重组人铜锌SOD的部分理化性质研究

对rhCu，Zn-SOD进行SDS-PAGE测定该SOD的亚基分子质量为19ku，该酶对热稳定，在pH5左右的活力最高，对乙腈、EDTA等抑制剂敏感，但是对SDS、尿素等变性剂表现出很好的稳定性。对该酶进行光谱分析表明，在265nm和673nm具有吸收峰，原子吸收光谱分析表明每分子SOD含有2个铜原子和2个锌原子，ESR表明铜原子价态为2价。可认为该重组酶与天然Cu，Zn-SOD在理化性质和结构上基本相同。     

羊红细胞铜锌超氧化物歧化酶的纯化及部分性质研究

目的：从羊红细胞中分离纯化铜锌超氧化物歧化酶(Cu，Zn—SOD)．并对其部分理化性质进行研究．方法：采用有机溶剂去除血红蛋白，热变性，超滤浓缩，丙酮沉淀、DF—FF柱色谱的方法．对羊红细胞Cu．Zn-SOD进行分离纯化。结果：羊红细胞520g得Cu，Zn—SOD总活力为467000IU．比活为8126μ／mg.pro，纯化倍数为26．2，活性回收率为61％，理化性质分析表明，该酶的最大紫外吸收波长为285nm，亚基相对分子量为16．1ku，每个亚基含1个铜原子和1个锌原子，pH在6-11范围内该酶稳定性很好，在35℃-75℃范围内，保温20min，酶活基本没有损失。2mmol／L的SDS对Cu，Zn—SOD没有明显的抑制作用，而2mmol／L的H2O2对该酶表现出较强的抑制作用，结论：采用此方法分离纯化的Cu，Zn—SOD达到电泳纯，其理化性质与其它动物血液来源的Cu，Zn—SOD一致。     

酵母SOD分离纯化及其酶学性质的研究

目的发酵培养Y12 酵母菌分离制备酵母SOD并研究其部分酶学性质。方法用已筛选出的一株Y12 酵母菌对其在优化培养条件下发酵培养得到湿菌体 ,破壁抽提得SOD粗酶液 ,采用硫铵盐析、丙酮沉淀、SephadexG 10 0凝胶过滤和QAE SephadexA 5 0离子交换柱层析 ,分离得到酵母SOD并测定其部分酶学性质。结果Y12 酵母菌SOD产量达 12 6 3u·g-1湿菌体 ,分离得到酵母SOD ,该酶属Cu、Zn SOD ,比活力为 10 73 5u·mg-1,活力回收率为 5 4 1% ,紫外吸收峰在2 5 7 2nm ,分子质量为 32 4 5 6u ,亚基分子质量为 16 2 2 7u。结论此酵母SOD与文献中报道的动物血红细胞Cu、Zn SOD基本相近。     

羊红细胞铜锌超氧化物歧化酶的纯化及部分性质研究

目的从羊红细胞中分离纯化铜锌超氧化物歧化酶 (Cu ,Zn SOD) ,并对其部分理化性质进行研究。方法采用有机溶剂去除血红蛋白、热变性、超滤浓缩、丙酮沉淀、DE FF柱色谱的方法 ,对羊红细胞Cu ,Zn SOD进行分离纯化。结果羊红细胞 5 2 0g得Cu ,Zn SOD总活力为 4 6 70 0 0u ,比活为 812 6u/mg·pro,纯化倍数为 2 6 .2 ,活性回收率为 6 1%。理化性质分析表明 :该酶的最大紫外吸收波长为 2 5 8nm ,亚基相对分子量为 16 .1kD ,每个亚基含 1个铜原子和 1个锌原子。pH在 6～ 11范围内该酶稳定性很好 ,在 35℃～ 75℃范围内 ,保温 2 0min ,酶活基本没有损失。 2mmol/L的SDS对Cu ,Zn SOD没有明显的抑制作用 ,而 2mmol/L的H2 O2 对该酶表现出较强的抑制作用。结论采用此方法分离纯化的Cu ,Zn SOD达到电泳纯 ,其理化性质与其它动物血液来源的Cu ,Zn SOD一致。     

联苯胺对大鼠肝脏线粒体同工酶的影响

采用不同浓度联苯胺(50mg/kg，100mg/kg，200mg/kg)对大鼠进行腹腔注射，研究了大鼠肝脏线粒体Ca^2 -ATP酶和超氧化物歧化酶(SOD)活性及其同工酶的变化。结果表明在联苯胺作用下这2种酶的活性表现为低浓度被激活，高浓度被抑制；在同工酶谱中出现了ATPl、SOD3和SOD4这3种酶的特异性表达。分析认为，联苯胺对大鼠肝脏线粒体的毒性作用可能为一种混合机制。     

柞蚕幼虫铜锌超氧化物歧化酶的纯化及部分性质研究

目的从柞蚕幼虫分离铜锌超氧化物歧化酶 (Cu ,Zn SOD) ,并对其部分性质进行研究。方法用氯仿 乙醇除杂蛋白质、丙酮沉淀、热变性、DE 32柱色谱等方法 ,对柞蚕幼虫Cu ,Zn SOD进行分离纯化。结果得Cu ,Zn SOD干粉 9.5 3mg ;比活 10 116 .5 8u/mgpro ;活力回收 5 5 .87% ;纯化倍数为 36 0 .6 7。该酶相对分子质量 (Mr)约为 310 0 0 ;亚基Mr 约为 15 5 0 0 ;最大吸收波长 2 5 8nm ;pH在 5～ 9范围内基本稳定 ;在 4 0℃～ 6 0℃内保温 30min酶活基本不变 ;2mmol/L十二烷基硫酸钠对此酶没有明显的抑制 ;该酶对KCN和H2 O2 敏感。结论柞蚕幼虫含有丰富的Cu ,Zn SOD。     

籽草SOD的分离纯化

从籽草中分离纯化的SOD比活为1855U／mg，纯化倍数约为100倍，总活力回收率22．6％，经SDS-PAGE测定，纯化的SOD纯度达电泳纯，该酶对氰化物和过氧化氢敏感，可证明其为Cu／Zn-SOD。     

大鼠血清和某些器官超氧化物歧化酶活力的测定方法

超氧化物岐化酶（SOD）广泛存在于各种生物体内，它是防御机体由于氧代谢过程中接受电子不足形成的超氧自由基（O2^-）损害的主要防御酶。在所有需氧有机体内都存在SOD，它是一种金属蛋白。目前测定SOD活力的方法很多。但操作较为繁琐，稳定性较差。给研究工作带来不便和困难。为此，根据Cai和Wei法稍加修改，为实验研究提供较为简便、快捷和稳定的SOD活力测定方法。     

纤维-壳聚糖复合材料固定超氧化物歧化酶的研究

目的 制备固定化超氧化物歧化酶(SOD)并研究其酶学性质.方法 以纤维-壳聚糖复合材料为载体,戊二醛为交联剂固定SOD,测定活力,考察重复使用性、催化特性、稳定性.结果 固定SOD的活力为0.871 ±0.014 U·cm-2;重复使用性较吸附固定SOD显著增强(P＜0.05),适宜催化pH、温度范围较游离酶扩大,自由基清除率与游离酶相当;高温稳定性、酸稳定性、H2 O2稳定性、胰蛋白酶稳定性均较游离酶显著增强(P＜0.05).结论 固定SOD的制备方法简单,活力稳定,既保持较高的自由基清除率,又提高了对环境的耐受性,有利于工业上重复使用.     

突变SOD1cDNA亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中

目的将突变SOD1cDNA亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。方法利用PCR方法从重组子pEGFP—N2-mSOD1中扩增突变的SOD1cDNA片断。以EcoRⅠ／salⅠ双酶切突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7，在T4DNA连接酶的作用下，连接突变SOD1cDNA片断和酵母穿梭表达质粒pGBKT7。转化感受态DH5α，筛选重组子，进行双酶切和测序鉴定。结果经酶切和测序鉴定，突变SOD1cDNA成功地亚克隆入酵母穿梭表达质粒pGBKT7中。结论亚克隆成功，可以对目的基因进行下一步研究。     

应用TL PAG—IEF方法测定人红细胞超氧化物歧化酶（SOD）同工酶

本文应用T%=7% C%=3.7%簿层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦（Thin-Layer polyacrylamide Gel-Isoelectric Focusing,TL PAG-IEF)技术电泳分离人红细胞溶血液和/或人红细胞SOD抽提液，使用了一种自行设计的SOD同工酶染色装置行特异性的SOD同工酶染色。可将人红细胞SOD分为11条同工酶带。又根据酶带的pI、酶带理化性质、酶带特征和失活情况，分为三组同工酶。其中A组SOD同工酶为Cu、Zn-SOD,有三条（pI为4.50、4.65、4.77)，B组SOD同工酶有三条（pI为4.87、4.95、5.10），C组SOD同工酶有五条（pI为5.48、5.75、5.83、6.52、8.45)，B、C两组SOD同工酶既非Cu、Zn-SOD，又非Mn-SOD。其中C组SOD同工酶特别容易失活。B、C两组SOD同工酶的生理功用及临床意义尚不清楚。     

胰激肽原酶油相制剂的制备及稳定性研究

目的:制备胰激肽原酶油相制剂并对其稳定性进行考察。方法:采用无水反胶束法制备胰激肽原酶油溶液,以紫外分光光度法测定胰激肽原酶的效价,测定了油溶液含药量,并考察了胰激肽原酶油相制剂的稳定性。结果:胰激肽原酶在2～10 IU·mL-1线性关系良好,回收率在98．0％～104．0％。所得胰液肽原酶油相制剂在常温下较稳定,其效价为(116．64±8．58)IU·mL-1。结论:该制剂制备简单,性质稳定。     

铝对大鼠海马神经细胞线粒体酶的影响

目的探讨线粒体酶在铝致大鼠凋亡神经细胞中的改变。方法健康雄性SD大鼠40只，按体重随机分为4组：生理盐水、AL^3＋ 2．5、5、10mg／kg组。腹腔注射染毒60d后处死，用TUNEL法检测细胞凋亡，电镜观察线粒体结构的改变，用试剂盒测定线粒体超氧化物歧化酶（SOD），琥珀酸脱氢酶（SDH），三磷酸腺苷（ATP）酶（总ATP、Na^＋-K^＋ATP，Ca^2＋ ATP和Mg^2＋ ATP酶）活力。结果 随染铝剂量的增高，凋亡指数（AI）逐渐升高（P〈0．05），Na^＋-K^＋ ATP酶、Ca^2＋ ATP酶、Mg^2＋ ATP酶和SOD均降低（P〈0．05）；海马神经细胞SDH均数降低，但差异无显著性（P〉0．05）。海马神经细胞凋亡指数与Na^＋-K^＋ ATP酶、Ca^2＋ ATP酶、Mg^2＋ ATP酶和SOD呈负相关（r=-0．439，-0．501，-0．530，-0．815，P〈0．05），与SDH没有相关性（r=0．287，P〉0．05）。结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡，并引起线粒体结构和线粒体酶活力的改变。     

巴马火麻仁油、蛋白粉和木脂素酰胺类提取物对老年小鼠的抗衰老作用研究

目的研究广西巴马产火麻仁油、火麻仁蛋白粉与火麻仁木脂素酰胺类提取物的抗衰老作用。方法采用自然衰老小鼠,每日不同浓度火麻仁油（2．5、5、10mL·kg^-1·d^-1）、火麻仁蛋白粉（1．3、2．6g·kg^-1·d^-1）与火麻仁木脂素酰胺类提取物（0．11、0．22g·kg^-1·d^-1）灌胃,持续30d,最后检测老年小鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量,脑组织与肝组织中SOD、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）、MDA含量,脑组织总抗氧化能力（T_AOC）,肝脏中ATP酶活力以及皮肤中Hyp含量,取少量皮肤制备天狼星红切片。结果火麻仁油、火麻仁蛋白粉与火麻仁木脂素酰胺类提取物均能显著提高老年小鼠体内的SOD与GSH-Px活力,增强其总抗氧化能力,降低MDA含量,调节血脂,增强ATP酶活力,改善能量代谢,增加皮肤中羟脯氨酸的含量,皮肤天狼星红病理切片也显示胶原蛋白含量明显增加。结论火麻仁油、火麻仁蛋白粉与火麻仁木脂素酰胺类提取物均有较强的抗衰老作用,尤其是火麻仁木脂素酰胺类提取物,具有进一步的研究开发价值。     

汉防已甲素对大鼠急性缺血性肾衰的保护作用

目的 研究汉防已甲素对急性缺血性肾衰的保护作用。方法 术前3d开始每天1次及术前1h ig汉防已甲素20mg/kg、40mg/kg。然后制作大鼠肾脏缺血再灌注致急性缺血性肾衰模型，测定肾组织中MDA、SOD、Na^ 、K^ -ATP酶和Ca^2 -ATP酶含量及切片观察肾脏形态。结果 缺血60min再灌注20min后肾组织中MDA明显升高，SOD、Na^ 、K^ -ATP酶和Ca^2 -ATP酶均显降低。用药组MDA显下降，SOD和ATP酶均明显升高。病理结果提示再灌注组肾小管上皮明显变性，而用药组损害明显减轻。结论 汉防已甲素对急性缺血性肾衰有一定的保护作用。     

超氧化物歧化酶的催化作用机理

<正> 在数以千种酶中仅超氧化物歧化酶(SOD)作用的底物为自由基,即超氧化物自由基(O_2~·)或其质子化产物HO_2~·(H~++O_2HO_2·)SOD属金属酶类,有Cu,Zn-SOD,Mn-S~(oD)和Fe-SOD三种。它们都能催化O_2~·歧化为H_2O_2与O_2。SOD催化作用机理涉及到底物,酶的结构与活性部位以及酶的催化反应。现简述这三方面的研究概况与展望。一、底物在非酶反应中0_2~·或HO_2可自动歧化为H_2O_2与O_2,但其反应速率(K)随反应物为     

CPDA液保存库血红细胞SOD和ATP酶活性的变化

CPDA保养液中因加入了腺嘌呤，促进ATP的合成，为红细胞代谢提供了能量。但ATP能量的释放需要红细胞ATP酶的水解，因此，ATP酶活性的高低决定红细胞能量的利用。SOD酶可防止细胞氧化损伤。SOD酶活性影响红细胞的保存。我们通过观察血液保存期间两种酶的活性变化，探讨其对红细胞质量的影响。     

模拟抗氧酶的生物学作用及其在医药学中应用

<正> 超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(Cat)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是需氧生物体内重要的抗氧酶。所谓抗氧酶就是指能清除氧代谢中产生某些活性氧的酶。SOD、Cat与GSH-Px的生物学作用分别为清除超氧化物自由基(O_(?)或HO_2)、过氧化氢(H_2O_2)以及脂质过氧化物(LOOH)或H_2O_2。在活性氧中除     

抗自由基复酶脂质体的制备及其性质的初步研究

目的 制备超氧化物岐化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)复酶脂质体并初步考察其性质.方法 采用逆相蒸发法制备SOD与CAT复酶脂质体冻干制剂,正交试验优化制备工艺,并研究其平均粒径、SOD包封率、CAT吸附量及脂质体渗漏率等性质.结果 SOD与CAT复酶脂质体在电镜下均匀完整,呈球形和椭圆形,平均粒径225 nm.复酶脂质体SOD平均包封率为39.2%,CAT平均吸附量为49.3%;复酶脂质体SOD 24 h的渗漏率为15.5%.结论 逆相蒸发法制备超SOD与CAT复酶脂质体可获得较高的包封率、稳定性和吸附最,具较高可行性.     

超氧化物歧化酶的测定及临床应用

超氧化物歧化酶((Superoxide Dismutase简称SOD)是生物体内一种重要的氧自由基清降剂,广泛存在于生物体内。该酶在防御氧的毒性、抗辐射损伤、预防衰老及防治肿瘤和炎症等方面起重要作用。该酶属金属酶,按所含金属辅基的不同,分为3类:第1类(CuZn SOD)主要存于真核细胞的胞浆中;第2类(FeSOD)主要存在于原核细胞中;第3类(Mn-