PPARα对糖基化终产物诱导的大鼠血管平滑肌细胞的作用

目的:观察氯贝特对糖基化终产物(AGEs)刺激下的离体大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用以及对过氧化物酶体增生物激活受体α(PPARα)基因及蛋白表达水平的影响,探讨PPARα在AGEs诱导VSMCs增殖中的作用。方法:体外培养大鼠VSMCs,应用不同浓度的AGEs分别刺激VSMCs并设立对照组进行比较,采用MTT法观察不同浓度的AGEs对VSMCs增殖的影响及氯贝特与AGEs共孵育对VSMCs增殖的干预作用,并用流式细胞仪检测细胞周期,RT-PCR检测PPARα的mRNA表达,Western blotting分析PPARα的蛋白表达。结果:AGEs增加DNA的合成促进平滑肌细胞的增殖,氯贝特激活PPARα,使PPARα的表达量增加,抑制AGEs诱导的细胞增殖和DNA合成。结论:AGEs诱导平滑肌细胞增殖与平滑肌细胞PPARα表达相关,PPARα表达下调可能是产生糖尿病动脉粥样硬化的重要原因之一。     

17β-雌二醇对大鼠血管平滑肌细胞C反应蛋白及其mRNA表达的影响

目的:探讨17β-雌二醇对大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)生成的影响及其相关机制。方法:采用免疫细胞化学法观察17β-雌二醇对正常状态大鼠VSMCs CRP表达的影响,免疫印迹法检测其对Ang-Ⅱ刺激大鼠VSMCs CRP及p-ERK1/2表达的影响,RT-PCR方法检测其对Ang-Ⅱ刺激状态大鼠VSMCs CRPmRNA表达的影响。结果:本实验所选用17β-雌二醇浓度(1、10、100 nmol/L)不影响正常状态大鼠VSMCs形态及CRP表达,但呈浓度依赖性抑制Ang-Ⅱ刺激的大鼠VSMCs CRP(r=-0.834,P<0.01)、p-ERK1/2(r=-0.712,P<0.05)及CRP mRNA(r=-0.856,P<0.01)的表达。结论:17β-雌二醇可以抑制Ang-Ⅱ刺激的大鼠VSMCs CRP及其mRNA表达,其作用机制与抑制ERK1/2信号转导通路相关。     

雷公藤内酯醇对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨雷公藤内酯醇对血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响及其作用机制.方法体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,细胞融合达60%时培养基中加入不同浓度的雷公藤内酯醇和雷帕霉素.采用细胞计数法观察细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR法检测VSMCs内c-fos mRNA表达水平.结果雷公藤内酯醇和雷帕霉素均明显抑制血清诱导的大鼠VSMCs增殖,阻断细胞由G0/G1期向S期转化;RT-PCR检测显示,随着雷公藤内酯醇浓度的增加,c-fos mRNA表达明显减少.结论雷公藤内酯醇能明显抑制血清诱导的VSMCs增殖,而阻断细胞周期、下调原癌基因c-fos mRNA的表达可能是其药理机制之一.     

雷公藤内酯醇对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇对血清诱导的大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响及其作用机制。方法体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,细胞融合达60％时培养基中加入不同浓度的雷公藤内酯醇和雷帕霉素。采用细胞计数法观察细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期;RT-PCR法检测VSMCs内c-fos mRNA表达水平。结果雷公藤内酯醇和雷帕霉素均明显抑制血清诱导的大鼠VSMCs增殖,阻断细胞由G0／G1期向S期转化;RT-PCR检测显示,随着雷公藤内酯醇浓度的增加,c-fos mRNA表达明显减少。结论雷公藤内酯醇能明显抑制血清诱导的VSMCs增殖,而阻断细胞周期、下调原癌基因c-fos mRNA的表达可能是其药理机制之一。     

PCSK3通过调控血管平滑肌细胞炎症反应及细胞表型转化标志物的表达抑制细胞迁移

目的 ：探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素3(PCSK3)调控小鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的作用。方法 ：首先采用0、25、50、100 mg/L的氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激小鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）,通过RT-PCR检测PCSK3 mRNA表达情况。将100 mg/L的ox-LDL刺激小鼠血管平滑肌细胞作为模型组,将VSMCs分为对照组（NC组,0 mg/L ox-LDL刺激的VSMCs+scramble siRNA,SCR）,ox-LDL组（模型组+SCR）,ox-LDL+si-PCSK3 1#组（模型组+si-PCSK3 1#质粒）以及ox-LDL+si-PCSK3 2#组（模型组+si-PCSK3 2#质粒）。EdU法检测各组VSMCs增殖活性,Transwell小室实验观察细胞迁移情况,ELISA试剂盒检测IL-1β,TNF-α,IL-6,细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量,RT-PCR检测各组SMCs细胞的Ⅰ型及Ⅲ型胶原,平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的mRNA表达水平的变化。结果 ：100 mg/L ox-LDL处理浓度下的VSMCs中PCSK3明显增高,能够...     

选择性雌激素受体调节剂对MC3T3-E1细胞生长分化的调节

目的探讨选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulator,SERM)———雷洛昔芬对小鼠颅顶成骨细胞MC3T3-E1分化的调节及其机制。方法体外培养MC3T3-E1细胞,10-7mol/L的雷洛昔芬和雌激素受体拮抗剂ICI-182780刺激细胞,另设空白对照组,24、48、72 h后检测各指标。MTT法检测细胞增殖;微量酶标法检测细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测细胞内β-catenin,雌激素受体α、β(estrogen receptorα、β,ERα、ERβ)mRNA的表达。结果 MC3T3-E1细胞分别加入10-7mol/L的雷洛昔芬和ICI-182780后,相对于对照组,雷洛昔芬处理组的促细胞增殖作用较强,在24 h增殖率最高,达(55.93±10.88)%;ALP活性增加,在48 h活性增加率最高,为(30.881±5.614)%;β-catenin、ERα和ERβmRNA的表达均增高,有统计学意义(P<0.05)。ICI-182780组的促细胞增殖率、ALP活性降低;β-catenin、ERα和ERβmRNA的表达均降低,有统计学意义(P<0.05)。结论雷洛昔芬可能通过上调β-catenin、ERα和ERβmRNA的表达促进MC3T3-E1细胞的增殖分化,而ICI-182780则下调β-catenin、ERα和ERβmRNA的表达抑制MC3T3-E1细胞的增殖和分化。     

大鼠血管平滑肌细胞中bFGF及其受体FGFR-1的基因表达

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体FGFR-1在大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的表达情况。方法：建立大鼠血管平滑肌细胞原代培养并鉴定；使用原位杂交检测VSMCs中bFGF及其受体FGFR-1的mRNA表达；用免疫组织化学和Western Blot技术鉴定bFGF蛋白表达情况。结果：通过光镜和免疫组织化学技术从细胞形态和结构上使VSMCs得到鉴定；原位杂交证实大鼠VSMCs表达bFGF及其受体FGFR-1的mRNA；免疫组织化学表明VSMCs的胞核和胞浆中有bFGF蛋白表达，Western Blot显示bFGF有18KDa、22KDa、22．5KDa3种异构体形式。结论：大鼠血管平滑肌细胞表达bFGF及其受体FGFR-1 mRNA，bFGF有多种异构体形式并分布在VSMCs的胞核和胞浆中。     

c-myc基因mRNA核酶对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的：构建特异性切割c-myc基因mRNA的锤头状核酶（Ribozyme)真核表达载体。探讨核酶对血管平滑肌细胞（VSMCs)增殖的影响。方法：计算机分析大鼠c-myc基因mRNA的二级结构，选择第2029位点作为锤头状核酶的切割位点并设计相应的核酶。采用DNA合成仪合成核酶基因，以克隆技术将核酶基因构建人pGEM3Zf( )体外转录载体，以Sanger双脱氧末端终止法测定核酶基因的序列后，通过亚克隆将核酶基因构建入pcDNA3真核表达载体；核酶真核表达载体以阳离子脂质体LipofectAMINE作为介导，转染体外培养的第5代SD大鼠VSMCs，经G418筛选出细胞克隆，流式细胞仪测定VSMCs的细胞周期。结果：核酶基因准确克隆入pGEM3Zf( )载体，DNA序列测定表明所克隆入的核酶基因序列正确；经过亚克隆将核酶基因准确克隆入pcDNA3载体（pcDNA-Rz);pcDNA-Rz转染VSMCs经G418筛选出多个抗性细胞克隆，扩大培养获得转染细胞；细胞周期分析显示，pcDNA-Rz转染细胞的细胞周期有明显变化，S期和G2/M期比率明显减少，细胞生长阻滞于G0/G1期，细胞增殖指数明显降低。结论：特异性切割c-myc基因mRNA核酶对体外培养VSMCs的增殖具有明显的抑制作用。     

SiRNA对大鼠钙调神经磷酸酶活性及VSMCs增殖的影响

目的:观察神经肽Y(NPY)刺激的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖中钙调神经磷酸酶(CaN)活性和c-fos表达水平的变化,以及RNA干扰抑制CaN活性的作用.方法:采用组织贴块法体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞;NPY刺激培养的大鼠VSMCs增殖;RNA干扰特异性抑制CaN的活性及其mRNA的表达,阻断NPY刺激的大鼠VSMCs中CaN依赖的信号转导通路,观察对CaN活性、细胞增殖、核内原癌基因c-fos表达水平的变化.结果:NPY可增加VSMCs的CaN活性,加快细胞增殖及增加核内c-fos表达水平.RNA干扰抑制CaN活性后,明显降低NPY刺激的VSMCs增殖及核内c-fos表达水平.结论:CaN参与了NPY刺激的VSMCs增殖,RNA干扰通过抑制CaN的活性可阻断NPY诱导的VSMCs增殖作用.     

反义凝血酶受体ODNs对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 :为研究凝血酶受体在血管平滑肌细胞增殖中的作用 ,探讨反义凝血酶受体ODNs对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响 .方法 :通过培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞 ,以3 H -TdR掺入率作为评价反义凝血酶受体ODNs抑制血管平滑肌细胞增殖的指标 ,用反转录聚合酶链反应检测反义凝血酶受体ODNs 抑制血管平滑肌细胞凝血酶受体mRNA的表达 ,用Western -Blot检测反义凝血酶受体ODNs抑制血管平滑肌细胞凝血酶受体蛋白质的表达 .结果 :反义凝血酶受体ODNs明显抑制血管平滑肌细胞的增殖 (与对照组相比 ,P <0 0 5 ) ,明显抑制血管平滑肌细胞的凝血酶受体mRNA和蛋白的表达 .结论 :反义凝血酶受体ODNs明显抑制血管平滑肌细胞的增殖 ,其抑制血管平滑肌细胞的增殖是通过抑制凝血酶受体基因的表达 ,特别是通过抑制DNA、mRNA和蛋白的表达来完成 .     

气血并治方有效组分配伍对平滑肌细胞增殖和血小板源生长因子及其受体基因表达的影响

目的:观察氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞损伤条件培养基及气血并治方有效组分芍药苷和总黄酮配伍(重量比为1∶2)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖相关基因表达的影响。方法:将VSMCs正常培养液、氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导血管内皮细胞损伤条件培养基、辛伐他汀加ox-LDL诱导血管内皮细胞损伤条件培养基、芍药苷和总黄酮配伍(高、中、低剂量)加ox-LDL诱导血管内皮细胞损伤条件培养基等分别作用于VSMCs,采用MTT染色法检测VSMCs生长活性,逆转录聚合酶链反应法测定血小板源生长因子BB(platelet-derived growth factor BB,PDGF-BB)和血小板源生长因子受体α(platelet derived growth factor receptor-α,PDGFR-α)基因的表达。结果:ox-LDL诱导血管内皮细胞损伤条件培养基作用于VSMCs后,与正常培养VSMCs比较,细胞生长活性明显增加(P<0.01),PDGF-BB和PDGFR-αmRNA表达增强。芍药苷和总黄酮配伍加ox-LDL诱导血管内皮细胞损伤条件培养基作用于VSMCs后,与ox-LDL诱导血管内皮细胞损伤条件培养基比较,细胞生长活性明显降低(P<0.01),PDGF-BB和PDGFR-αmRNA表达减弱。结论:气血并治方防治动脉粥样硬化的作用可能与方中有效组分芍药苷和总黄酮配伍抑制ox-LDL诱导血管内皮细胞损伤条件培养基引起的VSMCs增殖相关基因的表达有关。     

ORC1与大鼠血管平滑肌细胞DNA复制的关系及意义探讨

目的探讨大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖过程中DNA复制与起始识别复合物1(origin recognition complex 1,ORC1)基因表达的关系及意义.方法采用组织块贴片法培养大鼠胸主动脉VSMCs,利用MTT法绘制生长曲线,分析不同生长状态VSMCs的DNA合成与ORC1 mRNA和蛋白表达的关系.结果静止状态的VSMCs无ORC1 mRNA及蛋白质表达,血清刺激后12～24 h VSMCs DNA的合成量显著增加,ORC1 mRNA及蛋白质表达量与VSMCs DNA的合成量相一致.结论 ORC1与大鼠VSMCs增殖过程中的DNA复制密切相关.     

姜黄素对肿瘤坏死因子-α诱导的大鼠平滑肌细胞Syndecan-4蛋白及p44/42丝裂原活化蛋白激酶表达的影响

观察姜黄素对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导的离体大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和Syndecan-4蛋白及p44/42丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）表达的影响。方法分别用20 ng/ml TNF-α、20 μmol/L姜黄素、20 ng/ml TNF-α联合20 μmol/L姜黄素作用于体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞24 h,并设对照组进行比较。MTS/PMS法检测VSMCs的增殖状态,Westernblot蛋白免疫印迹法测定VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达。结果（1）细胞增殖结果经统计分析,与对照组比较,TNF-α能显著刺激大鼠VSMCs的增殖（P<0.01）,而单独应用姜黄素对大鼠VSMCs增殖无明显作用（P>0.05）。TNF-α联合姜黄素组与 TNF-α组比较,大鼠 VSMCs 的增殖受到抑制（P<0.01）;（2）统计分析蛋白表达结果,与对照组比较,TNF-α组能显著上调大鼠 VSMCs 中 Syndecan-4 蛋白及磷酸化 p44/42MAPK 的表达（P<0.01）,而单独应用姜黄素对大鼠VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达无明显作用（P>0.05）。与TNF-α组比较,TNF-α联合姜黄素组中大鼠VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达显著下调（P<0.01）。结论 一定剂量的姜黄素可显著抑制TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖和Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达。     

姜黄素对肿瘤坏死因子-α诱导的大鼠平滑肌细胞Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42丝裂原活化蛋白激酶表达的影响

目的观察姜黄素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的离体大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)Syndecan-4蛋白及p44/42丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法分别用20 ng/ml TNF-α、20μmol/L姜黄素、20 ng/ml TNF-α联合20μmol/L姜黄素作用于体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞24 h,MTS/PMS法检测VSMCs的增殖状态,Western blot蛋白免疫印迹法分别测定VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达。结果(1)统计分析表明,与对照组比较,TNF-α能显著刺激大鼠VSMCs的增殖(P<0.01),单独应用姜黄素对大鼠VSMCs增殖无显著作用(P>0.05)。与TNF-α组比较,姜黄素能显著抑制TNF-α所诱导的大鼠VSMCs的增殖(P<0.01);(2)统计分析表明,与对照组比较,TNF-α组能显著刺激大鼠VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达(P<0.01),TNF-α的这一作用能被姜黄素所抑制(P<0.01),单独应用姜黄素对大鼠VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达无显著作用(P>0.05)。结论一定剂量的姜黄素可显著抑制TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖和Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达。     

AGEs-RAGE通路阻断对血管平滑肌细胞迁移能力的影响

研究AGEs-RAGE通路阻断对糖尿病大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移能力的影响并探讨其可能机制。以晚期糖基化终产物受体(RAGE)抗体预孵VSMCs后,再用晚期糖基化终产物(AGEs)刺激VSMCs细胞,Transwell法检测VSMCs迁移能力变化,MTT法及ELISA分别检测VSMCs增殖及p27蛋白表达的变化,DCFH法测定VSMCs细胞内活性氧(ROS)水平,RT-PCR法测定NOX1 mRNA表达水平。结果显示:RAGE抗体可以明显抑制AGEs诱导的VSMCs迁移作用(P<0.01),且抑制迁移作用较其抑制增殖作用强,细胞ROS水平降低(P<0.01),NOX1 mRNA表达量下降但P27蛋白表达变化不大。实验结果表明,用RAGE抗体阻断AGEs-RAGE通路可以抑制VSMCs的迁移,其机制可能与其下调NOX1 mRNA表达从而降低细胞内氧化应激水平有关。     

Myocardin在血管平滑肌细胞增殖分化中的作用研究

目的研究Myocardin对血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、分化的影响,并探讨其作用机制。方法取SD大鼠胸主动脉,采用组织块贴壁法原代培养VSMCs;取第3代原代培养的VSMCs转染Myocardin基因,建立SMMyocd、SM-Myocd-DN、SM-TR细胞系作为实验模型,DOX(Doxycycline)干预处理,采用免疫荧光法鉴定VSMCs及SM-Myocd、SM-Myocd-DN、SM-TR细胞系,应用细胞计数检测细胞增殖活性;Western blot法检测SM-Myocd、SM-Myocd-DN、SM-TR细胞蛋白表达水平的变化。结果组织块贴壁法成功培养VSMCs;转染Myocardin成功建立SM-Myocd、SM-Myocd-DN、SM-TR细胞系;DOX干预处理SM-Myocd、SM-Myocd-DN、SM-TR细胞系结果显示:Myocd过度表达抑制VSMCs的增殖,Myocd-DN过度表达刺激VSMCs的增殖,对SM-TR则无效。结论过度表达Myocd可抑制平滑肌细胞增殖分化,这可能是预防和治疗动脉粥样硬化斑块和血管再狭窄等血管性疾病的作用机制之一。     

雌二醇促进正常宫颈上皮永生化细胞系End1/E6E7增殖的研究

[目的 ]研究在 17- β -E2 作用下正常宫颈上皮永生化细胞End1/E6E7的生长增殖和HPV16 /E6E7基因、ERβ表达的变化 ,探讨雌激素及HPV与ERβ在宫颈上皮病变发展过程中的作用。[方法 ]选取ERα(- ) /ERβ( )的正常宫颈上皮永生化细胞系End1/E6E7细胞 ,应用MTT比色实验及流式细胞术研究 17- β -E2 对其生长与增殖的调控作用 ;应用RT -PCR方法半定量研究 17- β -E2 对该细胞中HPV16 /E6E7基因及ERβ基因表达的影响。 [结果 ]随 17- β -E2 浓度增加 ,倍增时间缩短 ,MTT吸光度值增高 (P =0 .0 4 5 ) ,细胞周期G0 、G1期比例下降 ,G2 、M及S期比例上升 (P =0 .0 0 2 ) ;HPV16 /E6E7mRNA表达增强 (P =0 .0 19) ;ERβmRNA表达无明显改变 (P =1.0 0 )。 [结论 ]雌激素可能通过ERβ以外的途径促进HPV16 /E6E7基因的表达 ,进而促进永生化宫颈上皮的增殖生长。     

粟米草三帖皂苷对PDGF诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究粟米草三帖皂苷(MPTS)在体外对血小板源生长因子(PDGF)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖作用的影响及其机制.方法 原代培养大鼠血管平滑肌细胞,PDGF或PDGF与不同浓度MPTS(1～27μmol/L)共同作用后,以MTT法检测细胞活力;western-blot检测细胞pERK1/2表达变化.结果 成功培养血管平滑肌细胞;10ng/mL的PDGF促进VSMCs的增殖,而不同浓度MPTS作用后均可抑制PDGF诱导的VSMCs增殖(P<0.05);并且,MPTS对PDGF诱导的pERK1/2活化有抑制作用(P<0.05).结论 MPTS对PDGF诱导的大鼠血管平滑肌细胞的增殖有抑制作用,其部分机制可能与下调pERK1/2活性有关.     

尼古丁调控血管平滑肌细胞内生物钟基因表达节律的研究

目的研究尼古丁对原代大鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）内生物钟基因表达节律的影响。方法使用贴壁法提取原代VSMCs，免疫荧光法检测VSMCs标志物α-SMA的表达，MTT法检测细胞活力，RT-PCR法检测VSMCs内生物钟基因Bmal1、CLOCK、Per1、Cry1的表达节律。数据使用余弦法拟合，计算昼夜节律参数。结果尼古丁在100 nmol/L浓度刺激48 h，诱导VSMCs增殖效果最好。Bmal1和CLOCK基因的中值相对于对照组下调（P < 0.05和P < 0.01），而Per1和Cry1基因表达的中值上调，CLOCK基因表达振幅相对于对照组下调，而Per1和Cry1的振幅上调，差异均有统计学意义（P < 0.05~P < 0.01）；尼古丁使VSMCs内生物钟基因表达相位后移4~7 h。结论尼古丁在48 h内使VSMCs内生物钟基因表达变化的同时，使VSMCs特异性增殖，产生表型分化。     

ORC1在大鼠血管平滑肌细胞增殖过程中的表达

目的检测不同增殖状态大鼠血管平滑肌细胞(vascu lar smooth musc le cells,VSMCs)中起始识别复合物1(origin recogn ition comp lex 1,ORC1)的表达。方法采用组织块贴壁法培养大鼠胸主动脉原代培养VSMCs;提取细胞总RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定不同增殖状态VSMCs中ORC1 mRNA表达;采用免疫荧光、激光共聚焦显微镜检测不同增殖状态VSMCs中ORC1蛋白表达。结果经光镜、免疫荧光鉴定证实分离培养的细胞为VSMCs;处于静止状态的VSMCs无ORC1 mRNA表达,血清刺激6 h后ORC1 mRNA表达量明显增加,12~24 h达到高峰,继后逐渐减少;处于静止期的VSMCs无ORC1蛋白表达,处于增殖状态的VSMCs中有大量ORC1蛋白表达。结论ORC1可能在VSMCs增殖过程中起重要作用。