双歧杆菌粘附素对脂多糖和H2O2调节肠上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究双歧杆菌分泌型粘附素对脂多糖(LPS)和H2O2体外调节肠上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法 用^3H-TdR掺入法、流式细胞仪和荧光染色等方法观察肠上皮细胞增殖和凋亡的情况。结果 100μg／L LPS对细胞增殖和凋亡均有促进作用，200μmol/L H2O2可抑制肠上皮细胞增殖，促进凋亡。丫啶橙荧光染色见细胞核染色质致密浓染或裂解成碎片。预先经双歧杆菌分泌型粘附素处理后，LPS组细胞增殖和凋亡率均显著下降，H2O2组细胞凋亡明显减少。结论 在体外，双歧杆菌分泌型粘附素能抑制LPS和H2O2对肠上皮细胞的损害作用，维持肠上皮细胞增殖与凋亡的平衡。     

双歧杆菌粘附大鼠肠上皮细胞相关因素的研究

目的 以青春型双歧杆菌粘附大鼠肠上皮细胞株IEC－6为实验模型，探讨影响粘附的相关因素。方法 采用体外定量微生物分析方法观察粘附等指标。结果 双歧杆菌粘附需要一定时间、浓度、温度的作用，且酸性环境有利于粘附，胰蛋白酶能完全抑制其粘附。结论 双歧杆菌能粘附于肠上皮细胞表面，其粘附素成分可能为细胞壁中的蛋白成分和脂磷壁酸。     

双歧杆菌及其表面分子粘附肠上皮细胞的研究

本文采用人结肠腺癌细胞株Ｌｏｖｏ体外培养研究分叉双歧杆菌粘附的性质和机制。结果发现：分叉双歧扦菌的粘附具有时间依赖性和菌量依赖性。静止期菌粘附作用是强。酸性ｐＨ值可以促进其粘附。通过ＷＰＧ．ＬＴＡ、多糖阻断试验及胰酶处理发现,ＷＰＧ、ＬＴＡ、细胞壁蛋白都参与了分叉双歧杆菌对Ｌｏｖｏ细胞的粘附,说明此粘附过程是多种分子共同参与的结果。国家自然科学基金     

双歧杆菌对实验性大肠癌细胞凋亡的影响

我们以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,用原位末端标记法、免疫组化法以及电镜检测了移植瘤的凋亡细胞以及ｂｃ１２、ｂａｘ基因的表达水平,旨在探讨双歧杆菌的抑瘤机理。一、材料和方法１．实验动物：ＢＡＬＢ／ｃ（ｎｕ／ｎｕ）小鼠,６～８周龄,雄性,体重约１８～２...     

双歧杆菌对大肠癌细胞凋亡的影响

目的探讨双歧杆菌的体外抗肿瘤作用及其对肿瘤细胞凋亡的影响。方法将双歧杆菌体外直接作用于大肠癌LoVo细胞,以MTT法检测双歧杆菌对肿瘤细胞的杀伤作用;用流式细胞仪检测双歧杆菌对肿瘤细胞凋亡的影响。结果双歧杆菌在体外对大肠癌LoVo细胞具有显著的杀伤作用,且浓度越大、作用时间越长,其抑制作用越强,具有浓度和时间依赖性,且双歧杆菌能诱导肿瘤细胞凋亡。结论双歧杆菌对大肠癌LoVo细胞具有生长抑制作用,其机制可能是通过诱导细胞凋亡达到抑制肿瘤生长的作用。     

脂多糖对人脐血内皮祖细胞增殖及凋亡的影响

目的:观察脂多糖(LPS)对体外培养的人脐血内皮祖细胞(EPCs)增殖及凋亡的影响。方法:以密度梯度离心法获取人脐血EPCs,体外诱导分化并鉴定。实验分对照组及不同浓度(2.5、5.0、10.0、20.0mmol/L)LPS组。四氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,流式细胞仪测凋亡率及细胞周期。结果:110.0mmol/L组促进EPCs增殖,20.0 mmol/L组抑制EPCs增殖,差异有统计学意义(P<0.05),其余2组对EPCs增殖能力无显著影响,与对照组比差异无统计学意义(P>0.05)。220.0 mmol/L组促进EPCs凋亡,差异有统计学意义(P<0.05)。其余各组对EPCs凋亡率无明显影响,与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。310.0、20.0 mmol/L组影响细胞周期,10.0 mmol/L组G0/G1期细胞减少,S和G2/M期增加;20.0 mmol/L组发生S期阻滞,G2/M期细胞减少,与对照组比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LPS对EPCs增殖能力及凋亡的影响与其浓度有关,当浓度为20.0 mmol/L时抑制增殖并促进凋亡。     

内毒素脂多糖对培养肾小管上皮细胞凋亡和增殖的影响

目的 观察肾小管上皮细胞（Tubular epithelia cell,TEC）在含内毒素脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）微环境中细胞凋亡功能改变,探讨LPS直接损害肾小管的机制。方法 在含内毒素LPS的介质中体外培养肾小管上皮细胞,检测不同时相细胞凋亡增殖能力及分泌肿瘤坏死因子-a(Tumor necrosis factor a,TNF-a）能力的变化。结果 LPS有明显的抑制TEC增殖,促进TEC分泌TNF-a,且随着LPS浓度的增大,其作用更为明显;LPS还具有明显促细胞凋亡作用,呈剂量依赖性;相关分析表明,细胞凋亡与LPS促TEC分泌TNF-a的量有明显正相关。结论 LPS可抑制TEC增殖,促进细胞凋亡,可能是通过TNF-a而起作用,这可能是LPS导致脓毒症性肾衰或急性间质性肾炎小管间质损害的机制之一。     

双歧杆菌对肠黏膜粘附及免疫调节功能的研究进展

双歧杆菌在肠道菌群中属于有益菌,双歧杆菌定植于肠黏膜上皮细胞上是它发挥上述生理作用的前提,决定双歧杆菌能否在肠道中定植的条件有:一是双歧杆菌必须先与肠道细胞发生作用而粘附于肠道细胞上;二是粘附后的双歧杆菌进一步改变肠道环境而实现对肠道细胞的稳定粘附.同时,双歧杆菌具有免疫调节功能等.     

化合物2G2抑制K562细胞增殖并诱导凋亡

目的建立基于白血病细胞K562生长活力的小分子化合物筛选的高通量筛选模型,筛选特异性针对慢性粒细胞白血病（CML）增殖抑制的先导化合物。方法以K562细胞系为实验对象,在96孔板上,利用MTS/PMS比色实验测定化合物对细胞活力的影响,建立具有抑制K562细胞活性的化合物筛选模型,并应用该模型完成了1000多种小分子化合物的筛选,对筛选得到的活性化合物通过3H-TdR掺入实验、细胞生长曲线、细胞周期和凋亡检测等实验进行验证和分析。结果建立并利用96孔板药物筛选模型,筛选获得一个具有一定特异性抑制K562细胞增殖的化合物——2G2。结论成功建立了抗白血病药物的筛选方法,为白血病治疗药物的开发研究提供了新的筛选模型。     

北五味子总木脂素对H2O2诱导PC12细胞凋亡的影响

目的： 探讨北五味子总木脂素(SCL)对过氧化氢(H₂O₂) 诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞)凋亡的保护作用及其机制。方法： PC12细胞分为对照组、模型组及SCL高（SCL₁）、低（SCL₂）剂量组,用H₂O₂刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率及线粒体膜电位的变化,免疫组化方法检测与凋亡相关蛋白bcl-2和bax的表达。结果：与模型组比较,SCL组随着剂量的增加PC12细胞存活率升高（P<0.05),凋亡率下降（P<0.01),线粒体膜电位回升（P<0.01), bcl-2表达增加(P<0.05),bax的表达降低(P<0.05)。结论:SCL可抑制H₂O₂诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡有关。     

过氧化氢诱导鼠晶状体上皮细胞凋亡中 Caspase-2的表达及意义

目的探讨过氧化氢诱导鼠白内障形成过程中晶体上皮凋亡细胞中半胱氨酸天冬氨酸酶-2(Cas-pase-2)的表达及意义。方法大鼠晶状体器官离体培养后，用免疫组织化学方法检测晶体上皮细胞Caspase-2的表达。结果随过氧化氢损伤时间的处长，晶体上皮细胞Caspase-2的表达逐渐增强，与晶体混浊程度正相关。结论过氧化氢可以诱导鼠晶体上皮细胞Caspase-2的表达，后者可能参与晶体上皮细胞凋亡和白内障的形成。     

葛根素对过氧化氢诱导 ARPE－19细胞活力损伤和凋亡的影响

目的：探讨葛根素对过氧化氢诱导人视网膜色素上皮细胞（ ARPE－19 cells ）活力损伤和凋亡的影响。方法用200μmol／L过氧化氢（ H2 O2）诱导氧化应激,不同浓度葛根素作用于ARPE－19细胞24 h,应用WST－1法检测细胞活力,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果过氧化氢明显降低人视网膜色素上皮细胞活力,葛根素能剂量依赖性的减少这种降低;过氧化氢明显增加人视网膜色素上皮细胞的凋亡,葛根素能剂量依赖性的减少这种增加。结论葛根素能明显减少过氧化氢诱导的人视网膜色素上皮细胞活力的损伤和细胞凋亡。     

二膦酸盐对MG-63细胞增殖及凋亡的影响

目的体外观察二膦酸盐对骨肉瘤MG-63细胞的抑制增殖和促进凋亡作用。方法将不同浓度的二膦酸盐药物与MG-63细胞体外培养,采用MTT比色法测定其细胞活力,绘制细胞生长曲线;Hoechst33258细胞染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪进行细胞周期分析及凋亡检测。结果MTT比色法测得药物作用72h对MG-63细胞的ID50为52.37μmol/L;细胞生长曲线表明细胞增殖数量与药物浓度及时间有显著依赖性;细胞荧光染色观察实验组细胞形态改变;细胞流式观察细胞凋亡实验组较正常差异有显著性,72h后细胞凋亡率40.2%±2.1%相比正常细胞2.8%±0.7%有统计学意义;细胞周期分析实验组细胞SubG1相比正常组显著累积G2/M细胞被阻滞。结论二膦酸盐抑制体外培养骨肉瘤MG-63细胞增殖,并可诱导其细胞凋亡。     

红景天苷对H2O2诱导子鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨红景天苷对H2O2诱导子鼠心肌细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法在原代培养的SD大鼠子鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同剂量红景天苷（10、30、90μg／m1）对心肌细胞凋亡率、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响。结果红景天苷可以减少心肌细胞凋亡率,降低MDA和LDH含量,增加SOD活性。结论红景天苷对H2O2诱导的子鼠心肌细胞凋亡有抑制作用,其作用机制可能与其抗脂质氧化有关。     

白藜芦醇对过氧化氢诱导鼠晶状体上皮细胞凋亡保护作用的实验研究

目的 探讨白藜芦醇对过氧化氢(H2O2)诱导鼠晶状体上皮细胞凋亡损伤的保护作用.方法 取健康SD大鼠透明晶状体60只,随机分为5组,每组12只,分别给予高、中、低剂量(5、10、20μmol/L)的白藜芦醇和100 μmol/L H2O2,利用透射电镜观察超微结构变化并测定凋亡因子caspase-3及caspase-9的表达.结果 伴随白藜芦醇给药浓度的增加,透射电镜下鼠晶状体上皮细胞损伤的程度减轻,此外,白藜芦醇对caspase-3及caspase-9的表达具有抑制作用.结论 白藜芦醇可以抑制H2O2诱导的晶状体上皮细胞的凋亡,对氧化损伤性白内障具有预防作用,为寻求有效防治白内障药物提供了可靠的实验依据.     

N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的研究新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物[N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺]对人肺腺癌A549细胞株体外增殖及凋亡的影响。方法3种浓度的ATRA衍生物和ATRA(1、5、10mg/L)分别处理A549细胞1、2、3、7d,应用MTT法和流式细胞技术分别观察该ATRA衍生物对A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响;Western blot分析凋亡相关蛋白表达的变化。结果ATRA衍生物处理组A549细胞增殖抑制率随药物浓度的增加而提高,分别为9.1%、17.8%、47.0%;抑制率亦随药物作用时间的延长而提高,分别为18.1%、20.6%、40.4%、83.4%。10mg/LATRA衍生物可明显诱导A549细胞凋亡,凋亡率达到40.9%,G0～G1期细胞比例明显下降,细胞凋亡峰较对照组明显提前,凋亡过程伴随Bcl-2表达下降,而Bax、Bak、酶原形式的Caspase-3、p53、NF-κB的表达无明显变化。结论ATRA衍生物对A549细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性;并诱导细胞凋亡,可能与Bcl-2蛋白的表达下调有关。     

热休克预处理抑制过氧化氢所致心肌细胞Smac的释放及细胞凋亡

目的 :探讨热休克预处理 (heatshockpretreatment,HS)对过氧化氢 (hydrogenperoxide ,H2 O2 )所致心肌细胞凋亡及促凋亡分子线粒体释放的第二种Caspase激活物 (thesecondmitochondria derivedactivatorofcaspases ,Smac)从线粒体释放的影响。方法 :①采用H2 O2 (0 .5mmol/L)导致心肌细胞凋亡 ;②采用热休克预处理 (4 2℃ ,1h ,恢复 12h)诱导热休克蛋白表达 ;③采用Hoechst荧光染色 ,观察细胞凋亡发生并计算凋亡核百分率 ;④采用cas pase活性定量检测及Western blotting观察caspase 3,9的活化 ;采用免疫荧光及Western blotting检测细胞成分分离后Smac从线粒体的释放。结果 :①H2 O2 处理 2h ,Smac从心肌细胞线粒体释放入胞浆 ;处理 4hcaspase 3,9活性升高 ,12h达高峰 ;处理 2 4h心肌细胞明显出现凋亡 ,凋亡核百分率明显升高 ;②热休克预处理可诱导心肌细胞中HSP90 ,HSP70及αB 晶状体蛋白的表达增高 ;抑制Smac释放、caspase 3,9的活化及细胞凋亡的发生。结论 :线粒体信号通路在H2 O2 所致的心肌细胞凋亡中发挥重要作用 ;热休克预处理通过抑制上述通路而减轻H2 O2 所致的细胞凋亡 ,其机制与其诱导热休克蛋白表达、阻断Smac从线粒体向胞浆释放、抑制caspase 3,9的活化有关。     

Effect of Dachengqi Tang granule on proliferation of intestinal epithelial cells in rats with experimental intestinal obstruction

Objective: To study the effects of Dachengqi Tang (DCQT) granule on the proliferation of the intestinal epithelial cells in rats with experimental intestinal obstruction.Methods: Experimental intestinal obstruction models were established in rats and autoradiography with³ H-TdR was used to determine³H-TdR labeling counts of intestinal epithelial cells in rats.Results: DCQT granule had no effects on³H-TdR labeling counts of intestinal epithelial cells in normal rats. DCQT granule obviously increases the rate of renovation in intestinal epithelial cells of the intestinal obstruction rats.Conclusion: DCQT granule could reinforce the intestinal mucosa’s defensive function by means of increasing the proliferation of intestinal epithelial cells. This project was supported by the State’s Key Projects of the Tenth Five-year Plan (No. 969030105)     

过氧化氢对肠上皮细胞线粒体的损伤作用

目的 观察过氧化氢对体外培养肠上皮细胞系SW－480线粒体的损伤作用。方法 以不同浓度的过氧化氢处理人肠上皮细胞株（SW－480），观察细胞形态学和线粒体超微结构的改变。以MTT法测定线粒体整体功能的变化。应用DNA凝胶电泳和Annexin-V及PI双标流式细胞术观察细胞凋亡的发生。应用免疫组织化学检测细胞色素c的释放。结果 400μmol/L过氧化氢在3h可引起线粒体整体功能的明显改变，但以后逐渐恢复。4mmol/L过氧化氢可引起线粒体整体功能不可逆的进行性下降；可引起线粒体空化，嵴肿胀，随着过氧化氢浓度的增加，线粒体的空化更加明显；可引起细胞发生凋亡。过氧化氢处理早期即出现细胞色素c的释放。结论 过氧化氢可引起肠上此细胞线粒体明显损伤，线粒体的结构和功能改变与细胞凋亡的发生密切相关。