Smac基因转染对卵巢癌SKOV3/DDP裸鼠移植瘤顺铂敏感性及微血管生成的影响

目的:探讨转染Smac基因对卵巢癌SKOV3/DDP裸鼠移植瘤顺铂敏感性及微血管生成的影响。方法:建立卵巢癌SKOV3/DDP裸鼠移植瘤模型,随机分为5组,分别给予不同药物干预:(1)对照组:移植瘤内注射生理盐水;(2)DDP组:腹腔内注射顺铂;(3)空质粒+DDP组:移植瘤内注射空质粒,24h后腹腔内注射顺铂;(4)Smac组:移植瘤内注射Smac重组质粒;(5)Smac+DDP组:移植瘤内注射Smac重组质粒,24h后腹腔内注射顺铂。顺铂浓度为0.5mg/m1,给药剂量按3mg/kg计算。观察各组裸鼠移植瘤体积变化,计算抑瘤率。TUNEL法检测移植瘤组织标本的凋亡指数,免疫组化法检测CD34并计算微血管密度(MVD)。结果:Smac+DDP组的移植瘤体积最小,平均抑瘤率72.94%,与其他组比较差异有统计学意义(P0.05)。对照组、DDP组、空质粒+DDP组、Smac组、Smac+DDP组的凋亡指数分别为(19.90±3.18)%,(21.82±4.40)%,(22.64±3.81)%,(30.23±4.06)%,(48.59±4.47)%,MVD计数分别为(24.8±5.36),(21.2±3.11),(19.8±3.70),(14.4±3.85),(11.6±2.70)。其中,Smac+DDP组的凋亡指数最高,MVD最低,与其他组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:Smac基因转染可增强卵巢癌耐药移植瘤对顺铂的敏感性,同时减少微血管生成。     

促性腺激素释放激素类似物对化疗大鼠卵巢功能损害的干预作用

目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)和拮抗剂(GnRH-ant)对环磷酰胺(CTX)诱导的大鼠卵巢功能损害的干预作用.方法 将72只雌性SD大鼠随机分为6组,即对照组[腹腔注射生理盐水(NS)0.1 ml/d×11 d]、CTX组(第1天腹腔注射CTX 50 mg/kg,第2天起腹腔注射CTX 5 mg/d×10 d)、GnRH-a+NS组[GnRH-a 0.375 mg 1次深部肌内注射(估计释放量为12.5μg/d,持续28～30 d),于用药第14天左右(连续5 d观察阴道涂片均处于动情间期)开始注射NS,用药方法同对照组]、GnRH-a+CTX组(同GnRH-a+NS组注射GnRH-a后,于用药第14天左右的动情间期开始注射CTX,用药方法同CTX组)、GnRH-ant+NS组[GnRH-ant 0.3 mg皮下注射,以后每隔2天注射1次,共4次(估计释放量为100μg/d,共12 d),于第1次GnRH-ant皮下注射后第2天开始注射NS,用药方法同对照组]及GnRH-ant+CTX组(同GnRH-ant+NS组注射GnRH-ant后,于第1次GnRH-ant皮下注射后第2天开始注射CTX,用药方法同CTX组];每组12只.用药前后采用酶联免疫吸附法动态检测各组大鼠卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及雌二醇水平的变化,并于结束用药后的第1周内和第4～5周内(动情间期),各组分别处死6只大鼠,观察卵泡数量、卵巢重量的变化.结果 (1)血清内分泌激素水平:用药前后,对照组的血清LH、FSH、雌二醇水平无明显变化,CTX组的血清内分泌激素水平呈上升趋势.用药中,血清LH、FSH水平GnRH-a+CTX组为(42±8)、(124±45)μg/L,GnRH-a+NS组为(47±7)、(136±32)μg/L;GnRH-ant+CTX组为(31±5)、(178±54)μg/L,GnRH-ant+NS组为(36±7)、(198±27)μg/L;对照组为(118±16)、(350±35)μg/L;CTX组为(113±15)、(289±42)μg/L;分别比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05).血清雌二醇水平GnRH-ant+CTX组为(3.98±0.74)ng/L,GnRH-ant+NS组为(3.58±0.43)ng/L,GnRH-a+CTX组为(1.46±0.22)ng/L,GnRH-a+NS组为(0.98±0.18)ng/L分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).停药后,GnRH-a+CTX组、GnRH-a+NS组及GnRH-ant+NS组的血清LH、FSH、雌二醇水平逐渐接近对照组水平.但停药第4～5周时,GnRH-ant+CTX组LH、FSH水平[(156±12)、(520±44)μg/L]与CTX组[(178±18)、(546±36)μg/L]比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)卵巢重量:停药第1周,GnRH-a+CTX组大鼠双侧卵巢重量为(18±8)mg/100 g,GnRH-a+NS组为(12±5)mg/100 g,均明显低于其他各组[(30±9)～(37±8)mg/100 g],差异均有统计学意义(P＜0.05);停药第4～5周,GnRH-ant+CTX组大鼠双侧卵巢重量为(22±6)mg/100 g,CTX组为(20±4)mg/100 g,均明显低于其他各组,差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)卵泡数量:停药第1周,GnRH-a+CTX组大鼠卵巢原始卵泡数为(689±39)个,GnRH-a+NS组为(824±45)个,明显高于GnRH-ant+CTX组[(255±24)个]和CTX组[(343±29)个];生长卵泡数GnRH-a+CTX组为(21±3)个,GnRH-a+NS组为(15±1)个,明显低于GnRH-ant+CTX组[(110±21)个]和CTX组[(87±17)个];分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).停药第4～5周,GnRH-a+CTX组和GnRH-a+NS组的生长卵泡数[(56±16)、(58±11)个]接近对照组水平[(57±9)个];GnRH-ant+CTX组及CTX组的原始卵泡数和生长卵泡数均少于其他4组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 GnRH-a对CTX诱导的大鼠卵巢功能损害具有保护作用,GnRH-ant对CTX诱导的大鼠卵巢功能损害没有明显的保护作用.     

VP22增强慢病毒介导的自杀基因治疗抑制人卵巢癌裸鼠腹腔种植瘤生长的研究

目的:探讨单纯疱疹病毒壳膜蛋白VP22的细胞间传递作用促进HSV-TK/GCV(单纯疱疹病毒胸苷激酶/更昔洛韦)系统对卵巢癌腹腔移植瘤的杀伤效应。方法:将慢病毒包装质粒、包膜质粒、转移载体质粒采用磷酸钙沉淀法共转染包装细胞293T,收集病毒上清,并建立人上皮性卵巢癌(3AO)细胞株腹腔移植瘤模型。单药组分为TK+生理盐水(NS)组、VP22-TK+NS组、NS+NS组,分别腹腔注射慢病毒TK、VP22-TK或NS1ml,继而腹腔注射NS;联合用药组分为TK+GCV组、VP22-TK+GCV组、NS+GCV组分别腹腔注射慢病毒TK、VP22-TK及NS,24h后腹腔注射GCV治疗。每组裸小鼠均为5只。观察各组裸鼠的生存时间及慢病毒的毒性作用。结果:平均生存时间TK+NS组、VP2-TK+NS组、NS+NS组、NS+GCV组、TK+GCV组、VP2-TK+GCV组分别为18.3±2.7d、18.4±1.9d,17.2±1.3d、18.7±1.9d、21±4d和46±22d,6组差异有显著性(χ2=24.81,P=0.002);并且VP2-TK+GCV组平均生存时间较TK+GCV组裸鼠明显延长(χ2=7.42,P=0.006)。结论:VP22介导的自杀基因产物的细胞间扩散作用可明显加强对体内肿瘤细胞的杀伤效应。     

TRAIL对3AO裸鼠移植瘤治疗作用的实验研究

目的 :探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)对 3AO裸鼠皮下及腹腔移植瘤的治疗作用。方法 :将 5× 10 6 和 2× 10 7对数生长期的 3AO分别接种于BALB/C裸鼠右下肢皮下和腹腔内 ;待皮下组移植瘤长至 0 .2 5cm3,腹腔移植瘤组移植后 96h ,随机分为 5组。裸鼠皮下和腹腔移植瘤A、B组为TRAIL组 ,剂量分别为 0 .5 μg/ml和 1μg/ml;C组为TRAIL0 .5 μg/ml加cDDP 1.5mg/kg ,D组为cDDP 3mg/kg ;E组为对照组 (将生理盐水分别注射于瘤周和腹腔 ) ,观察移植瘤成瘤率、裸鼠生存期和生存期延长率。同时观察停药后 1d、1周、2周裸鼠移植瘤细胞的细胞凋亡率及CD95、Apo2 .7、P5 3、Bcl 2基因表达的变化。结果 :(1)A、B、C和D组裸鼠皮下移植瘤的抑制率分别为 2 3%、4 9.1%、6 2 .3%和 5 2 .6 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(2 )腹腔移植瘤组 :A、B、C、D组裸鼠移植瘤的成瘤率分别为 89.1%、72 .3%、5 1.7%和 6 1.5 % ;差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;(3)TRAIL作用裸鼠移植瘤后CD95与Apo2 .7的表达均升高 ,P5 3基因表达稍升高 ,Bcl 2基因表达降低。结论 :(1)TRAIL对人卵巢癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用 ,TRAIL能明显降低裸鼠的成瘤率及死亡率 ,延长生存期 ;(2 )其机制可能与基因CD95、Apo2 .7、Bcl 2的调节有关     

AD-p53及联合顺铂治疗卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤及腹水的实验研究

目的:探讨腺病毒载体介导的p53基因(AD-p53)对人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系(SKOV-3)的影响,探讨AD-p53及联合顺铂(DDP)以及不同剂量的AD-p53对卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤及腹水的抑制作用.方法:培养SKOV-3细胞,分组后行免疫荧光染色,绘制细胞生长曲线;建立裸鼠腹腔移植瘤模型.共6组:空白对照组、DDP组、低AD-p53组、高AD-p53组、低AD-p53+DDP组、高AD-p53+DDP组.计算抑瘤率及裸鼠腹水形成量.结果:①成功转染基因并表达p53蛋白的细胞在染色后呈红光,当MOI=100及以上时,转染率可达90%以上.②体外实验结果:经AD-p53作用的各组,细胞生长曲线受到不同程度抑制.③体内试验结果:a:各治疗组与空白对照组、联合用药组与单用药组之间瘤重差异均有统计学意义(P＜0.05),DDP组与单用AD-p53组、不同剂量AD-p53组之间瘤重差异无统计学意义(P＞0.05).b:空白对照组裸鼠均出现血性腹水,量0.4～2.0 ml,各治疗组无明显腹水形成.高AD-p53组荷瘤裸鼠的一般状态较其他组差.结论:AD-p53可成功转染SKOV-3细胞,并对细胞生长有抑制作用;AD-p53能抑制卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤,并对腹水的形成有抑制作用,其与顺铂有协同抗癌性;无限制地增大AD-p53剂量不会增加疗效,反而会对用药个体不利.     

叶酸偶联纳米紫杉醇靶向治疗耐药卵巢癌的动物实验研究

目的:研究腹腔注射叶酸偶联纳米紫杉醇(FA-N.P.)对耐药卵巢癌裸鼠的体内治疗效果,并探讨其最适给药方式.方法:建立裸鼠耐紫杉醇卵巢癌腹腔种植瘤模型,50只荷瘤鼠分5组,连续4周腹腔内分别注入空白载体(腹腔空白载体组)、紫杉醇(腹腔紫杉醇组)、纳米紫杉醇(腹腔N.P.组)、FA-N.P.(腹腔FA-N.P.组)及静脉注入FA-N.P.(静脉FA-N.P.组),比较其生存期及荷瘤量;电子显微镜及流式细胞仪定性和定量观察该药物对腹腔转移瘤的杀伤效果.结果:腹腔FA-N.P.组与其他4组比较,裸鼠生存期显著升高(P＜0.05,P＜0.01),瘤体数目(2.9±0.3个)明显降低(P＜0.05,P＜0.01).腹腔FA-N.P.组瘤体内肿瘤细胞的凋亡率(44.6％±8.5％)明显高于其他4组(P＜0.05).与腹腔给药组比较,静脉FA-N.P.组肿瘤细胞的凋亡率降低(20.1％±6.2％,P＜0.05).结论:FA-N.P.药物靶向治疗耐药卵巢癌腹腔转移瘤有效,且腹腔给药效果优于静脉给药.     

白细胞介素-15治疗3AO裸鼠移植瘤的实验研究

目的:探讨白细胞介素-15(IL-15)治疗3AO裸鼠皮下移植瘤的效果及其机制。方法:建立3AO裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为5组,每组12只。I组为顺铂(cD-DP)3mg/kg;Ⅱ组、Ⅲ组分别为IL-1550μg/kg,100μg/kg;Ⅳ组为cDDP1.5mg/kg加IL-1550μg/kg;Ⅴ组为对照组,注射生理盐水(各组药物均腹腔注射,按每只裸鼠0.2ml配制),1次/d,连用1周。观察移植瘤成瘤率、裸鼠生存期、生存延长率及肿瘤生长曲线。停药1天,1周,2周后,观察移植瘤细胞凋亡率及细胞周期,NK细胞群计数;测定裸鼠脾脏重量;对移植瘤及裸鼠肝、脾、肾行常规病理学检查。结果:实验组与对照组相比荷瘤裸鼠生存延长率,脾脏重量,移植瘤细胞凋亡率,NK细胞群计数均有明显差异。病理学检查示各治疗组均见肿瘤坏死,肿瘤细胞周围及肿瘤内淋巴细胞明显浸润。IL-15治疗组脾脏有充血增生表现,肝脏肝细胞嗜酸性变性,肝细胞水肿,周围有浊肿;cDDP治疗组肾脏近曲小管和远曲小管细胞水肿,管腔变小;对照组裸鼠肝、脾、肾未见明显病理改变。结论:IL-15对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤有明显的抑制作用,其机制可能与IL-15增强NK细胞的细胞毒活性,诱导NK细胞及细胞因子产生有关。     

沙立度胺对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤血管生成的影响

目的　探讨沙立度胺(Thd;商品名:反应停)对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长及血管生成的影响。方法　建立 15只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成 3组: (1)Thd组:腹腔内注射Thd(200mg·kg-1·d-1,浓度为 62 5mg/L); (2 )Thd+环磷酰胺 (CTX)组:按上述Thd剂量,加入浓度为 100mg/L的CTX(100mg·kg-1·d-1 ),腹腔内注射; (3)生理盐水组:腹腔内注射 0 2ml生理盐水。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况、裸鼠体重的变化,并采用RT PCR、酶联免疫吸附法、及Picture二步免疫组化法检测各组瘤组织中血管内皮生长因子 (VEGF)mRNA、外周血中VEGF含量及瘤组织中微血管密度(MVD)。结果　 ( 1 )Thd组、Thd+CTX组皮下移植瘤体积明显小于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Thd组瘤组织中VEGFmRNA为 55±9,血中VEGF含量为(29±10)pg/ml;Thd+CTX组瘤组织中VEGFmRNA为 26±7,血中VEGF含量为(12 ±6)pg/ml;生理盐水组瘤组织中VEGFmRNA为 79±7,血中VEGF含量为(71±16)pg/ml。Thd组、Thd+CTX组瘤组织中VEGFmRNA和血中VEGF含量分别与生理盐水组比较,差异均有统计学意义 (P<0.01)。(3)Thd组MVD计数为 (12.6±3.3)条,Thd+CTX组为 (10.6±1.9)条,均明显低于生理盐水组的(19 3±2 8)条(P<0 01)。结论　Thd有抗卵巢癌皮下移植瘤血     

二甲双胍降低人子宫内膜癌裸鼠移植瘤孕激素耐药及其机制的初步研究

目的:研究二甲双胍对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤孕激素耐药性的逆转作用,并初步探讨其可能机制。方法:将40只裸鼠随机分为2组,分别建立人子宫内膜癌ishikawa及孕激素不敏感ishikawa/GLOI细胞裸鼠皮下移植瘤模型,每组各随机分成4个亚组,每亚组各5只小鼠:对照组(生理盐水)、二甲双胍组(二甲双胍200mg/kg灌胃给药,0.1ml/只)、孕激素(MPA)组[甲羟孕酮(MPA)100mg/kg腹腔注射,0.1ml/只]、二甲双胍+MPA组(同时给予上述剂量二甲双胍灌胃和MPA腹腔注射)。治疗期间定期测量肿瘤大小及裸鼠质量。实验结束时取出移植瘤,测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,计算药物对肿瘤生长的抑制率。应用免疫组化检测肿瘤GLOI、CyclinD1、mTOR、pmTOR蛋白的表达。结果:接种ishikawa细胞株的裸鼠中,二甲双胍组、MPA组、二甲双胍+MPA组的抑瘤率分别为36.63%、55.92%和75.38%,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。接种ishikawa/GLOI细胞株的裸鼠中,二甲双胍+MPA组的抑瘤率为41.77%,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);而二甲双胍组、MPA组的抑瘤率分别为12.58%和2.79%,与对照组的差异无统计学意义(P0.05)。免疫组化结果显示,接种ishikawa/GLOI细胞的MPA组中GLOI、mTOR、pmTOR、CyclinD1的表达与对照组无明显差异(P0.05),余各实验组中GLOI、mTOR、pmTOR、CyclinD1的阳性表达率均低于对照组(P0.05)。结论:二甲双胍能逆转人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的孕激素耐药性,其逆转机制可能与下调GLOI、mTOR、pmTOR、CyclinD1表达有关。     

醋酸甲羟孕酮增强顺铂对人卵巢癌耐药细胞抗癌作用的研究

目的:观察醋酸甲羟孕酮(MPA)对人卵巢癌CoC1/cDDP细胞移植瘤的生长抑制作用及对DDP的耐药逆转作用,并分析其作用机制。方法:建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组,每组5只。(1)对照组:腹腔注射等体积生理盐水;(2)DDP治疗组:每只每次腹腔注射DDP 3mg/kg。(3)MPA治疗组:每只每次灌胃30mg/kg;(4)联合治疗组:每只每次灌胃MPA 30mg/kg,1h后每只每次腹腔注射DDP 3mg/kg,每隔2天给药1次,共4次,于治疗第1、5、10、15、20天分别测瘤体积,20天后处死裸鼠,完整剥出瘤组织,称瘤重,计算抑瘤率;通过流式细胞仪检测亚G1期细胞及AnnexinV+/PI-细胞鉴定细胞凋亡,分析移植瘤细胞周期;用半定量RT-PCR法检测移植细胞组织Survivin-ΔEx3、caspase-3、P21WAF1/CIP1及GST-π4基因mRNA表达。结果:(1)MPA组、MPA+DDP组治疗第10天起皮下移植瘤体积明显小于DDP组和对照组,且进行性缩小(P<0.01);抑瘤率分别为51.63%、62.21%,均明显大于DDP组的6.84%(P<0.01),并且两组间有显著差异(P<0.01);(2)流式细胞仪分析显示,移植瘤出现亚G1期峰及AnnexinV+/PI-细胞均证实MPA能诱导CoC1/cDDP细胞凋亡,并显著高于对照组及DDP组,并出现G1期阻滞;与DDP合用除出现G1期阻滞外又出现G2/M期阻滞,S期明显减少,亚G1期细胞及AnnexinV+/PI-细胞进一步上升;(3)半定量RT-PCR检测显示,MPA组Survivin-ΔEx3、GST-πmRNA下调,而P21WAF1/CIP1、caspase-3 mRNA上调,与DDP合用后,对Survivin-ΔEx3、P21WAF1/CIP1及GST-πmRNA的表达无协调作用,而对caspase-3 mRNA有协同上调作用。结论:MPA通过阻滞G0/G1期明显抑制了CoC1/cDDP移植瘤生长,并有很强的致凋亡作用,同时下调GST-πmRNA,从而逆转对顺铂耐药。     

邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯对妊娠大鼠的影响及锌保护作用的研究

目的 探讨邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)对大鼠妊娠结局的影响及锌对其影响的保护作用.方法 将50只雌鼠随机分为DEHP组(50mg·kg-1 ·d-1)、DEHP+锌组(含1.2 mg锌的葡萄糖酸锌+ 50 mg·kg-·d-1 DEHP)、空白组(灌注1ml生理盐水)、玉米油组(灌注1ml玉米油)、锌组(含1.2 mg锌的葡萄糖酸锌1ml)5组,每组10只,孕前7d开始每日给予相应药物灌胃,直至孕19 d处死孕鼠,取出胎鼠.测量孕鼠体质量、各脏器质量、活胎鼠数、活胎鼠体质量及胎盘质量.结果 孕鼠体质量及肾、脾、脑、心脏等脏器质量指数各组间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).孕鼠肝、子宫及卵巢质量指数,空白组分别为(4.4±0.7)％、(1.26±0.09)％、(0.083±0.009)％,玉米油组分别为(4.5±0.6)％、(1.29±0.10)％、(0.084±0.008)％,锌组分别为(4.4±0.4)％、(1.26±0.08)％、(0.084±0.009)％,DEHP组分别为(5.4±1.0)％、(1.11±0.08)％、(0.074±0.012)％,DEHP+锌组分别为(4.4±1.0)％、(1.28±0.10)％、(0.082±0.007)％,DEHP组与其他4组两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),其他4组间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).活胎鼠数、活胎鼠体质量及胎盘质量,空白组分别为(12.8±2.7)只、(6.03±0.16)g、(1.00±0.03)g,玉米油组分别为(13.6±3.1)只、(6.07±0.20)g、(1.00±0.04)g,锌组分别为(13.3±3.1)只、(6.16 ±0.18)g、(1.00±0.05)g,DEHP组分别为(9.2±4.1)只、(4.03±0.09)g、(0.95±0.03)g,DEHP+锌组分别为(12.1±2.9)只、(6.09±0.17)g、(0.99±0.03)g,DEHP组与其他4组两两比较,差异均有统计学意义(P＜0.05),其他4组间两两比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 妊娠期DEHP的暴露可对孕鼠及胎鼠造成损伤,预先给予锌干预可减轻DEHP暴露对妊娠的影响,保护妊娠过程.     

沙利度胺对裸鼠卵巢癌皮下种植瘤微血管密度和细胞凋亡影响的研究

目的:探讨沙利度胺(反应停,酞咪哌啶酮,thalidomide)对卵巢癌裸鼠皮下种植瘤的微血管密度和细胞凋亡的影响。方法:随机将20只卵巢癌裸鼠荷瘤模型分为4组,每组5只。(1)沙利度胺组:200mg.kg-1.d-10.2ml腹腔内注射(ip);(2)顺铂组:2mg.kg-1.d-10.2mlip;(3)联用组:顺铂2mg.kg-1.d-1,沙利度胺200mg.kg-1.d-1各0.2mlip;(4)生理盐水组:生理盐水0.2mlip。各组皮下种植瘤的瘤体直径平均为0.8cm时给药,给药2周,每周2次。给药2周后处死动物,检测各组肿瘤组织中微血管密度(MVD)及细胞凋亡指数(AI)。结果:(1)4组均未发现明显不良反应,沙利度胺组、联用组、顺铂组抑瘤率分别为57.47%、71.37%、42.18%,联用组抑瘤作用最显著(P<0.05);(2)与生理盐水组相比,沙利度胺组、联用组MVD受到明显抑制(P<0.05),顺铂组MVD无显著差异(P>0.05);(3)沙利度胺组、联用组、顺铂组AI均增高(P<0.05),且以联用组抑制作用最显著(P<0.05)。结论:腹腔注射沙利度胺可通过抑制肿瘤血管生成,诱导癌细胞凋亡,与化疗药物顺铂联用,有增强癌细胞凋亡的作用。     

Comparable effectiveness using flexible single-dose GnRH antagonist (cetrorelix) and single-dose long GnRH agonist (goserelin) protocol for IVF cycles--a prospective, randomized study

This prospective randomized study compared the effectiveness of a flexible single-dose gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) antagonist (cetrorelix) and a single-dose long GnRH agonist (goserelin) protocol for ovarian stimulation in IVF/intracytoplasmic sperm injection (ICSI) cycles. All patients from the waiting list were successively included in the study, pre-programmed with an oral contraceptive, and randomized into goserelin and cetrorelix groups. Depending on the date on which their menstrual period started, patients took oral contraceptives for one or two cycles. Ultimately, 236 patients in the first group received a single dose of depot preparation of goserelin and 224 patients received a single 3 mg dose of cetrorelix in the late follicular phase, when the mean follicle diameter exceeded 12 mm. The mean number of ampoules of FSH and the duration of stimulation was statistically significantly lower in the cetrorelix group than in the goserelin group (25.9 versus 34.5, and 9.6 versus 12.2 days, P < 0.01). The mean number of oocytes retrieved was similar (6.7 +/- 4.5 versus 7.2 +/- 4.6, NS). Similar results were observed in fertilization rates, blastulation rates and blastocyst transfer rates in both groups. Clinical pregnancy and delivery rates per cycle were higher in the goserelin group (34.3 and 30.1%) than in the cetrorelix group (31.9 and 28.3%), but the differences were not statistically significant. The flexible single-dose GnRH antagonist protocol is an advantageous alternative to the long GnRH agonist protocol, with similar efficacy, shorter duration, a significant reduction in the number of FSH ampoules used and without the menopause-like effects of the GnRH antagonist.     

多西紫杉醇对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的抑制作用及其与顺铂、曲妥珠单抗联合作用的探讨

目的:观察多西紫杉醇(Docetaxel,又名多西他赛,商品名泰素帝)对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的抑制作用,并观察其与顺铂和(或)曲妥珠单抗(Trastuzumab,商品名赫赛汀)联用的抑制作用差异。方法:将SKOV3细胞悬液接种于裸鼠右侧腋窝皮下,成功建立人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤模型后,随机将荷瘤裸鼠分为8组,即顺铂组、赫赛汀组、泰素帝组、顺铂+赫赛汀组、顺铂+泰素帝组、赫赛汀+泰素帝组、顺铂+赫赛汀+泰素帝组和对照组,每组4只。顺铂按3 mg/kg、赫赛汀按30 mg/kg、泰素帝按5 mg/kg每周1次经尾静脉给药,连续6周,每周测量1次小鼠肿瘤的长、短径及小鼠体质量,用药结束后1周处死小鼠,计算抑瘤率,肿瘤组织HE染色观察细胞凋亡,TUNEL技术检测凋亡指数,免疫组织化学方法检测肿瘤组织中Ki-67的表达情况。结果:(1)泰素帝能明显抑制人卵巢癌SKOV3细胞裸小鼠移植瘤的生长,且分别与顺铂、赫赛汀联合后对肿瘤生长的抑制作用更明显,顺铂+赫赛汀+泰素帝组对肿瘤生长的抑制作用最明显;(2)泰素帝单药组肿瘤细胞凋亡指数较对照组显著升高,且分别与顺铂、赫赛汀联合后肿瘤细胞凋亡指数更高,顺铂+赫赛汀+泰素帝组肿瘤细胞凋亡指数最高;(3)泰素帝单药组肿瘤组织中Ki-67的表达率较对照组显著下降,且分别与顺铂、赫赛汀联合后肿瘤组织中Ki-67的表达率下降更明显,而顺铂+赫赛汀+泰素帝三联组肿瘤组织中Ki-67的表达率下降最明显。结论:(1)泰素帝能够有效抑制人卵巢癌SKOV3裸小鼠移植瘤的生长,其可能的机制是通过下调Ki-67等的表达而抑制肿瘤的增殖活性,并诱导肿瘤细胞凋亡;(2)泰素帝分别与顺铂、赫赛汀间具有协同作用,而泰素帝、顺铂、赫赛汀三药联合应用能更有效地抑制肿瘤生长。     

荷人卵巢上皮癌裸鼠冻融卵巢组织移植的效果评价

目的:获取人卵巢上皮癌裸鼠原位移植瘤癌旁正常卵巢组织,经安全筛查并冻融后移植至去势裸鼠体内,探讨移植后效果,为临床应用提供依据。方法:将人卵巢上皮癌OVCAR3细胞种植于裸鼠皮下以获取瘤源,并进行卵巢原位移植,建立卵巢癌原位移植瘤模型,解剖裸鼠获取癌旁正常卵巢组织。癌旁组:取筛选后的癌旁卵巢组织进行玻璃化冷冻,复苏后分别进行皮下及原位移植,各20例;对照组:同龄正常裸鼠卵巢组织,皮下移植及原位移植各20例;去势裸鼠组:20只同龄去势裸鼠;正常卵巢组:20只同龄正常裸鼠。移植12周后,分析各组裸鼠卵巢组织内卵泡形态及激素分泌功能。结果:40只人卵巢上皮癌裸鼠原位移植瘤模型中共获取35份活检正常的癌旁卵巢组织,获取率87.5%(35/40)。玻璃化冷冻前后卵巢组织中卵泡形态及各级卵泡比例均无显著差异(P>0.05),癌旁冷冻组织和癌旁新鲜组织的异常卵泡比例差异无统计学意义(P>0.05),冷冻组织以初级卵泡及次级卵泡等窦前卵泡为主。癌旁组皮下移植组织存活率80%(16/20),对照组皮下移植组织存活率90%(18/20),癌旁组原位移植组织存活率90%(18/20),对照组原位移植组织存活率95%(19/20)。移植后组织内卵泡以次级卵泡及窦状卵泡为主,各级卵泡的形态及构成比和未移植的同龄正常裸鼠卵巢相似(P>0.05);癌旁组卵泡数明显低于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01);皮下移植和原位移植组织内的各级卵泡数差异无统计学意义(P>0.05)。癌旁组卵泡刺激素水平明显低于去势裸鼠组,而雌二醇水平明显高于去势裸鼠组(P<0.01);癌旁组卵泡刺激素水平明显高于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01),而雌二醇水平明显低于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01);皮下移植和原位移植的卵泡刺激素水平和雌二醇水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:癌旁卵巢组织冻融移植后有正常卵泡发育及激素分泌功能;皮下移植和原位移植均可取得较好的效果;癌旁卵巢组织冻融移植有望作为卵巢上皮癌患者治疗后恢复卵巢内分泌功能的有效手段。     

促性腺激素释放激素激动剂联合反向添加疗法治疗子宫内膜异位症的效果及安全性

目的 探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)联合反向添加疗法(经皮雌激素及口服醋酸甲羟孕酮)治疗子宫内膜异位症(内异症)的疗效及安伞性.方法 选择2007年1月1日-7月31日于复旦大学附属妇产科医院住院接受治疗、经腹腔镜或开腹手术确诊的内异症患者28例,随机分为A、B两组,每组各14例.A组患者于月经周期第2天起给予戈舍瑞林3.6 mg皮下注射,每4周注射1次,共12周;B组患者在A组治疗方案基础上同时加用半水合雌二醇贴剂,每周1/2片贴于腹部皮肤,并每晚口服醋酸甲羟孕酮6 mg,共12周.比较两组患者治疗前、治疗后(疗程第12周内)及月经恢复后的血清激素及骨钙素水平、阴道脱落细胞百分比、疼痛症状视觉模拟评分(VAS)、腰椎骨密度及骨量丢失率、绝经症状严重程度(以Kupperman评分表示)等.结果 (1)两组患者治疗后的m清卵泡刺激素(FSH)及雌二醇水平,A组分别为(5.0±2.6)U/L和(29±17)pmol/L,B组分别为(3.0±1.5)U/L和(87±53)pmol/L,均分别低于治疗前水平[A组分别为(17.0±12.2)U/L和(184±194)pmol/L.,B组分别为(15.3±13.6)U/L和(281±242)pmol/L],差异均有统计学意义(P＜0.01);治疗后B组的雌二醇水平高于A组,FSH水平低于A组,差异也均有统计学意义(P＜0.01).(2)治疗后的阴道脱落细胞中,A组的底层细胞百分比[(66.2±29.0)%]高于B组[(11.8±28.0)%],中层细胞[(29.1±23.1)%]、表层细胞[(4.0±5.5)%]和伊红染色细胞百分比[(2.3±2.6)%]则分别低于B组[分别为(73.0±25.2)%、(15.2±10.9)%、(10.8±7.9)%],差异均有统计学意义(P＜0.01).(3)两组患者治疗前的疼痛症状总分及盆腔痛、痛经、性交痛评分,A组分别为(7.43±3.20)、(2.35±1.82)、(4.93±1.98)和(0.14±0.53)分,B组分别为(7.71±2.02)、(2.57±1.60)、(4.86±1.56)和(0.29±1.07)分;治疗后,两组患者的VAS总分及各项评分[A组分别为(0.14±0.36)、(0.07±0.27)、(0.07±0.27)和0分,B组分别为(0.36±0.50)、(0.29±0.47)、(0.07±0.27)和0分]均低于治疗前,差异均有统计学意义(P＜0.01);月经恢复后,两组的总分及各项评分[A组分别为(0.21±0.43)、(0.07±0.27)、(0.14±0.36)和0分,B组分别为(0.50±0.65)、(0.29±0.47)、(0.2l±0.43)和0分]也均低于治疗前,差异也均有统计学意义(P＜0.01);两组之间各项评分比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(4)治疗前A、B两组的骨密度分别为(0.99±0.06)g/cm2和(0.99±0.10)g/cm2,治疗后A组的骨密度为(0.96±0.06)g/cm2,低于治疗前水平,差异有统计学意义(P＜0.01),B组的骨密度为(0.98±0.09)g/cm2,也低于治疗前水平,但差异无统计学意义(P=0.201);治疗前、后两组间骨密度分别比较,筹异均无统计学意义(P＞0.05).A、B两组的骨量丢失率分别为(-2.77±1.97)%和(-0.93±2.86)%,两组之间比较,差异无统计学意义(P=0.058).治疗前A、B两组外周血骨钙素水平分别为(13±3)μg/L和(13±6)μg/L,治疗后A组外周血骨钙素水平为(17±6)μg/L,高于治疗前水平,差异有统计学意义(P＜0.01),B组为(16±6)o,g/L,也高于治疗前水平,但差异无统计学意义(P=0.053);治疗前、后两组问骨钙素水平分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(5)A、B两组患者治疗后的改良Kupperman评分总分分别为(15±7)分和(11±6)分,两组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).A、B两组患者中潮热出汗的发生率分别为93%(13/14)和57%(8/14),两组间比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 经皮雌激素加订服醋酸甲羟孕酮治疗内异症是一种安全有效的反向添加疗法.