热休克蛋白对缺氧缺血性脑损伤神经元凋亡的保护作用及机制

热休克蛋白(HSP)是机体在受到应激刺激后诱导产生的一组蛋白质，对细胞损伤具有保护作用。近年来较多文献报道HSP对缺氧缺血性脑损伤神经元的凋亡具有保护作用。本文就HSP的特点、脑缺氧缺血后神经元中HSP的表达及其对神经元凋亡的保护作用和机制进行综述。     

高压氧对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

为研究高压氧(HBO)对新生儿缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用,应用新生Wistar大鼠制备HIBD模型,将HBO及HBO+胞二磷胆碱(CDPC)应用于这些模型中,观察它们对HIBD模型鼠的体重增长、病死率、脑病变的影响,并用原位缺口末端标记法(TUMEL)检测HBO对HI后脑细胞凋亡的影响.结果表明CDPC及HBO+CDPC治疗后减轻了病死率及脑病变率;并使HIBD模型鼠体重增长快于未治疗组,但两治疗组间差异不显著;HBO治疗组未明显减轻死亡率及脑病变率,也未明显减轻脑细胞凋亡;CDPC及HBO+CDPC却明显减轻了脑细胞的凋亡(P＜0.001),但两组间差异不显著.因此提示,HBO对HIBD的保护作用尚待定论.     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞凋亡时程

为确定新生大鼠缺氧缺血性脑损伤神经细胞凋亡时程、采用HE染色及TUNEL研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经细胞凋亡情况.结果显示,新生大鼠缺氧缺血后3周时,左脑仍有少量凋亡细胞存在,与对照组比较有显著性差异,P＜0.05;于4周时左脑凋亡细胞数与对照组比较无显著性差异,P＞0.05.结果提示新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经细胞凋亡持续至损伤后4周.     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤时细胞凋亡抑制蛋白1的变化

目的探讨在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)细胞凋亡抑制蛋白1(cIAPl)的变化。方法建立新生大鼠HIBD动物模型，采用RT-PCR技术检测缺氧缺血(HI)后不同时间点缺血侧脑组织中cIAP1基因表达的变化。结果正常组中有cIAPl基因表达，HI组cIAPl基因表达明显下调，且随HI后时间的延长，cIAPl基因表达在HI后6h开始下调，24h下调最明显，48-72h有所回升。结论脑缺氧缺血引起的神经细胞凋亡可能与clAPl基因表达下调有关。     

新生鼠缺氧缺血性脑损伤热休克蛋白70的表达

目的利用新生鼠缺氧缺血性脑损伤动物模型，探讨缺血缺氧后不同时间热休克蛋白(HSP70)的表达。方法采用阻断左侧颈总动脉制作新生鼠缺氧缺血性脑损伤动物模型，用原位杂交的技术观察正常对照组及缺氧缺血1h、24h、48h、96h组HSP70表达变化以及阳性染色细胞的分布部位及数量。结果核酸原位杂交DAB染色、图象扫描分析显示，HSP70表达在缺氧缺血后1h后即有升高，24h时阳性表达最高，48h、96h表达逐渐降低。结论脑缺氧缺血后热休克蛋白(HSP)表达增加，与脑缺氧缺血后神经细胞保护作用有关。     

高压氧对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

为研究高压氧（HBO）对新生儿缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的保护作用,应用新生Wistar大鼠制备HIBD模型,将HBO及HBO＋胞二磷胆碱（CDPC）应用于这些模型中,观察它们对HIBD模型鼠的体重增长、病死率、脑病变的影响,并用原位缺口末端标记法（TUNEL）检测HBO对HI后脑细胞凋亡的影响。结果表明：CDPC及HBO＋CDPC治疗后减轻了病死率及脑病变率;并使HIBD模型鼠体重增长快于未治疗组,但两治疗组间差异不显著;HBO治疗组未明显减轻死亡率及脑病变率,也未明显减轻脑细胞凋亡;CDPC及HBO＋CDPC却明显减轻了脑细胞的凋亡（P＜0．001）,但两组间差异不显著。因此提示,HBO对HIBD的保护作用尚待定论。     

神经生长因子对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：研究神经生长因子(NGF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用。方法：将新生7日龄SD大鼠40只随机分为NGF治疗组(n=16),对照组(n=16)和假手术组(n=8),缺氧缺血(HI)后即刻腹腔注射100 U NGF或等量生理盐水(假手术组不注射),然后观察NGF对HIBD模型鼠的体重增长、脑组织病理及超微结构改变的影响,并用TUNEL法原位标记DNA片段,观察NGF对HIBD后脑细胞凋亡的影响。结果：NGF治疗组体重增长(4.16±0.24) g明显高于对照组(2.86±0.17) g,(P<0.01);TUNEL检测结果,HIBD后24 h治疗组左侧海马和皮质凋亡细胞数(分别为199.75±19.61,182.75±19.12)明显低于对照组(分别为285.50±32.67,271.00±28.36)(P<0.01);HIBD后48 h治疗组左侧海马、皮质凋亡细胞数(分别为77.75±15.76,82.50±19.15)亦明显低于对照组(分别为106.50±16.96,122.75±16.56)(P<0.01)。结论：外源性NGF对HIBD后脑细胞凋亡可能具有一定的保护作用。     

亚低温对新生鼠缺氧缺血性脑损伤保护作用的实验研究

为研究亚低温对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用,应用7日龄大鼠制成缺氧缺血性脑损伤模型.动物随机分组假手术组(C组),缺氧缺血正常温度组(HI组),缺氧缺血后30分钟亚低温治疗组(亚低温组).脑皮质细胞匀浆用于测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,应用原位缺口末端标记(TUNEL)及免疫组化bax基因表达,观察神经细胞凋亡情况.结果显示,HI组MDA含量明显高于C组(P＜0.01),亚低温组MDA含量明显低于HI组(P＜0.01);亚低温组凋亡细胞明显少于HI组(P＜0.01).因此,亚低温可以通过减少自由基的产生,抑制细胞凋亡的机制发挥对缺氧缺血性脑损伤的保护作用.     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤的保护作用及机制研究进展

高压氧是指机体在高气压环境中所呼吸的与环境等压的纯氧,由于其可改善机体对氧的摄取和利用,使血氧含量增加,血氧分压增高,氧弥散到组织的能力增强,从而改善组织的微循环和有氧代谢,因此临床上将高压氧用于治疗缺氧缺血性脑损伤。大量的动物实验和临床研究资料均表明高压氧治疗对缺氧缺血性脑损伤具有保护作用。本文就高压氧治疗对缺氧缺血性脑损伤的保护作用及治疗机制的研究进展作一综述。     

缺氧缺血性脑损伤大鼠脑内bcl-2基因表达与细胞凋亡的关系

目的 观察bcl-2基因在缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后细胞凋亡中的表达，探讨新生大鼠HmD后神经细胞凋亡的分子机制。方法 54只7日龄新生SD大鼠随机分为1个对照组和8个实验组。给动物吸入含有92％氮气和8％氧气混合气体建立新生大鼠HIBD动物模型，分另q在脑损伤后不同时间点(0．5、1、3、6、12、24、48、72h等)断头处死动物，取海马组织，用免疫组织化学方法检测海马脑神经细胞凋亡及bcl-2基因表达情况。结果 HIBD1h内未见凋亡细胞出现，3h开始出现，并在48h达高峰，之后逐渐下降。bcl-2蛋白阳性细胞在HIBD后立即出现，6h达到高峰，之后渐下降。结论 HIBD后bd-2基因表达在脑神经细胞凋亡过程中起一定作用。在一定时间范围内,bcl-2基因表达与脑神经细胞凋亡呈负相美。     

高压氧对新生猪缺氧缺血性脑损伤保护作用的研究

使用新生猪复制新生儿缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic ischemic brain damage,HIBD)模型,研究HB0(Hvperbaric Oxygen,HBO)对HIBD的治疗作用.取30只7天仔猪使用改良Lvine法复制HIBD模型后,随机分为HB0组(16只)和对照组(14只),HB0组采用纯氧加压至170kPa,每天1次,对照组无任何治疗.分别于缺氧缺血(HI)后1天、7天处死每组各1半的仔猪,观察两组(1)仔猪的病死率及神经系统症状;(2)右颈总动脉血注速度VC、AV);(3)动脉血气分析;(4)脑重量.结果显示,HB0组病死率及神经症状发生率显著低于对照组(P<O.05).第1次HB0治疗后,HB0组rCAV明显高于对照组(P<O.05),低氧血症和代谢性酸中毒纠正速度明显快于对照组,(P<0 05).HI后1天和7天两组脑重量均无显著差异(P<0.05).因此HB0治疗HIBD具有一定的效果,作为一种HIBD的治疗方法,以早期应用效果为佳.     

低温对小鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的：低温对脑损伤的保护作用与抑制细胞凋亡有关并取决于低温开始的时间与脑的发育成熟程度,该研究探讨不同年龄阶段的小鼠在缺氧缺血性脑损伤过程中温度的改变对脑损伤的影响。方法：结扎7日龄(P7)和21日龄(P21)C57/BL6小鼠左侧颈总动脉后分别在34℃和36℃恒温箱吸入10%氧气50min制成脑缺氧缺血(HI)模型,在HI后24h及7d取脑进行免疫组化染色和Western蛋白印迹测定。结果：常温组(36℃)在HI后7dHI侧大脑多个部位可见明显损伤,其中P7小鼠大脑皮层可见液化空洞,而P21小鼠大脑皮层成层状梗塞。低温组(34℃)在HI后7d,P7小鼠未见明显的皮层梗塞,海马仍可见明显萎缩,但神经病理学积分在低温组均明显低于常温组(P<0.01);P21小鼠除皮层损伤较常温组明显减轻外(P<0.01),其他部位损伤如海马、纹状体和丘脑与常温组无明显差别。免疫组化染色显示P7小鼠HI后24h大脑皮层活性半胱天冬酶3,凋亡诱导因子(AIF)的阳性细胞数每高倍视野在低温组分别是:7.0±5.6和3.7±6.2,明显低于常温组的51.5±23.2和31.8±22.4(P<0.01),而在海马CA1区活性半胱天冬酶3和AIF的阳性细胞数在低温组与常温组之间无明显差别。Western蛋白印迹显示HI后激活的Akt表达明显减少,低温干预能减少激活的Akt下降(P<0.05)。结论：低温对缺氧缺血性脑损伤的保护作用与脑发育的成熟程度有关,对未成熟脑损伤的保护作用优于对成熟脑损伤的脑保护作用。     

亚低温和硫酸镁对新生鼠缺氧缺血性脑损伤脑细胞凋亡的影响

目的　 探讨亚低温、硫酸镁对新生鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)的脑细胞凋亡和远期行为能力的影响。 方法 　 48只 7日龄Wistar大鼠分为亚低温组 (直肠温度 3 4℃ ,维持 48h)、硫酸镁组 ( 2 5 %MgSO4 45 0mg/kg腹腔注射 ,共 6次 ,)和生理盐水(NS)对照组 ,每组 16只 ,其中 8只 48h进行HE染色病理检查和分别测定脑海马区bc1-2、bax蛋白表达 ,8只 75d进行Y迷宫测定学习能力。 结果 　NS对照组HE染色见CAl区受损细胞明显皱缩 ,染色较深 ,细胞核固缩 ;bc1-2蛋白表达的免疫反应光密度为 ( 0 43 2 1± 0 0 5 98)明显低于亚低温组 ( 0 763 8± 0 0 95 3 )和硫酸镁组 ( 0 7964± 0 0 994,P <0 0 1) ,对照组bax蛋白表达的免疫反应光密度为 ( 0 82 3 6± 0 0 73 4) ,明显高于亚低温组和硫酸镁组 ( 0 4887± 0 0 812和 0 5 0 2 1± 0 0 92 3 ,P <0 0 1) ,而 75d行为能力测定亚低温和硫酸镁组迷宫尝试次数明显少于NS组 (P <0 0 5 )。 结论 　HIBD后给予硫酸镁和亚低温治疗明显抑制了脑海马区神经细胞凋亡的产生 ,从而使远期行为预后得到了很大程度的改善     

高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型的保护作用

目的观察高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用。方法用2.0 ATA的高压氧对新生大鼠HIBD模型进行治疗,1h/(次·d),治疗7 d后处死。观察各组大鼠死亡率、体质量增长率、左/右脑重量比值、脑组织肉眼病理形态学改变。TUMEL检测大脑皮质和海马神经细胞凋亡情况。结果与HIBD组比较,高压氧治疗可使治疗组大鼠的体质量增长率和左/右脑重量比值增加,大鼠死亡率和脑组织病变减轻、神经细胞凋亡减少。结论高压氧治疗对新生大鼠HIBD 模型具有保护作用。     

缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡机制的研究进展

缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡过程一般经过启动-调控和执行-效应三个阶段。启动阶段的主要事件是一些跨膜信号转导通路的活化和凋亡相关基因的激活;线粒体在凋亡调控和执行阶段起着关键作用;凋亡信号诱使线粒体释放凋亡诱导因子如细胞色素c等,后者又激活半胱天冬酶（caspase）瀑布式级联反应,并激活效应阶段的关键效应酶caspase-3,最终使脑细胞发生不可逆的凋亡。Bcl-2s家族是重要的抗凋亡成员,作用于凋亡途径的不同位点,抑制凋亡的进行。对缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡机制的研究,有助于寻找新的抑制或减轻缺氧缺血性脑损伤细胞凋亡的理想途径。     

硫酸镁对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的　研究硫酸镁预处理对新生鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)的保护作用。方法　采用HE和TUNEL染色分别观察正常对照组、缺氧缺血组、硫酸镁预处理组新生鼠大脑神经细胞组织学改变和细胞凋亡情况。结果　硫酸镁预处理组新生鼠大脑组织病变范围和程度较缺氧缺血组减轻 ,且凋亡细胞数量明显减少。结论　硫酸镁预处理可减轻新生鼠HIBD程度 ,具有神经保护作用     

Bid基因在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中的动态变化

目的　探讨Bid基因在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)中的动态变化。方法　通过建立新生大鼠HIBD动物模型 ,采用RT PCR技术检测缺氧缺血后不同时间点缺血侧脑组织中Bid基因表达的变化。结果　正常组中无Bid基因表达 ,缺氧缺血组Bid基因表达明显上调 ,且随着缺氧缺血后时间的延长 ,Bid基因表达呈动态变化缺氧缺血后 6h其表达开始增加 ,2 4h达高峰 ,48～ 72h有所回落。结论　脑缺氧缺血引起的神经细胞凋亡可能与Bid基因表达上调有关。     

bFGF对新生大鼠缺氧缺血后海马CA 1 区神经细胞凋亡的影响

为研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对新生大鼠缺氧缺血(HI)后海马CA 1区神经细胞凋亡的影响,应用新生Wistar大鼠制备缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,用HE染色、电镜及原位缺口末端标记(TUNEL)法检测bFGF对HI后海马CA 1区神经细胞凋亡的影响.结果显示HE染色、电镜及TUNEL法均证实HI后海马存在选择性神经细胞凋亡,尤以CA 1区为重,CA 2和CA 3区病变较轻.TUNEL检测结果,bFGF治疗组阳性细胞数(15.23±14.2)低于未治疗组(25.12±20.25),差异显著(P＜0.05).因此,bFGF对HI后海马CA 1区神经细胞确有保护作用.     

石杉碱甲对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用

目的研究石杉碱甲对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用。方法7日龄SD大鼠随机分为对照组、缺氧缺血组和石杉碱甲组，用氨基酸自动分析仪测定脑损伤后0、60、120min和石杉碱甲组右侧脑组织中谷氨酸含量；光镜下计数缺氧缺血及予石杉碱甲后海马CAl区神经元。结果石杉碱甲组脑组织谷氨酸含量与缺氧缺血120min组比较明显降低；脑损伤21d后，石杉碱甲组海马C～1区神经元明显增多，与缺氧缺血组比较差异显著。结论石杉碱甲能抑制脑组织中谷氨酸释放，并对大鼠海马CAl区神经元有一定的保护作用。