L)预处理,观察缺血再灌注过程中心功能指标的变化情况,对新鲜的心肌组织进行TTC染色,测定心肌梗死面积;石蜡包埋切片HE染色;心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、还原性谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)、总抗氧化能力(T-AOC)和mPTP孔的开放程度。结果网络药理学方法筛选得到天山花楸抗心肌缺血再灌注损伤活性成分主要为黄酮类化合物,核心靶点为TSPO,与线粒体膜通透性转换孔mPTP密切相关;各给药组均能显著增强心功能指标,减小心肌梗死面积(P0.01),减轻心肌组织病理损伤,增强心肌组织抗氧化能力(P0.01),抑制m PTP孔的开放(P0.01),减轻线粒体水肿;其中,高剂量组作用最强。结论天山花楸叶黄酮提取物可增强心肌舒缩功能,减小心肌梗死面积,减轻心肌组织氧化应激损伤,通过作用于TSPO靶点,抑制mPTP孔开放,减轻心肌细胞线粒体水肿从而保护心肌组织。     

心肌缺血再灌注损伤引发的线粒体功能障碍与黄芪多糖的干预作用

目的:探讨心肌缺血再灌注损伤引发的线粒体损伤机制,以及黄芪多糖对大鼠心肌线粒体的保护作用。方法:健康成年SD雄性大鼠35只,分为假手术组,缺血再灌注组,黄芪多糖预处理组,黄芪多糖后处理组,阳性药物对照组。采用冠状动脉结扎的方法建立大鼠心肌缺血模型。电镜观察线粒体结构变化,测定线粒体内活性氧(ROS)水平,观察心律失常发生情况。结果:与假手术组相比,缺血再灌注组ROS水平显著升高(P0.05),心肌线粒体超微结构发生破坏,表现出明显的空泡变性,线粒体肿胀,线粒体脊膜破裂,而线粒体损伤积分也有显著升高(P0.05),同时心律失常评分升高(P0.05)。黄芪多糖预处理组和后处理组较缺血再灌注组线粒体结构损伤减轻(P0.05),粒体损伤积分降低(P0.05),线粒体内ROS水平降低(P0.05),心律失常显著减少(P0.05)。结论:黄芪多糖通过降低线粒体内ROS水平,减轻线粒体结构损伤,从而逆转线粒体功能障碍,减少缺血再灌注后恶心心律失常发生,减轻MIRI,从而发挥一定的心肌保护效应。     

四逆汤抗缺血再灌注引起小鼠心肌细胞凋亡的作用观察及其机制研究

目的:探讨心肌缺血再灌注模型中细胞凋亡的发生及四逆汤的保护作用机制。方法:昆明种小鼠随机分为四逆汤组、模型组和正常组,观察心肌细胞 DNA ladder,检测超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、Bcl-2蛋白、Caspase-3活性和 Bcl-2、Caspase-3mRNA 转录情况。结果:模型组存在氧化损伤,出现 DNA lad-der,凋亡指数增加;四逆汤可减少凋亡对抗氧化损伤。模型组 Bcl-2蛋白表达增加,四逆汤组更为显著,与mRNA 转录结果一致;模型组明显升高的 Caspase-3活性在四逆汤组被显著抑制,mRNA 转录未见明显变化。结论:此缺血再灌注模型存在心肌细胞凋亡,四逆汤可能通过提高机体抗氧化能力,增加 Bcl-2蛋白表达,抑制 Caspase-3激活减少凋亡发生。     

电针内关穴对心肌缺血再灌注损伤家兔心肌MDA、GSH-PX的影响

目的研究电针内关穴对心肌缺血再灌注损伤家兔心肌丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶含量的影响。方法将家兔随机分为4组:假手术组、模型组、电针内关组、电针列缺组。采用结扎左冠状动脉前降支30min,再灌注60min,建立心肌缺血再灌注损伤模型。应用分光光度法,观察电针对缺血再灌注损伤家兔心肌MDA、GSH-PX的影响。结果模型组家兔心肌MDA含量明显升高,而GSH-PX活性明显下降,与模型组、电针列缺组相比,电针内关组心肌MDA含量显著降低(P<0.05),而GSH-PX活性显著升高(P<0.01,P<0.05)。结论电针内关穴能显著降低缺血再灌注损伤心肌MDA含量,升高GSH-PX活性,达到抗缺血再灌注损伤的作用。     

丹红注射液激活AMPK保护心肌缺血再灌注损伤模型大鼠的实验研究

目的探讨丹红注射液激活AMPK保护缺血再灌注大鼠心肌的相关机制。方法将健康SD大鼠36只随机分为对照组、对照加丹红组、缺血再灌注组和缺血再灌注加丹红组。分别取各组大鼠心肌组织,血清。1)观察各组大鼠血清中TnT、LDH变化;2)用HBFP染色法将各组大鼠心肌组织进行染色,观察其坏死变化情况;3)采用投射电镜观察心肌组织中线粒体形态及结构变化;4)提取心肌组织蛋白,测定各组p-AMPKα、AMPKα的表达。结果丹红注射液可以降低大鼠心肌缺血再灌注的血清TnT、LDH水平、减少心肌坏死、减轻心肌细胞线粒体损伤、上调心肌AMPK的磷酸化水平。结论丹红注射液激活AMPK减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤及线粒体损伤。     

四逆汤抗阿霉素性心力衰竭的超氧化物歧化酶机制探讨

目的:探讨超氧化物歧化酶(SOD)在阿霉素(ADR)诱导的心力衰竭中的作用以及四逆汤的可能的保护机制。方法:SD大鼠随机分为对照组,心衰组和四逆汤组,心衰组和四逆汤组尾静脉注射ADR复制心衰模型,四逆汤组给予四逆汤煎剂灌胃(含生药3.75 g·kg^-1·d^-1),实验结束时测定各组大鼠心功能,留取心肌组织并提取心肌细胞线粒体,以TBA法测定丙二醛(MDA)含量,邻苯三酚法测定SOD活性,RT-PCR法检测铜-锌SOD和锰SOD mRNA表达情况。结果:与对照组相比,心衰组大鼠心脏左室内压及左室内压变化速率明显降低,左室舒张末期压力明显增高,心肌组织铜.锌SOD和锰SOD活性及其mRNA表达明显降低,心肌组织和心肌细胞线粒体MDA含量明显增多;而四逆汤组可以显著改善心衰大鼠心功能,并提高铜-锌SOD和锰SOD的活性,增加其mRNA表达,并明显减少心肌组织和心肌细胞线粒体MDA的含量。结论:阿霉素性心力衰竭中心肌细胞线粒体存在明显的氧化应激反应,四逆汤可以改善心功能,减轻此氧化应激反应,其机制可能与提高SOD活性密切相关。     

中药HD02抗脑缺血/再灌注损伤的作用及机制研究

目的:观察中药HD02制剂对小鼠反复缺血/再灌注损伤脑组织的保护作用.方法:随机分为假手术对照组、缺血再灌注模型组、HD02低、中、高剂量组,采用小鼠全脑反复缺血/再灌注模型,取脑组织进行脑含水量、SOD活性及MDA、Na /K -ATP酶、Ca2 -ATP含量酶的测定.结果:与假手术组比较,模型组脑含水量显著增加(P＜0.01)、SOD活性明显降低、MDA含量明显升高(P＜0.01)、ATP酶有明显下降(P＜0.01),HD02低、中、高剂量组均可明显减少脑组织含水量(P＜0.01)、提高SOD活性,降低MDA含量(P＜0.01),提高缺血/再灌注脑组织ATP酶活性(P＜0.01).结论:中药HD02可减少小鼠缺血/再灌注脑组织的损伤,其机制可能通过提高SOD活性,减轻自由基对组织的氧化损伤,同时保护细胞ATP酶活性从而使脑水肿程度降低,保护缺血再灌注导致的脑组织损伤.     

四逆汤防治PTCA术后再灌注损伤的作用机制及中医瓣证分型 …

目的：探讨不同证型患者服用四逆汤防治经皮冠状动脉内成形术（ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌ ｃｏｒｏｎａｒｙ ａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ,ＰＴＣＡ）后再灌注损伤的作用以及对没证型患者的影响。方法：对４０例做ＰＴＣＡ术患者随机分为四逆汤组和对照组,均有实证、虚证各１０例。四逆汤组于术前３天开始肥用四逆汤２５ｍｌ,每天１次;服至术后第３天。检测两组各型ＰＴＣＡ术前后血超氧化物歧化酶（ＳＯ     

四逆汤对大鼠肠缺血再灌注损伤后肠黏膜的保护效应

目的:探讨四逆汤(SND)对大鼠肠缺血再灌注(I/R)后肠黏膜的保护效应及机制。方法:SD大鼠随机分为对照组(仅分离不阻断肠系膜上动脉)、模型组(阻断肠系膜上动脉1 h后再灌注3 h)、SND高剂量(6 g.kg^-1.d^-1)及低剂量(3 g.kg^-1.d^-1)组。SND组大鼠连续灌胃3 d后手术。取回肠末端组织行光镜检查,并行肠黏膜组织Chiu’s评分,计算肠含水率;TUNEL法检测肠黏膜上皮细胞凋亡情况,检测肠黏膜组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的变化,免疫组化染色法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白表达。结果:SND预先给药能明显减轻肠黏膜组织病理损害,显著降低Chiu’s评分、肠含水率、肠黏膜细胞凋亡指数及MDA含量(P<0.01),升高SOD活性及Bcl-2蛋白表达(P<0.01),但SND两个剂量组间上述指标均无显著性差异(P>0.05)。相关分析表明,模型组及SND两个剂量组肠黏膜组织SOD活性与肠黏膜上皮细胞凋亡指数呈显著的负相关(r分别为0.775,0.796与0.712,P<0.01)。模型组与低剂量组Bcl-2蛋白表达量与肠黏膜上皮细胞凋亡指数亦呈显著负相关(r分别为0.751与0.698,P<0.01)。结论:SND预先给药对肠I/R后肠黏膜具有保护作用,可能与其清除氧自由基、促进Bcl-2蛋白表达来抑制肠黏膜细胞凋亡有关。     

核因子-κB在四逆汤预处理诱导大鼠心肌延迟预适应中的作用

目的:探讨四逆汤能否诱导心肌延迟预适应及其可能机制。方法:SD大鼠分为假手术组、缺血再灌注组、延迟缺血预处理组、四逆汤预处理组。延迟缺血预处理组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血5min,再灌5min,反复循环3次,24h后缺血1h,再灌1h。四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃(5g·kg^-1·d^-1)连续3d,末次灌药24h后缺血1h,再灌1h。以心肌梗死面积为评价指标并测定心肌中超氧化物歧化酶的活性、丙二醛的含量,通过RT PCR检测MnSODmRNA及Cu ZnSODmRNA的表达并利用免疫组织化学染色法检测大鼠心肌NFκB亚单位P65的表达。结果:延迟缺血预处理组及四逆汤预处理组心肌梗死面积明显小于缺血再灌注组,MDA的含量低于缺血再灌注组,SOD活性和MnSODmRNA的表达高于缺血再灌注组,NFκB发生核转位且蛋白表达显著高于缺血再灌注组。缺血再灌注组、延迟缺血预处理组及四逆汤预处理组的Cu ZnSODmRNA表达均下降,3组之间无差异。结论:四逆汤能诱导心肌延迟预适应,其机制可能与NFκB的激活相关。     

四逆汤保护缺血心肌作用的实验研究

从自由基角度在小鼠垂体后叶素性心肌缺血模型上探讨四逆汤保护缺血心肌的可能机制。结果表明：四逆汤可降低缺血心肌的氧自由基（ＯＦＲ）浓度和丙二醛（ＭＤＡ）含量，增加营养血流量（ＮＢＦ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。提示四逆汤保护缺血心肌是通过改善缺血心肌的灌流，减轻自由基损伤反应，加强自由基防御能力等多种机制实现的。     

四逆汤对心肌缺血大鼠内皮素影响的研究

观察了不同剂量的四逆汤(SND)及相同剂量的四逆汤灌胃后不同时点的大鼠血浆及心肌组织内皮素(ET)浓度的变化.末次药后1h腹腔注射垂体后叶素(Pit)15u/kg,Pit注射后1h取材,分别测定心肌及血浆ET浓度.结果四逆汤灌胃的最佳剂量为5.0g/kg体重@d,最佳灌胃时间为5天;SND组心肌及血浆ET浓度明显低于缺血组,说明SND可显著降低缺血心肌ET浓度,并对血浆ET浓度有降低趋势.     

四逆汤防治PTCA术后再灌注损伤的作用机制及中医辨证分型的临床研究

目的：探讨不同证型患者服用四逆汤防治经皮冠状动脉内成形术（ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌｃｏｒｏｎａｒｙａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ，ＰＴＣＡ）后再灌注损伤的作用以及对不同证型患者的影响。方法：对４０例做ＰＴＣＡ术患者随机分为四逆汤组和对照组，均有实证、虚证各１０例。四逆汤组于术前３天开始服用四逆汤２５ｍｌ，每天１次；服至术后第３天。检测两组各型ＰＴＣＡ术前后血超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性、丙二醛（ＭＤＡ）含量及一氧化氮（ＮＯ）含量并进行比较。结果：术前虚证型ＳＯＤ活性显著低于实证型（Ｐ＜００５），术前实证型ＭＤＡ含量显著高于虚证型（Ｐ＜００５），服用四逆汤能减轻两组术后ＳＯＤ活性和ＮＯ浓度的下降及ＭＤＡ含量的升高（Ｐ＜００５），其中提高虚证型ＳＯＤ活性的幅度显著高于实证型（Ｐ＜００５）。结论：四逆汤具有抗ＰＴＣＡ术后再灌注损伤的作用，对虚证型效果尤好。