银杏叶提取物对肾病患儿外周血单个核细胞中细胞因子mRNA表达的影响

目的 探讨银杏叶提取物对原发性肾病综合征（NS）患儿外周血单个核细胞（PBMC）中炎症细胞因子IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达的影响.方法 将我科2000年10月～2005年3月收治的35例小儿NS患儿随机分为两组,银杏叶组20例,采用泼尼松加银杏叶提取物治疗;激素组15例,采用常规泼尼松治疗.8周为1个疗程,疗程结束后判断疗效.分别于治疗前、后观察临床和生化指标,同时应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测PBMC培养上清液中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的含量变化;采用原位逆转录聚合酶链反应（In Situ RT-PCR）检测PBMC中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达情况.结果 治疗8周后,临床症状及血液生化指标明显改善;两组NS患儿PBMC上清液中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的含量间差别均有显著性意义（P＜0.01）;两组NS患儿PBMC上清液中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达量间差别亦均有显著性意义（P＜0.01）;35例患儿治疗前mRNA均呈强阳性表达,治疗后表达强度降低.结论 银杏叶提取物对PBMC中IL-1、IL-6、IL-8和TNF-α蛋白及其mRNA表达有明显的抑制作用,银杏叶提取物治疗NS安全、有效,辅助激素治疗值得临床应用.     

紫癜性肾炎患儿外周血单个核细胞内GRα和GRβ表达

目的 :探讨过敏性紫癜肾炎 (HSPN )患儿外周血单个核细胞 (PBMC)内糖皮质激素受体 (GR )两种亚型GRα和GRβmRNA表达与糖皮质激素 (GC)治疗效应之间的关系。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR ) ,检测不同激素效应的HSPN患儿 (激素敏感组 10例 ,激素不敏感组 8例 )和正常对照组儿童 ( 8例 )GRα和GRβmRNA表达水平。结果激素不敏感组HSPN患儿PBMC内GRβmRNA表达显著高于激素敏感组 ( P <0 .0 5 。结论 :HSPN患儿PBMC内GRβmRNA的表达增多 ,可能与GC治疗不敏感有关。     

健胃宝治疗小儿厌食症100例临床观察

目的观察健胃宝合剂治疗小儿厌食症的临床疗效。方法将100例患儿随机分为两组,治疗组(50例)患儿口服健胃宝合剂,对照组(50例)患儿口服葡萄糖酸锌口服液,2周为1疗程,共2个疗程。比较两组患儿治疗前后体重、血红蛋白、免疫球蛋白等指标。结果两组患儿的疗效间差别有显著意义(P<0·01)。治疗前两组患儿体重增长的均值间差别无显著性意义(P>0·05),而治疗后体重增长的均值间差别有显著性意义(P<0·01)。治疗前两组患儿的血红蛋白、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、发锌、发钙、发铁的含量间差别均无显著性意义(P>0·05),而治疗后两组患儿上述各指标间差别均有显著性意义(P<0·01,P<0·05)。结论健胃宝可使患儿体重及血红蛋白、免疫球蛋白含量增加,改善厌食患儿的临床症状。     

小儿反复呼吸道感染患儿细胞免疫功能的变化

目的观察小儿反复呼吸道感染患儿细胞免疫功能状况,以进一步探讨其发病机制。方法采用酶联免疫斑点法测定小儿反复呼吸道感染患儿外周血T淋巴细胞亚群,Th细胞亚群,PBMC培养上清中IL-2和IL-4的含量。结果两组儿童T淋巴细胞亚群CD3、CD4、CD8的含量及CD4/CD8比值间差别均有显著性意义(P<0·01);两组儿童Th1、Th2水平及Th1/Th2比值间差别均有显著性意义(P<0·01),细胞因子IL-2和IL-4的含量间差别亦均有显著性意义(P>0·01)。Th1亚群与IL-2水平呈显著正相关(P<0·01);Th2亚群与IL-4水平呈显著正相关(P<0·01)。结论小儿反复呼吸道感染患儿细胞免疫功能紊乱,不仅T淋巴细胞亚群紊乱、Th细胞亚群亦处于失平衡状态。     

儿童原发性肾病综合征激素耐药性与外周血淋巴细胞激素受体mRNA表达水平的相关性

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿糖皮质激素(GC)耐药性与糖皮质激素受体mRNA(包括GRα与GRβ)表达的相关性。方法选择2012年6月—2014年12月儿科住院的初诊并予大剂量激素治疗PNS患儿80例作为研究组,按照患儿GC疗效反应分为激素敏感亚组与耐药亚组;另选择正常同龄儿童30例作为健康对照组。于治疗前采取静脉血5 ml,使用荧光定量PCR方法检测并比较外周血单个核细胞(PBMCs)中GRα和GRβ的mRNA表达水平。结果 80例PNS患儿中出现GC耐药15例(18.8%),GC敏感65例(81.2%),与健康对照组相比,研究组PBMCs的GRαmRNA、GRβmRNA表达水平均较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与GC耐药亚组相比,GC敏感亚组PBMCs的GRβmRNA表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05),而GRαmRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。采用Logistic回归分析校正相关混杂因素后显示,患儿PBMCs的GRβmRNA表达水平是GC耐药性的独立危险因素(OR=2.17,95%CI 1.17~9.21,P<0.05)。结论儿童PNS PBMCs的GRβmRNA表达水平是GC耐药性的独立危险因素,可作为预测GC反应性的临床参考指标。     

原发性肾病综合征患者激素敏感性与糖皮质激素受体亚型的关系研究

目的 探讨原发性肾病综合征(PNS)患者对糖皮质激素(以下简称激素)敏感性与其外周血单个核细胞(PBMC)内激素受体(GR)亚型表达的关系.方法 应用流式细胞术(FCM)检测正常对照组(10例)和PNS组(28例,其中激素敏感组10例、激素依赖组10例、激素抵抗组8例)外周血PBMC内α与β亚型表达水平的变化.结果 与正常对照组相比,PNS患者3组中GRα的表达水平均降低,差异有显著性(P< 0 .05 );GRβ在激素抵抗组中表达明显增高,差异有显著性(P<0.01),而在激素敏感组、激素依赖组中表达无明显差异(P>0.05).结论 PNS患者糖皮质激素受体GRα、GRβ表达水平的变化,导致GRα与GRβ比例失调,使组织细胞对激素的敏感性降低,因此,导致PNS患者对糖皮质激素治疗反应不同,PNS出现激素抵抗可能与GRβ表达水平增高有关.     

自制消肿破淤胶囊治疗非急性期下肢深静脉血栓形成122例

目的探讨消肿破淤胶囊治疗非急性期下肢深静脉血栓形成的疗效。方法将200例下肢深静脉血栓患者随机分成治疗组和对照组,治疗组口服消肿破淤胶囊,对照组口服华法令,均治疗3个月。结果两组疗效间差别有显著性意义(P<0·01);深静脉造影示两组患者静脉血管再通率间差别有显著性意义(P<0·01);治疗组患者治疗后凝血指标较对照组明显好转(P<0·01)。结论消肿破淤胶囊治疗非急性期下肢深静脉血栓形成疗效较理想。     

儿童原发性肾病综合征外周血糖皮质激素受体β及热休克蛋白90的变化及其意义

目的探讨原发性肾病综合征（PNS）患儿外周血单个核细胞（PBMC）上糖皮质激素受体β（GRβ）及热休克蛋白90（HSP90）与糖皮质激素治疗效应之间的关系。方法以30例PNS患儿作为观察组,根据随访结果分成激素耐药型肾病综合征（SRNS）和激素敏感型肾病综合征（SSNS）2组,各15例。10例健康儿童作为正常对照组。应用RT-PCR检测了各组PBMC上GRβmRNA及HSP90mRNA的表达;并分析以上指标与肾脏病理及相关临床实验室指标的关系。结果 （1）SSNS组患儿PBMC上GRβmRNA、HSP90mRNA的表达均高于对照组（均P〈0.05）。（2）SRNS组患儿PBMC上GRβmRNA、HSP90mRNA的表达均高于SSNS组（均P〈0.01）。（3）SRNS组患儿PBMC上GRβmRNA的表达与肾脏病理分级成等级正相关（r=0.496,P〈0.05）;与24 h尿蛋白定量（24 h UTP）成等级正相关（r=0.458,P〈0.05）。（4）SSNS组患儿PBMC上GRβmRNA的表达与24 h UTP无相关性（P〉0.05）。结论 GRβ及HSP90可能参与了SRNS的发生与发展。GRβ可以作为监测PNS患儿病情以及预后的指标之一。     

静脉用奈普生对儿童高热的退热效果观察

目的观察静脉用奈普生对儿童高热的退热效果和不良反应。方法将120例急性上呼吸道感染伴高热的患儿随机分为两组,分别静脉给予奈普生和阿司匹林治疗。测定治疗前、治疗后1h和6h的体温,计算治疗后1h两组患儿体温下降幅度,并观察不良反应。结果治疗后1h、6h两组患儿体温间差别均有显著性意义(P<0·01);静脉用奈普生组1h体温下降幅度与静脉用阿司匹林组相比,差别有显著性意义(P<0·01)。两组患儿均未出现明显的不良反应。结论奈普生静脉注射治疗儿童急性上呼吸道感染所致的高热起效快,不良反应小,使用安全。     

甘草甜素对肾病综合征患儿尿蛋白的影响

目的探讨甘草甜素对儿童肾病综合征（NS）患儿尿蛋白和血浆蛋白的影响。方法将我科2003年10月-2006年10月收治的30例小儿NS患儿随机分为两组,治疗组18例,采用强的松加甘草甜素治疗;对照组12例,采用强的松加对症治疗。均4周为1疗程,疗程结束后判断疗效。结果治疗前两组NS患儿血清尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、肌酐清除率（Ccr）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、血和尿β2-微球蛋白（β2-MG）、尿N-乙酰-β-D葡萄糖苷酶（NAG）、血浆清蛋白（Alb）、24h尿蛋白定量间差别均无显著性意义（P〉0.05）;而治疗后两组NS患儿上述各生化指标间差别均有显著性意义（P〈0.05）。结论甘草甜素治疗儿童肾病综合征有明显疗效,尤其在减轻蛋白尿,降低血脂,提高血浆清蛋白方面作用明显,对肾脏有保护作用,辅助激素治疗值得临床应用。     

肾病综合征患儿T细胞亚群与激素敏感关系的研究

目的:探讨原发性肾病综合征(INS)患儿外周血T细胞亚群与激素(GC)治疗效应的关系。方法:按激素疗效的不同将31例INS患儿分为激素敏感组(17例)及激素耐药组(14例),及20例对照组均于治疗前抽取静脉血分离单个核细胞,加入植物血凝素刺激其生长、传代。48h～72h时后取其上清液,用酶联免疫吸附双抗夹心法(ELISA)检测IL4、IFNr。结果:INS中激素敏感组体外PBMCs经PHA刺激产生的IL4水平(195.70±36.61)明显高于激素耐药组(121.17±43.81)及对照组(37.20±12.89)(P<0.01);INS患儿的IFNγ水平明显高于对照组(194.15±30.53),激素组(606.17±201.03)及激素组(485.64±198.33)之间差异无显著性P>0.05。结论:NS患儿外周血Th2细胞亚群表达升高可能是GC治疗敏感的原因之一。     

冷缺血损伤对大鼠供肾转化生长因子β1表达的影响

目的探讨冷保存对转化生长因子β1(TGFβ1)在大鼠肾小管上皮细胞表达的影响。方法选择Wistar大鼠40只,采取原位灌注整块肾脏切取,HC-A(肾脏保护液)灌注,在0～4℃下分别保存0,12,24,36和48h,采用免疫组织化学术,原位杂交术分别检测肾小管上皮细胞TGFβ1表达水平。结果在0h组,12h组大鼠肾小管上皮细胞中TGFβ1极少表达,两组TGFβ1蛋白,mRNA平均阳性单位(PU值)分别为(6.37±2.77),(5.29±2.15);(6.11±1.82),(5.90±2.40);差异均无显著性(P>0.05)。随着冷缺血时间延长至24、36及48h,TGFβ1蛋白,mRNA表达逐渐增加[24h组PU值分别为(10.20±3.27),(11.32±3.34);36h组PU值分别为(13.84±3.91),(15.47±4.21);48h组PU值分别为(17.17±3.96),(19.01±3.53)],各组间比较差异有显著性(P<0.05),各组与0h,12h组相比较差异亦有显著性(P<0.05)。结论冷缺血损伤促进大鼠肾脏转化生长因子-β1表达增加,促进细胞外基质的合成。     

LPA 和COX－2 在鼠肺纤维化模型中的表达及意义

目的: 探讨LPA－COX－2 在小鼠肺纤维化发生发展过程中表达及作用。方法: 80 只小鼠随机分为博
来霉素组(BLM 组)及生理盐水组(NS 组),采用ELISA 检测血清中溶血磷脂酸(LPA) 及环氧合酶－2(COX－2)
的表达;免疫组化法检测肺组织TGF－β1、EGFＲ、PGE2 及COX－2 的表达。结果: TGF－β1、EGFＲ、PGE2 及COX－
2 在NS 组肺脏中均有表达,但表达较弱;在BLM 组的表达强于NS 组。NS 组血清中LPA 少量表达,BLM 组血清
中LPA 呈高表达,有显著性差异(P＜0．01)。NS 组血清中COX－2 少量表达,BLM 组小鼠14d 时血清中COX－2
表达量明显增加(P＜0．01),随着肺纤维化的加重,小鼠血清中的COX－2 表达水平逐渐降低,但较正常对照组仍
有明显表达(P＜0．01)。结论: LPA、COX－2、PGE2、TGF－β1 和EGFＲ 均在BLM 组高表达;LPA 可能通过TGF－β1
途径及EGFＲ 途径共同调节COX－2 及PGE2 表达。     

脓疱型银屑病患者治疗前后外周血中性粒细胞表面黏附分子的表达变化及其意义

目的观察脓疱型银屑病(PP)患者经芳维A酸乙酯(AE)治疗前后外周血中性粒细胞(PMN)表面黏附分子CD15、CD11b的表达变化,并探讨其临床意义。方法应用流式细胞仪检测13例PP患者应用AE治疗前、后PMN表面黏附分子CD15、CD11b的荧光强度,以13例健康志愿者作为正常对照组。结果13例PP患者AE治疗前、后其PMN表面黏附分子CD15、CD11b的表达量间差别有显著性意义(P<0·01)。AE治疗后PP患者PMN表面黏附分子CD15的表达与正常对照者间差别无显著性意义(P>0·05),而CD11b的表达与正常对照者间差别有显著性意义(P<0·01)。结论AE是通过抑制PP患者PMN表面黏附分子CD15、CD11b的表达而发挥其临床疗效的;PMN表面黏附分子CD15、CD11b的表达可作为PP活动性的监测指标。     

尿液α1-抗胰蛋白酶、尿转铁蛋白水平与小儿原发性肾病综合征激素治疗效果的关联分析

目的 探讨尿液α1-抗胰蛋白酶(AAT)、尿转铁蛋白(TRF)水平预测小儿原发性肾病综合征(PNS)激素治疗临床效果的价值。 方法 选取山东大学齐鲁儿童医院2016年5月至2017年6月PNS住院患儿90例,根据糖皮质激素治疗4周后的反应分为激素敏感组(n=60)和激素耐药组(n=30),选取同期30 例健康儿童为正常对照组,收集20 mL新鲜晨起尿,4 ℃离心,收集上清液。收集所有患儿基本资料以及激素治疗前后的血胆固醇、血肌酐、白蛋白、24 h尿蛋白定量等生化指标。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测尿液中AAT和TRF的浓度,并经尿肌酐(Cr)校正后分析其预测PNS患儿对激素治疗效果的反应。 结果 激素敏感组和激素耐药组的尿液AAT/Cr比值和TRF/Cr比值均高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);激素敏感组和激素耐药组的尿液AAT/Cr比值和TRF/Cr比值差异有统计学意义(P<0.05);回归分析显示,尿液AAT/Cr比值和TRF/Cr比值是影响PNS激素治疗临床效果的危险因素(P<0.05)。 结论 激素耐药PNS患儿尿液中的AAT和TRF浓度均较激素敏感患儿升高;如果PNS患儿发病初期尿液中AAT和TRF浓度升高,提示可能为激素耐药。     

激素耐药型肾病综合征患儿外周血单个核细胞凋亡的临床观察

目的 :观察小儿肾病综合征 (NS)强的松治疗前后激素耐药者外周血单个核细胞 (PBMC)的细胞凋亡变化 ,探讨PBMC细胞凋亡在激素治疗中的意义及与疗效之间的关系。方法 :1 5例激素耐药型肾病综合征患者分别于强的松治疗前和治疗后第 2、4、6、8周采血 ,进行细胞凋亡形态观察 ,计算百分率。结果 :治疗前与治疗后 2、4、6周比较均 P<0 .0 5差异有显著性意义 ;但第 8周尿蛋白未见转阴 ,而凋亡率下降。结论 :小儿 NS耐药型患者使用足量强的松治疗可短期诱导外周血 PBMC细胞凋亡增加 ,至 8周时诱导凋亡减弱 ,故持续足量使用不应超过八周。当尿蛋白未好转 ,应及时加用其它免疫抑制剂治疗 ,由此可见 NS激素治疗的疗效与外周血单个核细胞的细胞凋亡变化存在有一定关系     

转化生长因子β1在溃疡性结肠炎中的表达

目的　探讨转化生长因子β1(TGFβ1)在溃疡性结肠炎 (U C)发病中的作用。方法　免疫组化 SP法检测 U C组 (n=32 )、感染性结肠炎 (IC)组 (n=30 )和正常对照组 (n=12 )三组患者结肠粘膜 TGFβ1表达 ,原位杂交检测 TGFβ1m RNA。结果　 UC组与 IC组结肠粘膜 TGFβ1及 TGFβ1m RNA表达无显著性差异 ,但与对照组比较表达均有显著性增高 (P<0 .0 0 1)。TGFβ1表达与 U C组织学分级呈正相关 (r=0 .4 6 2 ,P=0 .0 0 2 )。结论　 UC可能存在 TGFβ1信号传导异常。 TGFβ1可能是反映 U C疾病活动性的指标。     

B7/CD28家族共刺激分子在川崎病发病机制中的作用

目的观察在川崎病(KD)患儿外周血单个核细胞(PBMC)B7/CD28家族分子:CTLA-4、BTLA、ICOS、CD80、CD86表达变化,旨在探讨B7/CD28家族分子在KD发病机制中的作用。方法应用荧光定量PCR检测48例KD患儿和其中30例用丙种球蛋白(IVIG)治疗后患儿的CTLA-4、BTLA、ICOS mRNA表达的变化,部分患儿应用流式细胞术测定CD80、CD86表达状况。本研究以25例同龄健康儿童作为对照组。结果(1)KD组与对照组相比:正性调节因子ICOS mRNA的表达显著升高(P<0.01);CD80、CD86表达升高(P<0.01);负性调节因子CT-LA-4、BTLA mRNA的表达则显著降低(P<0.05,P<0.01)。其中冠状动脉损害组较无冠状动脉损害组ICOS表达程度更高(P<0.01)。(2)KD组中IVIG治疗前后进行配对比较:IVIG治疗后CTLA-4、BTLA mRNA表达显著回升(P<0.05),ICOS mRNA的表达则显著下降(P<0.05)。IVIG治疗不敏感组与敏感组比较:ICOS表达前者显著升高(P<0.05),CTLA-4、BTLA表达显著降低(P<0...     

哮喘患儿血IL-4及Eotaxin的含量变化及意义

目的　探讨支气管哮喘患儿血浆白细胞介素 - 4 (IL - 4 ) ,嗜酸性粒细胞趋化蛋白 (Eotaxin)含量的变化及临床意义。方法　采用ELISA法测定 4 7例哮喘患儿 (发作期 2 8例 ,缓解期 19例 )的血IL - 4、Eotaxin的含量 ,并与正常对照儿比较。结果　哮喘发作组、缓解组患儿与正常对照儿的IL - 4含量间差别有显著性意义 (P <0 0 5 ) ;发作组与缓解组患儿的IL - 4含量间差别亦有显著性意义 (P <0 0 5 )。哮喘发作组患儿与缓解组患儿及正常对照儿的Eotaxin含量间差别均有显著性意义 (P <0 0 5 ) ,而缓解组患儿与正常对照儿的Eotaxin含量间差别无显著性意义 (P>0 0 5 )。血IL - 4含量和Eotaxin含量呈正相关 (P <0 0 5 )。结论　哮喘患儿血IL - 4、Eotaxin含量能反应哮喘气道炎症活动情况及疾病的严重程度 ,两者存在正相关。     

自我管理教育在儿童哮喘防治中的作用

目的探讨自我管理教育在儿童哮喘防治中的作用。方法将82例门诊哮喘患儿按分层随机法分为两组,教育组接受哮喘基本知识教育及自我管理教育,对照组仅接受哮喘基本知识教育。分别记录两组患儿近1周症状记分、近1周β2-激动剂喷数、近1年急诊次数、误学天数及最大呼气峰流速(PEF)。结果治疗前两组患儿PEF值、日间症状记分、夜间症状记分、误学天数、β2-激动剂喷数及近1年急诊次数间差别均无显著性意义(P>0.05),治疗1年后两组患儿上述各指标间差别均有显著性意义(P<0.01)。两组患儿治疗依从性间差别有显著性意义(P<0.01)。结论通过哮喘患儿自我管理教育可以减少患儿哮喘发作、提高治疗依从性,改善患儿生活质量。