CADM1与DAL-1/4.1B在结直肠癌中的表达

目的探讨细胞黏附分子(CADM1)和肿瘤差异表达基因(DAL-1)/4.1B在结直肠癌(CRC)中的作用机制。方法通过采用免疫组化法对35例CRC组织,15例结直肠癌腺瘤组织和35例正常结直肠组织的CADM1和DAL-1/4.1B的表达进行分析,并采用Western印迹法进行检测,结果使用HMIAS-2000型全自动彩色图像分析系统做半定量测定。结果 CADM1与DAL-1在CRC组织、结直肠癌腺瘤组织和正常结直肠组织中的阳性表达具有差异(均P<0.05)。采用图像分析软件分析的Western印迹条带中CRC组织中的CADM1与DAL-1/4.1B吸光度与β-actin比值明显低于结直肠腺瘤组和正常结直肠组(P<0.05)。半定量分析结果显示,CADM1与DAL-1/4.1B的表达位置和染色强度相近,两者呈正相关(r=0.795,P<0.05)。CADM1和DAL-1/4.1B蛋白仅与Dukes分期C+D中的表达阳性率相关(P<0.05)。结论 CRC发病中CADM1和DAL-1/4.1B存在失活或表达下调,通过相互作用参与CRC的发生发展。     

细胞骨架4.1蛋白基因家族在结直肠癌组织中的表达

目的:探讨4.1蛋白基因家族(蛋白4.1R,N,G和B)在结直肠癌组织表达的意义.方法:采用Envision~ 免疫组织化学的方法,检测94例结直肠癌组织中蛋白4.1R,N,G和B的表达,分析他们与结直肠癌病理特征之间的相关性.结果:结直肠癌组织中,除蛋白4.1G外,蛋白4.1R,N,B在癌组织与癌旁组织之间的表达差异有统计学意义(H_c=44.70,H_c=31.4l,H_c =13.62;均P<0.01);蛋白4.1N和B与患者的细胞分化呈正相关(r_s=0.27,r_s=0.28,均P<0.01);随浸润程度的加深,淋巴结的癌转移,4.1R的表达明显下调(r_s=0.03,P<0.01;r_s=0.24,P<0.05);随浸润程度的加深,4.1G的表达上调(r_s=0.24,P<0.05);4.1蛋白的表达与患者的年龄之间没有相关性,在不同性别之间,4.1蛋白表达的差异没有统计学意义.结论:蛋白4.1家族与结直肠的发生与发展间有着密切的关系,是一类新的结直肠癌标记物,其表达程度对结直肠癌的诊断和预后评价有一定的意义.     

TSLC1和DAL-1/4.1B在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的:探讨TSLCl和DAL-1/4.1B两种蛋白在胰腺癌中的表达和临床病理意义.方法:采用免疫组织化学S-P法检测42例胰腺癌组织、11例胰腺炎组织和9例正常胰腺组织中TSLCl和DAL-1/4.1B两种蛋白的表达.结果:TSLC1、DAL-1/4.1B蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率均明显低于在正常胰腺组织和胰腺炎组织中的表达(30.95% VS 77.78%,81.82%; 28.57% VS 66.67%,81.82%,P＜0.05或0.01).TSLCl和DAL-1/4.1B蛋白的异常表达均与胰腺癌的分化程度、淋巴结转移和TNM分期相关(P＜0.05),而与患者的性别、年龄、部位和病理分型无关.在42例胰腺癌中TSLC1与DAL-1/4.1B蛋白表达呈显著正相关(rs=0.489,P＜0.01).结论:胰腺癌中存在TSLC1和DAL-1/4.1B基因的失活和蛋白表达下调,二者可能通过TSLC1-DAL-1/4.1B级联反应共同参与胰腺癌的发生、发展和转移.     

Stathmin及Cathepsin B在结直肠癌中的表达

目的研究Stathmin和Cathepsin B在人结直肠癌组织及其转移灶中的差异表达,探讨Stathmin和Cathepsin B在结直肠癌发生发展过程中的作用及其临床病理意义。 方法用免疫组织化学染色技术检测158例高分化,中分化及低分化结直肠癌患者手术切除标本及64例相应转移灶组织中Stathmin蛋白和Cathepsin B蛋白的表达情况。 结果Stathmin蛋白及Cathepsin B蛋白在结直肠癌组织及其转移灶中均高表达;高分化结直肠癌样本中Stathmin蛋白及Cathepsin B蛋白在细胞膜或细胞浆阳性表达,而在低分化结直肠癌细胞核,细胞膜及细胞浆中可见二者的阳性表达。 结论Stathmin及Cathepsin B可能是判断结直肠癌患者临床病理分级的有用指标。     

Bves/popdc1、popdc3在结直肠癌中的表达和意义

背景:结直肠癌为常见消化道恶性肿瘤,较易发生肝、肺等远处转移,预测其远处转移风险对于指导综合治疗和判断预后具有重要意义。细胞黏附分子与肿瘤侵袭、转移关系密切。目的:检测结直肠癌组织中的细胞黏附分子Bves/popdc1、popdc3表达,探讨两者在结直肠癌侵袭、转移中的可能作用。方法:选择15例正常结直肠组织和70例结直肠癌手术标本,以免疫组化方法检测Bves/popdc1、popdc3表达,分析结直肠癌组织中的Bves/popdc1、popdc3表达与肿瘤临床病理特征的关系以及两种蛋白表达之间的相关性。结果:Bves/popdc1、popdc3在结直肠癌组织中以低表达为主,高表达率显著低于正常结直肠组织(Bves/popdc1:25.7%对86.7%,P=0.000;popdc3:20.0%对73.3%,P=0.000)。结直肠癌组织中的Bves/popdc1、popdc3低表达与肿瘤分化程度呈负相关(P<0.05),与肿瘤浸润、淋巴结转移、远处转移和TNM分期呈正相关(P<0.05)。Bves/popdc1与popdc3在结直肠癌组织中的表达呈显著正相关(P<0.01)。结论:Bves/popdc1、popdc3在结直肠癌组织中表达下调,并与肿瘤临床分期和转移相关,提示两者在结直肠癌的侵袭、转移中起一定作用。     

UQCRC1在结直肠癌及转移淋巴结中的表达

目的:分析结直肠癌(colorectal cancer,CRC)与正常黏膜间的蛋白质表达差异,筛选新的肿瘤标志物;并对兴趣蛋白进行验证,分析其与CRC的发生、发展及淋巴结转移的关系.方法:对6对新鲜的CRC与正常黏膜组织进行以二维差异凝胶电泳(2D differential gel electrophoresis,2D DIGE)及基质辅助激光解吸飞行时间质谱(matrix-assisted laserde sorption/ionization-time of flight masss pectrometry,MALDI-TOF-MS)分析.以免疫组织化学法验证兴趣蛋白泛醌细胞色素c还原酶核心蛋白1(ubiquinol cytochrome-creductase core protein 1,UQCRC1)在78例CRC与正常黏膜组织,和24个转移淋巴结中的表达.对染色的强弱评分为阴性:0,弱阳性:1,中阳性:2,强阳性:3.结果:2DDIGE分析显示在CRC中一个蛋白点丰度平均显著增高2.14倍(P<0.001).MALDI-TOF-MS分析证实该蛋白为UQCRC1.免疫组织化学法分析显示UQCRC1在CRC与正常黏膜组织中表达分别为2.28±0.95和1.81±0.88,有显著差异(P<0.001).UQCRC1表达的强弱与分化、分期及部位均无关(P>0.05).UQCRC1在转移淋巴结与配对的原发灶中表达分别为2.79±0.51和2.33±0.96,有显著差异(P<0.05).结论:UQCRC1在结直肠癌变和淋巴结转移过程中发挥一定的作用.     

hPTTG1在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的:检测人垂体瘤转化基因1(hPTTG1)在结直肠癌中的表达,分析其与临床病理参数之间的关系,为阐明hPTTG1在结直肠癌诊断和转移复发中的临床价值提供实验依据.方法:收集我院2004-01/2006-09结直肠癌及对应癌旁组织的手术标本60例.采用免疫组织化学和Western blotting检测结直肠癌组织与对应癌旁组织hPTTG1蛋白的表达,并探讨其与临床病理指标的关系.结果:60例结直肠癌组织有56例表达hPTTG1蛋白,阳性率为93.3%,而癌旁组织hPTTG1仅8例表达,且均为弱阳性,阳性率为13.3%(χ2=77.13,P<0.001).hPTTG1表达与血清CEA水平具有显著相关,血清CEA大于5 mg/L较小于5mg/L显著增高(χ2=30.886,P<0.001).hPTTG1在Dukes C、D期显著高于Dukes A、B期(χ2=9.87,P<0.001).伴有淋巴转移、肝转移或其他器官转移者较无转移者显著增高(χ2=9.87,P<0.001).hPTTG1与患者的性别、年龄、肿瘤直径大小和病理分型无关.结论:hPTTG1在结直肠癌中高表达,与结肠癌的疾病进展密切相关,检测hPTTG1有助于患者预后的判断.     

APPL1表达与结直肠癌发生发展的关系及意义

目的:研究APPL1蛋白在人结直肠癌组织中的表达情况与临床病理参数的关系.方法:收集35例新鲜结直肠癌及27例正常直肠黏膜组织,采用免疫组织化学SP法和RT-PCR法检测APPL1在结直肠癌组织及正常直肠黏膜组织中的表达.采用半定量积分分级对该蛋白的表达强弱进行评分.结果:免疫组织化学和RT-PCR结果显示,APPL1蛋白在结直肠癌组织以及正常直肠黏膜组织中普遍表达,但该蛋白和相应的mRNA在癌组织中的表达高于对照组(P<0.05).在35例结直肠癌组织中,APPL1表达与分化程度、淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型无明显相关(P>0.05).结论:APPL1蛋白在结直肠癌组织中的表达上调,且该蛋白表达与患者肿瘤的分化程度、淋巴结转移情况以及TNM分期有关.APPL1有可能成为结直肠癌治疗的一个新靶点.     

Yes相关蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究结直肠癌变组织中Yes相关蛋白及mRNA的表达,探讨其临床意义.方法:收集2010-03/2011-03福建省南安市医院普外科及福建医科大学附属第一医院普外科80例结直肠癌患者术中切除的癌组织,同时收集20例癌旁组织和正常结直肠组织,应用免疫组织化学S-P法和原位杂交方法检测结直肠癌组织、癌旁组织和正常组织中Yes相关蛋白及mRNA的表达.原位杂交法和免疫组织化学S-P法均严格按照试剂盒说明操作.结果:结直肠癌组织中Yes相关蛋白及mRNA的阳性表达率分别为66.25%和68.75%,癌旁组织中Yes相关蛋白及mRNA的阳性表达率分别为20.0%和25.0%和正常结直肠黏膜组织Yes相关蛋白及mRNA的阳性表达率分别为10.0%和15.0%.结直肠癌组织中Yes相关蛋白及mRNA的阳性表达率明显高于癌旁组织和正常结直肠黏膜组织(P<0.01),癌旁组织与正常结直肠黏膜组织中Yes相关蛋白及mRNA阳性表达率比较差别无统计学意义.Yes相关蛋白及mRNA阳性表达率与年龄、性别、肿瘤部位之间比较差异无统计学意义,但与肿瘤分化程度和肿瘤分期等之间比较差异有统计学意义(P<0.05或0.01).结论:Yes...     

Slug和E-cadherin在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Slug和E-cadherin在结直肠癌组织中的表达及预后意义。方法应用免疫组化SP法检测65例结直肠癌组织,25例癌旁正常结直肠组织中Slug和E-cadherin的表达,分析两者表达水平与临床病理特征及患者预后的关系。结果 Slug在结直肠癌组织中异常表达率为47.1%,而在正常结直肠组织中表达率为12%,差异有统计学意义(P<0.01);E-cadherin在结直肠癌组织中异常表达率为55.4%,而在正常结直肠组织中表达率为8%,差异有统计学意义(P<0.01);两者阳性表达率与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移、Dukes分期相关性均有统计学意义(P<0.05)。Slug、E-cadherin、淋巴结转移、Dukes分期可成为影响结直肠癌预后的独立因素(P<0.05)。结论 Slug和E-cadherin的表达异常可能与结直肠癌的发生发展、转移相关并可作为评价结直肠癌生物学行为和预后的重要指标。     

MID1在大肠癌组织中的表达及其对预后的意义

目的:探讨MID1在人大肠癌中表达的临床意义及其对术后生存时间的影响.方法:采用SP免疫组织化学法检测109例大肠癌手术切除组织标本中MID1的表达,分析MID1的表达与大肠癌的关系,用KaplanMeier和Cox回归分析法进行生存分析.结果:MID1的表达对大肠癌的术后的生存时间有显著影响(P<0.05);与大肠癌的淋巴结转移情况呈显著性负相关(r=-0.204,P=0.034<0.05);与大肠癌的浸润深度呈显著性负相关(r=-0.223,P=0.020<0.05);与大肠癌的分化程度呈显著性正相关(r=0.236,P=0.014<0.05);MID1的表达与大肠癌的年龄、性别及其病理类型没有关系.Kaplan-Meier生存曲线结果显示,随访期内MID1高中低各组7年累积生存率分别为69.2%、45.0%、30.0%;高中低各表达组患者术后平均生存时间分别为:91.101mo±6.127mo,69.389mo±7.512mo,50.358mo±8.091mo,Log-rank检验证明,整体水平及各组间水平均有统计学意义(P<0.05);经多因素Cox回归分析发现,MID1低表达、淋巴结的转移可显著增加患者的死亡风险(P<0.05).结论:MID1可以作为大肠癌分化、侵袭、淋巴结转移以及预后的一项指标.     

肿瘤相关基因RASAL1在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨Ras三磷酸鸟苷酶激活样蛋白(RASAL1)及基因在人结肠癌中的表达及其与临床病理参数间的关系.方法:收集2009-04/2010-05经手术切除的结肠腺癌标本50例作为研究组,相应正常组织为对照组,做成蜡块标本;其中20例另取其癌组织、癌旁组织及正常组织的新鲜标本;用免疫组织化学染色观察50例蜡块标本RASAL1蛋白的表达;用RT-PCR检测20例新鲜标本RASAL1 mRNA的表达,并分析其与临床病理参数的关系.结果:RASAL1蛋白主要在细胞质中表达;RASAL1蛋白在结肠癌中的阳性表达率明显低于癌旁组织及正常组织[46%(23/50)vs85%(17/20),96%(48/50),均P<0.05];RASAL1 mRNA在结肠癌中的阳性表达率较癌旁组织及正常组织明显减低[50%(10/20)vs90%(18/20),95%(19/20),均P<0.05],RASAL1蛋白与mRNA的表达呈明显正相关(r=0.686,P<0.01),与肿瘤的分化程度(P<0.05)、侵袭深度(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.05)、TNM分期(P<0.05)呈负相关.结论:RASAL1在结肠腺癌组织中低表...     

TSLC1和MPP3在胰腺癌中的表达及其意义

目的:探讨TSLC1和MPP3两种蛋白在胰腺癌中的表达和临床病理意义.方法:采用免疫组织化学S-P法检测37例胰腺癌组织、12例胰腺炎组织和10例正常胰腺组织中TSLC1和MPP3两种蛋白的表达.结果:TSLC1、MPP3蛋白在胰腺癌组织中的阳性表达率均明显低于在正常胰腺组织和胰腺炎组织中的表达(21.62%vs70.00%,75.00%;27.03%vs80.00%,66.67%,P<0.05或0.01).TSLC1和MPP3蛋白的异常表达均与胰腺癌的分化程度、淋巴结转移和TNM分期相关(均P<0.05),而与患者的性别、年龄、部位和病理分型无关.在37例胰腺癌中TSLC1与MPP3蛋白表达呈显著正相关(rs=0.715,P<0.01).结论:胰腺癌中存在TSLC1和MPP3基因的失活和蛋白表达下调,两者可能通过TSLC1-MPP3级联反应共同参与胰腺癌的发生、发展和转移.     

组蛋白去乙酰化酶1、2在大肠癌及腺瘤组织中的表达及其与临床病理的关系

目的:研究组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)和组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)在大肠正常组织、腺瘤、腺癌组织中的表达,探讨其可能的临床病理及预后的关系.方法:以免疫组织化学SP法检测HDAC1和HDAC2在正常大肠组织、腺瘤、腺癌组织中的表达.通过计算染色指数(SI),评估两者的表达水平与年龄、肿瘤大小、分期、分化等临床病理特征之间的关系.采用Kaplan-Meier法进行生存分析.结果:HDAC1和HDAC2在正常组织表达明显低于腺瘤及癌组织(14.3±9.3vs22.4±12.4,22.8±8.5;5.6±3.3,12.3±4.2vs16.2±9.7,均P<0.05).HDAC2在三者中的表达呈递增趋势.直径≥5cm的癌组织HDAC1的表达高于<5cm的癌组织(25.1±8.2vs20.4±8.5),差异均有统计学意义.结论:HDAC1和HDAC2是大肠癌发生的早期事件,两者共同促进大肠癌的发生发展,可能成为大肠癌治疗的新靶点.     

B7-H1 expression is associated with expansion of regulatory T cells in colorectal carcinoma

AIM: To investigate the expression of B7-H1 in human colorectal carcinoma (CRC) to define its regulating effects on T cells in tumor microenvironment.METHODS: One hundred and two paraffin blocks and 33 fresh samples of CRC tissues were subject to this study. Immunohistochemistry was performed for B7-H1 and CD3 staining in CRC tissues. Ficoll-Hypaque density gradient centrifugation was used to isolate peripheral blood mononuclear cells of fresh CRC tissues; flow cytometry and immunofluorescence staining were used for detection of regulatory T cells. Data was analyzed with statistical software.RESULTS: Costimulatory molecule B7-H1 was found strongly expressed in CRC tissues, localized in tumor cell membrane and cytoplasm, while weak or none expression of B7-H1 was detected in pared normal colorectal tissues. Meanwhile, CD3 positive T cells were found congregated in CRC tumor nest and stroma. Statistic analysis showed that B7-H1 expression level was negatively correlated to the total T cell density in tumor nest (P < 0.0001) and tumor stroma (P = 0.0200) of 102 cases of CRC tissues. Among the total T cells, a variable amount of regulatory T cells with a clear Foxp3⁺ (forkhead box P3) staining could be detected in CRC tissues and patients’ blood. Interestingly, in the 33 samples (15 cases of B7-H1^high CRC tissues and 18 cases of B7-H1^low CRC tissues) of freshly isolated mononuclear cells from CRC tissues, the percentages of CD4⁺Foxp3⁺ and CD8⁺Foxp3⁺ regulatory T cells were found remarkably higher in B7-H1^high CRC tissues than in B7-H1^low CRC tissues (P = 0.0024, P = 0.0182), indicating that B7-H1 expression was involved in proliferation of regulatory T cell. No significant difference was found in CRC peripheral blood (P = 0.0863, P = 0.0678). PD-1 is the specific ligand for B7-H1 pathway transferring inhibitory signal to T cell, which is expressed by activated T cell. Our further analysis of PD-1 expression on T cells in CRC tissues showed that conventional T cells (CD4⁺Foxp3^-/CD8⁺Foxp3^-), which was thought to contribute to the anti-tumor immune response, highly expressed PD-1; while regulatory T cells (CD4⁺Foxp3⁺/CD8⁺Foxp3^-) almost failed to express PD-1. The average percentage of PD-1 expression on regulatory T cells was significantly higher than the percentage of PD-1 on conventional T cells (CD4⁺Foxp3^- T cell, P < 0.0001; CD8⁺Foxp3^- T cell, P < 0.0001). The diverse expression of PD-1 might lead to different fate of T cell subsets in B7-H1 over-expression CRC tumor microenvironment.CONCLUSION: B7-H1 expression in tumor cells can inhibit the conventional T cell proliferation in tumor microenvironment through the PD-1 expression on conventional T cells.     

Increased frequency and clinical significance of myeloid-derived suppressor cells in human colorectal carcinoma

AIM: To investigate the frequency and clinical significance of the myeloid-derived suppressor cells (MDSC) in human colorectal carcinoma (CRC).METHODS: Samples of peripheral blood and tumor tissue from 49 CRC patients were analyzed. Mononuclear cells were isolated by Ficoll-Hypaque density gradient centrifugation and were subjected to a flow cytometry-based immunophenotypic analysis.RESULTS: A considerable increase in the percentage of CD33⁺HLA-DR^- MDSCs was observed in the peripheral blood (1.89% ± 0.75%) and tumor tissues (2.99% ± 1.29%) of CRC patients as compared with that in the peripheral blood of healthy controls (0.54% ± 0.35%). This expanded CD33⁺HLA-DR^- subset exhibited immature myeloid cell markers, but not lineage markers, and showed up-regulation of CD18/CD11b expression as compared with the MDSCs from healthy donors. Further studies showed that the MDSC proportion in CRC peripheral blood was correlated with nodal metastasis(P = 0.023), whereas that in tumor tissues was correlated with nodal/distant metastasis (P = 0.016/P = 0.047) and tumor stage (P = 0.028), suggesting the involvement of MDSCs in CRC tumor development.CONCLUSION: Characterization of MDSCs in CRC suggests the clinical significance of circulating and tumor-infiltrating MDSCs and may provide new insights into the CRC immunotherapy targeting MDSCs.