PI3K/Akt信号转导通路在EphB受体介导大鼠神经病理性痛中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号转导通路在EphB受体介导大鼠神经病理性痛中的作用.方法 清洁级雄性SD大鼠48只,体重150～180 g,2～3月龄,采用随机数字表法,将大鼠随机分为6组(n=8),C1组、E1组、C2组和E2组采用坐骨神经慢性压迫法(CCI)建立大鼠神经病理性痛模型,S1组和S2仅暴露坐骨神经.S1组和C1组分别于术前1h、术后1、2d时鞘内注射生理盐水5 μl,E1组给予EphB受体拮抗剂EphB1与IgG的重组体(EphB1-Fc)0.5μg;S2组和C2组于术后5d时鞘内注射生理盐水5μl,E2组给予EphB1-Fc0.5μg.各组分别于术前、术后1、3、5d时测定双侧热缩足潜伏期(PWL)和机械缩足阈值(PWT),计算非术侧与术侧PWL和PWT的差值(△PWL和△PWT).于术后5d测定痛阈结束后,取术侧L4-6节段脊髓,采用免疫组织化学法检测c-Fos、PI3K及磷酸化Akt(p-Akt)的表达水平.结果 与S1组或S2组比较,C1组或C2组术后△PWL延长,△PWT增加,c-Fos、PI3K和p-Akt表达上调(P＜0.05);与C1组或C2组比较,E1组或E2组△PWL缩短,△PWT降低,c-Fos、PDK和p-Akt表达下调(P＜0.05).结论 EphB受体通过PI3K/Akt信号转导通路介导大鼠神经病理性痛的形成和维持.     

Akt-GSK3β通路在丙泊酚后处理对脑缺血再灌注大鼠长时程脑保护效应中的作用

目的 探讨丝氨酸-苏氨酸激酶(Akt)-糖原合成酶激酶3β(GSK3β)(Akt-GSK3β)通路在丙泊酚后处理对脑缺血再灌注大鼠长时程脑保护效应中的作用.方法 健康雄性SD大鼠216只,体重250～ 280 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=54):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、溶媒对照组(I组)和丙泊酚后处理组(P组),除S组外,其余各组采用线栓法阻塞大脑中动脉1h,P组在再灌注即刻开始股静脉输注丙泊酚20 mg·kg-1 ·h-1,输注时间2h,S组和I/R组给予等容量生理盐水,I组给予等容量10％脂肪乳.于术后3、7、14和28 d时分别取6只大鼠,取脑组织,测定脑梗死体积,再分别取6只大鼠,采用Western blot法检测缺血侧海马Akt、GSK3β及磷酸化Akt、GSK3β表达水平,于术后28 d时取6只大鼠,采用免疫荧光法检测缺血侧海马齿状回(DG)神经元再生情况.结果 与S组比较,I/R组、I组和P组脑梗死体积增加,海马DG区新生神经元数量升高,I/R组和I组海马组织Akt磷酸化和GSK3β磷酸化水平降低,P组海马组织Akt磷酸化和GSK3β磷酸化水平升高(P＜0.05);与I/R组比较,P组脑梗死体积降低,海马DG区新生神经元数量升高,海马组织Akt磷酸化和GSK3β磷酸化水平升高(P＜0.05).结论 丙泊酚后处理对脑缺血再灌注大鼠具有长时程脑保护效应,其机制与Akt-GSK3β通路有关.     

TIPE2在小鼠脓毒症心肌损伤中的作用：与AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路的关系

目的评价肿瘤坏死因子α诱导蛋白家族8样蛋白2(TIPE2)在小鼠脓毒症心肌损伤中的作用及其与丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)/糖原合酶激酶3β(GSK-3β)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的关系。方法选择16只雄性野生型C57BL/6N小鼠和16只雄性TIPE2基因敲除C57BL/6N小鼠, 6～8周龄, 体质量20～25 g, 按照随机数字表法分为野生型假手术组(WT-Sham组)、野生型CLP组(WT-CLP组)、TIPE2基因敲除型假手术组(WT-Sham组)和TIPE2基因敲除CLP组(KO-CLP组), 每组8只。采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症小鼠急性心肌损伤模型。术后24 h时采集下腔静脉血标本, 采用ELISA法检测血清心肌cTnI浓度, 然后处死小鼠, 取心肌组织, HE染色观察病理学结果, 采用q-PCR法检测TNF-α、IL-1β及IL-6的mRNA表达, Western blot法检测TIPE2、磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化(p-GSK-3β)及β-catenin表达。结果与相应Sham组比较, 相应CLP组血清cTnI浓度升高, 心肌组织TNF-...     

PKB/Akt信号通路与阴茎勃起功能的关系

阴茎勃起是由神经内分泌调节下阴茎动脉和阴茎海绵体一系列血液动力学变化的过程.阴茎的勃起机制比较复杂,目前尚未完全明确.研究普遍认为,由一氧化氮合酶(NOS)催化合成的一氧化氮(NO)作为海绵体平滑肌舒张的重要调节因子,在阴茎勃起过程中发挥关键作用.NOS有三种亚型,分别命名为神经元型(nNOS)、内皮型(eNOS)和诱导型(iNOS).其中eNOS在阴茎中活性较高,在海绵体平滑肌松弛和阴茎勃起过程中起重要作用.蛋白激酶B (PKB/Akt)即作用于eNOS,使其磷酸化后激活,激活的eNOS进而催化合成NO,最后促进阴茎勃起.     

PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路在α7nAChR激动剂后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨PI3K/Akt和JAK/STAT信号转导通路在α7亚基烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)激动剂后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠60只,体重290～ 320 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=15):缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IPC组)、缺血后处理组(IPOC组)和α7nAChR激动剂后处理组(PNU组).4组采用结扎左冠状动脉前降支30 min时进行再灌注的方法制备心肌缺血再灌注损伤模型.IPC组进行缺血预处理,缺血5min再灌注5min,共3个循环,IPOC组再灌注前进行缺血后处理,再灌注10 s缺血10s,共3个循环.PNU组再灌注前即刻腹腔注射特异性α7nAChR激动剂PNU282987 2.4 mg/kg.再灌注60 min时取5只大鼠,取心肌组织,测定Akt mRNA、STAT3 mRNA、磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化STAT3( p-STAT3)的表达水平.再灌注180 min时取10只大鼠,取心肌组织,测定心肌梗死面积.结果 与I/R组比较,IPC组心肌组织STAT3 mRNA和p-Akt表达上调,IPOC组心肌组织p-Akt和p-STAT3表达上调,PNU组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05),IPC组、IPOC组和PNU组心肌梗死面积缩小(P＜0.05).结论 α7nAChR激动剂后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制与PI3K/Akt和JAK/STAT两条信号转导通路无关.     

奥拉西坦对七氟烷诱发小鼠认知功能障碍的影响：PI3K/Akt信号通路在其中的作用

目的:评价奥拉西坦对七氟烷诱发小鼠认知功能障碍的影响及磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路在其中的作用。方法:成年昆明小鼠80只,雌雄各半,体重35～55 g,采用随机数字表法分为4组( n＝20)：对照组(C组)、七氟烷组(S组)、奥拉西坦+七氟烷组(OS组)和LY294002...     

内皮祖细胞迁移与PI3K/Akt信号转导通路

PI3K/Akt信号转导通路作为细胞内重要信号转导通路之一,通过其上、下游多种效应分子的活化而影响内皮祖细胞迁移,在血管内皮损伤后修复和血管新生过程中起关键作用。该文就PI3K/Akt信号转导通路的上、下游信号通路的激活调节机制及其对内皮祖细胞迁移的影响,作一综述。     

PI3K/Akt信号通路在异丙酚后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用

目的 评价磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路在异丙酚后处理减轻大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用.方法 体外培养SD乳鼠心肌细胞,接种于96孔板(细胞密度1×105/ml,200 μl/孔)或6孔板(细胞密度5×105/ml,2 ml/孔)中,采用随机数字表法,将细胞随机分为4组(n=24):常规培养组(C组)细胞常规培养6h;缺氧复氧组(H/R组)细胞行缺氧2h,复氧4h;缺氧复氧+异丙酚组(H/R+P组)于缺氧结束时行异丙酚(终浓度50 μmol/L)后处理;H/R+异丙酚+ PI3K抑制剂组(H/R+ P+W组)于缺氧结束时加入PI3K抑制剂渥曼青霉素(终浓度100nmol/L)和异丙酚(终浓度为50μmol/L).复氧结束时,采用MTT法测定细胞活力,应用生化自动分析仪测定培养液LDH活性;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot法检测心肌细胞磷酸化Akt(p-Akt)、Bcl-2及Bax表达水平.结果 与C组相比,H/R组细胞活力降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt和Bax表达上调,Bcl-2表达下调,Bcl-2/Bax降低(P＜0.05).与H/R组比较,H/R+P组细胞活力升高,LDH活性和细胞凋亡率降低,p-Akt和Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Bcl-2/Bax升高(P＜0.05).与H/R+P组比较,H/R+ P+W组细胞活力降低,LDH活性和细胞凋亡率升高,p-Akt和Bcl-2表达下调,Bcl-2/Bax降低(P＜0.05).结论 异丙酚后处理减轻心肌细胞缺氧复氧损伤的机制与激活PI3K/Akt信号通路有关.     

PI3K/Akt信号转导通路在人参皂甙Rb1预先给药减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号转导通路在人参皂甙Rb1预先给药减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠,体重250～300 g,采用腹腔注射链脲佐菌素的方法制备糖尿病模型,造模成功的糖尿病大鼠48只,饲养8周后,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=12):心肌缺血再灌注组(I/R组)、人参皂甙Rb1预先给药组(R组)、人参皂甙Rb1预先给药+PI3K抑制剂渥曼青霉素组(RW组)和渥曼青霉素组(W组).采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注的方法建立心肌缺血再灌注损伤模型.RW组和W组于缺血前20 min静脉注射渥曼青霉素15μg/kg,R组和RW组于缺血前10 min静脉注射人参皂甙Rb1 40mg/kg.再灌注120 min时采集动脉血样,测定血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性;然后处死大鼠,取心肌组织,采用四氮唑法测定心肌梗死面积;采用TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡,计算心肌细胞凋亡指数(AI);采用Western blot法测定心肌组织Akt和磷酸化Akt(p-Akt)表达.结果 与I/R组比较,R组血清CK和LDH活性、心肌梗死面积和心肌细胞AI降低,心肌组织p-Akt表达上调(P＜0.05);与R组比较,RW组血清CK和LDH活性、心肌梗死面积和心肌细胞AI升高,心肌组织p- Akt表达下调(P＜0.05).结论 人参皂甙Rb1预先给药通过PI3K/Akt信号转导通路减轻糖尿病大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

脊髓糖皮质激素受体在吗啡耐受大鼠PI3K/Akt信号通路中的作用

目的 探讨脊髓糖皮质激素受体(GR)在吗啡耐受大鼠磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路中的作用.方法 健康雄性SD大鼠,8～ 10周龄,体重300 ～ 350 g,取鞘内置管成功的大鼠40只,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=10):对照组(C组)鞘内注射生理盐水10μl;吗啡耐受组(M组)鞘内注射吗啡10 μg;地塞米松组(GR激动剂,DEX组)鞘内注射地塞米松4μg,30 min后注射吗啡10 μg; RU38486组(GR阻断剂,R组)鞘内注射RU38486 2 μg,30 min后注射吗啡10 μg.注射药物容量均为10μl,2次/d,连续7d.于每天第1次鞘内给药前和鞘内给药结束后1d测定甩尾潜伏期,计算最大抗伤害效应百分比( MPAE),最后一次甩尾潜伏期测定结束后,取脊髓背角组织,测定PI3K、Caspase-3的表达水平和Akt活性.结果 M组、DEX组和R组发生了吗啡耐受,C组未发生吗啡耐受.与C组比较,M组脊髓背角Akt活性降低,PI3K表达下调,Caspase-3表达上调(P＜0.01);与M组比较,DEX组MPAE和Akt活性降低,PI3K表达下调,Caspase-3表达上调,R组MPAE和Akt活性升高,PI3K表达上调,Caspase-3表达下调(P＜0.05).结论 脊髓GR可通过抑制PI3K/Akt信号通路参与吗啡耐受的形成.     

PI3K/Akt信号转导通路在乌司他丁后处理减轻CPB下心脏瓣膜置换术患者心肌细胞凋亡中的作用

目的 探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号转导通路在乌司他丁后处理减轻CPB下心脏瓣膜置换术患者心肌细胞凋亡中的作用.方法 择期CPB下心脏瓣膜置换术患者40例,性别不限,年龄21 ～ 59岁,心功能和ASA分级Ⅱ或Ⅲ级.采用随机数字表法,将患者分为2组(n=20):生理盐水对照组(C组)和乌司他丁后处理组(U组).U组于主动脉开放前5min经主动脉根部灌注乌司他丁4000～5000 U·kg-1 ·min-1(剂量1万U/kg);C组给予等容量生理盐水.于升动脉开放后45 min时取右心耳心肌组织,检测Akt、磷酸化Akt(p-Akt)与细胞色素c、caspase9、Bcl-2、Bax表达和细胞凋亡情况,并计算Bcl-2与Bax表达的比值(Bcl-2/Bax)和凋亡指数(AI).结果 与C组比较,U组心肌组织p-Akt与Bcl-2表达上调,心肌组织细胞色素c、caspase-9及Bax表达下调,Bcl-2/Bax升高,AI降低(P＜0.05).结论 乌司他丁后处理通过激活PI3K/Akt信号转导通路减轻CPB下心脏瓣膜置换术患者心肌细胞凋亡.     

电压门控钠离子通道β3亚基在小鼠神经病理性痛中的作用

目的 评价电压门控钠离子通道β3亚基(Scn3b)在小鼠神经病理性痛中的作用.方法 采用转基因手段,将目的基因Scn3b嵌入pBROAD-mcs载体中,成为pBROAD-rosa-Scn3b质粒,孕育原代小鼠.将原代小鼠和C57/B6小鼠进行配种,得到转基因小鼠.通过DNA、RT-PCR和Western blot实验鉴定过表达成功后,进行后续实验.随机选择Scn3b过表达转基因小鼠(Scn3b组)和同窝阴性对照小鼠(Con组)各10只,2月龄,雌雄不拘,体重25 ～ 30 g,制备神经病理性痛模型.分别于术前、术后3、5、7和14 d时,测定机械痛阈.结果 2组间不同时间点机械痛阈比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Scn3b不参与小鼠神经病理性痛的形成和维持.     

酸处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及PI3K/Akt信号通路在其中的作用

目的 评价酸处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在其中的作用.方法 清洁级SD大鼠70只,雌雄不拘,体重450-550 g,随机分为7组(n=10):缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理组(IPO组)、酸处理组(H+组)、缺血后处理+碱处理组(IPO+OH-组)、碱处理组(OH-组)、酸处理+渥曼青霉索组(H++wort组)和渥曼青霉素组(wort组).采用Langendorff装置行离体心脏灌注,采用全心停灌30 min、再灌注中性K-H液(pH值7.4)120 min的方法 制备大鼠离体心脏缺血再灌注模型.IPO组于再灌注即刻灌注中性K-H液15 s,停灌15 s,重复6次,行缺血后处理;H+组于再灌注即刻灌注经80%O2-20%CO2饱和的酸性K-H液(pH值6.9)3 min;IPO+OH-组于再灌注即刻灌注经100%O2饱和的碱性K-H液(pH值7.8)3min,并行缺血后处理;OH-组于再灌注即刻灌注碱性K-H液3 min;H++wort组于再灌注即刻灌注含100 nmol/L渥曼青霉素的酸性K-H液3 min;wort组于再灌注即刻灌注含100 nmol/L渥曼青霉素的中性K-H液3 min.于缺血前和再灌注30 min时记录左心室舒张末期压(LVEDP)和左心室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax);于再灌注30 min时测定冠状动脉流出液一氧化氮(NO)浓度;于再灌注120 min时,计算心肌梗塞区与缺血危险区的质量比,来表示心肌梗塞范围.结果 与I/R组比较,IPO组和H+组再灌注时LVEDP降低,±dp/dtmax升高,心肌梗塞范围减小,冠状动脉流出液NO浓度升高,OH-组、H++wort组心肌梗塞范围增加,wort组心肌梗塞范围增加,冠状动脉流出液NO浓度降低,IPO+OH-组LVEDP降低(P<0.05或0.01),±dp/dtmax、心肌梗塞范围和冠状动脉流出液NO浓度差异无统计学意义(P>0.05);IPO组与H+组上述指标比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 酸处理可减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤.其机制与激活PI3K/Akt信号通路有关.     

PI3K/Akt/mTOR信号通路在依达拉奉减轻老龄大鼠术后认知功能障碍中的作用

目的评价磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路在依达拉奉减轻老龄大鼠术后认知功能障碍中的作用。方法健康雄性SD大鼠60只, 20月龄, 体质量600～700 g, 采用随机数字表法分为4组(n=15):对照组(C组)、手术组(O组)、依达拉奉组(E组)和PI3K抑制剂LY294002组(LY组)。O组、E组和LY组于3%七氟烷麻醉下行剖腹探查术。E组和LY组术前30 min时腹腔注射依达拉奉3 mg/kg, 同时LY组尾静脉注射LY294002 0.3 mg/kg。术后3 d时行旷场实验评估大鼠自发活动能力, 然后行Morris水迷宫实验评估大鼠认知功能。行为学实验结束后处死大鼠分离海马组织, 采用Western blot法测定磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、突触素(SYP)和突触后致密蛋白95(PSD-95)的表达水平, 行高尔基染色记录海马CA1区神经元树突长度, 计算树突棘密度。结果 4组运动速度、路程及旷场中心停留时间比较差异无统计学意义(P>...     

SPP1在脊髓损伤小鼠神经病理性痛内源性保护机制中的作用：与VEGF/Akt信号通路的关系

目的:评价分泌磷蛋白1(SPP1)在脊髓损伤小鼠神经病理性痛内源性保护机制中的作用及其与血管内皮生长因子(VEGF)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的关系。方法:清洁级健康雌性昆明小鼠72只,7~8周龄,体重30~35 g,采用随机数字表法分为4组( n＝18)：假手术组(Sham组)、脊髓损伤致神经病理性痛...     

PI3K-Akt-eNOS信号转导通路在吗啡促人脐静脉内皮细胞一氧化氮合成中的作用

目的 评价磷脂酰肌醇-3激酶-蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶-内皮型一氧化氮合酶(PI3K-Akt-eNOS)信号转导通路在吗啡对促人脐静脉内皮细胞一氧化氮(NO)合成中的作用.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,实验Ⅰ:人脐静脉内皮细胞随机分为4组,每组6孔:C组和M1～3组,C组不予任何处理;M1～3组加入吗啡,终浓度为1 μmol/L,分别孵育3、6和12 h,随后测定NO含量;实验Ⅱ:人脐静脉内皮细胞随机分为4组,每组6孔:C组和M1～3组,C组不予任何处理;M1～3组加入吗啡,终浓度分别为0.01、1和100 μmol/L,孵育6 h,随后测定NO含量;实验Ⅲ:人脐静脉内皮细胞随机分为5组,每组6孔:C组、M组、MW组、MS组和ML组,C组不予任何处理;M组加入吗啡,终浓度1 μmol/L;MW组先加入wortmannin(PI3K特异性抑制剂),15 min后加入吗啡,终浓度分别为5、1μmol/L;MS组先加入SH-5(Akt特异性抑制剂),15 rain后加入吗啡,终浓度分别为10、1 μmol/L;ML组先加入L-NAME(eNOS特异性抑制剂),15 min后加入吗啡,终浓度分别为0.5、1 μmol/L,各组孵育6 h后,测定NO含量.结果 实验Ⅰ结果 :随吗啡孵育时间延长,促脐静脉内皮细胞NO合成的作用增强(P<0.05);实验Ⅱ结果 :随吗啡浓度升高,促脐静脉内皮细胞NO合成的作用增强(P<0.05);实验Ⅲ结果 :与C组比较,M组人脐静脉内皮细胞NO含量升高(P<0.05),MW组、MS组和ML组差异无统计学意义(P>0.05);与M组比较,MW组、MS组和ML组人脐静脉内皮细胞NO含量降低(P<0.05).结论 吗啡促人脐静脉内皮细胞NO合成呈浓度和时间依赖性,其机制可能与激活PI3K-Akt-eNOS信号转导通路有关.     

PI3K/AKT信号通路在异丙酚减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨PI3K／AKT信号传导通路在异丙酚减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤中的作用。方法 成年SD大鼠32只，随机分为4组：缺血再灌注组（I／R组）、异丙酚组（P组）、渥曼青霉素组（W组）和异丙酚＋渥曼青霉素组（PW组），每组8只。建立Langendorff离体心脏灌注模型，灌注压10kPa,灌注速率7．10ml／min，I／R组用K-H液灌注，P组用含50μmol／L异丙酚的K-H液灌注，W组用含100nmol／L渥曼青霉素的K-H液灌注；PW组用含50μmol／L异丙酚＋100nmol／L渥曼青霉素的K-H液灌注，灌注15min，全心缺血30min，再灌注60min。测定再灌注10、40min时冠脉流出液中心肌肌钙蛋白（cTnI）浓度，再灌注60min时测定心肌组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性，电镜下观察心肌细胞超微结构。结果 与I／R组比较，P组再灌注期间cTnI浓度明显降低，心肌组织SOD活性升高，MDA含量降低（P〈0．05），其余2组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与缺血前比较，P组再灌注40min时cTnI浓度升高，其余各组再灌注期间cTnI浓度均升高（P〈0．05或0．01）。P组电镜下心肌超微结构改变减轻。结论 异丙酚减轻离体大鼠心脏缺血再灌注损伤可能通过PI3K／AKT信号传导通路介导。     

PI3K-Akt-eNOS信号转导通路在吗啡促人脐静脉内皮细胞一氧化氮合成中的作用

Objective To evaluate the role of phosphatidyhnositol 3-kiuase-Akt-endothelial nitric oxide synthase (PI3K/Akt/eNOS) signal transduction pathway in nitric oxide (NO) synthesis increased by morphine in cultured human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods HUVECs were inoculated in 24 well palates in vitro. Three experiments were performed in this study. In experiment Ⅰ , HUVECs were randomly divided into 4 groups of 6 wells each: control group (group C) and morphine group (group MM1～3). In group M1～3,morphine with the final concentration of 1 μmol/L was added, and then the cells were incubated for 3, 6 and 12 h respectively. NO synthesis was viewed with fluorescence microscope and NO content was measured. In experiment Ⅱ , HUVECs were randomly divided into 4 groups of 6 wells each: group C and group M1～3. In group M1～3,morphine with the final concentrations of 0.01, 1 and 100 μmol/L was added respectively, and then the cells were incubated for 6 h. NO content was measured. In experiment Ⅲ, HUVECs were randomly divided into 5 groups of 6 wells each: group C, group M, group M + wortmannin (W) (group MW), group M + SH-5 (group MS) and group M + L-NAME (group ML). In group M, morphine with the final concentration of 1 μmol/L was added. In group MW, wortmannin (a PI3K specific inhibitor) was added and 15 min later, morphine with the final concentrations of 5 and 1 μmol/L was added. In group MS, SH-5 (an Akt specific inhibitor) was added and 15 min later, morphine with the final concentrations of 10 and 1 μmol/L was added. In group ML, L-NAME (an eNOS specific inhibitor) was added and 15 min later, morphine with the final concentrations of 0.5 and 1 μmol/L was added. The cells were then incubated for 6 h and NO content was measured in each group. Results In experiment Ⅰ , morphine treatment increased the endothelial NO synthesis in a time-dependent manner (P <0.05). In experiment Ⅱ , morphine treatment increased the endothelial NO synthesis in a concentration-dependent manner (P < 0.05). In experiment Ⅲ, increased NO synthesis by morphine treatment was abolished by wortmannin, SH-5, or L-NAME. Conclusion Morphine can increase NO synthesis in cultured HUVECs in concentration- and time-dependent manners, and the mechanism may be related to the activation of the PI3K-AKT-eNOS signal tranaduction pathway.     

吗啡后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及PI3K/Akt信号通路在其中的作用

目的 评价吗啡后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响及磷脂酰肌醇-3激酶,蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在其中的作用.方法 清洁级雄性SD大鼠70只,体重280～330 g,年龄16～17周.随机分为5组(n=14):假手术组(S组)、缺血冉灌注组(IR组)、吗啡后处理组(M组)、渥曼青霉素+吗啡后处理组(w+M组)和渥曼青霉素组(W组).采用结扎左冠状动脉前降支45 min、再灌注120 min的方法 制备心肌缺血再灌注模型.S组仅穿线,不结扎;M组于再灌注前3 min和再灌注后2 min时经左颈内静脉注射吗啡1.25 mg/kg;W+M组于结扎左冠状动脉前降支前20 min时经左颈内静脉注射PI3K特异性阻断剂渥曼青霉素15μg/kg,并行吗啡后处理;W组于结扎左冠状动脉前降支前20 min时经左颈内静脉注射渥曼青霉素15 μg/kg.于左冠状动脉前降支阻断前即刻、阻断20 min和再灌注120 min(T1-3)时记录心率(HR)、平均动脉压(MAP)和心率.收缩压乘积(RPP);于再灌注120 min时各组随机取9只大鼠,计算心肌缺血和梗塞范围;其余5只大鼠采用Western blot法测定心肌组织总Akt和磷酸化Akt的表达水平.结果 五组HR、MAP、RPP、心肌缺血范围和总Akt表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);与T1时比较,IR组、M组、S+M组和W组再灌注时MAP和RPP均降低(P<0.05);与S组比较,IR组和M组磷酸化Akt表达上调(P<0.05),W+M组和W组差异无统计学意义(P>0.05);与IR组比较,M组心肌梗塞范围缩小,心肌组织磷酸化Akt表达上调(P<0.01),W+M组和w组心肌梗塞范围差异无统计学意义(P>0.05).结论 吗啡后处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,可能与进一步激活PI3K/Akt信号通路有关.     

阿托伐他汀预处理对小鼠肠缺血再灌注损伤的影响及其与PI3K/Akt信号通路的关系

目的:探讨阿托伐他汀预处理对小鼠肠缺血再灌注损伤的影响及其与1-磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路的关系。方法:健康雄性C57BL/6小鼠24只,6~8周龄,体重18~22 g,采用随机数字表法分为4组( n＝6)：假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、阿托伐他汀预...