新疆哈萨克族食管鳞癌组织Smad4基因启动子甲基化的检测

目的：检测新疆哈萨克族食管鳞癌组织中抑癌基因Smad4启动子区的甲基化状态,并描述其在哈萨克族食管鳞癌发生和发展中的作用。方法：应用MassARRAY技术平台检测2009—01-01—2011—10-31新源县人民医院收集的新疆食管癌高发区-伊犁哈萨克自治州哈萨克族食管鳞癌组织37例和当地正常人食管组织33例中Smad4基因启动子的甲基化状态。结果：哈萨克族食管癌组与对照组中Smad4基因启动子的12个CpG单位,6-甲基化率的平均值分别为40．07％和30．15％,差异有统计学意义,Z=-2．611,P=0．01】。哈萨克族食管鳞癌组织和正常人食管组织中Smad4基因启动子区CpG-1的平均甲基化水平分别为1．7％和O．7％,z=-2．2,P=0．028;CpG-16—19的平均甲基化水平分别为4．5％和2．2％,z=-3．3,P=0．001;CpG-27—28的平均甲基化水平分别为4．9％和3．0％,z=-2．6,P=0．007;CpG-31—33的平均甲基化水平分别为6．8％和5．5％,z=-2．5,P=0．012。结论：Smad4基因启动子甲基化参与了哈萨克族食管癌的发生和发展,Smad4基因启动子区CpG-1、CpG-16—17—18—19、CpG-27—28和CpG-31—32—33甲基化状态的改变可能与新疆哈萨克族食管癌发生和发展有关。     

HPV16感染与新疆哈萨克族食管癌发病及临床病理学研究

背景与目的:人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)作为食管癌发生重要的环境因素备受许多学者的关注,但其相关性未得到一致性公认,尤其对于高发的新疆哈萨克族食管癌.本研究探讨HPV16感染与新疆哈萨克族食管痛发生、发展的相关性.方法:采用半巢式聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术检测100例新疆哈萨克族食管癌患者癌组织和100例新疆哈萨克族正常人食管正常黏膜组织HPV16 E6的感染情况.结果:新疆哈萨克族食管癌患者HPV16 E6感染率为46%,明显高于新疆哈萨克族正常人群感染率的22%(P<0.001,OR=3.020);HPV16 E6感染与新疆哈萨克族食管癌患者的发病年龄、性别、肿瘤生长部位、淋巴转移、分化程度无明显相关性(P均>0.05).结论:HPV16 E6感染与新疆哈萨克族食管癌发病密切相关,是其发病的重要因素之一.     

新疆哈萨克族食管鳞癌中HLA-G的表达及其意义

目的 探讨人类白细胞抗原G(human leucocyte antigen,HLA G)在新疆哈萨克族食管鳞癌中的表达及临床意义.方法 应用免疫组织化学SP法对30例哈族食管鳞癌及20例癌旁正常组织中HLA-G的表达进行检测.结果 哈族食管鳞癌组织中HLA-G的表达率为66.7％,明显高于癌旁正常组织20.0％,差异具有统计学意义(P＜0.05);HLA-G的表达与哈族食管癌浸润深度和临床分期关系密切(P均＜0.05),而与患者年龄、性别、食管癌发生部位、分化程度和淋巴结转移无明显相关性(P均＞0.05).结论 HLA-G的高表达可能在新疆哈族食管鳞癌的发生发展中起重要作用.     

新疆哈萨克族食管癌survivin启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义

目的： 检测消化道肿瘤早期相关基因survivin mRNA在哈萨克族食管癌组织中的表达及其启动子区CpG岛甲基化状态,并进一步探究survivin启动子甲基化是否参与了食管癌的发生。方法：提取哈萨克族食管癌患者癌组织及远端无癌组织RNA,RT-PCR检测组织中survivin mRNA的表达水平,甲基化特异性PCR (methylation specific PCR,MSP)检测survivin启动子区CpG 岛的甲基化状态。结果：在20对食管癌组织标本中,癌组织中survivin mRNA阳性表达率 (95%)明显高于远端无癌组织 (65%) (P＜0.05)。癌组织及远端无癌组织中survivin基因启动子区CpG岛多为杂合型甲基化,且两种组织间甲基化状态无明显差异 (P＞0.05)。结论：survivin mRNA表达水平的增高在哈萨克族食管癌的发生、发展过程中起到了一定的作用,但其表达与启动子区CpG岛甲基化无关,提示甲基化并未直接调控该基因的表达并促进哈萨克族食管癌的发生发展。     

新疆哈萨克族食管癌研究进展

  目的  探讨Lrig1、NF-κB及MMP-2在哈萨克族食管癌患者中的表达与PI3K-AKT、MEK-ERK信号通路及与临床病理指标之间的关系。  方法  采用RT-PCR方法检测48例哈萨克族食管癌患者组织中Lrig1、NF-κB、MMP-2表达, 探讨NF-κB、MMP-2的表达与Lrig1的关系。纳入PI3K及MEK信号通路的关键基因PI3K、AKT1、MEK1、MEK2、MEK5、ERK1、ERK2, 研究Lrig1调控NF-κB、MMP-2基因表达的通路。  结果  转录水平mRNA检测显示在肿瘤组织及远端正常组织中NF-κB（P < 0.001, P= 0.014）、MMP-2（P=0.003, P=0.045）的表达与Lrig1 mRNA表达相关; 蛋白水平Western blot检测显示Lrig1与NF-κB、MMP-2可能呈负相关。在肿瘤组织中MEK5（P < 0.001）及ERK2（P=0.009）的表达与Lrig1相关; PI3K在正常组织中（P < 0.001）的表达与Lrig1相关。Lrig1、MMP-2及NF-κB协同表达率为52.1%（25/48）, 其协同表达与淋巴结转移相关（P=0.020）。  结论  NF-κB、MMP-2与Lrig1协同表达促进食管癌患者的淋巴结转移, Lrig1可能是通过MEK-ERK信号通路调控相关基因表达。     

新疆哈萨克族和汉族食管癌患者FHIT基因甲基化及其与预后的关系

目的：探讨和比较新疆哈萨克族和汉族食管癌患者FHIT基因甲基化状态及其与食管癌发生及预后之间的关系。方法：采用甲基化特异性PCR法（methvlation-specific polymerase chain reaction,MSF）测定哈、汉两民族共71例食管癌及癌旁组织标本FHIT基因启动子区甲基化状况,建立Cox回归模型分析临床病理指标及FHIT基因甲基化水平等因素与预后的关系。结果：36例哈族食管癌患者癌组织和癌旁组织的FHIT基因启动子甲基化率分别为58.3%和19.4%,35例汉族食管癌患者癌组织和癌旁组织的FHIT基因启动子甲基化率分别为51.4%和14.3%,两民族癌组织FHIT基因的甲基化率均明显高于癌旁组织（P〈0.01）;哈、汉民族食管癌患者癌组织之间、癌旁组织之间FHIT基因启动子甲基化率无显著性差异（P〉0.05）。预后因素分析表明肿瘤浸润程度、TNM分期、淋巴结转移区域数是影响哈、汉民族食管癌预后的独立危险因素,女性性别是保护因素。结论：FHIT基因启动子区甲基化状态与新疆哈族、汉族食管癌的发生有密切的关系,但可能与食管癌预后无关。     

新疆哈萨克族食管鳞癌与长链非编码RNA表达的关系

目的:对新疆哈萨克族食管鳞癌组织及癌旁组织长链非编码RNA(lnc RNA)表达谱进行分析,并探讨其与食管癌发生和发展的关系。方法:采用基因芯片技术,对4组食管鳞癌及其癌旁组织中差异表达的lnc RNA进行筛选,通过lnc RNA-m RNA共表达网络对靶基因进行预测,利用GO和KEGG数据库进行富集分析和通路分析,明确lnc RNA的功能。结果:癌组织和癌旁组织之间差异表达的lnc RNA共318个,与癌旁组织比较,癌组织中193个lnc RNA表达上调,125个lnc RNA表达下调(P<0.01)。富集分析表明共有5个GO类别,其中细胞成分有3个,生物过程有1个,分子功能有1个,均通过反式调控方式调控靶基因。通路分析表明这些差异表达的基因可能参与轴突导向信号通路和ECM受体相互作用途径信号通路。结论:新疆哈萨克族食管鳞癌组织中lnc RNA的表达水平与癌旁组织有明显差异,差异表达的lnc RNA可能参与食管癌的复杂调控网络,并与肿瘤发生和发展有一定的关系。     

新疆哈萨克族食管鳞癌与长链非编码RNA表达的关系

目的：对新疆哈萨克族食管鳞癌组织及癌旁组织长链非编码RNA（lncRNA）表达谱进行分析，并探讨其与食管癌发生和发展的关系。方法：采用基因芯片技术，对4组食管鳞癌及其癌旁组织中差异表达的lncRNA进行筛选，通过lncRNA-mRNA共表达网络对靶基因进行预测，利用GO和KEGG数据库进行富集分析和通路分析，明确lncRNA的功能。结果：癌组织和癌旁组织之间差异表达的lncRNA共318个，与癌旁组织比较，癌组织中193个lncRNA表达上调，125个lncRNA表达下调（P < 0.01）。富集分析表明共有5个GO类别，其中细胞成分有3个，生物过程有1个，分子功能有1个，均通过反式调控方式调控靶基因。通路分析表明这些差异表达的基因可能参与轴突导向信号通路和ECM受体相互作用途径信号通路。结论：新疆哈萨克族食管鳞癌组织中lncRNA的表达水平与癌旁组织有明显差异，差异表达的lncRNA可能参与食管癌的复杂调控网络，并与肿瘤发生和发展有一定的关系。     

新疆哈萨克族904例恶性肿瘤流行病学分析

目的 探讨新疆哈萨克族恶性肿瘤构成比及流行病学特点。方法 904例经临床病理活检证实的哈萨克族恶性肿瘤进行流行病学统计分析。结果 （1）904例恶性肿瘤中：男性占67.26%(608例），女性占32.74%(296例），男女之比为2.05:1。（2）恶性肿瘤的平均年龄为54.98岁，男性56.58岁，女性51.01岁。（3）前五位恶性肿瘤的顺序依次是：食管癌、胃癌、肺癌、中枢神经系统恶性肿瘤、宫颈癌。男、女性均以食管癌和胃癌占前两位。结论 本文提示新疆哈萨克族恶性肿瘤的特殊构成比及其前五位恶性肿瘤的构成顺序与我国总的前五位恶性肿瘤及其他少数民族相比较有显著的差异。     

Survivin调控相关基因在新疆哈萨克族食管癌中的表达

目的：探讨与凋亡相关因子Survivin调控相关的基因c-IAP2、Bcl-2、STAT3、cyclinD1、PTEN、VEGF在新疆哈萨克族食管癌中的作用。方法：从50例新疆哈萨克族食管癌标本中筛选出Survivin mRNA差异表达（癌组织中的表达量高于远端无癌组织）的32例癌组织及远端无癌组织标本,采用RT-PCR方法检测c-IAP2、Bcl-2、STAT3、cyclinD1、PTEN、VEGF mRNA在标本中的表达;并分析这些基因的表达与临床病理因素间的关系。结果：在哈萨克族食管癌中,c-IAP2、Bcl-2、STAT3、cyclinD1、PTEN、VEGF mRNA的表达阳性率依次为93.75%,78.13%、68.75%、65.63%、87.5%和84.38%;半定量光密度扫描结果显示,c-IAP2、STAT3、PTEN、VEGF mRNA在癌组织中的表达均显著高于无癌组织（P均〈0.05）;Survivn mRNA的阳性表达率与c-IAP2、STAT3、PTEN、VEGF mRNA的表达呈正相关;在食管癌组织中cyclinD1 mRNA的表达与c-IAP2、Bcl-2、PTEN mRNA的表达具有相关性（P〈0.05）,PTEN的表达与c-IAP2、STAT3、cyclinD1、VEGF mRNA的表达具有相关性（P〈0.05）;cyclinD1 mRNA的表达与哈萨克族食管癌组织的分化程度相关,Bcl-2、STAT3 mRNA的表达与食管癌淋巴结转移相关,VEGF mRNA的表达则与食管癌患者性别、癌组织分化程度相关（P〈0.05）。结论：Survivin调控相关的基因c-IAP2、Bcl-2、STAT3、cyclinD1、PTEN、VEGF在新疆哈萨克族食管癌发生发展过程中可能发挥着重要的作用。     

Detection of Human Papillomaviral Infection on Kazakh Patients with Esophageal Squamous Cell Carcinoma in Xinjiang

OBJECTIVE To investigate the detection rate of human papilloma virus (HPV) DNA in the Kazakh esophageal carcinoma (EC) patients of Xinjiang.METHODS We detected the prevalence of a HPV gene in tumor tissues from 318 esophageal squamous cell carcinoma (ESCC).Tumor tissues were kept in formalin and embedded in paraffin.One hundred seventeen samples used crude cell suspension, while the other 201 used the method of DNA extraction with phenol-Tris/chloroform. We analyzed the relevance to EC of Kazakh's in Xinjiang.RESULTS In the ESCC samples of Kazakh's in Xinjiang, total detection rate for HPV DNA was 64.5% (205/318). The positive rate of HPV in group of crude cell suspensions was 82.9% (97/117) compared with the rate of 53.7% (108/201) in the group of DNA extraction. The results in the two groups showed significant diffference (X2 = 5.711, P < 0.05).CONCLUSION HPV DNA infection may be one of the most important factors related to EC of Kazakh's in Xinjiang.     

新疆哈萨克族食管鳞癌中p16蛋白的表达及其意义

目的研究p16蛋白表达与新疆哈萨克族食管鳞癌生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测30例食管鳞癌和60例正常食管组织中p16蛋白的表达。结果60例正常组织中p16蛋白阳性表达率为88.33%(53/60);30例食管鳞癌组织中p16蛋白表达阳性率为46.67%（14/30）。随着恶性程度增加及病程进展,p16蛋白阳性率逐渐下降,p16在高分化鳞癌组阳性表达率(75%)显著高于低分化鳞癌组(25%)(P<0.05)。结论p16蛋白表达缺失可能与哈萨克族食管癌的发生发展有关。     

p16 Expression as a Surrogate Marker for HPV Infection in Esophageal Squamous Cell Carcinoma can Predict Response to Neo-Adjuvant Chemotherapy

Background: Esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) is a common cancer in the north east of India. Thepresent study concerned the prevalence of human papilloma virus (HPV) in the ESCC in north eastern India andits impact on response to chemotherapy. Materials and Methods: p16 expression, a surrogate marker for HPVinfection was assessed in 101 pre-treatment biopsies of locally advanced ESCC, reported from a comprehensivecancer centre in north east India, using immunohistochemistry. All patients received neo-adjuvant chemotherapy.Response was assessed clinically and histopathologically with attention to p16 expression. Results: p16 wasexpressed in 22% of ESCC (22 out of 101) and was more prevalent in patients who were more than 45 years ofage (P=0.048). p16 positive tumors appeared more commonly in the upper 2/3 of the thoracic esophagus (18 in22). Nine of the 22 (41%) p16 positive tumors achieved pathologic complete response following neo-adjuvantchemotherapy (P=0.008). There was a trend towards reduced mortality in this group (P=0.048). Some 9 of the20 (45%) patients who achieved pathologic complete response were p16 positive. Conclusions: Expression ofp16 in ESCC correlates with higher rate of pathologic complete remission in patients undergoing neo adjuvantchemotherapy and could be a predictive marker for response assessment.     

食管鳞状细胞癌组织中miRNA-375的表达及其临床意义

目的 探讨miRNA-375表达与食管鳞状细胞癌临床病理特征的关系.方法 通过实时荧光定量PCR,检测miRNA-375在67例食管癌及癌旁正常组织的表达.结果 采用循环阈值(△Ct)对miRNA-375在食管癌和癌旁正常组织中表达量进行定量分析,食管癌组织△Ct为9.61±1.52,对应正常组织△Ct为10.86±1.44,其中有80.6％的食管癌组织其表达量低于癌旁正常组织(2-△△Ct＜1).结论 miRNA-375低表达可能与食管鳞状细胞癌的发生、发展、转移相关.     

食管鳞癌中p16基因启动子区甲基化及其表达

 目的探讨食管鳞癌（ESCC）p16基因甲基化的状况及其表达与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。方法采用甲基化特异性PCR方法（MSP）分别检测75例食管癌组织、癌旁组织和切缘组织p16基因启动子区域CpG岛甲基化状态。采用Envision免疫组化法检测食管癌组织及癌旁组织的p16蛋白的表达。结果75例标本中，食管癌组织、癌旁组织和切缘细织p16基因甲基化率分别为41．3％（31／75）、13．3％（10／75）和6．67％（5／75）。癌组织和癌旁组织P16蛋白的阳性表达率分别为29．3％（22／75）和56．7％0（17／30）。31例癌组织p16基因甲基化阳性标本中有2例（6．4％）检测到P16蛋白的表达，而44例癌组织p16基因甲基化阴性标本中有20例（45．5％）检测到P16蛋白的表达。食管癌组织p16基因甲基化率显著高于癌旁组织和切缘组织（P〈0.01），P16蛋白表达与p16基因甲基化呈负相关。p16基因启动子区甲基化与食管癌的组织学分级、肿瘤部位无明显相关，与临床分期、淋巴转移密切相关。结论p16基因甲基化在食管癌发生发展中起着重要作用，食管鳞癌的分期和淋巴结转移与p16基因甲基化之间有密切关系。     

Transmembrane Protein 166 Expression in Esophageal Squamous Cell Carcinoma in Xinjiang,China

Objective: Transmembrane protein 166 (TMEM166) expression in esophageal squamous cell carcinoma(ESCC) and remote normal esophageal tissues was examined to assess any role in tumour biology. Methods:TMEM166 mRNA expression in 36 cases with ESCC (36 tumour samples, 36 remote normal esophageal tissuesamples) was detected by RT-PCR. TMEM166 protein expression was analysed in paraffin-embedded tissuesamples from the same cases by immunohistochemistry. Results: Semi-quantitative analysis showed TMEM166mRNA expression in ESCCs to be significantly lower than in remote normal esophageal tissues (0.759±0.713 vs.2.622±1.690, P=0.014). TMEM166 protein expression was also significantly reduced (69.4% vs. 94.4%, P<0.01).Conclusion: TMEM166 mRNA and protein expression demonstrated significant reduction in ESCCs comparedwith remote esophageal tissues, albeit with no correlation with tumour size, differentiation, stage, and lymphnode metastasis, suggesting a role in regulating autophagic and apoptotic processes in the ESCC.     

食管鳞状细胞癌中miRNAs的研究进展

食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma, ESCC）是我国常见食管癌（esophageal cancer, EC）的主要亚型。虽然ESCC从分子遗传学角度已被广泛研究,但其发病分子机制还没有完全阐明。microRNAs（miRNAs）是一类小的内源性非蛋白编码RNAs,在生理、病理过程中发挥着重要作用,包括细胞分化、凋亡、增殖和代谢。miRNAs通过致癌基因、抑癌基因在ESCC的发病机制中扮演着重要角色。近年来研究表明,许多miRNAs在ESCC组织中的表达存在明显的差异,了解miRNAs及其靶基因在ESCC发生发展中的作用,可能为早期检测、诊断、治疗和预后提供策略。     

Human papillomavirus in esophageal squamous cell carcinoma of the high-risk Kazakh ethnic group in Xinjiang,China

Aims

To investigate human papillomavirus (HPV) genotype-specific prevalence in the high-risk Kazakh ethnic group with esophageal squamous cell carcinoma (ESCC).

Methods

Sixty-seven Kazakh patients with primary ESCC were studied. From each patient, two tissue samples were collected: one sample of the tumor and one sample of normal esophageal tissue from an area away from the tumor. Tissues were analyzed by INNO-LiPA HPV Genotyping test v2 assay allowing the detection of at least 24 different HPV genotypes.

Results

Twenty cancer patients (30%) had HPV DNA detected in collected specimens. Interestingly, 14 patients (21%) had HPV only in the tumor and six (9%) had HPV only in the normal esophageal tissue. Overall, HPV16 was the viral type most frequently detected being present in eight out of 20 positive cases (40%). No correlation between the presence of HPVs and the gender or ESCC grade was observed.

Conclusion

If the causative factors of esophageal carcinogenesis remain to be firmly established in the Kazakh population, HPV found in 30% of patients might play a role in the etiology of esophageal SCC.     

E-钙黏附素在食管癌中的表达

目的 :研究细胞黏附分子 E- CD在食管癌中的表达 ,探讨 E- CD表达与食管癌侵袭转移的关系。方法 :采用免疫组织化学 L SAB技术 ,检测 5 8例食管癌患者手术切除标本 E- CD蛋白表达 ,分析其表达与癌侵袭转移的关系。结果 :E- CD蛋白表达与食管癌患者年龄、性别及发生部位无关 (P>0 .0 5 ) ;与食管癌细胞分化程度相关 (P<0 .0 5 ) ,与管壁浸润深度、淋巴结转移密切相关 (P<0 .0 1)。结论 :E- CD蛋白表达减弱与食管癌侵袭转移潜能相关 ,可作为食管癌侵袭转移的生物学标志之一。