血管紧张素Ⅱ对外周血早期内皮祖细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ对外周血早期内皮祖细胞血管内皮生长因子表达的影响。方法密度梯度离心法获取外周血单个核细胞,培养7天,收集贴壁细胞,随机分对照组、血管紧张素Ⅱ各浓度(10-3mol/L、10-5mol/L、10-7mol/L)组、血管紧张素Ⅱ+缬沙坦组、血管紧张素Ⅱ+PD123319组。多波长激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝集素Ⅰ和D iI标记的乙酰化低密度脂蛋白双染色阳性为早期内皮祖细胞,流式细胞仪检测其表面标志进一步鉴定。酶联免疫吸附测定法对早期内皮祖细胞血管内皮生长因子的表达进行测定。结果血管紧张素Ⅱ呈浓度依赖方式上调早期内皮祖细胞血管内皮生长因子的表达,此作用可被缬沙坦显著抑制,使之接近正常水平,PD123319对此无明显作用。结论血管紧张素Ⅱ通过血管紧张素Ⅱ受体1介导上调早期内皮祖细胞的血管内皮生长因子的表达,并呈浓度依赖性,血管紧张素Ⅱ受体2不参与血管紧张素介导的血管内皮生长因子的分泌。     

血管内皮生长因子在Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠关节组织中的表达

目的 研究血管生成因子－血管内皮生长因子（VEGF）在Ⅱ型胶原诱导的关节炎（CIA）形成期的表达及功能。方法 于DBA／1J小鼠皮下注射Ⅱ型胶原制作关节炎模型并进行关节指数评价。用酶联免疫吸附法（ELISA）及免疫组织化学技术,检测关节组织内VEGF和vWF含量,以及通过RT－PCR,Southern blotting技术检测VEGF mRNA表达。结果 VEGF与vWF呈平行变化关系,均在关节炎发生后第4天达到最高,并与血管新生程度、关节炎严重程度呈正相关。VEGF mRNA在关节组织内表达形式为279、304bp。结论 VEGF在关节炎形成早期起着重要作用,影响着实验诱导关节炎血管新生及进展。     

胶原诱导关节炎大鼠滑膜中血管内皮生长因子和内皮抑素的表达及意义

目的观察血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、内皮抑素（endostatin）在胶原诱导关节炎（CIA）大鼠不同时期滑膜中的蛋白表达，通过CD34给血管密度计数．明确生长因子在血管翳形成中的作用机制。方法建立CIA大鼠模型，测量关节体积，计算关节病理积分，并用免疫组织化学染色检测VEGF、bFGF、endostatin和CD34的蛋白表达。结果模型组大鼠滑膜VEGF和bFGF表达明显高于正常组大鼠（P〈0．01），并且二者表达存在相关性（P〈0．01），内皮抑素表达模型组与正常组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论滑膜中生长因子表达失衡在关节炎的形成及发展过程中起重要作用，促血管生长因子表达升高是导致滑膜新生血管形成的主要原因。     

氟对小鼠成纤维细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的 观察氟在单层细胞培养系统即二维(2D)培养体系和成纤维细胞(FB)胶原凝胶系统即三维(3D)培养体系中对小鼠FB血管内皮生长因子(VEGF)mRNA及蛋白表达的影响,探讨VEGF表达改变对FB成骨功能的作用.方法 在2D、3D培养体系中,FB按染氟剂量不同分为0(对照)、0.0001、0.0010、0.1000、1.0000、10.0000、20.0000mg/L组,染氟培养48h后,应用RT-PCR法、酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫组化方法(IHC)检测VEGF mRNA和蛋白的表达.结果 3D培养体系中,0.1000 mg/L组VEGF mRNA表达(1.08±0.09)高于对照组(0.93 ±0.02,P<0.05).2D培养体系中,0.1000、1.0000、10.0000 mg/L组VEGF蛋白表达(0.19±0.02、0.26±0.01、0.32±0.01)高于对照组(0.14±0.01,P均<0.05);3D培养体系中,0.1000、1.0000 mg/L组VEGF蛋白表达(0.59±0.06、0.52±0.03)高于对照组(0.37±0.05,P均<0.01).2D培养体系中,0.0010mg/L组VEGF蛋白阳性表达细胞数(0.45±0.05)高于对照组(0.36±0.03,P<0.05);3D培养体系中,0.0010、0.1000、1.0000 mg/L组VEGF蛋白阳性表达细胞数(0.62 ±0.04、0.70±0.06、0.65 ±0.07)高于对照组(0.44±0.04,P<0.05或<0.01).结论 2D和3D培养体系中FB VEGF mRNA和蛋白,提示VEGF在氟化物刺激FB成骨功能增强方面具有重要作用.     

不同膝关节骨性关节炎模型大鼠软骨细胞Ⅱ型胶原表达的比较

目的采取2%木瓜蛋白酶溶液关节腔注射和手术造成关节不稳两种方法诱导大鼠膝关节骨性关节炎(KOA)模型,比较两种造模方法在不同时间节点关节软骨Ⅱ型胶原表达的异同。方法 54只8周龄SD大鼠按体重分层后随机分为3组,每组18只。手术组手术切除大鼠右膝内侧半月板、切断内侧副韧带诱导KOA;药物组通过在大鼠右膝关节腔注射2%木瓜蛋白酶溶液诱导KOA;对照组常规饲养。于造模后第4、6、8周取右膝股骨内侧髁关节软骨,行免疫组化染色观察Ⅱ型胶原表达。结果造模后第4、6、8周,手术组和药物组软骨细胞Ⅱ胶原表达逐渐减低,软骨表面缺损,与对照组相比有统计学差异(P<0.05)。手术组关节软骨Ⅱ型胶原表达与药物组比较无统计学差异(P>0.05)。结论手术切除膝关节内侧半月板、切断内侧副韧带和关节腔注射木瓜蛋白酶溶液是KOA的理想造模方法,在第4、6、8周关节软骨Ⅱ型胶原表达逐渐减少,Ⅱ型胶原的表达手术组与药物组比较无统计学差异。实验可根据个体需要,做出科学地选择。     

血管内皮生长因子与细胞黏附分子-1的表达及其对血管内皮功能的影响

目的 通过观察高脂血症大鼠NO、血管内皮生长因子(VEGF)与血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平及调脂药物辛伐他汀对其表达的影响,探讨高脂血症在动脉粥样硬化早期对内皮功能的损伤机制.方法 将30只SD大鼠随机分为正常对照组、高脂血症组及辛伐他汀治疗组,分别检测3组大鼠血脂变化及NO、VEGF、VCAM-1水平.结果 与正常对照组比较,高脂血症组NO水平较低、VCAM-1表达较强且范围较广,黏附于内皮的白细胞数明显增多(P＜0.05);VEGF水平与对照组比较,差异无统计学意义;高脂血症组血NO2-/NO3-水平为(29.6±7.2)μmol/L,与正常对照组(38.0±9.9)μmol/L比较明显降低(P＜0.05);辛伐他汀组血NO2-/NO3-水平为(37.4±9.5)μmol/L,高于高脂血症组(P＜0.05),VEGF较高脂血症组明显增高(P＜0.05);血NO2-/NO3-与VEGF呈正相关(r=0.644,P＜0.05).血清NO浓度与VCAM-1表达强度及范围呈负相关(r分别为-0.676、-0.684,均为P＜0.05).结论 NO、VCAM-1参与高脂血症血管内皮的损害;辛伐他汀对内皮功能的改善,可能是通过提高NO水平、减少内皮细胞VCAM-1的表达及促进VEGF的分泌而实现的.     

血管内皮生长因子及其表达调控

血管内皮生长因子（VEGF）特异性的促血管再生作用使其在临床应用有重要意义。本文对VEGF的分子生物学特性、对机体的作用、表达及生成的调节进行综述，并展望其临床应用。     

血管内皮生长因子与非酒精性脂肪性肝病

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是影响公共健康的全球性疾病,其病理变化可向非酒精性单纯性脂肪肝（NAFL）、脂肪性肝炎（NASH）甚至脂肪性肝硬化（FLC）发展。虽然NAFLD的这些病理进展机制尚未明确,但仍有一些实验研究提示了可能的诱发机制。其中血管内皮生长因子（VEGF）在促进NAFLD肝脏炎症、肝纤维化中发挥着重要的作用。本文就VEGF与NAFLD关系的研究进展予以综述。     

血管紧张素Ⅱ、血管内皮生长因子与糖尿病视网膜病变的关系

糖尿病视网膜病变(DR)是糖尿病的主要慢性眼部并发症之一，DR的发生主要与糖尿病的病程有关，患糖尿病10年者，约50％有DR；20年后，几乎80％-90％的患者将发生DR。DR也是一种主要的致盲眼病，能导致双眼不可逆性失明，在失明的患者中，约85％由DR引起。目前对于DR的发病机制尚未完全清楚，近年来多数的学者认为血管内皮生     

人血管内皮生长因子研究进展

血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)为血管内皮细胞特异性肝素结合生长因子,在体内外均可诱导新生血管形成.人VEGF蛋白于1989年分别由美国两个生物科技公司的科学家成功纯化与鉴定,并且其基因序列被成功克隆及测定,证实了VEGF与血管通透因子(VPF)为同一基因编码的同一种蛋白.VEGF为同源二聚体糖蛋白,高度保守,二聚体由分子量各为24 kD的单链以二硫键组成.其单体无活性,N2糖基对其生物效应无影响,但可能在细胞分泌中起作用.近年来关于VEGF的研究较多,研究显示,肿瘤的生长和转移依赖于血管的形成,而VEGF为肿瘤血管生成最有效的促进因子.     

血管内皮生长因子、胰岛素样生长因子-Ⅱ对肝细胞癌的诊断价值

了解血管内皮生长因子 (VEGF)、胰岛素样生长因子 -Ⅱ (IGF -Ⅱ )在肝细胞癌 (HCC)中的诊断意义。分别用双抗体夹心法 (ELISA)及放射免疫测定法 (RIA)测定了 35例肝细胞癌 (HCC)、16例肝硬化 (LC)和 16例慢性肝炎 (CH)及 10例正常对照者 (NC)的血清VEGF、IGF -Ⅱ水平。HCC患者血清VEGF、IGF -Ⅱ的水平明显高于正常对照组及其它各病组 (P <0 0 1或P <0 0 5 ) ,二者对于AFP阴性的HCC诊断阳性率分别为 6 3 6 %和 5 4 5 % ,三者联合检测可提高HCC诊断阳性率达 94 3%。有远处转移的HCC患者VEGF水平明显高于无转移者 (P <0 0 1)     

兔关节软骨细胞原代培养及生物学鉴定

目的探讨兔膝关节软骨细胞体外分离培养及鉴定方法,分析软骨细胞在体外不同阶段的生物学特性。方法取4周龄健康新西兰兔膝关节软骨,以机械分离和酶消化相结合的方法获取膝关节软骨细胞,经体外培养、传代。观察不同培养阶段细胞形态和生长,CCK-8法测定细胞增殖并绘制生长曲线,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定软骨细胞。结果兔软骨细胞经两步消化,可获取高纯度的软骨细胞,细胞活性率可达95%以上,甲苯胺蓝染色及免疫荧光呈阳性结果。原代细胞和第一代细胞呈多角形,传代4~5代后,细胞形态逐渐由多角形变为梭形,基质分泌氨基多糖和胶原染色变浅。结论成功建立了简单易行的软骨细胞分离、培养方法,通过传代可以获取大量实验细胞,但仅限于5代以内软骨细胞适用于组织工程研究。     

瘦素对人脐静脉内皮细胞血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨瘦素对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:用不同浓度的瘦素刺激原代培养的HUVECs,检测HUVECs表达VEGF的情况。结果:在相同作用时间下,随着瘦素浓度的升高,VEGF蛋白及VEGF mRNA的表达也随之升高,经统计学检验有相关性;在相同瘦素浓度下, 随着作用时间的延长,VEGF蛋白及VEGFmRNA的表达也随之升高,且有相关性。结论:瘦素可以刺激HU- VECs表达VEGF而且呈时间和剂量相关性。     

血管、淋巴管内皮生长因子在胰腺癌中的表达

研究血管内皮生长因子(VEGF)在胰腺癌中的表达及意义,采用:Northern blot分析法检测正常胰腺组织和胰腺癌组织中VEGF-A、c mRNA的表达;采用免疫组织化学染色法检测胰腺癌标本中VEGF-A、C蛋白的表达。结果发现胰腺癌组织中VEGF-A和VEGF-C基因的表达分别是正常胰腺组织中的3.0和3.6倍;免疫组织化学染色法显示胰腺癌组织中VEGF-A和VEGF-C的阳性率分别为50％和80％;胰腺癌细胞VEGF-A的表达与肿瘤大小呈正相关,VEGF-C的表达与淋巴结转移呈正相关,均有统计学意义(P<0.05),而VEGF-A与VEGF-C表达无关联。胰腺癌非同步联合表达血管和淋巴管内皮生长因子,前者与肿瘤大小、局部范围相关联,后者与淋巴结转移相关联。     

低氧对培养心肌细胞表达和分泌血管内皮生长因子的影响

目的　探讨低氧对心肌细胞血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。方法　采用Kuwabara等并加以改进的方法对心肌细胞进行低氧培养 ,并于低氧培养的即刻、2 4、4 8h分别测定培养液中的氧分压。使用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、免疫组织化学和酶联免疫吸附测定 (ELISA)法分别检测低氧培养的不同时间点VEGFmRNA及VEGF蛋白的表达和分泌。结果　与常规培养相比 ,简易低氧培养培养液氧分压降至 5 8mmHg ,并于 3个时间点保持这一水平 (P >0 .0 5 )。从mRNA水平和蛋白水平我们检测到VEGF表达的增加 ,于低氧培养 2 4h达峰值 ,培养液中的峰值浓度为 (72 4 .6 7± 5 6 .87)pg ml。结论　低氧促进心肌细胞表达VEGFmRNA、VEGF蛋白和分泌该蛋白     

瘦素对体外培养的大鼠关节软骨细胞外基质合成的影响

目的探讨瘦素刺激对体外培养的大鼠膝关节软骨细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白多糖的影响。方法选用4周SD大鼠的膝关节软骨细胞作为实验研究材料进行体外培养,传至2代,随机分为6组,空白组加入空白DMEM,5个实验组分别加入含0.1、1、10、100、1 000 ng/ml瘦素的DMEM培养基。24 h后,采用氯胺T法和Anto-nopoulos法检测软骨细胞分泌Ⅱ型胶原和蛋白多糖的情况。结果经瘦素刺激的各实验组Ⅱ型胶原和蛋白多糖的合成均有不同程度的增加,其最大效应浓度为10-100 ng/ml。结论不同浓度的瘦素可以不同程度地促进体外培养的关节软骨细胞外基质的合成。     

血管内皮生长因子的研究进展

血管内皮生长因子的研究进展陈静汪鸿志血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ），也称血管通透性因子（ＶＰＦ）或促血管素，最初是由多种培养的肿瘤细胞系中发现的一种新型的生长因子，它能增加微血管与小静脉血管的通透性。后来发现，该因子特异性地作用于血管内皮细胞，并促进血...     

低氧诱导星形胶质细胞血管内皮生长因子表达

目的探讨低氧环境对体外培养的胎鼠大脑星形胶质细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用孕16d的SD胎鼠大脑组织培养星形胶质细胞,实验分为正常组(正常培养,5%CO_2,95%空气,37℃,绝对湿度)和低氧组(低氧培养,5%CO_2,2%O_2,93%N_2,37℃、绝对湿度)。MTT实验观察细胞经2、4、6、8、10h低氧培养后细胞增殖情况,免疫荧光染色观察细胞经4、8、12、24、32h低氧培养后VEGF表达的变化。结果低氧组胶质细胞增殖除6h与正常组无差异外,2、4、8、10h较正常组均明显增高,差异有统计学意义(P0.05);低氧组8、12h VEGF表达明显高于正常组,24、32h VFGF表达明显低于正常组(P0.05)。结论低氧培养短期可促进星形胶质细胞增殖,VEGF表达升高,长期低氧可至星形胶质细胞损伤,VEGF表达下降。     

血管紧张素Ⅱ和氧化型低密度脂蛋白对大鼠血管平滑肌细胞Smurf2和Ⅰ型胶原表达的影响

目的 在体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)中探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)对Smad泛素调节因子2(Smurf2)及I型胶原表达的影响.方法 应用RT-PCR检测Smurf2 mRNA的表达,Western blot检测Smurf2蛋白的表达,ELISA检测I型胶原的表达.结果 与对照组相比,AngⅡ呈浓度依赖性抑制Smurf2mRNA和蛋白的表达(P＜0.05),促进I型胶原的表达(P＜0.05);ox-LDL呈浓度依赖性促进Smurf2mRNA和蛋白的表达(P＜0.01),抑制I型胶原的表达(P＜0.05).以AngⅡ(10-5 mol/L)联合不同浓度ox-LDL(20、40及80ms/L)作用大鼠VSMC后,与对照组相比,联合组Smurf2的表达升高(P＜0.05),抑制I型胶原的表达(P＜0.05).结论 AngⅡ可能通过抑制Smurf2的表达来提高I型胶原的表达;ox-LDL可能通过提高Smurf2的表达抑制Ⅰ型胶原的表达;ox-LDL呈浓度依赖性逆转AngⅡ对Smurf2的抑制作用,同时抑制I型胶原的表达.