重组水蛭素治疗急性冠脉综合征的研究

重组水蛭素为直接凝血酶抑制剂,本文综述了其分子生物学和药理学特性、作用机理及其在急性冠脉综合征中的应用进展.     

水蛭素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

为研究重组水蛭素对凝血酶诱导的免胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制。选用第2～5代培养的血管平滑肌细胞，在与凝血酶(4．0ku／L)共同孵育的条件下，分别给予水蛭素(6．0ku／L)和肝素(6．0ku／L)进行干预。通过四唑盐比色实验检测细胞生长活性，流式细胞术检测细胞周期，免疫组织化学检测血小板生长因子和增殖细胞核抗原在血管平滑肌细胞中的表达。结果发现，重组水蛭素能明显抑制凝血酶诱导的平滑肌细胞增殖，其抑制作用可能与减低了血管平滑肌细胞对血小板生长因子和增殖细胞核抗原的表达有关。     

水蛭素在深静脉血栓治疗中的作用

水蛭素是凝血酶特异性抑制剂,能与血浆中游离的凝血酶和纤维蛋白结合的凝血酶结合,以防止血栓形成。深静脉血栓是外科手术后最严重和常见的并发症,并可导致肺栓塞和长期的血栓后综合征。本文综述了水蛭素在深静脉血栓治疗中的作用。     

水蛭素与阿司匹林联用抗血栓治疗的研究

目的 探讨抗凝剂水蛭素与抗血小板药物阿司匹林联合应用在治疗老年患者异常凝血状态中的意义。方法 60例老年患者随机分为阿司匹林单药治疗组和阿司匹林与水蛭素联合治疗组，连续用药4w；治疗前、后分别测凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原浓度（FIb）及最大血小板聚集率（MAR）。结果 4w后，与治疗前相比，单药治疗组盯、APTT明显延长，MAR明显降低，Fib无显著变化；联合治疗组盯、APTT亦显著延长，MAR、Fib明显降低；与单药治疗组相比，联合治疗组PT、APTT更长，MAR、Fib更低。结论 水蛭素与阿司匹林联合应用能够更有效地改善老年患者的异常凝血状态。     

水蛭素注射液治疗脑出血的临床疗效观察

目的观察水蛭素注射液对自发性脑出血血肿吸收、血肿周围低密度区改变及对神经功能恢复的影响。方法将465例入选的自发性脑出血患者随机分为治疗组(308例)和对照组(157例)。治疗组给予水蛭素注射液,6ml加入5%葡萄糖液250ml中静脉滴注,1次/d。分别于发病第1、4、10、21天利用CT测量血肿体积及血肿周围低密度区,采用欧洲卒中量表进行神经功能缺损评分。结果治疗组血肿体积第10天为(21±10)ml,第21天为(14±7)ml,对照组第10天为(27±8)ml,第21天为(25±9)ml,两组比较差异有显著意义;治疗组在20d时血肿周围密度区为1·5mm,对照组为3mm,两组比较差异有显著意义;治疗组第10、20天欧洲卒中量表评分分别为62±19、66±24,对照组分别为46±16、51±14,两组比较差异有显著意义,P<0·05。结论水蛭素注射液能促进脑出血血肿的吸收,使血肿周围低密度区缩小和促进神经功能恢复。     

重组水蛭素治疗急性冠脉综合征的研究

重组水蛭素为直接凝血酶抑制剂，本文综述了其分子生物学和药理学特性、作用机理及其在急性冠脉综合征中的应用进展。     

重组水蛭素延缓部分肾切除大鼠慢性进行性肾损伤的初步研究

我们在前期研究中发现，部分肾切除大鼠模型中有明显的肾小球内微血栓形成以及纤维蛋白相关抗原（ＦＲＡ）沉积，提示肾小球局部有凝血酶的活化［１］。本研究从模型制备早期开始采用特异的凝血酶阻滞剂人工重组水蛭素进行了干预性治疗，以观察重组水蛭素延缓慢性进行性肾...     

水蛭素对凝血酶诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

为研究重组水蛭素对凝血酶诱导的兔胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响及其作用机制.选用第2～5代培养的血管平滑肌细胞,在与凝血酶(4.0 ku/L)共同孵育的条件下,分别给予水蛭素(6.0 ku/L)和肝素(6.O ku/L)进行干预.通过四唑盐比色实验检测细胞生长活性,流式细胞术检测细胞周期,免疫组织化学检测血小板生长因子和增殖细胞核抗原在血管平滑肌细胞中的表达.结果发现,重组水蛭素能明显抑制凝血酶诱导的平滑肌细胞增殖,其抑制作用可能与减低了血管平滑肌细胞对血小板生长因子和增殖细胞核抗原的表达有关.     

水蛭素的抗凝抗血栓形成作用

水蛭素是从医用水蛭(蚂螨)的唾液腺中分离纯化的一种多肽物质。通过家兔的体内急性实验,即耳静脉注射230ATU/kg,观察到水蛭素明显地延长凝血酶原时间和凝血酶凝结时间。耳静脉注射后二小时,其作用效果达到高峰。且水蛭素具有明显的抑制血栓形成作用。     

低分子肝素和水蛭素在抗凝治疗中的应用

抗凝疗法是利用抗凝剂预防或治疗血栓栓塞性疾病的一种方法 ,其基本原理是通过抗凝剂阻止纤维蛋白原转化为纤维蛋白 ,防止血栓形成或发展。肝素和香豆素类口服抗凝剂是两类常用的抗凝剂 ,已有较长的应用历史 ,并积累了较成熟的经验 ,此处不再赘述。本文着重讨论两种较新的抗凝药物 ,即低分子量肝素 (L MWH或 L MMH)和水蛭素 (HRD)。1　 L MWHL MWH是未组分肝素 (或称普通肝素 )经化学处理或酶解法处理获得的分子量较小的组分制品。其分子量为 30 0 0～70 0 0 (平均 5 0 0 0 )道尔顿。目前已有多种 L MWH投放市场。因为制备方法的…     

重组水蛭素对兔髂总动脉球囊损伤后内膜增殖影响的实验研究

目的 :探讨重组水蛭素对兔髂总动脉球囊损伤后内膜增殖的影响。方法 :2 4只纯种日本大耳白兔随机分成肝素对照组 （n=12 ）和重组水蛭素组 （n=12 ） ,采用兔髂总动脉球囊扩张损伤后内膜增殖动物模型 ,术后 2周和 4周复查血管造影 ,术后 4周处死动物取髂总动脉标本。结果 :用药组术后 2周和 4周平均髂总动脉直径均较对照组明显增加 （P<0 .0 1） ,4周后新生内膜面积显著减少 （P<0 .0 1） ,管腔面积明显扩大 （P<0 .0 1）。结论 :重组水蛭素可显著减轻兔髂总动脉球囊扩张损伤后新生内膜增殖和管腔的狭窄     

抗凝溶栓重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的构建与表达

目的:探讨抗凝溶栓重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的构建效果与抗凝溶栓活性表达情况。方法:在间接实验中,选择p BV-重组葡激酶-水蛭素融合蛋白质质粒进行酵母大量表达,再进行两级纯化分析;去纯化的单位进行抗凝溶栓的检测。结果:工程菌酵母发酵培养诱导1 h后就可以检测到重组葡激酶-水蛭素融合蛋白表达,表达量随发酵时间的增加而递增。两级纯化的重复性非常好,纯度经RP-HPLC测定在98%以上。重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的溶栓活性明显高于水蛭素与葡激酶的单纯溶栓活性(P0.05)。重组葡激酶-水蛭素融合蛋白具有更强的纤溶酶原激活活性,明显高于水蛭素与葡激酶的单纯纤溶酶原激活活性(P0.05)。结论:重组葡激酶-水蛭素融合蛋白生产工艺具有很好的诱导与纯化效果,重组葡激酶-水蛭素融合蛋白能发挥较好的抗凝与溶栓作用。     

抗凝溶栓重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的构建与表达

目的：通过间接实验探讨抗凝溶栓重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的构建效果与抗凝溶栓活性表达情况。方法：在间接实验中，选择pBV-重组葡激酶-水蛭素融合蛋白质质粒进行酵母大量表达，然后进行两级纯化分析；去纯化的单位进行抗凝溶栓的检测。结果：工程菌酵母发酵培养诱导1 h 后就可以检测到重组葡激酶-水蛭素融合蛋白表达，表达量随发酵时间的增加而递增。两级纯化的重复性非常好，纯度经RP-HPLC检定在98%以上。重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的溶栓活性明显高于水蛭素与葡激酶的单纯溶栓活性(P<0.05)。重组葡激酶-水蛭素融合蛋白具有更强的纤溶酶原激活活性，明显高于水蛭素与葡激酶的单纯纤溶酶原激活活性(P<0.05)。结论：通过间接实验建立的重组葡激酶-水蛭素融合蛋白生产工艺具有很好的诱导与纯化效果，而重组葡激酶-水蛭素融合蛋白能发挥比较好的抗凝与溶栓作用。     

水蛭素在急性冠状动脉综合征防治中的作用

急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)是从不稳定型心绞痛(unstable angina pecforis,UAP)到Q波心肌梗死(Q-wave myocardial infarction)的一组病症.可分为ST段抬高的心肌梗死和无ST段抬高(主要表现为ST段下降和/或T波倒置)的不稳定型心绞痛和无Q波心肌梗死,后二种情况又可统称为不稳定型冠状动脉疾病.     

重组水蛭素局部治疗球囊扩张术后内膜增殖和管腔狭窄的实验研究

目的 :探讨重组水蛭素经多孔球囊导管局部治疗兔髂总动脉球囊扩张术后内膜增殖和管腔狭窄的作用。方法 :2 4只纯种日本大耳白兔随机分成对照组 （n=12 ）和重组水蛭素局部治疗组 （n=12 ） ,采用兔髂总动脉球囊扩张术后内膜增殖和管腔狭窄动物模型 ,治疗组经多孔球囊导管于球囊扩张局部在 2个大气压下给予重组水蛭素 re-fludin（14 .5× 10 6 ATU· g- 1 ） 1m g· kg- 1 ,对照组给予生理盐水。术后 2周和 4周复查血管造影 ,术后 4周取髂总动脉标本行 HE染色、Masson三色染色、平滑肌肌动蛋白 （α- actin）免疫组织化学染色和增殖细胞核抗原 （PCNA ）免疫组织化学染色 ,并进行计算机图象分析。结果 :治疗组术后 2周和 4周血管造影平均髂总动脉直径分别较对照组扩大 5 9.9% （P<0 .0 1）和 6 1.6 % （P<0 .0 1） ,平均髂总动脉面积分别较对照组扩大 135 .6 % （P<0 .0 1）和 191.1% （P<0 .0 1）。图象分析示球囊扩张术后 4周治疗组髂总动脉血管腔面积较对照组扩大 113.0 4 % （P<0 .0 1） ,管壁面积和内膜面积分别减少 2 9.2 0 % （P<0 .0 1）和 82 .0 0 % （P<0 .0 1）。术后 4周治疗组球囊扩张血管壁α- actin和 PCNA免疫组化染色阳性细胞均较对照组明显减少。结论 :重组水蛭素经多孔球囊导管局部治疗 ,可显著减轻兔髂总动脉     

水蛭素对增生性瘢痕基质金属蛋白酶-2、9表达作用的影响

目的 研究水蛭素对增生性瘢痕组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,探讨水蛭素对增生性瘢痕作用机理.方法 取烧伤后6个月内的皮肤增生性瘢痕,体外培养成纤维细胞,ELISA法测定水蛭素作用后MMP-2、MMP-9表达含量.结果 水蛭素作用后增生性瘢痕组织内MMP-2、MMP-9含量增加,分别以0.5 U/mL和1 U/mL组作用最明显,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 水蛭素能促进MMP-2、MMP-9表达,有抑制增生性瘢痕的作用.     

水蛭素对脑出血大鼠血肿周围脑组织CD34阳性微血管、RCA-1阳性细胞和中性粒细胞数量的影响

目的 观察大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)不同时间点血肿周围组织CD34阳性微血管、蓖麻凝聚素(Ricinus communis agglutinin,RCA-1)阳性细胞和中性粒细胞数量的动态变化和凝血酶特异性抑制剂水蛭素对上述指标的影响,探讨水蛭索对脑出血后脑损伤的保护机制.方法 采用立体定向法将自体不凝全血注入大鼠脑基底节区制作实验性ICH模型,随机分为假手术组、ICH组、水蛭素干预组和生理盐水干预组.CD34和RCA-1免疫组织化学染色和常规HE染色观察CD34阳性微血管、RCA-1阳性细胞和中性粒细胞.结果 ICH 12 h CD34阳性微血管数量开始下降,72 h降至最低,7 d后缓慢恢复至正常水平;在ICH6 h时可见RCA-1阳性细胞,48 h达高峰,持续2周仍可见少量细胞;ICH 12 h可见中性粒细胞,48 h达高峰,2周时消失.ICH早期(5 min)应用水蛭素能显著减少RCA-1阳性细胞和中性粒细胞数量,同时显著抑制CD34阳性微血管数量的减少(P均＜0.01);水肿形成期(ICH 24 h)应用水蛭素亦可显著减少血肿周围RCA-1阳性细胞和中性粒细胞数量(P均＜0.05),但不能显著增加CD34阳性微血管数量.结论 凝血酶介导的炎症反应参与了ICH后的脑损伤过程,早期应用水蛭素可显著减轻血肿周围组织损伤.     

水蛭素合用阿司匹林与氯吡格雷治疗TIA的疗效和卫生经济学比较

目的比较水蛭素合用阿司匹林与氯吡格雷治疗短暂性脑缺血发作（TIA）的疗效和卫生经济学差异。方法59例TIA随机分成两组,实验组口服水蛭素0．32g／次,3次／d,阿司匹林100mg／d;对照组口服氯吡格雷75mg／d,观察治疗后90d内的治疗效果,比较两组不同时期内缺血性脑血管事件的病例数、出血等不良事件的发生率和治疗费用。结果两组在降低90d内缺血性脑血管事件方面无显著性差异。水蛭素合用阿司匹林组的治疗费用为单用氯吡格雷的42％。两组出血发生率无显著性差异。结论水蛭素合用阿司匹林降低TIA患者90d内缺血性脑血管事件风险的疗效与单用氯吡格雷相似,而治疗费用显著低于氯吡格雷,但可能会增加出血的风险。