基于蛋白质组学技术对竹叶青蛇毒染毒家兔模型血清蛋白质变化的检测及其意义

目的:探讨竹叶青蛇蛇毒模型中血清蛋白的表达,阐明竹叶青蛇蛇毒在染毒过程中标志蛋白的表达情况.方法:将12只雌雄不限日本大耳兔随机分为假手术组和模型组,每组6只.模型组家兔给予20 mg·kg-1竹叶青蛇毒肌肉注射,假手术组家兔给予等量生理盐水注射;4 h后,2组日本大耳兔用戊巴比妥钠麻醉后心脏采血,分离血清,采用绝对定...     

SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术在宫颈癌早期诊断和鉴别诊断中的应用

目的 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术检测宫颈浸润癌和原位癌患者血清蛋白质指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物.方法 应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集74例宫颈癌(44例宫颈浸润癌和30例宫颈原位癌)患者和51例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白,应用Biomarker patternsoftware 5.0.2版建立诊断模型,并盲法验证其诊断效率.结果 宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有12个差异表达的蛋白质峰(P<0.05),筛选出分子量分别为5642、5912、5905、5660、2288和8700 Da 6个标志蛋白,将125例血清随机分为30例宫颈癌和30例健康人血清作为训练组用于建立人工神经网络(ANN)模型,44例宫颈癌和21例健康人血清作为验证组,其对宫颈癌的诊断敏感性为95.45%,特异性为95.23%.宫颈浸润癌与原住癌血清蛋白质谱有16个差异表达的蛋白质(P<0.01),筛选出分子量分别为13776、2796、2697、2070、2768和9222 Da 6个标志蛋白,随机将15例宫颈浸润癌和15例原位癌血清分为训练组,29例浸润癌和15例原位癌作为验证组,其鉴别宫颈浸润癌的敏感性为93.10%.特异性为93.33%.宫颈原位癌患者与对照组血清蛋白质谱比较有6个差异表迭的蛋白质(P<0.05),分别随机选取15例宫颈原位癌和15例健康人血清作为训练组,15例原位癌和36例健康人血清作为验证组,其诊断宫颈原位癌的敏感性为60%,特异性为98.08%.结论 血清蛋白质谱技术可望用于宫颈浸润癌和原位癌的鉴别,标志蛋白的鉴定可能对宫颈癌浸润机制的探讨和新的治疗手段的开展具有重要的指导意义.     

血清蛋白质指纹图谱筛选上皮性卵巢癌及预测肿瘤复发的应用研究

目的:建立人上皮性卵巢癌蛋白质组诊断模型,并盲法验证.方法:应用蛋白质芯片SELDI-TOF MS技术和生物信息学方法,比较40例上皮性卵巢癌患者手术前后、29例卵巢癌复发患者、22名健康人血清蛋白质谱,用45例包括良恶性卵巢病变患者和健康人的血清作肓筛验证.结果:卵巢癌和正常人血清比较,P＜0.01的差异蛋白峰有7个,用其中的质荷比4 162.69、5 804.26、6 749.37建立诊断模型,诊断的敏感度为98.3％,特异度为95.7％,阳性预测值为96.7％.卵巢癌术前、术后血清蛋白质谱比较,P＜0.01的差异蛋白峰有4个,术后化疗后复发与正常人血清差异蛋白质峰有5个,其中质荷比5 804.26蛋白峰术后下降、复发时升高.结论:应用SELDI方法建立人卵巢癌血清蛋白质谱诊断模型可用于卵巢癌的筛查,质荷比5 804.26蛋白峰有望成为卵巢癌疗效监测特异蛋白峰.     

针刺血清对急性失血性休克家兔血压即时效应影响的实验研究

目的:观察针刺血清和空白血清对失血性休克家兔血压影响的即时效应。方法:10只家兔随机分成针刺血清组和空白血清组,每组5只,分别观察两组治疗后家兔血压的变化。结果:针刺血清组血压升高幅度比空白血清组大,持续时间比空白血清组长,病死率比空白血清组低。结论:针刺血清组效果优于空白血清组。     

兔骨折模型应用胎盘多肽的实验研究

目的:观察胎盘多肽注射液对家兔骨折模型愈合过程的影响.方法:选用30只雄性新西兰家兔,随机分为3组.正常组(10只)不予任何处理,模型组(10只)和治疗组(10只)均手术处理,制作骨折模型,治疗组家兔术后第6天开始每天注射胎盘多肽注射液4 mL,所有家兔于4周后处死,观察骨折部位骨痂生长、骨生物力学、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、转化生长因子-β2(TGF-β2)、骨钙素(BGP)及血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果:治疗组和模型组均有骨痂组织生长,治疗组及模型组中BMP-2、TGF-β2、BGP、VEGF表达量均高于正常对照组,且治疗组VEGF、BMP-2切片阳性细胞数高于模型组,但治疗组与模型组TGF-β2、BGP阳性细胞数大体相当.结论:胎盘多肽注射液在骨折愈合过程中促进骨痂组织的生长,可能与提高BMP-2、VEGF表达有关.     

运用激光解析电离飞行时间质谱技术检测肺腺癌的血清蛋白表达

目的 运用激光解析电离飞行时间质谱技术(ClinProt技术)寻找肺腺癌相关蛋白,以期对肺癌的早期诊断、治疗效果及预后等做出判断.方法 应用ClinProt技术对10例患者及10例正常人进行质谱分析寻找差异蛋白,观察差异蛋白在肺腺癌患者术后1周的变化.结果 正常人与肺腺癌患者血清比较,发现6个差异蛋白峰,其中相对分子质量为2661、2991的蛋白在肺腺癌组表达增高且术后继续呈增高趋势,相对分子质量为4091、4210、4644、5336的蛋白在肺腺癌组表达降低且术后继续呈降低趋势.结论 肺腺癌患者与正常人之间的差异蛋白可能成为潜在的肺腺癌血清标志物.发现差异蛋白在术后的变化,可能有助于治疗效果的检测及预后的判定.     

CD45在克罗恩病患者血清中的表达

目的 应用蛋白质组学方法在患者血清中寻找与克罗恩病相关的蛋白质.方法 采取克罗恩病患者以及正常成人血清蛋白样本各4例,用不同的CyDye荧光染料标记后进行胶内差异双向凝胶电泳(2-D DIGE),并对获得的图谱进行分析及对差异蛋白质进行基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱鉴定.结果 通过2-D DIGE分析,发现克罗恩病患者中存在29个表达异常蛋白质点,其中胶号为973的蛋白质点,在克罗恩病患者患者血清中比正常成人组表达升高2.55倍(P<0.05),该蛋白点经质谱鉴定为CD45.结论 CD45在克罗恩病患者血清的高表达提示在克罗恩病的病程中免疫系统失衡可能起着一定作用.     

双向电泳联合串联质谱技术筛查人胃癌血清蛋白质标记物

目的:通过血清蛋白质组学技术寻找胃癌标记物,是目前肿瘤研究的热点.文中比较胃癌患者与正常人血清蛋白质的差异,以寻找候选血清标记物. 方法:①随机选取20例胃癌患者(胃癌组)血清,pTNM分期(Ⅰ～Ⅳ期)各5例,10例正常人(对照组)血清作对照.②血清样品处理:通过蛋白亲和柱去除血清清蛋白和IgG两种高丰度蛋白.③通过双向电泳进行差异比较,利用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI/TOF/TOF/MS)鉴定差异蛋白点.④利用免疫印记方法对筛选的标记物蛋白质进行验证. 结果:发现胃癌患者较正常人存在多个蛋白质点差异,差异蛋白质点质谱鉴定结果显示,补体 C4-B 前体在胃癌血清中含量明显增高;补体因子Ⅰ前体和血清结合珠蛋白前体则含量显著降低(P＜0.01). 结论:利用血清蛋白质组学技术可筛选出胃癌血清蛋白标记物,为胃癌的血清学诊断提供依据.     

跟腱断裂术后运动康复治疗观察

目的:探讨开放性跟腱断裂修复术后运动疗法康复治疗与自然恢复对疗效的影响.方法:对52例开放性跟腱断裂术后患者临床资料进行分析,术后随访8～18个月,观察疗效.结果:按Arner-Lindholm疗效评定标准,运动康复组优良率90.32%(28/31),自然恢复组优良率71.42%(15/21).术后运动康复组伤口感染1例,无再次断裂.自然恢复组伤口感染3例,皮肤与跟腱粘连1例,再次断裂3例.结论:开放性跟腱断裂术后规则运动康复治疗,能有效提高疗效,减少术后并发症.     

督脉电针对急性脊髓损伤6 h后大鼠差异蛋白质组学的机理研究

目的确定急性脊髓损伤(SCI)后差异表达蛋白,初步探讨其功能,从差异蛋白组学角度研究SCI的病理机制,以及电针对该病的治疗作用。方法大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、药物组、电针组,每组15只大鼠,共75只。采用自制的改良式Allen’s打击装置造模。术后6h取脊髓损伤区2cm的脊髓组织称重,保存。对样本蛋白进行提取、定量、蛋白双向电泳图像分析,找出差异点进行质谱分析和数据库检索。结果成功鉴定出6种蛋白质:假定蛋白LEF3-IAP2、泛素羧基末端水解酶、先驱B环蛋白3、假定蛋白ORF F-93、角蛋白16、泡溶酶蛋白。结论通过本动物实验可见,针刺对早期脊髓损伤具治疗效果。鉴定出的蛋白质可能通过引起炎症细胞浸润、神经细胞凋亡等途径参与了SCI的损伤及修复过程。