超高效液相色谱-串联质谱法测定厄贝沙坦和氯沙坦钾原料药中3种叠氮类基因毒性杂质

目的:建立厄贝沙坦原料药和氯沙坦钾原料药中5-[4′-(叠氮甲基)-[1,1′-联苯]-2-基]-1H-四氮唑(MB-X),4′-叠氮甲基-[1,1′-联苯]-2-氰基(AZBC)和5-[4′-[(5-(叠氮甲基)-2-丁基-4-氯-1H-咪唑-1-基)甲基]-[1,1′-联苯]2-基]-1H-四唑(LADX)这3种叠氮类基因毒性杂质的超高效液相色谱-串联(UPLC-MS/MS)三重四级杆质谱的检测方法。方法:ACQUITY UPLC HSS T3(100 mm×2.1 mm, 1.8μm)色谱柱；0.1%甲酸水溶液为流动相A,0.1%甲酸的甲醇溶液为流动相B,梯度洗脱；流速为0.35 mL·min^-1,柱温为50℃;采用大气压化学离子源(APCI)正/负离子扫描，多反应监测(MRM)模式对3种基因毒性杂质同时进行定量检测。结果:3种杂质在0.5～100 ng·mL^-1范围内具有良好的线性关系；检测限分别为0.05,0.03,0.02 ng·mL^-1,定量限分别为0.15,0.11,0.08 ng·mL^-1     

4’-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯的合成

目的：合成4’-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯。方法；以2-氰基-4’-甲基联苯为原料，经水解，酯化，溴代3步反应合成4’-溴甲基-2联苯甲酸甲酯。结果：合成了4’-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯，总收率70％。结论：本合成方法提高了反应收率，简化了操作，降低了成本。     

LC-MS/MS测定艾司奥美拉唑钠中潜在基因毒性杂质2-氯甲基-3,5-二甲基-4-甲氧基吡啶

摘要：目的:建立LC-MS/MS法测定艾司奥美拉唑钠中潜在基因毒性杂质2-氯甲基-3,5-二甲基-4-甲氧基吡啶。方法:色谱柱为Poroshell 120 EC-C18柱（50 mm×4.6 mm,2.7μm）,柱温:30℃,流动相为水-乙腈（60∶40）（含0.2%甲酸）,流速:0.5 ml·min-1。采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测模式（MRM）进行正离子扫描,定量离子对为质荷比（m/z） 186→150.2,定性离子对为质荷比（m/z） 186→120.1。结果:在该色谱条件下,2-氯甲基-3,5-二甲基-4-甲氧基吡啶在0.825 8～165.166 7 ng·ml-1浓度范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为90.2%（RSD=1.6%,n=9）,检测限为0.330 3 ng·ml-1,方法检测限为0.033μg·g-1。结论:该分析方法简便高效,能有效准确的测定艾司奥美拉唑钠中的潜在基因毒性杂质2-氯甲基-3,5-二甲基-4-甲氧基吡啶。     

HPLC法测定缬沙坦中的遗传毒性杂质

目的：建立缬沙坦中潜在的遗传毒性杂质2-氰基-4''-溴甲基联苯（杂质1）和2-氰基-4'',4''-二溴甲基联苯（杂质2）的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱为C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm)，流动相为乙腈-水-冰乙酸（700:300:1），检测波长210nm，流量0.8 mL?min-1，柱温30 ℃，进样量20 μL。结果：杂质1和杂质2与主成分之间分离度良好，在0.045-~0.18 μg?mL-1的浓度范围内杂质1和杂质2的峰面积呈良好的线性关系（ 相关系数分别为1.000和0.999 5）；杂质1和杂质2的平均回收率分别为96.57%和107.38%，RSD（n=9）分别为1.9%和7%。结论：所建方法简单、准确、重复性好，适用于缬沙坦中的遗传毒性杂质检测。     

UPLC-MS/MS法测定维格列汀中4-二甲氨基吡啶

目的 建立超高效液相色谱串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定维格列汀中基因毒性杂质4-二甲氨基吡啶。方法 采用Waters ACQUITY BEH HILIC(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为乙酸盐缓冲溶液（10 mmol/L乙酸铵溶液,乙酸调至pH 4.0）-乙腈（体积比10∶90）;流速0.3 ml/min,柱温30℃;采用电喷雾离子源（ESI）正离子扫描,以监测模式为多反应监测模式（MRM）,定量离子对为123.2→107.1(m/z)进行检测。结果 4-二甲氨基吡啶浓度在0.55～10.98 ng/ml范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.9993）;定量限为0.02 ng/ml;检出限为0.005 ng/ml;平均加样回收率为91.06%,RSD为1.25%(n=9)。结论 本方法专属性强、灵敏度高、准确度好,可用于维格列汀原料药中4-二甲氨基吡啶的测定     

气相色谱串联质谱法测定苯甲酸阿格列汀中苯甲醛、苯甲醇、2-氰基溴苄和三正丁胺的含量

本试验建立了气相色谱串联质谱法测定苯甲酸阿格列汀中基因毒性杂质苯甲醛、苯甲醇、2-氰基溴苄和三正丁胺的分析方法。采用6%氰丙基苯-94%二甲基硅氧烷为固定相(DB-624,0.32 mm×30 m,1.8μm),用多反应监测模式检测。结果显示4种待测物均具有较好的线性关系,相关系数r≥0.9992,检测限均为2 ng/ml,平均回收率在90%~100%,且供试品溶液、杂质对照品溶液和系统适用性溶液在室温(25℃)放置12 h内稳定。3批生产规模样品中均未检出2-氰基溴苄、苯甲醛、苯甲醇和三正丁胺。说明本试验建立的分析方法灵敏度高、分离度好、结果准确,可有效分离并测定苯甲酸阿格列汀中的4种潜在毒性杂质,为其质量控制提供保障。     

水合肼还原制备3-氨基-2-[(2'-氰基联苯-4-基)甲基]氨基-苯甲酸乙酯的工艺研究

目的研究3-氨基-2-[(2’-氰基联苯-4-基)甲基]氨基-苯甲酸乙酯的最优合成工艺。方法以2-[(2’-氰基联苯-4-基)-甲基]氨基-3-硝基苯甲酸乙酯为原料,水合肼为还原剂,Pb/C为催化剂,还原制得。结果原料与还原剂的最佳物质的量比为1.92:1,催化剂Pd/C为1.2g,反应温度为75℃,反应时间2h的最优条件下,收率为92.0%。结论本合成工艺稳定,条件温和,产率高,适合3-氨基-2-[(2’-氰基联苯-4-基)甲基]氨基-苯甲酸乙酯的工业化生产。     

LC-MS/MS法测定厄贝沙坦中基因毒性杂质N-亚硝基二甲胺和N-亚硝基二乙胺

建立同时检测厄贝沙坦中N-亚硝基二甲胺(NDMA)和N-亚硝基二乙胺(NDEA)的液质联用(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)方法。选择大气压电离串联四极杆质谱(APCI+MRM)模式进行检测,流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸甲醇溶液梯度洗脱。结果表明该方法专属性良好,标准曲线线性范围分别为1~120 ng·mL^-1(NDMA)和0.4~48 ng·mL^-1(NDEA);检测限浓度分别为0.5 ng·mL^-1(NDMA)和0.2 ng·mL^-1(NDEA);精密度RSD均<3.0%;准确度为96.1%~106.2%,重复性良好;样品的提取回收率分别为102.5%(NDMA)和99.9%(NDEA);对照溶液在进样器和0℃下放置24 h后稳定。该方法简单灵敏准确,可以较好地满足厄贝沙坦原料药生产中基因毒性杂质NDMA和NDEA的检验。     

HPLC测定N-三苯基甲基-5-(4'-溴甲基联苯-2-基)四氮唑中的有关物质

目的 采用HPLC法测定N-三苯基甲基-5-(4'-溴甲基联苯-2-基)四氮唑中的有关物质.方法 采用Hypersil BDS C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(75∶25),检测波长220 nm,流速1.0 mL· min-1,柱温30℃.结果 0.0199 ～498.4 μg·mL-1N-三苯基甲基-5-(4'-溴甲基联苯-2-基)四氮唑与峰面积的线性关系良好(r=0.9999),检测限为0.106 ng,定量限为0.318 ng.结论 所用方法准确、灵敏、快速,适用于N-三苯基甲基-5-(4'-溴甲基联苯-2-基)四氮唑中有关物质的检查.     

基于UPLC MS/MS对盐酸表阿霉素中14-溴-4'-表柔红霉素的质量控制

建立超高效液相色谱-三重四级杆质谱（UPLC MS/MS）对盐酸表阿霉素中14-溴-4’-表柔红霉素质量控制的方法。采用Waters ACQUITY UPLC?BEH C18色谱柱进行分离,以0.1%甲酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,质谱检测器,流速为0.3mL/min。经验证14-溴-4’-表柔红霉素的线性范围为0.5474～10.9484ng/mL,相关系数r=0.9999,方法检出限浓度为0.1642ng/mL,定量限浓度为0.5474ng/m L,样品加标回收率在99.0%～101.3%。可用于快速、简便、灵敏、准确地测定盐酸表阿霉素中14-溴-4’-表柔红霉素的含量。     

甲磺酸伏美替尼中间体AST 2815中4个基因毒性杂质检测

目的:通过中间体检测的控制策略,建立甲磺酸伏美替尼关键中间体N²-(2-(二甲胺基)乙基-N²-甲基-N⁵-(4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡啶-2,3,5-三胺(AST 2815)质量标准中氯甲烷、氯乙烷、乙酰胺、4-氯-1-丁醇4个基因毒性杂质的检测方法,从而降低在终产品中的残留风险。方法:建立气相色谱-氢火焰离子化检测器(GC-FID)法,同时检测甲磺酸伏美替尼关键中间体AST 2815中氯甲烷、氯乙烷、乙酰胺3个基因毒性杂质;建立气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法,检测AST 2815中的4-氯-1-丁醇。结果:氯甲烷、氯乙烷、乙酰胺、4-氯-1-丁醇分别在5.246～104.9、5.228～104.6、2.034～40.68、0.016 05～0.321 1μg·mL^-1浓度范围内,峰面积与质量浓度线性关系良好,r均大于0.999;方法定量限分别为0.016%、0.016%、0.041%、0.000 054%;方法检测限分别为0.0...     

超高效液相色谱-串联质谱法测定氯氮平中基因毒性杂质

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS),测定氯氮平中基因毒性杂质。方法 采用Inert Sil-ODS-3(75 mm×4.6 mm×3 mm)色谱柱;以0.1%甲酸水溶液和乙腈为流动相,流速为0.7 mL·min^-1;质谱采用ESI负离子模式,进行多反应监测。结果 通过外标法计算,邻氨基苯甲酸、环合物缩合物和环合物酸析物分别在20～100、0.16～3.2、0.48～3.2 ng·mL^-1范围内线性良好;低(80%)、中(100%)、高(120%)3个浓度的加样回收率为90.8%～117.2%,相对标准偏差(RSD)为3.9%～12.8%;检测限范围为0.08～10 ng·mL^-1,邻氨基苯甲酸、环合物缩合物和环合物酸析物的定量限分别是20、0.16、0.48 ng·mL^-1。不同批次样品检测结果均低于限度值。结论本方法操作简便,结果可靠,适用于氯氮平中基因毒性杂质检测。     

4＇-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯的合成

目的:合成4′-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯.方法:以2-氰基-4′-甲基联苯为原料,经水解,酯化,溴代3步反应合成4′-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯.结果:合成了4′-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯,总收率70%.结论:本合成方法提高了反应收率,简化了操作,降低了成本.     

4′-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯的合成

目的:合成4′-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯。方法:以2-氰基-4′-甲基联苯为原料,经水解,酯化,溴代3步反应合成4′-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯。结果:合成了4′-溴甲基-2-联苯甲酸甲酯,总收率70%。结论:本合成方法提高了反应收率,简化了操作,降低了成本。     

厄贝沙坦的合成

环戊酮与氰化钠反应制得1-氨基环戊腈，成盐、水解成酰胺后与戊酰氯反应制得2-丁基-1，3-二氮杂螺[4-4]壬-1-烯-4-酮，相转移催化条件下与4’-溴甲基-2-氰基联苯反应制得2-丁基-3-[（2’-氰基联苯-4-基）甲基]-1，3-二氮杂螺[4-4]壬-1-烯-4-酮，最后与叠氮化钠反应制得厄贝沙坦，总收率约39％。     

HPLC-MS法分析甲苯磺酸拉帕替尼中痕量基因毒性杂质

目的:建立液相色谱-质谱联用方法测定甲苯磺酸拉帕替尼中基因毒性杂质的含量。方法:采用色谱柱C18(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸溶液-乙腈(20∶80)为流动相,流速1.0 m L·min-1,电喷雾离子化(ESI)正离子模式下选择m/z252离子进行检测。结果:基因毒性杂质4-(3-氟苯甲氧基)-3-氯苯胺质量浓度在0.08~8 ng·m L-1范围内,与峰面积线性关系良好(r=1.000);检测限为0.003 6 ng,定量限为0.010 7 ng;样品中基因毒性杂质测定结果的重复性良好,RSD(n=6)为7.5%;基因毒性杂质平均回收率(n=9)为96.6%。结论:本方法操作简便,结果可靠,可以用于甲苯磺酸拉帕替尼中基因毒性杂质4-(3-氟苯甲氧基)-3-氯苯胺含量的检测。     

正相高效液相色谱法测定IMH中氯代烷烃类遗传毒性杂质氯代物

目的:建立抗脂肪肝治疗药4,4’-二甲氧基-5,6,5’,6’-双(亚甲二氧基)-2’-吗啉亚甲基联苯-2-甲酸甲酯甲磺酸盐(简称IMH)中氯代烷烃类遗传毒性杂质4,4’-二甲氧基-5,6,5’,6’-双(亚甲二氧基)-2’-氯甲基-2-甲酸甲酯(简称氯代物)的分析方法。方法:采用正相高效液相色谱(NP-HPLC)法,选用Phenomenex Luna~? Silica色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以正己烷-异丙醇(95∶5)为流动相,流速0.8 mL·min^-1,检测波长226 nm,柱温35℃,进样量50μL;采用外标法对氯代物进行定量。结果:在水相中易分解的氯代物在该正相色谱方法条件下能够达到有效分离,专属性良好;氯代物质量浓度在0.03～3.0μg·mL^-1的范围内呈现良好的线性关系,检测限和定量限分别为0.15 ng和0.31 ng;平均回收率处于99%～103%,精密度及溶液稳定性良好。3批实测样品中均未检出氯代物,表明后续工艺能有效清除本品中的氯代物。结论:该色谱方法快速、准确、灵敏,能够对IMH中的氯代物进行...     

UPLC-MS/MS测定布洛芬中的潜在遗传毒性杂质(2RS)-2-(4-甲酰基苯基)丙酸

摘要：目的:建立UPLC-MS/MS法测定布洛芬中潜在基因毒性杂质（2RS）-2-（4-甲酰基苯基）丙酸。方法:色谱柱：Agilent Poroshell 120 EC-C18柱（150 mm×4.6 mm, 2.7μm）,柱温：40℃;流动相A:0.1%甲酸水溶液,流动相B:0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱;流速0.5 ml·min-1;采用电喷雾离子源（ESI）,以多反应监测模式（MRM）进行正离子扫描,定量离子对为m/z 179→105,定性离子对为m/z 179→133。结果:在该色谱条件下,（2RS）-2-（4-甲酰基苯基）丙酸专属性好,在1.160 5～29.012 5 ng·ml-1浓度范围内线性关系良好（r=0.997 1）,平均回收率为109.1%（RSD=3.9%,n=9）,检测限为0.464 2 ng·ml-1,方法检测限为0.000 001 9%。结论:该分析方法简便高效,能有效准确的测定布洛芬中的潜在基因毒性杂质（2RS）-2-（4-甲酰基苯基）丙酸。     

UPLC-MS/MS测定酒石酸伐尼克兰中基因毒性杂质N-亚硝基伐尼克兰

目的 建立酒石酸伐尼克兰原料药和片剂中基因毒性杂质N-亚硝基伐尼克兰超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)的检测方法。方法 采用ACQUITY UPLC^? CSH^TM Phenyl-Hexyl(150 mm×3.0 mm,1.7μm)色谱柱;0.1%甲酸水溶液为流动相A,0.1%甲酸的甲醇溶液为流动相B,梯度洗脱;流速为0.45 mL·min^–1,柱温为50℃;采用ESI离子源正离子扫描,多反应监测(MRM)模式下,对基因毒性杂质进行定量检测。结果 杂质在0.10～10.04ng·mL^–1具有良好的线性关系;原料药的低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)分别为103.58%(RSD=3.30%),98.65%(RSD=2.73%),92.00%(RSD=1.98%);片剂的低、中、高3个浓度的加样回收率(n=3)为91.53%(RSD=0.78%),96.76%(RSD=3.12%),93.01%(RSD=2.21%);检测限与定量限分别为0.014 ng·mL^–1<...     

3α-羟基-7-氧代-胆烷酸有关物质分析方法的建立

目的：建立3α-羟基-7-氧代-胆烷酸有关物质的分析方法。方法：以碳十八烷基键合硅胶柱为填充剂,以0.05%的磷酸水溶液和乙腈为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为202nm。 结果：3α-羟基-7-氧代-胆烷酸样品溶液的色谱图中主峰与已知杂质之间和各已知杂质之间均能有效分离,3α-羟基-7-氧代-胆烷酸、杂质01、杂质04、杂质05和杂质06-A分别在1.00～24.97 μg.mL-1(r =0.9999),1.00～50.05 μg.mL-1(r =0.9999),0.75～25.04 μg.mL-1(r =0.9999),1.01～5.02 μg.mL-1(r =0.9998),1.00～9.98 μg.mL-1(r =0.9999)的浓度范围内与峰面积成良好的线性关系;检测限分别为12.5ng,12.5ng,10ng,12.5ng,12.5ng。