白细胞介素10基因修饰干细胞移植对肝纤维化大鼠肝脏炎症和肝再生的影响

目的 探讨白细胞介素10(IL-10)基因修饰骨髓源性肝干细胞(BDLSC)移植对大鼠纤维化肝脏的炎症反应和肝再生的影响. 方法 雌性Wistar大鼠50只随机分为4组:(1)正常组(10只):皮下注射橄榄油3 ml/kg,2次/周,首剂加倍,共注射8周;(2)模型组(16只):皮下注射体积分数40%CCl_4和橄榄油(CCl_4:橄榄油=2:3),3 ml/kg,注射次数和时间同正常组,于第4周末经门静脉分支输注1 ml无菌等渗盐水(NS);(3)BDLSC组(12只):造模方法 同模型组,于第4周末经门静脉分支输注BDLSC 1 ml(每毫升NS含BDLSC 2×10~5个),后续处理同模型组,(4)BDLSC/IL-10组(12只):造模方法 同模型组,于第4周末经门静脉分支输注IL-10基因修饰BDLSC 1 ml(每毫升NS含BDLSC 2×10~5个),后续处理同模型组.大鼠于造模第8周末处死,留取肝组织备用.采用酶联免疫吸附法检测肝组织IL-10,肿瘤坏死因子α含量,采用苏木素-伊红染色法观察肝组织病理学改变情况;分别采用实时定量PCR法和免疫组织化学法检测肝组织肝细胞生长因子mRNA和增殖细胞核抗原蛋白的表达.根据不同资料采用方差分析或Kruskal-Wallis检验进行统计学分析. 结果 BDLSC能顺利种植于肝内,并至少维持4周.大鼠肝组织的IL-10/TNF α比值,模型组为0.05±0.01,正常组为0.26±0.04(F=57.538,P<0.01),BDLSC/IL-10组为0.68±0.21,BDLSC组为0.08±0.03,模型组比正常组明显降低,BDLSC/IL-10组比正常组明显升高.单纯BDLSC移植未能改善IL-10/TNF α比值降低情况.模型组大鼠肝组织病理学改变明显,炎症反应重,BDLSC组炎症有所减轻,BDLSC/IL-10组的肝组织形态接近正常组.模型组大鼠肝组织的肝细胞生长因子mRNA和增殖细胞核抗原蛋白表达增强,分别为0.0049±0.0009和8511.80±4560.34,F值分别为84.945和82.376,P值均<0.01.BDLSC组二者表达进一步增强,分别为0.0145±0.0022和15 785.21±6431.66,,值分别为84.945和82.376,P值均<0.01,BDLSC/IL-10组较BDLSC组增强更明显,分别为0.0684±0.0190和44 371.43±13 865.65,F值分别为84.945和82.376,P值均<0.01,差异有统计学意义.结论 IL-10基因修饰BDLSC移植能减轻纤维化肝脏的炎症反应,促进肝再生,为有效治疗肝纤维化提供了依据.     

uPA基因转染骨髓源性肝干细胞移植对肝纤维化大鼠HSC活化的影响

目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)基因修饰骨髓源性肝干细胞(BDLSC)移植对CCl4诱导的大鼠肝星状细胞(HSC)激活的影响.方法:大鼠sc 400mL/LCCl4造模.36只大鼠随机分为4组:(1)正常组:sc等量橄榄油;(2)模型组;(3)BDLSC组;(4)BDLSC-uPA组,每组9只.各组大鼠于第8周处死,留取血清及肝组织.观察大鼠肝功能的变化;采用免疫组织化学法和Western blot法检测大鼠肝组织仅α-平滑肌肌动蛋(α-SMA)蛋白表达变化.结果:与模型组和BDLSC组相比.BDLSCuPA组大鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)水平均有不同程度的降低(86.5±9.7 vs 187.1±14.8,113.5±15.7:11.5±2.1 vs 26.3±3.7,17.94±2.8,均P<0.01),血清透明质酸(HA)和Ⅲ型前胶原(PCⅢ)水平明显降低(47.4±10.1vs148.5±22.4,97.6±14.4:18.9±4.4 vs 39.0±6.1,28.2±4.1,均P<0.01); 肝组织α-SMA表达显著下调(0.0174 0.0048 vs 0.3404 0.0662,0.1080 0.0408,均P<0.01).结论:uPA基因修饰BDLSC移植能有效抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化,改善纤维化大鼠的肝功能,且抑制HSC的活化可能是其抑制肝纤维化的主要机制之一.     

荔枝核总黄酮防治胆汁淤积性大鼠肝纤维化的实验研究

目的探讨荔枝核总黄酮(TFL)对胆汁淤积性大鼠肝纤维化的防治作用及其机制。方法雄性SD大鼠80只,随机分为假手术组、模型组、TFL大剂量组[200 mg/(kg.d)]、TFL小剂量组[100 mg/(kg.d)],每组20只。采用胆总管结扎制备肝纤维化大鼠模型,于术后第4周时处死大鼠,留取大鼠肝左叶组织,HE染色观察肝纤维化程度变化;免疫组化方法检测转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad3、Smad7蛋白的表达。结果术后第4周,与模型组比较TFL大剂量组肝小叶结构破坏明显减轻,肝纤维化程度较模型组明显好转,与假手术组结构接近;TFL小剂量组肝小叶结构破坏程度和肝纤维化程度介于模型组与TFL大剂量组之间。TFL大剂量组肝组织中TGF-β1、Smad3表达明显减少,Smad7表达显著增高;TFL小剂量组TGF-β1和Smad3、Smad7蛋白表达与模型组比较无明显差异(P>0.05)。结论 TFL能有效减轻胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝损伤及肝纤维化程度,其机制可能与调控TGF-β1、Smad3/7信号转导表达有关。     

尿激酶型纤溶酶原激活物基因转染骨髓源性肝干细胞移植对肝纤维化大鼠肝细胞再生的影响

目的 探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)基因修饰骨髓源性肝干细胞(BDLSC)移植对四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化大鼠肝细胞再生的影响.方法 纯系Fisher 344雄性大鼠10只,为BDLSC供体大鼠.体外将AduPA转染雄性大鼠BDLSC.纯系Fisher 344雌性大鼠36只,均分为正常组(皮下注射橄榄油)、模型组(CCl4造模,尾静脉注射0.9%氯化钠)、BDLSC组(CCl4造模,尾静脉输入BDLSC)、转基因组(CCl4造模,尾静脉输入转基因BDLSC).检测大鼠肝功能和肝组织胶原面积.半定量RT-PCR方法检测大鼠肝组织肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-met mRNA表达水平.免疫组织化学法检测大鼠肝组织增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达.结果 正常组、模型组、BDLSC组、转基因组肝组织胶原染色面积分别为0.12%±0.03%、14.49%±1.40%、8.25%±0.82%、5.12%±0.40%,组间差异均有统计学意义(P值均<0.05).与模型组和BDLSC组相比,转基因组大鼠肝功能明显改善,血清透明质酸(HA)、血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、肝组织羟脯氨酸含量明显降低,肝组织HGF和c-met mRNA水平均显著上调,PCNA蛋白表达显著增加.结论 uPA基因修饰BDLSC移植可能诱导肝细胞增殖,从而改善CCl4诱导肝纤维化大鼠的肝功能.

Abstract：

Objective To explore the effects of urokinase type plasminogen activator (uPA) gene-modified bone marrow-derived liver stem cells ( BDLSC) transplantation on hepatocyte regeneration in CCl4-induced liver fibrosis rats. Methods Ten male Fisher 344 rats were donor rats of BDLSC. The BDLSC of male rat was transfected with AduPA. Thirty-six female Fisher 344 rats were equally divided into normal group (injected subcutaneously with olive oil) , model group (CCl4 induced the model, injected through tail vein with 0. 9% sodium chloride), BDLSC group (CCl4 induced the model, injected through tail vein with BDLSC) and gene transfected group (CCl4 induced the model,injected through tail vein with gene transfected BDLSC). Liver function and area of collagen were observed. The expression of hepatic growth factor ( HGF) and its receptor c-met mRNA in rats' liver tissues were tested by semiquantitative RT-PCR. The expressions of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in rats' liver tissues were determined by immunohistochemistry staining. Results The areas of collagen in normal group, model group, BDLSC group and gene transfected group was 0. 12% ± 0.03%, 14. 49%±1.40%, 8. 25%±0. 82% and 5. 12%±0. 40% accordingly, there were significant differences between groups (P<0. 05). Compared with model group and BDLSC group, the liver function of gene transfected group significantly improved, the serum levels of hyaluronic acid (HA),procollagen Ⅲ (PCⅢ) and the content of hydroxyproline in liver tissues decreased dramatically. The expression of HGF and c-met at mRNA levels were up-regulated significantly, and the expression of PCNA protein in liver tissues increased obviously. Conclusion uPA gene-modified BDLSC transplantation may induce proliferation of hepatocytes, and then improve the liver functions of fibrotic rats induced by CCl4.     

红景天对大鼠肝纤维化肝脏组织Smad4、Smad7表达的影响

目的 探讨红景天对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化肝组织Smad4、Smad7基因表达的影响.方法 健康雄性SD大鼠60只随机分组:①正常对照组;②肝纤维化模型组;③红景天干预组.每组20只.以CCl4腹腔注射法诱导大鼠肝纤维化,红景天干预组大鼠在造模的同时给予红景天灌胃,正常对照组给予橄榄油和生理盐水,8 w实验结束时处死动物,留取的肝脏组织做HE按0～4期标准判定肝纤维化程度,应用半定量RT-PCR及免疫组化法检测肝组织中Smad4、Smad7的表达.结果 模型组肝纤维化程度处于2～4期,其中大部分达3期以上,红景天干预组大鼠肝纤维化程度明显减轻,只有少部分达3期.红景天干预组大鼠肝脏Smad4蛋白、Smad4mRNA表达阳性率均低于模型组(P＜0.05);红景天干预组大鼠Smad7蛋白、Smad7mRNA阳性率高于模型组(P＜0.01).肝组织Smads蛋白表达与Smads mRNA水平变化一致.结论 红景天防治可显著抑制肝脏Smad4表达及促进Smad7的表达,从而减弱了由TGFβ1介导的肝纤维化信号,可能是其发挥抗肝纤维化作用的分子机制之一.     

鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化的防治作用

目的:研究鳖甲煎改良方对大鼠肝纤维化(HF)的防治作用及对TGF-β1和Sman3/7蛋白表达的影响,探讨其机制.方法:SD♂大鼠90只,随机取10只作为正常对照组(A组),其余大鼠用皮下注射40%CCl4橄榄油油剂3mL/kg诱导大鼠肝纤维化模型8wk,于第2周时随机处死5只大鼠证实HF形成后,将剩下的大鼠随机分为肝纤维化模型组(B组)、鳖甲煎改良方高剂量组[C组,28.4g/(kg·d)]、中剂量组[D组,14.2g/(kg·d)]、低剂量组[E组,7.1g/(kg·d)]、复方鳖甲软肝片组[F组,0.6g/(kg·d)],每组15只.C、D、E、F组给予10mL/(kg·d)相应药液灌胃治疗,A、B组同时给予等剂量的生理盐水灌胃处理.8wk后采血测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、草氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白和球蛋白含量;取肝组织作HE染色观察肝纤维化程度变化;Westernblot方法检测TGF-β1、Smad3和Smad7蛋白的表达.结果:8wk后,与B组比较,C、D、E组和F组肝小叶结构破坏明显减轻,肝纤维化程度分级较B组明显好转;ALT和AST含量显著降低(P<0.01),白蛋白含量显著增...     

虫草多糖脂质体对实验性大鼠肝纤维化Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达的影响

目的:探讨虫草多糖脂质体(CPL)对CC14大鼠肝纤维化的预防作用及可能机制。方法:采用虫草多糖脂质体(CPL)预防CC14大鼠肝纤维化,运用免疫组和Northern杂交化检测肝组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白及Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因的表达。结果:CPL预防组肝脏中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白较模型对照组明显减少(P值分别<0.01);CPL预防组大鼠肝脏组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达量明显下降,与模型组大鼠比较差异有显著性(P值分别<0.05)。结论:虫草多糖脂质体可以预防大鼠肝纤维化,其抗纤维化作用是通过在转录水平抑制肝脏胶原合成而实现的。     

壮肝逐瘀煎对肝纤维化大鼠TβRI/Ⅱ、Smad3、Smad4和Smad7表达的影响

目的:研究壮肝逐瘀煎对肝纤维化(HF)大鼠TβR Ⅰ/Ⅱ、Smad3、Smad4和Smad7表达的影响.方法:Wistar大鼠44只,随机取8只作为正常对照(A)组;余大鼠用CCl4复合因素法进行HF造模,wk 4随机处死4只证实HF形成后随机分为病理模型(B)组、壮肝逐瘀煎治疗(C)组、秋水仙碱对照(D)组、大黄(蠊)虫丸对照(E)组.B组予生理盐水ig,C、D、E组予相应药液ig.6 wk后获取肝组织,HE染色观察HF程度;用免疫组化、图像分析方法对TβR Ⅰ/Ⅱ、Smad3、Smad4、Smad7的组织分布进行半定量分析.结果:与B组比较,C、D、E组肝小叶结构趋于正常,肝组织TβR Ⅰ/Ⅱ、Smad3、Smad4表达显著减少(TβR Ⅰ:2.75±0.10,3.14±0.07,3.44±0.06 vs 5.47±0.13,P<0.01:TβR Ⅱ:1.86±0.12,2.09±0.10,2.53±0.12 vs 3.52±0.15,P<0.01;Smad3:2.28±0.59,3.84±1.11,3.97±0.90 vs 5.65±1.28,P<0.01:Smad4:1.57±0.53,3.15±0.79,3.37±0.78 vs 5.25±1.60,P<0.01),Smad7表达显著增加(3.45±0.58,2.09±0.38,1.75±0.29 vs 0.73±0.34,P<0.01),C组强于D、E组(P<0.01).结论:壮肝逐瘀煎能显著改善HF组织病理变化,其作用机制可能与壮肝逐瘀煎调控TβR Ⅰ/Ⅱ、Smad3、Smad4、Smad7的表达有关.     

软肝冲剂对CCl4肝纤维化大鼠TGFβ1 mRNA表达的影响

研究软肝冲剂对CCl4肝纤维化大鼠转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA表达的影响,从分子水平探讨软肝冲剂促进肝细胞再生、阻止肝纤维化、肝硬化形成的作用机制.方法:采用Northern-blot方法检测CCl4肝纤维化大鼠TGFβ1mRNA表达.结果:Northern-blot杂交显示,实验第45、90天,模型组、中药各组和西药秋水仙碱组大鼠肝脏TGFβ1 mRNA表达均较正常组增强(P＜0.01).但中药各组和西药秋水仙碱组TGFβ1 mRNA表达水平均低于模型组(P＜0.01).其中中药高剂量组TGFβ1 mRNA表达水平均低于中药低剂量组和西药秋水仙碱组(P＜0.01).结论:软肝冲剂能调节CCl4肝纤维化大鼠TGFβ1mRNA表达,促进肝细胞再生,抑制肝纤维化、肝硬化的形成.     

中药肝炎平对CCl4诱导的肝纤维化大鼠TGFβ1/Smad信号通路的影响

目的:研究中药肝炎平对CCl4诱导的大鼠肝纤维化肝脏TGFβ1及其受体TβR Ⅰ,TβR Ⅱ水平和 Smad3,Smad7及前胶原α2(Ⅰ)(Colla2)mRNA 表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制．方法:健康Wistar大鼠38R随机分为正常对照组(N组)、模型对照组(A组)以及肝炎平治疗组(B组)．N组每日以生理盐水10μL/g灌胃,A 组及B组用CCl4制备大鼠肝纤维化模型,B组 4wk后开始以肝炎平10μL/g灌胃给药,A组同时以生理盐水10μL／g灌胃,每日1次．9 wk 后处死大鼠,取肝组织作病理学检查,免疫组化检测TGFβ1及其受体TβR Ⅰ,TβR Ⅱ的表达, RT-PCR检测胞内信号蛋白Smad3,Smad7以及 Coila2 mRNA的表达．结果:与正常对照组相比,模型组TGFβ1、 TβR Ⅰ、TβRⅡ、Smad3、Colla2表达明显增强,Smad7表达明显下降．经肝炎平治疗后大鼠肝脏TGFβ1及其受体TβR Ⅰ,TβR Ⅱ表达均比模型组减弱(TGFβ1:4．30±0．16 vs 4．18 ±0．17．P<0．05;TβR Ⅰ:4．35±0．14 vs 4．24± 0．10．P<0．05;TβRⅡ:4.37±0．11 vs 4．27±0．08． P<0．05)．肝炎平同时下调Smad3和Colla2 mRNA的表达(Smad3:0．93±0．05 vs 0．90± 0．41．P<0．05;Colla2:0．95±0．03 vs 0．92±0．03． P<0．05),上调Smad7 mRNA的表达(0．84±0．05 vs 0．87±0．03,P<0．05)．另外,肝炎平组大鼠肝脏病理变化显著改善．结论:肝炎平对大鼠肝纤维化肝脏TGFβ1/ Smad信号通路有明显的影响,能抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化,其作用机制可能为抑制 TGFβ1．及其受体TβR Ⅰ,TβRⅡ蛋白表达,下调Smad3 mRNA,上调Smad7 mRNA的表达, 并最终下调了作为主要细胞外基质的Colla2 mRNA的表达．     

丹参单体IH764-3抗肝纤维化作用研究

目的:研究丹参单体IH764-3在大鼠体内、外的抗肝纤维化作用,重点观察对胶原降解的影响.方法:40只SD大鼠随机分为3组,对照组10只,模型组及IH764-3组各15只.以胆总管结扎法(BDL)建立肝纤维化模型,用免疫组化法检测大鼠组织血细胞金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)、转化生长因子β(TGF-β1)和肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量.结果:BDL结扎14 d后有明显肝纤维化形成.IH764-3使肝组织Hyp减少40.6%,同时TIMP-1、TGF-β1蛋白质表达分别下降36.2%和32.5%;在体外使TIMP-1、TGF-β1阳性肝星状细胞数目减少.结论:丹参单体IH764-3具有抗肝纤维化作用,其机制之一是抑制TIMP-1和TGF-β1蛋白的表达.     

腺病毒介导的人uPA体外转染大鼠骨髓源性肝干细胞的研究

目的评价携带人uPA基因的腺病毒(AduPA)转染骨髓源性肝干细胞(BDLSC)的效率,在BDLSC中的表达及其对BDLSC增殖和分化的影响。方法利用淤胆型肝损伤大鼠模型和含5%淤胆血清病理条件培养液筛选和扩增BDLSC,采用荧光显微镜检测AduPA的转染效率,采用Westernblotting法检测uPA在BDLSC中的表达,采用MTT法和免疫细胞化学法分别检测转染AduPA的BDLSC的增殖和分化变化。结果随着MOI的增高,转染效率明显增高,当MOI为500时,转染效率达92.6±2.2%,转染3天后的人uPA在BDLSC稳定表达,且转染AduPA对BDLSC的增殖和分化无明显影响。结论BDLSC可能是一种良好的基因载体细胞,可携带uPA用于肝纤维化的治疗研究。     

中药软肝饮对CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型Smad3表达的影响

目的研究中药软肝饮对CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型Smad3表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法 40只Wistar大鼠,随机分成正常对照组、模型组、软肝饮组和复方鳖甲软肝片组,采用CCl4背部皮下注射构建肝纤维化模型,进行HE和Van-Gieson染色,光镜下观察肝组织纤维化程度。同时以免疫组织化学SABC法检测各组Smad3的表达。结果与正常对照组相比,模型组Smad3表达明显增强,软肝饮组大鼠肝脏Smad3的表达显著下调(0.279±0.085vs0.885±0.904,P<0.05)。另外,软肝饮组大鼠肝脏纤维化病理变化显著改善。结论软肝饮对CCl4诱导的大鼠肝脏纤维化模型肝脏Smad3表达有明显的下调作用,可能是其抗肝纤维化主要作用机制之一。     

实验性肝纤维化大鼠细胞因子及超微结构的变化和意义

目的:研究四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化大鼠肝脏转化生长因子β1(TGFβ1)和结缔组织生长因子(CTGF)的表达及定位,血清IL-6、IL-10和IL-18的变化,以及肝组织超微结构的改变.方法:将28只大鼠随机分为正常对照组与模型组,模型组大鼠予以40?l4皮下注射8周后处死.免疫组化技术检测TGFβ1和CTGF在肝脏的表达及细胞内的定位;ELISA检测血清IL-6、IL-10和IL-18;电镜检测肝组织超微变化.结果:与正常组大鼠比较,模型组大鼠肝内TGFβ1和CTGF表达增加,免疫阳性反应信号的主要位于纤维间隔中的细胞浆;模型组大鼠血清IL-6和IL-18升高,而IL-10较正常组降低(P＜0.05 or P＜0.01);超微结构符合肝纤维化改变.结论:TGFβ1、CTGF、IL-6、IL-10和IL-18与肝纤维化的形成发展有关,可作为抗肝纤维化的新途径.     

鸡尾酒疗法对肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ表达的影响

目的:研究鸡尾酒疗法对肝纤维化大鼠肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)及Ⅲ型胶原(COLⅢ)表达的影响.方法:采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型, 实验分为: 牛磺酸组、表没食子儿茶素没食子酸酯组、三羟基异黄酮组、鸡尾酒组、秋水仙碱组、模型组和正常组. 在实验的第10周末取肝组织, HE染色法观察肝组织改变, 免疫组织化学法检测肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ的表达.结果:病理组织学观察发现各组能明显改善肝纤维化大鼠肝组织结构和肝纤维化, 免疫组织化学检测表明鸡尾酒组、三羟基异黄酮组、表没食子儿茶素没食子酸酯组、牛磺酸组的肝组织中TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ表达量与模型组比较均显著降低(TGF-β1: 2.57±0.23, 4.21±0.35, 4.93±0.21, 4.81±0.16 vs12.11±0.62, P <0.05; COLⅠ: 2.69±0.10, 4.88±0.42, 5.04±0.31, 4.79±0.29 vs 13.06±0.24,P <0.05; COLⅢ: 3.17±0.42, 5.73±0.23, 5.51±0.25, 5.24±0.18 vs 15.15±0.43, P <0.05), 并且鸡尾酒组与单一用药各组相比有统计学意义(P <0.05).结论:鸡尾酒疗法能对肝纤维化大鼠的肝脏起保护作用, 与单一用药相比更能有效降低TGF-β1、COLⅠ及COLⅢ的表达, 可能具有更高的抗肝纤维化能力.     

肝纤维化与TGF-β和以其为靶位点的治疗策略

肝纤维化是细胞外基质(ECM)在肝脏中过量堆积的结果,是几乎各种慢性肝病的共同病理基础.转化生长因子β(TGF-β)是一类能够调节细胞生长和分化的多肽,在肝纤维化的发生、发展过程中起着重要作用,是最重要的促肝纤维化细胞因子之一.在细胞及分子水平上,肝纤维化主要以肝星状细胞(HSC)的活化和TGF-β的异常活性为特征.TGF-β-Smads信号转导通路与肝纤维化的发病机制具有密切关系,为肝纤维化的防治与治疗提供了新的有效途径.我们综述了肝纤维化与TGF-β-Smads信号转导通路的关系和以TGF-β为靶位点进行肝纤维化的治疗策略.     

水蛭桃仁汤对肝纤维化大鼠HSC活化及TGF-β1表达的影响

观察水蛭桃仁汤对肝纤维化大鼠肝星状细胞(HSC)活化及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,并探讨其对肝纤维化是否具有治疗作用及其作用机制.方法:以二甲基亚硝胺(DMN)制备大鼠肝纤维化模型,同时给予水蛭桃仁汤灌胃治疗.免疫组化法检测肝组织的α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和TGF-β1,并做组织病理学检测.结果:经图像分析,药物防治组α-SMA和TGF-β1较模型组显著减少(均为P＜0.01);结论:水蛭桃仁汤对DMN诱导的实验性大鼠肝纤维化具有良好的防治作用.     

罗格列酮与秋水仙碱对肝纤维化大鼠防护作用的比较

目的:探讨罗格列酮(RGZ)对实验性大鼠肝纤维化的防护作用.方法:采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导的大鼠肝纤维化模型,70只SPF级SD大鼠随机分为7组:正常对照组、模型组、罗格列酮组、罗格列酮预防组(小、中、大剂量组各10只)秋水仙碱组.应用HE染色、Masson染色、网状纤维染色观察大鼠肝纤维化的程度;生化法检测肝功能ALT、AST、Alb等;免疫组化染色法检测肝组织过氧化物酶体增生激活受体(PPAR-γ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达.结果:罗格列酮预防组大鼠与模型组相比,肝组织结构明显改善,纤维化增生程度减低,肝功能改善,肝组织内丙二醛(MDA)、TGF-β1的表达均降低;RGZ综合效果优于秋水仙碱.结论:RGZ可通过激活PPAR-γ途径,减轻氧化应激后继的肝纤维化病变,降低TGF-β1的表达,对肝纤维化有良好的防护作用.     

肝纤维化大鼠肝组织Smads基因表达状况及意义

目的:研究CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织Smad基因表达的变化及其意义.方法:80只健康雄性SD大鼠分为2组:正常组(C组,n=40)和模型组(M组,n=40).以CCl4 sc 法诱导肝纤维化,HE和VG胶原染色观察肝脏胶原沉积情况,原位杂交法及免疫组化法检测肝组织Smads分子表达水平变化.结果:与C组比较,M组大鼠肝脏组织学积分显著增加(3.29±0.68 vs0,P<0.05),平均胶原面积显著增加(290.86±89.37 μm2 vs 56.12±21.45 μm2,P<0.01),肝组织Smad4蛋白表达率较C组明显增加(4.27%±0.43% vs 2.86%±0.86%,P<0.05),而Smad7蛋白表达虽然增加,但水平低下;Smad 3 mRNA表达A值明显增加(0.167±0.092 vs 0.010±0.002,P<0.05),Smad4 mRNA表达A值也明显增加(0.24 1±0.098 vs 0.021±0.004,P<0.05),Smad6、Smad7 mRNA虽然增加,但表达水平仍然低下.结论:实验性大鼠肝纤维化存在肝脏Smads分子表达水平的比例失调,TGF-Smad信号通路可能参与了肝纤维化的形成与发展.     

虫草多糖脂质体对肝纤维化大鼠转化生长因子β-基因表达的影响

目的：探讨冬虫夏草多糖脂质体(CPL)对肝纤维化大鼠肝组织转化生长因子(TGF)β-的影响。方法：动物分为3组,肝纤维化模型组、CPL治疗组和正常对照组,采用Northern杂交技术检测各组大鼠肝组织TGF-β基因的表达。结果：CPL治疗组大鼠肝脏中TGF-βmRNA表达量明显下降,与模型组大鼠比较差异有显著性(P&;lt;0.01)。结论：CPL可明显下调实验性肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1mRNA的表达。