胶体金与胶乳增强免疫比浊法测定心肌肌钙蛋白Ⅰ的比较

目的 用北京九强公司的胶体金法与胶乳增强免疫比浊法定量测定我院60例血清肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)水平.方法 结合临床最后诊断,评价两种测定方法的分析性能.比较胶体金法与胶乳增强免疫比浊法测定cTn Ⅰ总符合率、灵敏度、特异性、误诊率和漏诊率.结果 胶体金法与胶乳增强免疫比浊法与临床诊断总符合率好,灵敏度高,特异性强,误诊率和漏诊率低.两种检测方法测定结果之间差异无统计学意义,P＞0.05.结论 胶乳增强免疫比浊法定量测定cTn Ⅰ方法简便、快速,具有较高的灵敏度和精密度,可用全自动分析仪进行测试,适用于大批量及临床常规使用.胶体金法方便快速,适合临床科室床旁检测.     

两种分析方法测定肌钙蛋白Ⅰ在诊断心肌损伤的优劣性分析

目的用定量的化学发光免疫法与定性的免疫层析法测定血清肌钙蛋白Ⅰ，探讨两种方法在诊断心肌损伤的优劣性。方法将患者分为低浓度组（cTnI≤10ng／ml）和高浓度组（cTnI〉10ng／ml）把化学发光免疫法测定的定量结果〉1．5ng／ml作为阳性样本，这样有利于两种方法之间的比较。结果用定量的化学发光免疫法测定肌钙蛋白Ⅰ的灵敏度比定性的免疫层析法的快速诊断卡高，两种不同的方法，测定的结果存在较大差异（P〈0．01=。结论定量的方法灵敏度高，即临床诊断率高；免疫层析法优点是快速简便，但在心肌损伤病人血液中低浓度cTnI时，不能及时检出，只有当病人血液中具有较高浓度cTnI时才能检出。故尽可能地用灵敏度高的定量方法进行测定，也可以用两种方法同时检测，这样可以提高心肌损伤病人的诊断率，做到快速准确。     

化学发光法测定519例心肌肌钙蛋白I水平

心肌肌钙蛋白I(CTnI)作为心肌损伤标志物,在临床上已应用了多年,由于其高度的心肌特异性,对于心肌损伤的高度敏感性及较长的窗口期,CTnI已被临床医生及检验人员广泛接受,已取代肌酸激酶同工酶(CK-MB),不仅成为判断心肌损伤,特别是诊断急性心梗(AMI)的标准.而且已成为判断冠脉综合征患者处于心肌损伤风险的最合适的标志物,CTnI的升高还可支持临床医生及早做出抗血栓、抗血小板凝集及介入性治疗.     

胶乳增强免疫比浊法检测糖化血红蛋白的性能评价

目的 对应用胶乳增强免疫比浊法在日立7600-020全自动生化分析仪上检测糖化血红蛋白(HbA1c)的性能进行评价.方法 应用胶乳增强免疫比浊法在日立7600-020全自动生化分析仪上检测HbA1c,对其精密度、空白检测限、线性、携带污染率进行评价,并与BIO-RAD(D-1 0N)高效液相色谱法(HPLC)检测HbA1c进行相关性分析,同时对参考区间进行验证.结果 日立7600-020全自动生化分析仪上检测HbA1c的低高水平的CV％批内分别为1.6％、0.5％;CV％批间分别为2.6％、1.3％;CV％总分别为3.5％、2.6％.检测限为0.1％.在2.0％～17.6％范围内线性良好(y=1.0046X-0.0619,R2=0.9996).携带污染率为1.03％,样本间交叉污染小.日立7600-020分析仪与BIO-RAD(D-10N)分析仪检测HbA1c的结果呈明显相关(y=1.0064X-0.0769,R2 =0.9942),95％置信区间为(-0.41～0.52)且百分偏倚的绝对值均小于6％.20名健康人群的HbA1c测定结果为4.0％ ～5.5％,在厂家提供的参考区间内.结论 应用胶乳增强免疫比浊法在日立7600-020全自动生化分析仪上检测HbA1c的性能良好,可供临床使用.     

一种检测血清心肌肌钙蛋白I的生物传感器

目的 :建立一种新的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)定量检测法。方法 :用亲和层析法提纯cTnI,免疫BALB C鼠及新西兰兔 ,并用杂交瘤技术及膜渗滤亲和层析法 ,制备了特异性抗cTnI单克隆抗体和多克隆抗体。以葡萄球菌蛋白A作基底膜 ,特异性多克隆抗体作捕捉抗体 ,单抗 9F5作第二抗体 ,制成了表面等离子体共振生物传感器。比较了直接法和夹心免疫法检测血清cTnI的性能。结果 :夹心免疫法的最低检测限 (0 8μg L)是直接法的 5倍 (4 μg L) ,检测范围为 (0 8～ 2 0 ) μg L ,批内及批间精密度分别达 3 8%～ 5 1% ,6 3%～ 8 1%。用该夹心法及国外试剂盒分别检测 4 0名健康献血队员和 2 8例急性心肌梗死患者血清cTnI水平 ,两者符合率分别为 97 5 %和 94 6 %。结论 :所建立的夹心免疫法操作简单 ,特异性强 ,灵敏度高 ,符合临床诊断要求。     

视黄醇结合蛋白两种测定方法的可比性与不同真空采血管间干扰性评价

目的观察视黄醇结合蛋白(RBP)免疫比浊法(340nm波长)和胶乳增强免疫比浊法(600nm波长)两种检测方法的可比性,以及不同采血管的影响差异。方法用三种采血管,随机抽取40例样本,由同一操作者在同一生化仪上,用两种不同方法学的RBP试剂进行检测。并用SPSS17.O统计软件进行处理,以P<0.05为有统计学意义。结果普通无抗凝剂采血管用两种方法测定比较,P>0.05无显著性差异;免疫比浊法用肝素抗凝采血管与普通无抗凝剂管相比,有显著性差异(P<0.05);胶乳增强免疫比浊法用分离胶采血管与普通无抗凝剂管相比,有显著性差异(P<0.05)。结论视黄醇结合蛋白(RBP)两种检测方法的检测结果具有可比性,可应用于临床;免疫比浊法(340nm波长)受肝素抗凝管干扰影响结果 ;胶乳增强免疫比浊法(600nm波长)受分离胶采血管干扰影响结果 。     

五种方法检测抗dsDNA抗体性能比较与临床评价

用化学发光免疫分析法(CLIA)、免疫印迹法(WB)、间接免疫荧光法(IIF)、胶体金免疫层析法(CGCIA) 和ELISA检测dsDNA抗体,评价方法的分析性能、相关性及对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断价值.用五种方法检测300例SLE组患者、300例疾病对照组患者和100名健康人对照组血清抗dsDNA抗体.经统计学...     

胶乳增强免疫透射比浊法测定CRP的方法学评价

CRP的测定方法主要有免疫比浊法、免疫单抗法、胶乳凝集法、火箭电泳法,其中以免疫特定蛋白仪的免疫散射比浊法作为参考方法,而其他几种方法操作繁琐又不易于自动化分析。胶乳增强免疫透射比浊法是近年来发展较为可靠的方法,具有检测敏感度高、线性范围宽、结果稳定、     

胶乳免疫比浊法检测总前列腺特异性抗原性能评价及其与电化学免疫发光法的一致性评价

目的 对胶乳免疫比浊法(比对方法)检测总前列腺特异性抗原(total prostate specific antigen, tPSA)做性能验证,比较其与电化学免疫发光法(参比方法)检测结果的一致性。方法 依据CNAS-GL037文件对比对方法检测PSA进行准确度、精密度、线性区间的验证;收集2021年5月至8月解放军总医院第二医学中心剩余血清样本225例,分别由比对方法及参比方法检测总PSA,并对检测结果进行一致性评价。用Passing-Bablok回归、一致性相关系数(CCC)、Bland-Altman图分析2种检测方法的一致性和偏差。结果 比对方法检测国家标准物质4个浓度偏倚均在±5%以内,低于厂家声明的15%;重复性和实验室内精密度(CV)不超过2%;临床高低值样本验证1.20～98.12μg/L区间符合临床线性要求。比对方法与参比方法的相关性(r=0.994)、一致性(CCC=0.989)均较好;两种方法检测总PSA平均偏差为-0.617μg/L(-4.36%)。结论 比对方法检测总PSA正确度、精密度、线性区间验证均符合要求,比对方法与参比方法检测总PSA具有较好的相关性和...     

化学放光免疫方法测定肌钙蛋白I可快速诊断心肌梗塞

急性心肌梗塞 (ＡＭＩ)早期临床实验检查是血清心肌酶谱 ,但特异性不够高 ,而心电图诊断 60 %并无肯定的梗塞征象。心肌肌钙蛋白Ｉ(ｃＴｎＩ)是最近几年发展起来的一种高灵敏度、高特异性反映心肌细胞损害的血清标志物引起人们的广泛兴趣[1] 。我们自 2 0 0 2年 3月开始至 5月用化学发光免疫方法检测 3 0例心梗病人血清中ｃＴｎＩ水平 ,并与Ｍｂ、ＣＫ -ＭＢ作对照以探讨心肌肌钙蛋白临床实用价值。对象和方法一、对象 :因胸痛或心电图异常而高度怀疑为心梗急诊入院病人 3 0例 (男 2 0 ,女 10 ) ,年龄 4 2～ 82岁 ,平均 64 5岁 ,入院后立即…     

三种检测24小时尿游离皮质醇方法的比较

应用化学发光免疫测定法 (CLIA)和竞争性蛋白结合分析法 (CPBA)检测 2 4h尿游离皮质醇 (UFC)水平 ,比较方法的相关性、精密度及特异性。拟用CLIA替代CPBA检测UFC。采用CLIA提取法与CLIA未提取法和CPBA法检测 5 3名正常人 ,13例未经治疗的库欣综合征患者和 92例肥胖患者及 37例口服类固醇激素药患者的 2 4hUFC水平。对其结果进行相关性比较 ,并做重复性试验 ,同时进行了七种类固醇激素的交叉试验 ,以比较三种方法的精密度和特异性。CLIA提取法与CPBA法相比较 ,r =0 .814 ,P <0 .0 0 0 1;CLIA未提取法与CPBA法相比较 ,r =0 .70 6 ,P <0 .0 0 0 1;CLIA提取法和CLIA未提取法相比较 ,r =0 .90 1,P <0 .0 0 0 1。交叉试验显示 :除皮质醇外 ,强的松龙在CPBA法、CLIA提取法和CLIA未提取法中 ,均干扰UFC测定 ,其交叉百分率分别为 19.0 %、15 .4 %及 2 4 .9% ,高于其它五种类固醇激素 ,而后五种激素对UFC的测定干扰不大。两种CLIA法的批内和批间变异系数均小于CPBA法 ,而且均与CPBA法有很好的相关性。由于CLIA提取法的精密度和特异性均优于CPBA法和CLIA未提取法 ,本文建议用CLIA提取法代替CPBA法。     

传染病四项不同检测方法的临床应用价值对比分析

目的 通过三种方法检测传染病四项,探讨它们在检测传染病四项中的临床应用价值.方法 2014年8月至2014年12月在本院门诊体检人群中随机选取标本480例,采用全自动酶免分析法,胶体金免疫检测法,化学发光免疫分析法分别进行传染病四项的检测,比较分析三种检测方法的结果差异.结果 通过对480例体检者的检测结果进行分析,化学发光法的特异性、敏感性、阳性率和重复性均高于ELISA法和胶体金法,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 对三种传染病四项的检测方法的结果进行分析,其中化学发光法极具优势,检测结果阳性率、特异性、敏感性均高于其他两种方法,它的检测结果具有重要价值,对有效治疗方案的提出具有指导意义.     

乙肝表面抗原吖啶酯化学发光定量免疫分析方法的建立

目的建立一种定量检测乙肝表面抗原(HBsAg)的化学发光免疫分析方法并评估其性能。方法利用双抗体夹心法实验原理,用吖啶酯标记多抗,用生物素标记两株单抗,通过磁颗粒链霉亲和素-生物素系统分离固相和液相完成检测。结果本方法的检测限为0.05IU/mL,线性范围为0.05~150IU/mL,可溯源至国际标准品,批内变异小于5%,总变异小于8%,浓度高达106IU/mL的强阳样本未出现HOOK效应;5套阳转盘对雅培Architect、西门子centaur和强生VITROS发光试剂相对敏感系数分别是3、0、-3;国家参考盘检出达标;与雅培Architect比较,2000例临床样本检测灵敏度为99.77%,特异性为100%,一致性达99.95%。结论本研究建立的HBsAg定量检测试剂,各项指标均满足临床检测的要求,灵敏度高,特异性好,适合临床推广应用。     

胶乳增强透射免疫比浊法与电化学发光免疫分析法检测癌胚抗原结果比对

目的探讨胶乳增强透射免疫比浊法与电化学发光免疫分析法检测血清中癌胚抗原的结果差异性。方法随机抽取门诊体检标本204例,用胶乳增强透射免疫比浊法和电化学发光免疫分析法同时检测血清中癌胚抗原的浓度,比较两者间差异及相关性。结果两方法学检测结果具有高度相似性,Sprerman相关性检验,相关系数为0.998。结论胶乳增强透射免疫比浊法与电化学发光免疫分析法检测值的相关性良好,胶乳增强透射免疫比浊法值得在临床上推广使用。但建议各地区基层医院实验室建立本实验室参考范围。     

Comparison of a chemiluminescence immunoassay and an enzyme immunoassay for detection of IgM antibodies against measles,mumps, rubella,cytomegalovirus (CMV), Epstein Barr virus (EBV), and human herpes virus (HHV) -1 and -2 infections

PurposeOutbreaks of vaccine-preventable viral diseases have been increasingly reported globally over the past few years. The burden of congenital viral infections, their impact on physical and mental development and the resulting economic loss to the family and the community are also well known. IgM antibody detection has been convenient in the diagnosis of acute viral infections, particularly in settings with limited resources where molecular tests are not feasible.MethodsThis is a comparative study between a chemiluminescence immunoassay (Liaison, DiaSorin, Saluggia, Italy) and an enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) (Euroimmun, Lubeck, Germany) for the detection of IgM antibody against measles, mumps, rubella, CMV, EBV and HHV-1 and -2 viruses using a total of 345 samples. Results are expressed as agreement using kappa statistics.ResultsIn this study, CLIA is perfectly comparable to ELISA for the detection of IgM antibodies against measles (0.86) and mumps (0.92) with a moderate agreement for rubella (0.52), CMV (0.57), EBV (0.50), and HHV-1 and -2 (0.47) assays. However, a PABAK (prevalence-adjusted bias-adjusted kappa) showed improved agreement for rubella (0.64), CMV (0.65), EBV (0.60), and HHV-1 and -2 (0.88) assays.ConclusionsIgM antibody assays (CLIA and ELISA) against measles and mumps virus can be comparably used depending on the laboratory setup, throughput and expertise.     

三种检测方法对梅毒血清学诊断价值的评价

目的：评价ELISA、RPR、TRUST对梅毒的诊断价值。方法：用ELISA与RPR、TRUST对205例阳性标本和1254例献血员标本检测结果进行对比试验。结果：ELISA明显优于RPR和TRUST法,结果有显著差异性（P〈0．05）。结论：ELISA在输血工作中应用可提高输血安全性。     

Development of a fluorescent microbead-based immunoassay for the detection of hepatitis E virus IgG antibodies in pigs and comparison to an enzyme-linked immunoassay

Swine hepatitis E virus (HEV) is a zoonotic virus and pigs are considered as an important reservoir. Swine HEV infection is widespread and most pig herds are infected. Humans can be infected with swine HEV via consumption of undercooked pork or through direct contact with infected pigs. To minimize the risk of zoonotic transmission, sensitive tools to assess the HEV infection status of pigs and pork products are needed. The objective of this study was to develop a fluorescent microbead-based immunoassay (FMIA) for the detection of IgG antibodies against swine HEV and compare it to an in-house enzyme-linked immunoassay (ELISA). Three sets of samples were utilized: (A) samples from pigs infected experimentally with different strains of HEV (positive controls, n = 72), (B) samples from known HEV-negative pigs (negative controls, n = 62) and (C) samples from pigs of unknown HEV infection status (n = 182). All samples were tested by both ELISA and FMIA. The results on the experimental samples with known HEV exposure indicate that both assays have a specificity of 100% while the sensitivity ranges from 84.6% (ELISA) to 92.3% (FMIA). The overall prevalence of HEV IgG antibodies in field samples from pigs with unknown HEV exposure was 21.9% (40/182) for the ELISA and 21.4% (39/182) for the FMIA. The two assays had an almost perfect overall agreement (Kappa = 0.92).     

Poly(Ethyleneimine)-Immobilized-Cloth Enzyme Immunoassay for the Detection of Salmonella Lipopolysaccharide

Poly(ethyleneimine) (PEI) was immobilized on non-woven polyester cloth and examined for application on a simple, rapid and economical “cloth enzyme immunoassay (CEIA)” which was developed originally as polymyxin-CEIA for the detection of Salmonella lipopolysaccharide (LPS). PEI-cloth regardless of the PEI molecular weight, but with the amine group contents of 0.1 ∼ 0.35 meq/g immobilized either in a physisorption-like or chemisorption-like manner, adsorbed LPS rapidly, preferentially and effectively. The captured LPS was then able to be detected qualitatively and quantitatively as an antigen by enzyme immunoassay. PEI-CEIA had a detection limit for Salmonella LPS of 10 ng/ml, which was equivalent to 1.6 × 10⁵ cell/ml and was ten times more sensitive than polymyxin-CEIA. It was possible to detect Salmonella LPS in the presence of a 100-fold excess of E. coli LPS. PEI-CEIA was found to be more sensitive and much easier to carry out than polymyxin-CEIA but had the same advantages as polymyxin-CEIA.     

颗粒增强免疫透射比浊测定血中Cyst C全自动分析法的建立与评价

目的：建立颗粒增强免疫透射比浊测定血中胱蛋白酶抑制剂C（Cyst C）全自动分析,评价该法常规用于检测血中胱蛋白酶抑制剂C的可行性。方法：将含有Cyst C血样本与乳胶颗粒增强的Cyst C多克隆兔抗体按一定体积比混合,在一定量的兔免疫球蛋白及表面活性剂存在条件下,抗原、抗体结合反应在一定温度、时间内产生一定大小的颗粒,许多颗粒在反应液体中形成一定的浊度,利用Olympus AU2700全自动生化分析仪透射比浊测定,并对方法的不精密度、准确度、干扰试验及与Dade Behring BN ProSpeC免疫散射比浊测定方法比较等进行评价。结果：Cyst C浓度为1．03mg／L、5．67mg／L样本的批内不精密度CV分别为4．8％、1．9％。向Cyst C浓度为0．79mg／L、1．18mg／L、1．46mg／L、2．46mg／L样本中加入1．65mg／L的标准液测定回收率分别为100％、95％、85％、87％,平均回收率为92％。样本中的类风湿因子、胆红素、血红蛋白、三酰甘油等干扰物浓度分别达975U／ml、400μmol／L、5g／L、6．7mmol／L时对检测无显著性影响。Cyst C浓度在0．41mg／L～6．60mg／L范围内检测线性良好。血清、肝素抗凝血浆及EDTA抗凝血浆样本测得的Cyst C结果未发现显著性差异（F=0．065,P=0．938）。与Dade Behring BN ProSpeC免疫散射比浊测定方法比较有良好的相关性,Y=0．98x-0．054,r=0．997,P〈0．01,但两者存在非常显著性差异（P〈0．01）,本法结果较Dade Behring BN ProSpeC免疫散射仪测定结果略低,两种方法的平均偏差为-0．0678mg／L。结论：建立的颗粒增强免疫透射比浊法测定血Cyst C重复性好、准确度高。血清、肝素抗凝血浆及EDTA抗凝血浆均可用于分析。测定不受类风湿因子（≥975U／ml）,胆红素（≥400μmol／L）,血红蛋白（≥5g／L）及三酰甘油（≥6．7mmol／L）的干扰。与Dade Behring BN ProSpec免疫散射比浊测定方法测定结果比较有良好的相关性,适用于在全自动生化分析仪上作常规检测。