多药耐药相关蛋白基因、肺耐药蛋白基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的　研究多药耐药相关蛋白基因 (MRP)和肺耐药蛋白基因 (LRP)在肝细胞癌 (HCC)中的表达及其与临床的关系。方法　采用SP免疫组化和PCR技术检测 5 4例HCC和 2 4例癌旁组织及 1 2 例肝炎后肝硬化组织中的两种基因表达。结果　MRP和LRP在 3种组织中均有表达,HCC组织中其基因表达显著高于其他组织 (P< 0. 0 5 )。HCC中两种基因表达呈正相关 (r= 0. 3 1 2, P <0. 0 5; r= 0. 3 2 8, P< 0. 0 5 );其表达与HCC的分化程度有关 (P< 0. 0 5 )。并且其表达阳性组患者化疗后AFP有效率和平均生存期分别高于和长于阴性组 (P< 0. 0 5 ),但LRP与平均生存期无关 (P> 0. 0 5 )。结论　HCC多药耐药 (MDR)与两种基因表达有关,起源于内源性耐药;检测其表达对预测化疗耐药具有指导意义;MRP可能与预后有关。     

原发性肝细胞癌肺耐药蛋白基因Irp表达及其意义

目的 :研究肺耐药蛋白基因Irp在原发性肝细胞癌 (PHC)化疗中产生的多药耐药机制及其与PHC的临床病理关系 ,对甲胎蛋白 (AFP)的影响和术后预后的意义。方法 :采用S P免疫组织化学法和原位PCR技术对 5 4例未化疗的PHC、2 4例PHC癌旁和 12例肝炎后肝硬化存档石蜡包埋组织中Irp基因编码的LRP和mRNAIrp的表达进行检测 ,对术后 2 4例AFP阳性的PHC病人进行术后化疗 ,分析Irp基因表达与AFP变化关系。 结果 :LRP和mRNAIrp在 3种组织中的阳性表达率分别为6 1.1%,33.3%,16 .7%和 75 .9%,37.5 %,33.3%,PHC组织中Irp基因表达显著高于其他组织 (P <0 .0 5 )。Irp基因表达与PHC的分化程度有关 (P <0 .0 5 ) ,与PHC病人的年龄、性别、肿瘤大小等临床病理资料无关 (P >0 .0 5 )。Irp基因表达阳性组病人术后化疗AFP有效率显著低于Irp基因表达阴性组病人 (P <0 .0 5 )。术后随访Irp基因表达阴性组病人平均生存时间长于阳性组病人 ,但无统计学意义(P >0 .0 5 )。结论 :PHC多药耐药 (MDR)与Irp基因表达有关 ,Irp基因可作为临床化疗耐药指标 ,检测Irp基因表达有助于PHC个体化疗方案制订 ,并为MDR逆转提供依据。Irp基因表达与PHC的分化程度有关 ,可能与病人的预后无关。     

原发性肝细胞癌与多药耐药相关蛋白基因mrp临床意义的相关研究

目的:研究多药耐药相关蛋白基因mrp的表达与原发性肝细胞癌(PHC)的临床病理特征、对甲胎蛋白(AFP)的影响及预后的意义.方法:应用S-P免疫组织化学方法和原位PCR(ISRCR)方法对54例未化疗PHC、24例PHC癌旁和12例肝炎后肝硬化存档石蜡包埋切片组织中mrp基因编码的MRP蛋白和mRNAmrp表达进行检测,对术后24例AFP阳性的PHC病人进行术后化疗,分析mrp基因表达与AFP变化的关系,并对54病人术后随访.结果:mrp和mRNAmrp在3种组织中的阳性表达率分别为57.4%,25.0%,16.7%和72.2%,37.5%,33.3%,PHC组织中mrp基因表达显著高于其他组织(P＜0.05).mrp基因表达与PHC病的年龄、性别、肿瘤大小等临床病理资料无关(P＞0.05),与PHC的分化程度有关(P＜0.05).mrp基因表达阴性组病人化疗后AFP有效率显著高于阳性组(P＜0.05).mrp基因表达阳性组术后生平均存期显著短于阴性组(P＜0.05),但两组1、3、5年生存率无显著差异(P＞0.05).结论:PHC的化疗耐药与mrp基因表达有关,检测mrp基因表达对肝癌化疗有指导意义,并为mrp耐药逆转提供理论依据.mrp基因表达与PHC肿瘤分化程度、术后平均生存期有关,有望作为判断PHC预后的一个生物学指标.     

肝细胞癌肺耐药蛋白基因的表达及临床意义

目的研究肺耐药蛋白 (lungresistance protein ,LRP)基因LRP在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma ,HCC)中产生的多药耐药机制 ,及其与预后的关系。方法采用SP免疫组织化学法和原位PCR技术对 5 4例未化疗的HCC ,2 4例癌旁和 12例肝炎后肝硬化组织中LRP编码的LRP和mRNAlrp的表达进行检测 ,对术后 2 4例AFP阳性的HCC患者进行术后化疗 ,分析LRP表达与AFP变化关系。结果LRP和mRNAlrp在 3种组织中的阳性表达率分别为 6 1%、33%、17%和 76 %、38%、33%。HCC组织中LRP表达显著高于其他组织 (CMH统计量为 9 32 ,10 96 ,P值均小于 0 0 1)。LRP表达与HCC的分化程度有关 (CMH统计量为 4 2 7,6 71,P值分别小于 0 0 5、0 0 1)。LRP ,mRNAlrp表达阳性组患者术后化疗AFP下降率 [有效率分别为 2 0 % (3/ 15 ) ,2 5 % (4 /16 ) ],显著低于LRP及mRNAlrp表达阴性组 [有效率分别为 78% (7/ 9)及 88% (7/ 8) (P值分别小于 0 0 5、0 0 1) ]。术后随访mRNAlrp表达阳性组患者术后平均生存为 (36± 10 )个月 ,而阴性组为(4 5± 11)个月 (t=2 6 76 0 ,P <0 0 1)。结论HCC化疗多药耐药与其LRP表达有关 ,LRP表达也与HCC的分化程度有关 ,检测LRP表达对预测化疗耐药具有指导意义。     

肺耐药相关蛋白基因及基因产物在膀胱移行细胞癌中的表达

目的探讨肺耐药相关蛋白(LRP)在膀胱癌组织中的表达及与临床病理参数的关系。方法用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,检测66例(Ta期12例,T1期26例,T2期11例,T3期10例,T4期7例;G135例,G219例,G312例)术前未经任何治疗的原发膀胱癌患者癌组织及正常组织中LRP、多药耐药基因1(MDR1)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)mRNA表达,并用免疫组化法检测LRP、P53和P63蛋白的表达情况。结果(1)膀胱癌标本中,,LRPmRNA的表达率最高(64%,42/66);(2)LRPmRNA水平,正常膀胱组织(142±036)高于膀胱癌组织(080±033,t=282,P<001);低分级膀胱癌组织(G1为139±042)高于高分级癌组织(G2、G3为072±031,t=414,P<001),浅表膀胱癌组织(136±039)高于浸润癌组织(068±030,t=358,P<005);(3)LRPmRNA表达与MDR1或MRP1表达无关,但与其自身的蛋白表达密切相关(r=089,P<001);(4)LRP蛋白表达与低分级、低分期相关(r=081,P<001;r=078,P<005),但与P53、P63表达无关(P>005)。结论膀胱癌组织中,LRPmRNA与蛋白表达一致,且与肿瘤进展有关,可能是膀胱癌内源性多药耐药的预测指标。     

c-jun氨基末端激酶与多药耐药蛋白在胃癌组织中的表达及其意义

目的 研究c-jun氨基末端激酶(e-jun N-terminal kinase,JNK)的磷酸化活性形式p-JNK与多药耐药蛋白P糖蛋白(p-glycoprotein,P-gP)、多药耐药相关蛋白1(multidrng resistance associated proteinl,MRP1)和肺耐药相关蛋白(lung resistance protein,LRP)在胃癌组织中的表达及p-JNK在胃癌耐药中的作用.方法 通过免疫组化方法研究168例胃癌和27例正常胃组织的组织芯片中p-JNK和P-gP、MRP1、LRP的表达及其关系.结果 p-JNK和耐药蛋白P-gP、MRP1、LRP在胃癌组织中的阳性表达率分别为45.8%、51.8%、45.8%和55.4%,均明显高于在正常胃组织中的表达.p-JNK与肿瘤大小、浸润深度、脉管浸润、淋巴结转移和远处转移显著相关.p-JNK与P-gP和MRPl表达正相关(P＜0.01).Kaplan-Meier分析显示p-JNK和P-gp、MRP1阳性组的预后较阴性组差(P＜0.01).结论 p-JNK高表达参与胃癌的恶性生物学行为,通过上调耐药蛋白P-gp和MRP1的表达参与胃癌化疗耐药的形成;p-JNK可成为评价胃癌预后和耐药的有价值指标.     

胰腺癌与多药耐药基因LRP的相关性研究

近年来胰腺癌发病率持续增加，早期诊断困难，术后易复发，预后差、‘。成功的肿瘤切除和有效的化疗是当今治疗胰腺癌的主要手段。化疗耐药是引起化疗失败的一个重要因素。化疗耐药不仅与MDR1(muhidrug resistance 1，MDR1)，MRP(multidrug resistance associated protein gene，MRP)和GST-(glutathione S-transferase Pi，GST-)等耐药基因有关，还与LRP     

多药耐药基因在原发性肝癌的表达及其临床意义

目的 探讨多药耐药基因（MDR）在原发性肝癌中的表达及其临床意义。方法 取肝细胞癌标本64例，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法半定量检测肝癌多种多药耐药基因的基因表达情况，分析其临床意义。结果 （1）各多药耐药基因的表达率高，各耐药基因的表达率差异无统计学意义。（2）各多药耐药基因的表达量差异无统计学意义。（3）MDRl、多药耐药相关蛋白（MRP）、谷胱甘肽S转移酶（GST）-π和肺耐药蛋白（LRP）的mRNA表达量有随分级而增高的趋势；DNA拓扑异构酶（TOPOⅡ）的mRNA表达量有随分级而下降的趋势。（4）肝癌MDR基因mRNA表达量与肿瘤大小、有无转移、有无包膜和结节数目有关，与AFP水平、肝硬化情况、肝功能状况无关。（5）在有效组中MDR1、MRP、GST-Ⅱ LRP mRNA的表达量低于无效组；TOPOⅡ mRNA的表达量有效组高于无效组，差异无统计学意义。结论 在肝癌多药耐药基因mRNA的表达率高；在肝癌多药耐药的基因mRNA的表达与肿瘤大小、有无转移、结节数目、有无包膜相关，与化疗的疗效相关。     

胃癌新辅助化疗前后多药耐药基因的表达及其与化疗敏感性的关系

目的 探讨6种多药耐药基因:G谷胱甘肽S转移酶(GST-π)、肺耐药相关蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)、拓扑异构酶Ⅱ(Topo Ⅱ)、多药耐药基因蛋白(P-gP)、胸苷酸合成酶(TS)在胃癌新辅助化疗前后的表达及其与化疗敏感性的关系,寻求建立化疗敏感性的预测指标.方法 采用免疫组化方法评价35例胃癌新辅助化疗前后6种多药耐药基因的表达情况,分析各耐药基因表达与化疗疗效的关系.对所有患者均行FOLFOX4方案化疗,以WHO实体瘤疗效评价标准评价疗效.结果 本组35例患者中1例完全缓解(3%),15例部分缓解(43%),16例病情稳定(46%),3例病情进展(9%),新辅助化疗有效率为46%.35例患者肿瘤标本中6种多药耐药基因的表达情况:GST-π阳性率为40%,LRP阳性率为69%,MRP阳性率为34%,TopoⅡ阳性率为37%,P-gp阳性率为86%,TS阳性率为40%.GST-π、LRP、MRP、Topo Ⅱ、P-gP的表达与化疗敏感性无关(P>0.05),TS的表达与化疗敏感性有关(P=0.0048).结论 FOLFOX4方案新辅助化疗不影响6种多药耐药基因GST-π、LRP、MRP、Topo Ⅱ、P-gP及TS的表达;TS的表达与化疗敏感性有关,有可能成为评估胃癌化疗敏感性的重要指标.     

LRP、P-gp、GST-π、TopoⅡ在肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨多药耐药(MDR)基因产物肺耐药蛋白(LRP)、P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在肺癌中的表达及其临床意义. 方法应用单克隆抗体、免疫组化技术SP法, 对58例肺癌标本进行上述4种MDR指标检测. 结果在肺癌组织中LRP、P-gp、GST-π、TopoⅡ表达的阳性率分别为79.3%、70.7%、82.8%和84.5%,其表达与性别、年龄、部位、临床分期无关(P>0.05);在未分化、小细胞型肺癌中LRP、P-gp、GST-π表达的阳性率明显降低(P<0.05);鳞癌、腺癌、支气管肺泡癌与小细胞癌相比,LRP、GST-π表达的强度明显增高(P<0.05);LRP、GST-π的表达强度随分化程度的降低而降低,TopoⅡ的表达强度随分化程度的降低而升高(P<0.05). 结论 LRP、P-gp、GST-π、TopoⅡ在未化疗过的肺癌组织中均有不同程度的高表达,且与肺癌的某些生物学行为有关,联合检测有助于化疗药物的选择及预后的判断.     

安徽地区绝经后妇女低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因多态性与骨密度的关系

目的研究安徽地区绝经后妇女低密度脂蛋白受体相关蛋白5基因（LRP5）Q89R和A1330V多态性位点与骨密度的关系。方法采用PCR-限制性片段长度多态性（PCR．RFLP）方法检测安徽地区247名绝经后妇女LRP5基因Q89R和A1330V多态性位点的基因型,双能X线骨密度仪测定腰椎和股骨的骨密度。结果本研究人群中,LRP5基因Q89R和A1330V多态性呈连锁不平衡（x^2=24、48,P〈0．01）。Q89R位点QR组的股骨颈、Ward’s三角和大转子区骨密度明显低于QQ组,A1330V位点AV/VV组的股骨颈骨密度明显低于AA组。在调整年龄、身高、体重、BMI以及绝经年限这些影响因素后,Q89R多态位点与股骨颈和大转子区骨密度显著相关（P〈0．05）,而A1330V多态性位点则与各位点的骨密度均无相关性。结论LRP5基因Q89R多态性位点可能对绝经后妇女骨密度有影响,提示LRP5基因是影响骨密度的候选基因之一。     

多药耐药相关蛋白在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的 研究人肝细胞癌组织中多药耐药相关蛋白（ＭＲＰ）的表达情况并探讨其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法检测了１１０例随访资料完整的肝细胞癌石蜡切片组织中ＭＲＰ表达情况，并与临床病理指标联系，进行统计学分析。结果 本组肝细胞癌１１０例，表达阳性５７例，其阳性率为５２％。术前行经肝动脉栓塞化疗（ＴＡＣＥ）及未行ＴＡＣＥ治疗者的ＭＲＰ阳性率分别为５１％（１９／３７）和５２％（３８／７３）。ＭＲＰ与癌     

Clinical Phenotype and Relevance of LRP5 and LRP6 Variants in Patients With Early-Onset Osteoporosis (EOOP)

Reduced bone mineral density (BMD; ie, Z-score ≤−2.0) occurring at a young age (ie, premenopausal women and men <50 years) in the absence of secondary osteoporosis is considered early-onset osteoporosis (EOOP). Mutations affecting the WNT signaling pathway are of special interest because of their key role in bone mass regulation. Here, we analyzed the effects of relevant LRP5 and LRP6 variants on the clinical phenotype, bone turnover, BMD, and bone microarchitecture. After exclusion of secondary osteoporosis, EOOP patients (n = 372) were genotyped by gene panel sequencing, and segregation analysis of variants in LRP5/LRP6 was performed. The clinical assessment included the evaluation of bone turnover parameters, BMD by dual-energy X-ray absorptiometry, and microarchitecture via high-resolution peripheral quantitative computed tomography (HR-pQCT). In 50 individuals (31 EOOP index patients, 19 family members), relevant variants affecting LRP5 or LRP6 were detected (42 LRP5 and 8 LRP6 variants), including 10 novel variants. Seventeen variants were classified as disease causing, 14 were variants of unknown significance, and 19 were BMD-associated single-nucleotide polymorphisms (SNPs). One patient harbored compound heterozygous LRP5 mutations causing osteoporosis-pseudoglioma syndrome. Fractures were reported in 37 of 50 individuals, consisting of vertebral (18 of 50) and peripheral (29 of 50) fractures. Low bone formation was revealed in all individuals. A Z-score ≤−2.0 was detected in 31 of 50 individuals, and values at the spine were significantly lower than those at the hip (−2.1 ± 1.3 versus −1.6 ± 0.8; p = .003). HR-pQCT analysis (n = 34) showed impaired microarchitecture in trabecular and cortical compartments. Significant differences regarding the clinical phenotype were detectable between index patients and family members but not between different variant classes. Relevant variants in LRP5 and LRP6 contribute to EOOP in a substantial number of individuals, leading to a high number of fractures, low bone formation, reduced Z-scores, and impaired microarchitecture. This detailed skeletal characterization improves the interpretation of known and novel LRP5 and LRP6 variants. © 2020 The Authors. Journal of Bone and Mineral Research published by Wiley Periodicals LLC on behalf of American Society for Bone and Mineral Research (ASBMR).     

胰腺癌多药耐药细胞株BxPC-3/ADM的建立及耐药机制的初步探讨

目的 构建胰腺癌多药耐药细胞株BxPC-3/ADM,通过动态监测诱导耐药过程,探讨其耐药的可能机制.方法 逐步增加阿霉素浓度对BxPC-3细胞进行诱导,在不同的阿霉素诱导浓度,MTT法检测细胞对多种化疗药物的耐药指数,RT-PCR和Western印迹法检测细胞MDR1和MRP mRNA和蛋白的表达.结果 成功构建多药耐药细胞株BxPC-3/ADM;在0.05 μg/ml至8 μg/ml阿霉素诱导浓度,细胞对5-Fu、MMC和Gem的耐药指数无明显增加;在16 μg/ml浓度3种化疗药物的耐药指数有较明显上升,同时伴有MDR1 mRNA表达的明显增加;至32 μg/ml 5-Fu和Gem的耐药指数未再有继续上升,而MMC的耐药指数则继续上升,同时MDR1 mRNA表达未再增加,而MRP mRNA表达则明显增加.Western印迹实验显示MDR1和MRP蛋白表达变化与mRNA表达变化趋势一致.结论 MDR1基因在诱导早期的耐药中起主导作用,在后期则和MRP基因协同发挥作用.     

LRP5 gene polymorphisms and idiopathic osteoporosis in men

Mutations in the low-density lipoprotein receptor-related protein 5 gene (LRP5) have demonstrated the role of LRP5 in bone mass acquisition. LRP5 variants were recently reported to contribute to the population-based variance in vertebral bone mass and size in males. To investigate whether LRP5 variants are implicated in idiopathic male osteoporosis, we studied 78 men with low BMD (<2.5 T score or < −2 Z score) aged less than 70 years (mean ± SD: 50 ± 16 years) in whom secondary causes of osteoporosis had been excluded and 86 controls (51 ± 10 years). Genotypes and haplotypes were based on LRP5 missense substitutions in exons 9 (c.2047G > A, p.V667M) and 18 (c.4037C > T, p.A1330V), and their association with osteoporosis evaluated after adjustment for multiple clinical and environmental variables using logistic regression. The presence of osteoporosis was significantly associated with LRP5 haplotypes (P = 0.0036) independent of age (P = 0.006), weight (P = 0.004), calcium intake (P = 0.002), alcohol (P = 0.005) and tobacco (P = 0.004) consumption. Accordingly, the odds ratio for osteoporosis was 3.78 (95% CI 1.27–11.26, P < 0.001) in male carriers of haplotype 3 (c.2047A–4037T, n = 20 cases and 12 controls) versus homozygous carriers of haplotype 1 (c.2047G–4037C, n = 42 cases and 61 controls). In conclusion, these data indicate beyond a significant role for environmental factors, an association between LRP5 variants and idiopathic osteoporosis in males, pointing to a role of LRP5 in this disease.     

FDPS､LRP5基因多态性与绝经后妇女骨质疏松的关系

目的探讨FDPS、LRP5基因多态性与绝经后妇女骨质疏松的关系。方法在2017年6月至2019年8月期间,共纳入364名绝经后妇女,其中228名确诊为骨质疏松症(OP),为骨质疏松组,另136名骨质正常者为对照组。收集所有参与者的临床数据和血液样本,分别采用Taq Man荧光探针及限制性片段长度多态性(PCR-RELP)法对FDPS rs2297480、LRP5rs3736228位点进行基因分型,统计其与骨密度(BMD)和骨质疏松的关系。结果 FDPS rs2297480 TT基因型腰椎和全髋关节的BMD值明显较低,T等位基因的存在与骨质疏松症有显著相关性。LRP5 rs3736228携带CC基因型的股骨颈和全髋关节骨密度值较低。结论在绝经后的骨质疏松症妇女中,BMD和FDPS基因多态性之间有很强的相关性,与LRP5基因多态性之间存在较低的关连。