Src激酶在胃癌细胞来源的exosome促进肿瘤细胞增殖中的作用

目的:研究胃癌细胞来源的外泌体(exosome)对肿瘤细胞增殖的影响,初步探讨Src蛋白激酶在此过程中的作用.方法:采用离心超滤和蔗糖密度梯度超速离心的方法从胃癌SGC7901细胞的上清液中分离出胃癌细胞来源的exosome.透射电子显微镜下观察exosome形态.MTT法检测细胞增殖能力,Western blot检测...     

鼻咽癌中PTTG1与MAPK/ERK信号通路及增殖凋亡的关系

目的探讨鼻咽癌中PTTG1与MAPK/ERK信号通路及细胞增殖凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法检测33例鼻咽癌中PTTG1、p-ERK、Ki-67蛋白的表达;用50、100μmol/L的ERK/MAPK信号传导通路抑制剂PD98059,分别处理CNE-2Z细胞24、48、72 h,免疫细胞化学法检测PTTG1、p-ERK、Ki-67蛋白的表达;MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 33例鼻咽癌组织中PTTG1、p-ERK、Ki-67蛋白的阳性表达率分别为81.82%(27/33)、66.67%(22/33)、78.79%(26/33);PTTG1与p-ERK(r=0.345,P=0.042<0.05)、Ki-67(r=0.600,P<0.01)蛋白表达均呈正相关;不同浓度PD98059作用于CNE-2Z细胞不同的时间,免疫细化检测PT-TG1、p-ERK、Ki-67蛋白的阳性表达降低,细胞增殖明显受抑制,可检测到凋亡峰。结论 PTTG1在鼻咽癌中可能通过MAPK/ERK信号通路发挥促进癌细胞增殖及抑制凋亡的生物学作用。     

PI3K/Akt信号通路与肝纤维化

PI3K/AKT信号通路可以通过调控基因表达,从而在细胞的存活、分化、生长、运动和凋亡等多种生理和病理过程中起到重要作用。尤其在肝纤维化的进展中,此信号通路发挥了重要的调节作用。本文将对目前有关PI3K/AKT信号通路在参与肝纤维化形成中,如何调控细胞外基质的降解、影响HSC的活化及调节肝窦毛细血管化等作用机制作一综述。这些资料不仅可以揭示相关疾病条件下,多个细胞与信号因子之间复杂的相互作用机制,而且能够突出通过阻断PI3K/AKT信号通路可以保护和治疗肝纤维化这一潜在的临床意义。     

ERK信号通路在组胺诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖中的调控作用

目的本研究旨在探讨细胞外信号调节激酶（extracellular signal—regulated kinase,ERK）信号通路在组胺诱导的大鼠气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells,ASMCs）增殖中的调控作用。方法以体外分离、培养的ASMCs为研究对象,加入不同浓度组胺（histanmine,Hist）和PD98059对其进行处理,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）微量比色法检测Hist及ERK信号通路对ASMCs增殖的影响,Western blot检测ERK1／2、磷酸化ERK1／2（phosphorylated-ERK1／2,p-ERK1／2）蛋白的表达,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定ASMCs核内NF—κB水平,并对各组进行比较。结果低浓度和高浓度的Hist均能不同程度刺激ASMCs增殖,100μmol／L时细胞存活率达201．3％;Hist组ASMCs增殖反应与对照组相比显著增加,而Hist＋PD980059组ASMCs的增殖反应显著低于Hist组;Hist组ASMCs中的p-ERK1／2蛋白表达较正常对照组明显增强,在加入PD980059后Hist诱导的活化ERK1／2相对于Hist组表达显著下降;Hist处理组NF—κB吸光度值显著高于对照组,Hist＋PD98059组NF—κB吸光度值较Hist处理组显著降低。结论Hist可显著诱导ASMCs增殖,ERK信号通道在此调控中起重要作用,而且还可能参与ASMCs中Hist诱导的NF—κB活化。     

宫颈癌细胞分泌外泌体对宫颈癌细胞增殖、凋亡功能及MAPK/ERK信号通路的影响

目的 探讨宫颈癌细胞分泌外泌体对宫颈癌细胞增殖、凋亡功能及丝裂原活化蛋白激酶/胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)信号通路的影响。方法 采用超速离心法分离宫颈癌C33A细胞外泌体。将C33A细胞分为外泌体(Exo)组和对照(C)组,Exo组C33A细胞用含外泌体的培养基培养,C组C33A细胞用不含外泌体的培养基培养。MTT测定C33A细胞增殖能力,克隆形成实验测定C33A细胞集落形成能力,流式细胞术测定C33A细胞凋亡能力,Western印迹测定C33A细胞中ERK1/2、磷酸化(p)ERK1/2蛋白水平。结果 1 d、3 d、5 d, Exo组C33A细胞A值明显高于C组(P<0.05),Exo组C33A细胞集落形成数明显高于C组(P<0.05),Exo组C33A细胞凋亡率明显低于C组(P<0.05),两组C33A细胞ERK1/2蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05);Exo组C33A细胞p-ERK1/2蛋白水平明显高于C组(P<0.05)。结论 宫颈癌C33A细胞来源外泌体可促进C33A细胞增殖、抑制其凋亡,其机制可能与C33A细胞外泌体可激活MAP...     

PI3K/Akt信号通路在肿瘤血管形成中的作用研究进展

磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路在抑制细胞凋亡、促进细胞增殖等方面具有重要作用。近年来越来越多的研究发现其与肺癌、乳腺癌、结直肠癌、前列腺癌、卵巢癌、肝癌及淋巴瘤的发生、发展密切相关。血管形成是肿瘤生长的重要环节,受血管内皮生长因子、表皮生长因子受体、血管生成素等的调控。现将近年来有关P13K/AKT信号通路在肿瘤血管形成中的作用研究进展情况综述如下。     

ERK1、ERK2在胃腺癌中的表达及临床意义

对38例胃腺癌及其相应癌旁组织和20例大致正常的胃粘膜组织进行Western印迹检测,同时将其石蜡切片进行免疫组织化学染色,检测以上组织中细胞外信号激酶1．2（ERK1、ERK2）的表达,并结合胃癌临床病理资料进行分析。结果显示,ERK1、ERK2在胃癌组织中呈强阳性表达,而对照胃粘膜组织中呈弱表达或无表达,免疫组织化学与Western印迹结果具有一致性;ERK1、ERK2的阳性表达与胃癌的组织学类型、TNM分期及有无淋巴结转移无关（P＞0．05）。认为胃癌组织中ERK1、EK2的表达增强,ERK信号传导途径在胃癌发生发展中可能起一定作用。     

PI3K/Akt/mTOR信号通路对大鼠肾小球系膜细胞增殖的调控作用探讨

目的:探讨磷脂酰肌醇-3(PI3K)/蛋白激酶(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路对大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖的调控作用。方法:体外培养大鼠MC,随机分为正常对照组、表皮生长因子(EGF)(10ng/m L)组、PI3K抑制剂LY294002组(2μg/m L)、EGF联合LY294002组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测4组MC的增殖,流式细胞术检测MC周期,免疫荧光法检测系膜细胞m TOR的表达。结果:与正常对照组相比,EGF组能显著促进大鼠MC增殖,G0/G1期细胞减少,S期及G2/M期细胞增加,且m TOR表达增加;LY294002组大鼠MC增殖受抑制,G0/G1期细胞增加,S期及G2/M期细胞减少,且m TOR表达降低;与EGF组比较,EGF联合LY294002干预组MC增殖受抑制,G0/G1期细胞增多,S期及G2/M期细胞减少,且m TOR表达降低。结论:m TOR信号通路参与了大鼠肾小球MC增殖的调控,抑制该信号通路的活化可显著抑制MC的增殖和MC周期的进程。     

PI3K/Akt抑制剂LY294002对胃癌细胞化疗增敏作用的探讨

目的 探讨PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002与化疗药物5-Fu及奥沙利铂联合使用对3种胃癌细胞系(MGC803、BGC823和SGC7901)化疗效果的影响.方法 将PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002联合化疗药物5-Fu及奥沙利铂作用于3种胃癌细胞系,MTT法检测单独使用5-Fu、奥沙利铂及联合LY294002对体外培养的3种胃癌细胞系的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 联合LY294002作用后,5-Fu、奥沙利铂对3种胃癌细胞系的增殖抑制作用明显增强(P<0.05),且凋亡率显著提高(P<0.05).结论结果 LY294002能有效提高化疗药物5-Fu、奥沙利铂体外对胃癌细胞的增殖抑制作用,抑制PI3K/Akt信号转导通路可显著提高胃癌的化疗疗效.     

ERK信号通路与肝纤维化

细胞外信号调节激酶是丝裂原激活蛋白激酶家族的重要成员。近年来发现其与肝纤维化的关系密切,可从多方面影响肝纤维化的形成。通过干预细胞外信号调节激酶通路,研究肝纤维化的发病机制和药物治疗是有希望的途径。     

Involvement of PI3K and ERK1/2 pathways in hepatocyte growth factor-induced cholangiocarcinoma cell invasion

AIM:To investigate the role of hepatocyte growth factor(HGF) in cholangiocarcinoma(CCA) cell invasiveness and the mechanisms underlying such cellular responses. METHODS:Effects of HGF on cell invasion and motility were investigated in two human CCA cell lines,HuCCA-1 and KKU-M213,using Transwell in vitro assay.Levels of proteins of interest and their phosphorylated forms were determined by Western blotting.Localization of E-cadherin was analyzed by immunofluorescence staining and visualized under confocal m...     

Akt和胞外信号调节激酶通路间的信号交流对内质网应激条件下肝癌细胞周期的调控

目的 研究内质网应激介导的磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/Akt和丝裂原活化蛋白激酶(MEK)/胞外信号调节激酶(ERK)途径间的信号交流及其对内质网应激条件下肝癌细胞周期的调控作用.方法 采用PI3K抑制剂LY294002、Akt激活型突变载体myr-Akt和MEK抑制剂U0126分别阻断或激活内质网应激介导的Akt和ERK活化,并利用Western blot和流式细胞技术分析内质网应激条件下PI3K/Akt和MEK/ERK途径间的信号交流及其对肝癌细胞株SMMC-7721、Hep3B和HepG2细胞周期的调控作用.数据处理采用Sperman等级相关分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 阻断PI3K/Akt明显促进内质网应激介导的MEK/ERK活化,而过度激活PI3K/Akt则抑制内质网应激介导的MEK/ERK活化.阻断MEK/ERK对内质网应激介导的PI3K/Akt活化无影响.持续活化的Akt突变载体myr-Akt和MEK抑制剂U0126均明显抑制了内质网应激诱导的压力细胞G0/G1期阻滞.结论 PI3K/Akt和MEK/ERK信号途径在内质网应激肝癌细胞中存在信号交流,该信号交流对细胞周期起重要调控作用.     

联合抑制Notch和PI3K/Akt通路对胃癌细胞增殖的影响

目的初步探讨Notch和PI3K/Akt信号通路在胃癌细胞SGC-7901中是否存在交叉作用。方法应用Notch信号通路的抑制剂GSI和PI3K/Akt信号通路的抑制剂LY294002分别单独和联合处理体外培养的胃癌SGC-7901细胞,以无药物处理的细胞作为对照组。MTT法检测癌细胞的增殖抑制率,Western blotting法检测磷酸化Akt(p-Akt)和Notch-1蛋白的表达水平。结果 GSI能抑制癌细胞的增殖(53.56±2.04)%,并降低蛋白Notch-1的表达水平,而p-Akt的表达水平则较对照组增加。LY294002能抑制癌细胞的增殖(42.93±1.64)%,并降低p-Akt的表达水平,Notch-1水平则无明显变化,两种信号通路的抑制剂联合应用后能明显降低癌细胞的增殖率[(86.01±2.02)%,P=0.00],p-Akt和Notch-1蛋白的表达水平均降低。结论在抑制Notch信号通路的基础上,抑制PI3K/Akt通路可进一步增强抑制Notch通路的抗肿瘤增殖效果,并提示PI3K/Akt和Notch两条信号通路在胃癌SGC-7901细胞中存在交叉作用。