麦胚提取物对成骨细胞TGF—β1和IGF—l表达的影响

目的：通过研究成骨细胞中转化生长因子(TGF)—β1和胰岛素祥生长因子(IGF)—1的表达，进一步探讨麦胚乙醇提取物对大鼠成骨细胞的作用机理。方法：体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞，用免疫组化方法测定成骨细胞中TGF—β1和IGF—1的表达情况，用HPIAS—1000图象分析仪对各组表达进行定量分析。结果：麦胚提取物培养的大鼠第3代成骨细胞的TGF—β1和IGF—1呈阳性表达，麦胚提取物组的TGF—β1和IGF—1平均光密度都显著高于阴性对照组(P＜0．05，P＜0．01)，但与阳性对照组比较无显著差异(P＞0．05)。结论：麦胚乙醇提取物可增强新生大鼠成骨细胞TGF—β1和IGF—1的表达。     

麦胚提取物对大鼠成骨细胞增殖分化和矿化的影响

目的　探讨麦胚提取物对骨质疏松症的防治作用。方法　体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑蓝 (MTT)法测定麦胚提取物对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,茜素红染色方法 (ARS)研究对成骨细胞矿化的影响。结果　 0 10 g·L-1的麦胚提取物可以促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖和分化作用 ,0 5 0g·L-1促使成骨细胞矿化结节的形成。结论　麦胚提取物可以提高成骨细胞的增殖和分化 ,并有促进矿化的功能     

秋水仙碱对心肌组织中TGF-β_1的影响

目的 探讨秋水仙碱对压力负荷性大鼠心肌中转化生长因子β_1(TGF-β_1)的影响.方法 利用腹主动脉缩窄的方法 建立压力超负荷性心肌大鼠模型,放射免疫分析法测定局部心肌组织中血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平,RT-PCR法半定量TGF-β_1mRNA的表达变化,免疫组织化学法测定心肌TGF-β_1的表达,同时给予秋水仙碱8周,观察上述指标的变化.结果 与对照组相比,模型组AngⅡ、TGF-β_1 mRNA和TGF-β_1 表达明显增加(P<0.01),秋水仙碱能明显减少上述指标的表达.结论 秋水仙碱可以通过抑制压力负荷性心室重构大鼠RAAS和交感神经系统活性,减少神经内分泌因子AngⅡ生成,减少纤维化因子TGF-β_1的表达.     

降钙素基因相关肽对兔成骨细胞增殖和TGF-β1表达的影响

目的 检测外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene-ralated peptide,CGRP)对体外培养兔成骨细胞转化生长因子-β1(transformation growth factor-β1,TGF-β1)表达的调控作用,探讨其对成骨细胞增殖的影响.方法 将出生5d以内新西兰大白兔头骨成骨细胞进行原...     

补肾方对成骨细胞生长因子TGF-β1 mRNA表达的影响

目的探讨补肾方对成骨细胞转化生长因子-β1 (TGF-β1)mRNA 表达的影响.方法将体外分离培养的新生SD 大鼠的颅骨成骨细胞加入不同浓度的补肾中药密骨片药液(100～ 10 000 μg·m l- 1) 及阳性对照药物重组碱性成纤维细胞生长因子( rbFGF).24 min后, 利用自行制备的地高辛标记的鼠TGF-β1cDNA 探针进行成骨细胞的核酸分子原位杂交分析, 以其细胞内杂交阳性颗粒的平均光密度值代表TGF-β1 mRNA 的表达水平.结果结果显示随着密骨片药液浓度的增加, 成骨细胞内TGF-β1 mRNA 表达明显高于阴性对照组; 但5 000 和1 000 μg·m l- 1的密骨片药液组的TGF-β1光密度值与5 ng·m l- 1的bFGF 组比较无明显差异(P＞ 0. 05).结论表明补肾中药密骨片可刺激成骨细胞TGF-β1 的分泌和合成, 从而促进骨形成和抑制骨吸收.这可能是该方能有效地防治骨质疏松的疗效机制之一.     

IGF-Ⅰ和TGF-β1 在多囊卵巢综合征大鼠卵巢中的表达及意义

目的 探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)在多囊卵巢综合征(PCOS)发病机制中的作用.方法 40只雌性Wistar大鼠随机分为PCOS组和对照组,每组各20只.PCOS组应用来曲唑{1-[双-(4-氰基苯基)甲基]-1,2,4-三氮唑}灌胃制备PCOS大鼠模型,对照组不作任何处理.阴道涂片观察大鼠动情周期变化;运用放免法测定大鼠血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)和睾酮(T)水平;光镜观察卵巢、卵泡发育情况;免疫组化法观察卵巢组织中IGF-Ⅰ和TGF-β1的表达.结果 PCOS组大鼠失去规律性动情周期变化.血清T、LH浓度高于对照组(P<0.05),血清E2、FSH、P浓度低于对照组(P<0.05).IGF-Ⅰ在PCOS组颗粒细胞的表达明显强于对照组(P<0.05),TGF-β1在PCOS组卵泡膜细胞和间质细胞的表达明显强于对照组(P<0.05).结论 来曲唑诱导的大鼠动物模型是较好的PCOS模型.IGF-Ⅰ和TGF-β1与PCOS的发病密切相关.     

强直性脊柱炎患者血清RANKL、TGF-β_1和TGF-β_2的表达及临床意义

目的:观察强直性脊柱炎患者血清中细胞核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)和转化生长因子β_2(TGF-β_2)表达水平,探讨其临床意义。方法:选择202例强直性脊柱炎患者作为观察组,选择98例健康成人的血清标本作为对照组。收集受试者血清标本,应用ELISA法检测两组血清中RANKL、TGF-β_1和TGF-β_2的表达。结果:两组血清中RANKL、TGF-β_1和TGF-β_2的表达差别有统计学意义。RANKL、TGF-β_1和TGF-β_2的表达与在不同骨侵蚀关节个数及附着点炎关节个数中的表达差别有统计学意义。相关分析显示观察组中强直性脊柱炎患者血清中RANKL和TGF-β_1、RANKL和TGF-β_2、TGF-β_1和TGF-β_2之间的表达具有正相关性。结论:RANKL、TGF-β_1和TGF-β_2在强直性脊柱炎高表达,对病变的形成和进展具有重要作用,三者之间具有正相关性。联合检测血清中RANKL、TGF-β_1和TGF-β_2的表达可能成为强直性脊柱炎的早期诊断标志物。     

体外培养成骨细胞合成分泌TGF-β1的研究

目的 研究体外培养成骨细胞合成分泌TGF－β1的功能。方法 利用胎兔颅骨成骨样细胞体外培养模型，应用免疫组化和酶联免疫吸附试验检测成骨细胞分泌TGF－β1的情况。结果 体外培养的成骨细胞能够分泌TGF－β，随传代培养次数增加和培养时间延长，TGF－β1浓度增加，在第3代和第7天时增加明显，以后逐渐下降。结论 体外培养的成骨细胞具有分泌TGF－β1的功能，呈一定的时效关系，并和传代次数有关。     

血小板源性生长因子和转化生长因子-β_1对大鼠肺成纤维细胞整合素α_5β_1表达的影响

目的观察血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）和转化生长因子β１（ＴＧＦ－β１）对大鼠肺成纤维细胞整合素（ｉｎｔｅｇｒｉｎ）α５β１及其配体纤维连接蛋白（ＦＮ）合成的影响。方法采用细胞培养、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、免疫细胞化学方法。结果经ＰＤＧＦ－ＢＢ、ＴＧＦ－β１作用２ｈ，α５、β１、ＦＮｍＲＮＡ的表达即强于对照组，以后继续增强，其间仅于１８或１２ｈ短暂回落，但仍明显强于对照组。免疫细胞化学显示肺成纤维细胞α５β１和ＦＮ蛋白的表达也明显增强。结论ＰＤＧＦ、ＴＧＦ－β１可以促进ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮ的合成增加，其调控机制之一可能是在转录水平上增强ｉｎｔｅｇｒｉｎα５β１及其配体ＦＮｍＲＮＡ的表达。     

细胞因子IGF-1及IGF-1R在不同程度肝纤维化的表达

目的：对不同程度慢性乙型肝炎病人肝脏组织中IGF-1及IGF—1R表达进行免疫组织化学法，探讨IGF—1及IGF—1R在肝纤维化不同程度的表达及分布。探讨细胞因子IGF-1及IGF-1R在肝纤维化形成中的作用，明确肝纤维化成因。方法：选择52例不同程度肝纤维化组织标本。采用免疫组化方法检测各个标本IGF-1及IGF-1R的表达及分布进行定位度半定量研究。结果：IGF-1阳性细胞主要定位于肝星状细胞及枯否细胞胞浆，阳性产物呈棕黄色，未见细胞核着色。IGF—1R的分布与IGF-1类似。IGF-1随着病理损伤的加重而逐渐增加，S3期和S4期IGF-1水平明显高于S3期，与肝脏病理炎症程度呈正相关。IGF—1R的表达与IGF—1呈类似趋势。结论：在慢性肝炎肝组织中有IGF-1及IGF—1R的阳性表达。IGF-1及IGF-1R在肝组织内的表达强度与肝纤维化程度呈正相关。     

颅脑损伤患者血清TGF-β_1的含量变化及其临床意义

目的:探讨颅脑损伤患者血清转化生长因子-β1(TGF-β_1)的含量变化及其临床意义。方法:收集颅脑损伤患者轻型(22例)、中型(18例)、重型(20例)三组分别于伤后1d、3d、7d抽取的静脉血及正常对照组(20例)清晨空腹抽取的静脉血,采用酶联免疫法测定血清TGF-β_1含量,分析其与颅脑损伤严重程度及病情变化的关系。结果:与对照组血清TGF-β_1水平相比,第1天、第3天颅脑损伤各组显著降低(P<0.05),第7天轻型、中型组与其均差异无显著性(P>0.05),重型组显著降低(P<0.05)。重型组血清TGF-β_1水平在伤后1d、3d、7d较轻型、中型组显著降低(P<0.05);颅脑损伤各组血清TGF-β_1水平第1天下降至最低,第3天、第7天逐渐回升。结论:颅脑损伤患者血清TGF-β_1的测定可作为判断颅脑损伤严重程度以及反映病情变化的重要指标。     

不同浓度雌激素对卵巢癌细胞VEGF-C和TGF-β_1表达的影响

目的观察在不同浓度的雌激素作用下,卵巢癌细胞转化生长因子-β1（TGF-β1）、血管内皮细胞生长因子C（VEGF-C）表达的变化。方法在体外不同浓度（10-11、10-10、10-9、10-8mol/L 17β-E2）的17-β雌二醇（E2）作用下,用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及ELISA方法,检测卵巢癌SKOV3细胞株VEGF-CmRNA的表达及TGF-β1分泌量水平的变化。结果 SKOV3细胞在E2的作用下,TGF-β1的分泌量呈剂量浓度反应,随着10-11~10-8mol/L17-βE2浓度的增加,TGF-β1的分泌量明显增加;随着雌激素浓度的增加,SKOV3细胞VEGF-C mRNA的PCR产物表达也呈递增趋势。10-11、10-10、10-9和10-8mol/L 17β-E2组与对照组比较,VEGF-C,TGF-β1的表达有显著性差异（P〈0.05）。结论雌激素可上调SKOV3细胞的VEGF-C mRNA表达、TGF-β1分泌水平,两者均呈浓度递增趋势。     

胰岛素样生长因子-1和转化生长因子-β1在鼻息肉中表达的意义

目的 检测胰岛素样生长因子-1(IGF-1) 与转化生长因子-β1(TGF-β1) 在鼻息肉中的表达,探讨其在鼻息肉发病中的作用.方法 免疫组化和实时定量PCR.结果 显微镜下观察IGF-1、TGF-β1 在鼻息肉组织中的阳性表达细胞数分别为18.37±7.60,18.93±8.72,正常组织IGF-1、TGF-β1 阳性表达细胞数分别为1.63±0.96,2.25±1.57,两组比较P<0.05.检测IGF-1 TGF-β1 在鼻息肉组织中的mRNA 表达相对值分别为9.61±7.84,17.68±5.53,正常组织IGF-1 TGF-β1 的mRNA 表达相对值分别为0.95±0.19,0.84±0.29,两组比较P<0.05.结论 IGF-1 和TGF-β1 在鼻息肉中组织中的表达明显高于正常组织,IGF-1 和TGF-β1 在鼻息肉发病及生长过程中有重要作用.     

心肌组织内IGF-1和TGF-β1在高血压不同发病阶段的表达及意义

目的：探讨心肌组织内胰岛素样生长因子-1（IGF-1）和转化生长因子-β1（TGF-β1）在自性高血压大鼠（SHR）不同发病阶段的表达及其与心肌肥厚及心肌纤维化的关系。方法：应用RT-PCR方法检测IGF-1和TGF-β1在SHR心肌组织内的表达;应用大体及病理组织学检查结合图像分析和生化测定等方法检测SHR心肌肥厚和心肌纤维化的动态改变。结果：IGF-1在SHR心肌组织内的表达在第6周时无明显改变,第14周时开始增高,24周时仍持续增高,与心肌肥厚同步,但与代表心肌纤维化的参数呈非同步现象;TGF-β1的表达与对照组WKY大鼠相比,则无明显差异。结论：IGF-1在SHR心肌组织内的表达增高,且与心肌肥厚同步,提示其参与心肌肥厚的发生及发展;TGF-β1可能不参与SHR心肌肥厚及心肌纤维化的发生及发展。     

大鼠转化生长因子β1基因转染成骨细胞后的表达

目的 将大鼠转化生长因子β1(TGF—β1)基因转染成骨细胞后，研究转基因细胞表达TGF—β1的情况。方法 通过Lipofectamine介导将TGF—β1基因导人大鼠成骨细胞，转染24h后通过SABC法和原位杂交法检测目的基因瞬时表达的情况。采用G418筛选转染细胞2周，获得阳性细胞克隆，用SABC法检测转染细胞稳定表达TGF—β1的情况。结果 转染24h后，成骨细胞就有明显的TGF—β1蛋白和mRNA高表达。G418筛选2周后的转染细胞仍然有较高的TGF—β1表达。结论 TGF—β1基因转染成骨细胞后可获得稳定的高表达，采用细胞因子基因转染成骨细胞进行骨缺损的基因治疗具有可行性。     

慢性肝病患者PBMC及血浆中TGF-β_1的表达水平与肝纤维化程度的关系

目的:探讨慢性肝病患者单个核细胞(PBMC)及血浆中转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平与肝纤维化发生发展的关系。方法:采用荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法检测慢性肝病患者PBMC中TGF-β1mRNA含量;ELISA方法检测血浆TGF-β1含量;采用放射免疫方法检测HA,LN,CIV,PCⅢ含量。同时对检测结果进行对比分析,以探讨各检测指标的相关性。结果:慢性乙型肝炎中重度患者及肝炎后肝纤维化患者PBMC中TGF-β1含量及血浆TGF-β1水平均显著高于正常;且与HA,LN,CIV,PCⅢ四项肝纤维化诊断指标呈正相关。结论:慢性肝病患者PBMC及血浆中TGF-β1表达水平可以作为肝纤维化的诊断指标;但能否作为早期诊断的敏感指标,仍需要临床大量试验证实。     

大肠癌中TGF-αTGF-β_1TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ表达及其临床意义

目的　研究TGF α、TGF β1、TGF βRⅠ和TGF βRⅡ在大肠癌发生发展中的作用以及与临床病理参数之间的关系。方法　采用免疫组化SABC法检测 5 6例大肠癌中TGF α、TGF β1、TGF βRⅠ和TGF βRⅡ表达的情况。结果　TGF α和TGF β1在癌组织中的表达积分高于CDM (cancer distantmucosa ,CDM ) ,P <0 .0 5 ;而TGF βRⅠ和TGF βRⅡ ,在癌组织中的表达积分低于CAM (cancer adjacentmucosa ,CAM )P <0 .0 5。结论　大肠癌中TGF α、TGF β1、TGF βRⅠ和TGF βRⅡ表达积分与组织学类型、分化程度和Dukse’分期有关 ,而与肿瘤部位无关。     

胰岛素对β细胞IGF-1R表达的上调作用

[目的]观察胰岛素对胰岛β细胞胰岛素样生长因子1受体（IGF-1R）表达的影响。[方法]胶原酶原位灌注法分离SD雄性大鼠胰岛,不连续密度梯度离心法纯化胰岛;在含100μIU/ml胰岛素的RPMI 1640培养液中分别孵育胰岛0、30、60、120、240 min,对照组是未经胰岛素孵育的胰岛,即0 min组。应用免疫组织化学方法,对胰岛β细胞以及IGF-1R进行定位,并结合激光扫描共聚焦显微镜技术对荧光图像进行半定量分析。[结果]IGF-1R定位于β细胞,对图像中β细胞表达的IGF-1R荧光积分光密度值进行分析显示,与对照组相比,胰岛素处理30 min,β细胞IGF-1R的荧光积分光密度值无显著差异（P〉0.05）,在胰岛素处理60、120、240 min组中,β细胞IGF-1R的荧光积分光密度值明显升高（P〈0.01）,并随着时间的延长,荧光密度值有上升的趋势。[结论]胰岛素对SD大鼠胰岛β细胞上IGF-1R的表达具有促进作用。