TGF－β单抗对NIH／3T3细胞增殖及前胶原Ⅲ表达的影响

ＴＧＦ－β在肝纤维化的形成中起着重要作用。以ＭＴＴ法及原位杂交检测法研究ＴＧＦ－β单抗对ＮＩＨ／３Ｔ３细胞增殖及Ⅲ型前胶原表达的影响。结果表明，ＴＧＦ－β单抗抑制３Ｔ３细胞增殖，并显著抑制细胞Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达，提示离体培养的成纤维细胞可能存在ＴＧＦ－β自分泌，ＴＧＦ－β单抗能显著阻断其效应，阻止细胞增殖及胶原表达。     

转化生长因子β_1对纤维母细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA表达的影响

目的纤维母细胞是重要的胶原合成细胞，观察转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对纤维母细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶ｍＲＮＡ表达的影响，以了解ＴＧＦ－β１在肝纤维化中的作用机制。方法首先对含有Ⅰ、Ⅲ型前胶原及胶原酶ｃＤＮＡ片段的质粒进行扩增、提纯及酶切，然后用自由引物延伸法进行地戈辛标记，并对探针进行检测；其次对纤维母细胞进行培养，加用ＴＧＦ－β１孵育后收集细胞并提取细胞总ＲＮＡ，最后将ＲＮＡ点样于尼龙膜上，并与上述探针进行斑点杂交。结果杂交结果显示ＴＧＦ－β能明显促进纤维母细胞Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ的表达（Ｐ＜０．０５），也能促进其Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达（Ｐ＝０．０９）；而对其胶原酶ｍＲＮＡ的表达则起抑制作用（Ｐ＜０．０５）。结论ＴＧＦ－β可以从细胞及分子水平发挥其抗纤维化作用。     

转化生长因子β1对纤维母细胞I,Ⅲ型前胶原及胶原酶mRNA表达？…

目的 纤维母细胞是重要的胶原合成细胞，观察转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对纤维母细胞Ｉ，Ⅲ型前胶原及胶原酶ｍＲＮＡ表达的影响，以了解ＴＧＦ－β１在肝纤维化中的作用机制。方法 首先对含有Ｉ，Ⅲ型前胶原及胶原酶ｃＤＮＡ片段的质粒进行了扩增，提纯及酶切，然后用自由引物延伸法进行地戈辛标记，并对探针进行检测；其次对纤维母细胞进行培养，加用ＴＧＦ－β１孵育后收集细胞并提取细胞总ＲＮＡ，最后将ＲＮＡ点样于尼     

TNFα对NIH／3T3细胞,肝贮脂细胞增殖及前胶原表达的影响

ＴＮＦα系单核－巨噬细胞产生的细胞因子，具有明确促进纤维母细胞增殖的作用，但对胶原产生的影响文献报道不尽相同。本文研究并比较了重组ＴＮＦα对ＮＩＨ／３Ｔ３细胞及大鼠肝贮脂细胞增殖，Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达的影响，结果发现ＴＮＦα具有促进上述两种细胞增殖作用，且具剂量依赖性。原位杂交显示，在单个细胞水平，ＴＮＦα可抑制或降低Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ水平的表达。本研究提示肝贮脂细胞与纤维母细胞类似，接受ＴＮＦα调控，ＴＮＦα在肝纤维化始动激活及调控中具重要作用。     

转化生长因子—β1单克隆抗体对大鼠肺纤维化的治疗观察

目的探讨转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）单克隆抗体对博莱霉素所致肺间质纤维化的作用。方法结合体内和体外实验，利用３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交法。结果表明大鼠肺纤维化模型中肺泡巨噬细胞的条件培养基能促进成纤维细胞的增殖和胶原ｍＲＮＡ的表达。ＴＧＦ－β１单克隆抗体对其有抑制作用，同时亦能减轻肺组织的病变程度和胶原ｍＲＮＡ的表达。结论ＴＧＦ－β１单克隆抗体可部分地抑制成纤维细胞增殖和胶原合成。     

转化生长因子β1与病毒性肝炎肝纤维化的关系

目的：研究转化生长因子β＿１（ＴＧＦ－β＿１）与病毒性肝炎肝纤维化发生的关系。方法：对５４例病毒性肝炎肝组织进行ＴＧＦ－β＿１以及α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ－Ｃ）免疫组织化学研究，并检测其中４９例血清Ⅲ型前胶原肽（ＰⅢＰ）、层粘蛋白（ＬＮ）、透明质酸（ＨＡ）、Ⅳ－Ｃ等。结果：随着肝纤维化程度的加重，ＴＧＦ－β＿１在肝组织中的表达逐渐明显。在慢性肝炎重度、肝硬变慢性重型肝炎中的表达强度明显高于慢性肝炎中度、轻度及急性肝炎。同时ＴＧＦ－β＿１在肝组织中的表达与血清ＰⅢＰ、ＬＮ、ＨＡ、Ⅳ－Ｃ以及α－ＳＭＡ和Ⅳ－Ｃ在肝组织中的表达呈明显的正相关。结论：ＴＧＦ－β＿１通过刺激贮脂细胞，大量合成细胞外间质，最终导致肝脏的纤维化。     

转化生长因子β亚型及其受体在人类系膜增生性肾小球肾炎各期病变表达的研究

目的研究人系膜增生性肾小球肾炎（ＭｓＰＧＮ）病变进展过程中转化生长因子β（ＴＧＦβ）各亚型及其受体的变化。方法应用免疫酶染色技术，检测人轻度ＭｓＰＧＮ、中度ＭｓＰＧＮ及重度ＭｓＰＧＮ时，肾组织中ＴＧＦβ各亚型及其受体及细胞外基质成分（Ⅳ型胶原、纤粘连蛋白、层粘连蛋白及Ⅲ型胶原）的表达情况。结果在轻度ＭｓＰＧＮ时，肾小球中无ＴＧＦβ１、β２、β３及其受体（ＴβＲＩ）的表达。中、重度ＭｓＰＧＮ时，上述ＴＧＦβ各亚型及其受体在肾小球中表达并增加。同时肾小球中细胞外基质各成分的含量也显著增加。结论ＴＧＦβ各亚型及其受体均参与了人ＭｓＰＧＮ时肾小球内细胞外基质的过度聚积     

转化生长因子β1及虫草多糖对大鼠肝纤维化形成的影响

目的探讨转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ１，ＴＧＦβ１）及其受体１（ＴＧＦβＲ１）在免疫性大鼠肝纤维化形成中的作用及虫草多糖对其影响。方法以牛血清白蛋白（ｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ，ＢＳＡ）制备免疫性大鼠肝纤维化，攻击注射８周后给予虫草多糖（６０ｍｇ／ｋｇ）保护，继续攻击注射４次，用药至末次注射３周后（共３４天）；用免疫组化法观察ＴＧＦβ１、ＴＧＦβＲ１、肝星状细胞及Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化。结果攻击注射ＢＳＡ８月后，大鼠已形成典型的肝纤维化；纤维隔中ＴＧＦβ１及ＴＧＦβＲ１阳染增强，后者阳染强度与胶原增生程度有相关性；肝星状细胞显著增多，Ⅰ、Ⅲ型胶原及肝羟脯氨酸含量显著增加。虫草多糖组对应指标的变化均显著轻于对照组。结论ＴＧＦβ１与ＴＧＦβＲ１表达的增加是ＢＳＡ免疫性大鼠肝纤维化发生发展的病理基础之一；虫草多糖可显著改善免疫性大鼠肝纤维化的病理变化。     

γ-干扰素基因修饰肝细胞对感染日本血吸虫小鼠TGF-β_1及其受体的影响

目的： 探讨γ－干扰素 （ＩＦＮ－γ） 基因治疗对感染日本血吸虫小鼠转化生长因子－β１ （ＴＧＦ－β１） 及其受体的影响与抗肝纤维化作用的关系。方法： 将小鼠ＩＦＮ－γ基因重组腺病毒载体转染的肝细胞经脾移植到感染日本血吸虫尾蚴１６ ｗｋ 的小鼠, 采用ＥＬＩＳＡ、免疫组化和斑点杂交方法分析小鼠血清ＩＦＮ－γ与ＴＧＦ－β１ 表达的关系, 小鼠肝内ＩＦＮ－γ、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－βＲＩＩ与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的关系。结果： ＩＦＮ－γ基因修饰的肝细胞经脾移植后能有效地表达, 显著地降低ＴＧＦ－β１ 、ＴＧＦ－βＲＩＩ的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。结论： ＩＦＮ－γ基因治疗能有效地发挥抗血吸虫病肝纤维化作用, 可能与降低ＴＧＦ－β１及其受体有关。     

γ-干扰素基因修饰肝细胞对感染日本血吸虫小鼠TGF-β_1及其受体的影响

目的： 探讨γ－干扰素 （ＩＦＮ－γ） 基因治疗对感染日本血吸虫小鼠转化生长因子－β１ （ＴＧＦ－β１） 及其受体的影响与抗肝纤维化作用的关系。方法： 将小鼠ＩＦＮ－γ基因重组腺病毒载体转染的肝细胞经脾移植到感染日本血吸虫尾蚴１６ ｗｋ 的小鼠, 采用ＥＬＩＳＡ、免疫组化和斑点杂交方法分析小鼠血清ＩＦＮ－γ与ＴＧＦ－β１ 表达的关系, 小鼠肝内ＩＦＮ－γ、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－βＲＩＩ与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的关系。结果： ＩＦＮ－γ基因修饰的肝细胞经脾移植后能有效地表达, 显著地降低ＴＧＦ－β１ 、ＴＧＦ－βＲＩＩ的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。结论： ＩＦＮ－γ基因治疗能有效地发挥抗血吸虫病肝纤维化作用, 可能与降低ＴＧＦ－β１及其受体有关。     

TNF—α及其拮抗剂对血吸虫病小鼠的TGF—β1和Ⅲ型胶？…

为探索ＴＮＦ－α及其拮抗剂对血吸虫病小鼠转化生长因子β１和Ⅲ型胶原的影响,用免疫组化计算机分析,ＥＩＡ和ＥＬＩＳＡ检测血清和肝内ＴＧＦ－β１、Ⅲ型前胶原肽和Ⅲ型胶原。结果显示,感染鼠肝内ＴＧＦ－β１和Ⅲ型胶原主要分布在汇管区,肉芽肿内及其周围。     

转化生长因子－β对人胚肺成纤维细胞胶原表达的影响

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一族多功能的细胞因子，具有调节细胞外基质代谢的功能，在肺间质纤维化的形成中具有重要作用。胚原是细胞外基质的主要成分。胶原积聚是肺间质纤维化的一个重要特征。为了进一步探讨肺间质纤维化形成的机制，在体外观察了ＴＧＦ－β对人胚胎肺成纤维细胞胶原蛋白合成及胶原Ｉ、胶原ＩＩｌｍＲＮＡ表达的影响。结果发现：ＴＧＦ－β能刺激胶原蛋白的合成，胶原Ｉ、胶原ＩＩＩｍＲＮＡ的表达。而对成纤维细胞的增殖影响不明显。因此认为ＴＧＦ－β可能与肺间质纤维化时胶原积聚有关。ＴＧＦ－β胶原合成的调节是通过ｍＲＮＡ水平。     

转化生长因子β1 与病毒性肝炎肝纤维化的关系

研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）与病毒性肝炎肝纤维化的关系。对４５例慢性病毒性肝炎 病毒人肝组织进行了ＴＧＦβ１免疫组织化学检测,同时检测其中２１例血清ＴＧＦβ１及血清透明质酸（ＨＡ）,层粘蛋白（ＬＮ）、Ⅳ型胶原、（Ⅳ－Ｃ）Ⅲ型前原肽（ＰⅢＰ）水平。结果：随着肝纤维化程度加重,ＴＧβ１血清水平上升,肝内表达逐渐明显,二者呈正相关;ＴＧＦβ１的血清水平及肝内表达ＨＡ、ＬＮⅣ－Ｃ、ＰⅢＰ四项肝纤维化     

转化生长因子—β对人胚肺成纤维细胞胶原表达的影响

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）是一族多功能的细胞因子，具有调节细胞外基质代谢的功能，在肺间质纤维化的形成中具有重要作用。胶原是细胞外基质的主要成分。胶原积聚是肺间质纤维化的一个重要特征。为了进一步探讨肺间质纤维化形成的机制，在体外观察了ＴＧＦ－β对人胚胎成纤维细胞胶原蛋白合成及胶原Ｉ、胶原ＩＩＩｍＲＮＡ表达的影响。结果发现：ＴＧＦ－β能刺激胶原蛋白的合成，胶原Ｉ、胶原ＩＩＩｍＲＮＡ的表达。而对纤维     

病毒性肝炎患者血清转化生长因子—β1活性及其与肝纤维化的关系

为了探讨转化生长因子－β（ＴＧＦ－β１）在肝纤维化发病机制中的作用，采用ＭＶ１ＬＵ细胞了制ＭＴ法，检测了１０８例病毒性肝炎患者血清ＴＧＦ－β１活性，同时用放免法检测血清前季Ⅲ型胶原（ＰＣⅢ）、透明质酸（ＨＡ）层粘蛋白（ＬＮ）的含量，结果表明各型肝炎患者ＴＧＦ－β１活性较正常对照都明显增高（Ｐ〈０．０１）。随病情的发展，ＴＧＦ－β１活性逐渐增高，ＰＣⅢ、ＨＡ、ＬＮ含量也明显增加，各组间差异均有显著性     

血小板源生长因子对动脉平滑肌细胞增殖,Ⅰ、Ⅲ型前胶原信使核糖核酸的表达及胶原蛋白合成的调节作用

目的：研究血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）对培养的人主动脉平滑肌细胞增殖、胶原蛋白合成、分泌及Ⅰ、Ⅲ型前胶原信使核糖核酸（ｍＲＮＡ）表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达的调节作用。方法：氚胸腺嘧啶脱氧核苷（３ＨＴｄＲ），氚脯氨酸参入及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析。３ＨＴｄＲ，氚脯氨酸参入的比较采用ｔ检验。结果：ＰＤＧＦ能促进人主动脉平滑肌细胞脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）合成和胶原蛋白合成、分泌；ＰＤＧＦ能上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达。结论：血小板源生长因子能通过上调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和转移生长因子βｍＲＮＡ表达促进平滑肌细胞胶原蛋白的合成、分泌。     

转化生长因子β在高糖培养条件下系膜细胞生长抑制中的作用

观察了转化生长因子β（ＴＧＦβ）在高糖培养条件下系膜细胞生长抑制中的作用。结果显示，高糖浓度依赖性地抑制了系膜细胞的增殖；培养中加入抗－ＴＧＦβ抗体，则明显增强了正常及高糖培养条件下的系膜细胞的生长，拮抗了高糖导致的系膜细胞增殖的抑制；生物学方法检测高糖培养后系膜细胞产生的ＴＧＦβ，发现随着糖浓度增加，活性ＴＧＦβ占总ＴＧＦβ的百分比也明显上升。结果提示，ＴＧＦβ是系膜细胞产生的自分泌性生长调节因子，高糖条件下，内源性ＴＧＦβ参与并介导了高糖导致的系膜细胞增殖抑制。     

转化生长因子β在肝纤维化研究中的进展

转化生长因子β（ＴＧＦ－β）是一族具有广泛生物学活性的多肽,它能调节多种细胞的功能,如细胞增殖周期调控、伤口愈合、血管发生、细胞分化、胚胎发生、免疫调节、凋亡等,在肝纤维化的形成过程中,ＴＧＦ－β是一种起关键作用的细胞因子。１　ＴＧＦ－β的一般特点七十年代末ＴＧＦ－β被分离出来,至今已在脊椎动物中发现了五种亚型。目前,在哺乳动物中已发现三种ＴＧＦ－β的亚型：ＴＧＦ－β１、２、３,它们的生物学特征基本相同。ＴＧＦ－β分布于多种细胞组织中,具有广泛的生物学效应。在培养中几乎所有细胞均表达ＴＧＦ－β及…     

虫草多糖对大鼠Ito细胞增殖及胶原基因表达的影响

目的　研究虫草多糖（ＣＰ）对大鼠Ｉｔｏ细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因ｍＲＮＡ表达的影响,探索ＣＰ抗肝纤维化的作用机制。方法分离、培养大鼠Ｉｔｏ细胞,采用~３Ｈ－胸腺嘧啶（~３Ｈ－ＴｄＲ）和~３Ｈ－脯氨酸（~３Ｈ－Ｐｒｏ）掺入法测定Ｉｔｏ细胞增殖及胶原合成;用原位杂交法检测Ｉｔｏ细胞Ⅰ、Ⅲ前胶原基因ｍＲＮＡ含量。结果　在０．１～８０μｇ／ｍ剂量范围内,ＣＰ可明显抑制Ｉｔｏ细胞~３Ｈ－ＴｄＲ和~３Ｈ－Ｐｒｏ的掺入。当ＣＰ浓度为１０μｇ／ｍｌ时,抑制率分别为２７．９％和４５．４％（Ｐ均＜０．０５）。随着浓度的增加和作用时间的延长,其抑制作用逐渐加强,１０μｇ／ｍｌ ＣＰ可显著抑制Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达,抑制率分别为３２．６０％和３７．３２％（Ｐ均＜０．０１）。结论 ＣＰ在体外可抑制Ｉｔｏ细胞的增殖和胶原合成,下调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达,并呈剂量和时间依赖性,提示ＣＰ对Ｉｔｏ细胞增殖和胶原合成的抑制可能是其体内抗肝纤维化作用的主要途径。     

风湿性心脏病瓣膜胶原及转化生长因子β1改变的初步研究

为了解风湿性心脏病（风心病）病变二尖瓣和主动脉瓣组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）基因表达的改变。用斑点杂交法测定９例风心病人和３例尸检中除外心血管病与胶原系统疾病者的二尖瓣和主动脉瓣中Ⅰ型胶原α１链［α１（Ⅰ）］ｍＲＮＡ、Ⅲ型胶原α１链［α１（Ⅲ）］ｍＲＮＡ、ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的含量。结果显示：以对照组值为１．００，风心病人二尖瓣α１（Ⅰ）ｍＲＮＡ为２．３１±０．４８（Ｐ＜０．０１），α１（Ⅲ）ｍＲＮＡ为１．５９±０．１７（Ｐ＜０．０１），ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ为１．５７±０．２１（Ｐ＜０．０１）；主动脉瓣的结果分别为２．１０±０．４９（Ｐ＜０．０１），１．６６±０．２７（Ｐ＜０．０１），１．５２±０．１８（Ｐ＜０．０１）。结论：提示风心病病变瓣膜成纤维细胞胶原基因表达增强，使胶原合成增加，导致瓣膜纤维化。ＴＧＦ－β１基因表达增强的意义尚需进一步研究。