酶标鼠疫F1McAb在酶免疫染色法快速鉴定鼠疫菌中的应用

目的观察酶标鼠疫F1McAb在酶免疫染色法快速鉴定鼠疫菌中的应用效果.方法实验感染鼠疫强毒菌的病死小鼠和处死健康小鼠尸体,20℃以上室温放置,用鼠疫F1McAb酶免疫染色法检测,同时用细菌学检验方法分离鼠疫菌和反向血凝试验(RIHA)检测鼠疫F1抗原.结果直接培养仅从5d内的鼠尸分离检出鼠疫菌,阳性率为53.3%;动物实验检出鼠疫菌的最长时间为8d,阳性率为71.6%.存放13d内,酶免疫染色阳性率为99.1%,RIHA阳性率98.2%,用酶免疫染色法和RIHA检测健康动物腐败脏器全部阴性.以上方法检查鼠疫疫区自毙动物标本12份,酶免疫染色法阳性7份,RIHA阳性6份,动物实验阳性5份,直接培养未获得阳性结果.结论酶免疫染色法检查动物腐败脏器中的鼠疫菌具有较高的敏感性和特异性.     

检测鼠疫F1抗原的三种免疫学方法比较

目的 比较三种检测鼠疫F1抗原方法用于诊断鼠疫的效果.方法在鼠疫疫源地,收集野生动物的血、肝、脾、淋巴组织标本,酶联免疫吸附试验(ELISA)、反向间接血凝试验(RIHA)、胶体金纸上色谱试验(GICA)三种方法检测鼠疫F1抗原.结果检测鼠疫疫源地内自毙和捕获野生动物脏器浸液标本414份,ELISA和GICA检出的阳性标本相同,阳性率均为5.31%(22/414),阳性符合率和阴性符合率均为100%.RIHA初试2孔以上凝集186份,复试仅18份阳性,非特异性凝集率高达40.57%(168/414),阳性率4.35%(18/414).RIHA与GICA、ELISA的阳性符合率均为81.82%(18/22),阴性符合率均为98.99%(392/396);阳性标本的平均滴度,ELISA为1:29.95,RIHA为1:28.68,组间比较差异有统计学意义(t=4.379,P＜0.01).结论三种方法检测鼠疫F1抗原诊断鼠疫,RIHA结果有定量的意义,非特异性凝集率高,复试工作量大;GICA和ELISA具有相同的特异性和敏感性,GICA结果只有定性意义,ELISA排除了RIHA、GICA两种方法的缺陷,综合了两种方法的优点.     

不同方法检测鼠疫动物脏器的研究

应用双重式聚合酶反应（Pla-F1-PCR)、常规细菌培养和反相血凝试验（RIHA），对9只实验感染鼠疫的动物脏器（豚鼠6份，小白鼠3份），在4℃条件下保存不同时间后进行同步检测。结果表明，保存90d和180d后，PCR与RIHA均为阳性，而细菌培养阳性率明显降低，PCR和RIHA法敏感性高于常规培养。提示对鼠疫或疑似鼠疫材料的检测除常规培养外应做PCR和RIHA，以防漏诊。     

胶体金免疫层析法与双单克隆抗体夹心ELISA检测鼠疫F1抗原的比较

目的比较胶体金免疫层析法（GICA）和双单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验（DMcAbS-ELISA）检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性。方法用GICA试纸条和DMcAbS-ELISA平行检测308份强毒鼠疫耶尔森菌感染鼠脏器标本和327份对照鼠标本,用RIHA微量法同时检测作为参照。结果327份对照鼠鼠疫细菌学检验及GICA,DMcAbS-ELISA和RIHA的F1抗原检测均为阴性,GICA,DMcAbS-ELISA和RIHA在108cfu/mL水平上未发现与近缘假结核耶尔森菌有交叉反应;308只感染鼠样本细菌培养阳性284只,24只样本未分离到鼠疫菌;F1抗原检测GICA阳性287份,DM-cAbS-ELISA阳性280份,RIHA阳性276份,GICA阳性检出率最高93.19%,与DMcAbS-ELISA和RIHA比较,差异均有统计学意义（χ^2=5.14,9.09;P=0.016,0.001）;GICA与DMcAbS-ELISA符合率97.73%（Kappa=0.845）;GICA和DMcAbS-ELISA与RIHA符合率分别是96.43%和98.70%（Kappa=0.774,0.926）;284份细菌培养阳性鼠标本F1抗原检测GICA阳性率是98.59%,高于DMcAbS-ELISA和RIHA,差异有统计学意义（χ^2=4.17,5.14;P=0.031,0.016）;24份细菌培养阴性实验鼠标本F1抗原检测：GICA检出7份阳性,阳性率29.17%,DMcAbS-ELISA检出6份阳性,阳性率25%,RIHA检出3份阳性,阳性率12.5%,GICA高于DMcAbS-ELISA和RIHA,但差异无统计学意义（χ^2=2.25,0;P=0.125,1.000）。结论GICA检测鼠疫F1抗原敏感特异,快速简便,优于DMcAbS-ELISA和RIHA,是鼠疫快速诊断中有应用价值的检测技术。     

酶免疫染色技术快速检测鼠疫耶尔森菌

目的研究酶免疫染色技术检测鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)的敏感性及特异性,建立鼠疫免疫快速检测技术。方法用酶免疫染色技术对细菌标本和动物标本检测鼠疫菌,动物标本同时用细菌学、RIHA、RGICA和ELISA法平行检测鼠疫菌。结果细菌标本酶免疫染色法检测结果与实际相符,酶免疫染色技术检测鼠疫菌的灵敏性为1 000个/ml;动物标本酶免疫染色法检测鼠疫菌结果和细菌学、RIHA、RGICA和ELISA一致。结论酶免疫染色技术检测鼠疫菌敏感、特异、简便、快速,可用于鼠疫检测工作。     

鼠疫菌检测技术在鼠疫实际监测工作的应用效果分析

目的评价鼠疫菌检测技术在鼠疫实际监测工作的应用效果。方法分别用细菌培养、反向血凝、金标、PCR和ELISA方法检测染疫动物脏器材料F1抗原,比较了不同方法在实际监测工作中的差异。结果细菌培养、ELISA、R IHA、PCR、金标阳性检出率分别为4.68（、8.19（、15.79（、15.20（、14.62（;以标准值为对照,敏感度和特异度分别为细菌培养：敏感度36.4%、特异度100%;ELISA敏感度63.6%、特异度100%;R IHA敏感度72.7%、特异度92.6%;PCR敏感度95.5%、特异度96.6%;金标敏感度81.8%、特异度95.3%。结论细菌培养在实际应用中,受到材料腐败程度影响较大,但能培养出鼠疫菌。反向血凝在应用中以其方便、迅速且成本较低,在大范围的疫源监测中起到重要作用。胶体金法在应用中简单、准确、便捷,适用于现场操作。PCR技术在非典型鼠疫菌的检测中意义重大[1]。ELISA技术方便、快捷、特异性强,但对材料要求较高。     

鼠疫检验新技术在乌鲁木齐县灰旱獭鼠疫疫源地中的应用

目的比较分析酶联免疫吸附试验(ELISA)、红细胞凝集试验(IHA和RIHA)、胶体金纸上层析试验(GICA)3种免疫学检测技术的敏感性、特异性和稳定性。方法按照《鼠疫检测新技术在灰旱獭鼠疫监测和应急处置中的应用》课题设计要求,以Spss 13.0对2007—2015年乌鲁木齐县鼠疫监测数据整理并进行分析。结果 2007—2015年检测血清样本3 260份,其中灰旱獭血清2 753份、牧犬血清507份,ELISA检出阳性36份、阳性率1.10%,IHA检出阳性13份、阳性率0.40%,两种方法检出阳性率差异有统计学意义(χ~2=10.877 7,P0.01),检出鼠疫抗体滴度差异无统计学意义(t=0.036 6,P0.01);共检测以自毙灰旱獭脏器及骨骼为主的各种自毙动物材料322份,检出鼠疫F1抗原分别为ELISA8份、GICA 8份和RIHA 6份,阳性率分别为2.48%、2.48%和1.86%,四步检验法分离出鼠疫菌2株、检菌阳性率0.62%,ELISA与RIHA检出阳性率(χ~2=0.292 1)和检菌率(χ~2=3.465 2)差异无统计学意义(P0.01),RIHA与四步法检菌率差异亦无统计学意义(χ~2=1.925 5,P0.01);检测自毙动物脏器标本鼠疫F1抗原ELISA和GICA阳性率一致,二者略高于RIHA和检菌,差异无统计学意义(χ~2=0.292 1,P0.01)。结论在鼠疫监测和应对突发鼠疫疫情处置工作中,3种方法各有其优缺点,联合使用才能发挥各自特长,依据不同情况采用不同的方法,可提高鼠疫监测质量和快速应对鼠疫突发事件能力。     

3种检测方法在人间鼠疫疫情处理中的应用评价

目的分析ELISA,GICA和IHA（RIHA）3种方法在疫情处理中的特异性、敏感性及其在快速诊断方面的作用。方法对2起疫情的检测结果进行统计学分析。结果ELISA,GICA和IHA3种方法检测鼠疫F1抗体的阳性率分别为32．9％,2．5％和10．9％,差异有统计学意义（X2=42．28,P〈0．01）。结论在疫情处理过程中,同时使用ELISA,GICA和IHA方法检测血清中的鼠疫F1抗体,其结果快速、准确、可靠,既能快速判定疫情,又能及时发现感染者,对迅速判定疫情和有效控制疫情扩散均能起到很好作用。RIHA检验方法所需时间短、敏感性好、准确性高,是早期、快速的诊断方法。     

应用RIHA,Kado,PCR法检测鼠疫菌Fra 1抗原的对比研究

目的了解RIHA,Kado,PCR法检测鼠疫菌Fra1抗原的敏感性及特异性,比较三种方法的优劣.方法采用反向间接血凝抑制法(RIHA)、Kado法及双重式聚合酶链(Pla-F1-PCR)反应三种方法.结果检测鼠疫菌Fra1抗原检出率分别为100%,93.5%和96.7%,经配对资料的卡方检验,三者间无显著性差异(χ2=2.0, P<0.05).结论RIHA法仅适用于追溯诊断,质粒图谱在分子流行病学上具有重要意义,双重式聚合酶链法不但具有快速、特异、敏感等特性,而且还可用于非典型菌株的检测,可为静息期鼠疫的防治提供科学依据.     

双单克隆抗体夹心酶联免疫吸附试验检测鼠疫F1抗原的实验观察

目的 观察双单克隆抗体(F1-McAb)夹心酶联免疫试验(DMcAbS-ELISA)快速检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性.方法 采用鼠疫细菌学检验、DMcAbS-ELISA和反向间接血球凝集试验(RIHA)对比检测鼠疫感染鼠和阴性对照鼠脏器标本.结果 共检测225份阴性对照鼠脏器标本,鼠疫细菌学检验、DMcAbS-ELISA和RIHA法检测F1抗原均为阴性.共检测308只鼠疫感染鼠脏器标本,鼠疫细菌学检验、DMcAbS-ELISA、RIHA法阳性率分别为92.21％(284/308)、90.91％(280/308)和89.61％(276/308),3种方法比较,差异无统计学意义(x2=5.65,P＞0.05).DMcAbS-ELISA法与鼠疫细菌学检验结果符合率为97.00％[(274+243)/533],Kappa值为0.940;与RIHA法符合率为99.25％[(276+253)/533],Kappa值为0.985.脏器标本F1抗原检测的真实性比较:DMcAbS-ELISA法敏感性为96.48％(274/284),特异性为97.59％(243/249),阳性预测值为97.86％(274/280),阴性预测值为96.05％(243/253),一致性为96.99％11/4×(274/280+274/284+ 243/253+243/249)|,Youden指数为0.9407;RIHA法的敏感性为96.13％(273/284),特异性为98.80％(246/249),阳性预测值为98.91％(273/276),阴性预测值为95.72％(246/257),一致性为97.39％[1/4×(273/276+273/284+246/257+246/249)],Youden指数为0.9492.DMcAbS-ELISA法对鼠疫菌检测灵敏度为2.7×104cfu/ml,RIHA法为2.2×105 cfu/ml;两种方法检测F1抗原灵敏度均为10 μg/L.结论 DMcAbS-ELISA法检测鼠疫F1抗原具有敏感、特异、简便、快速的特点,是有应用价值的鼠疫快速诊断技术.     

鼠疫F1抗原胶体金检测试剂的应用评价

目的 探讨鼠疫F1抗原胶体金检测试剂(简称金标试剂)的应用价值.方法 制备金标试剂,实验室检测其灵敏度、特异性和稳定性.并在全国17个鼠疫监测点检测动物脏器标本1798份,以细菌培养和反向血凝法作为平行对照,比较金标试剂的符合率和阳性率.结果 金标试剂灵敏度为0.0010g/L F1抗原,室温和4℃放置12个月检测效果稳定,检测假结核和小肠结肠炎菌悬液均呈阴性反应.现场检测标本,金标试剂与反向血凝法比较,符合率为97.11%(1746/1798),与细菌培养法比较,符合率为96.83%(1741/1798);而金标试剂阳性率为9.23%(166/1798),高于反向血凝法[6.79%(122/1798)]和细菌培养法[6.28%(113/1798)].结论 金标试剂灵敏度高、特异性强,是可以用于鼠疫现场监测和病例判定的快速诊断方法.     

胶体金免疫层析试纸条对云南鼠疫现场材料的检测

目的评价检测鼠疫抗原及抗体胶体金免疫层析试纸条(G ICA及RG ICA)对现场材料的检测效果。方法采用G ICA分别对采自云南省的607份血清标本(查鼠疫抗体)及572份鼠脏器标本(查鼠疫抗原)进行检测,同时以血凝试验(IHA及R IHA)与酶联试验(ELISA及F1-ELISA)作为对照。结果(1)在对607份血清标本的检测中,G ICA、IHA及ELISA三种方法的符合率中度,而G ICA的敏感性比IHA与ELISA分别高111%和90%;(2)在对572份鼠脏器标本的检测中,RG ICA、R IHA及F1-ELISA三种方法的符合率中度,而RG ICA的敏感性比R IHA与F1-ELISA分别高100%和14.3%。结论检测鼠疫的G ICA及RG ICA特异性强、灵敏度高、简便快速,有较大的推广应用价值。     

梅毒胶体金法在临床诊断中的应用价值

目的了解梅毒胶体金法在自愿咨询检测(VCT)门诊、社区卫生服务中心和非政府组织(NGO)工作室等临床诊断中的应用价值。方法应用梅毒螺旋体(TP)抗体检测试剂(胶体金法)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA),同时对2011-2013年医院哨点监测性病门诊送检的血清标本进行检测。结果对1204例样本进行检测,梅毒胶体金法阳性检出率为20.51%(247/1204),ELISA法为21.01%(253/1204),TPPA法为20.02%(241/1204)。以TPPA为金标准,梅毒胶体金、ELISA的敏感性均为99.59%,特异性分别为99.27%、98.65%。胶体金法与TPPA法和ELISA法经Kappa一致性检验比较(u分别为135.20、137.71,k=0.98,P0.05),具有极强的一致性。结论梅毒胶体金检测敏感性高、特异性强,具有简便、迅速的特点,值得在临床诊断中推广应用。     

胶体金免疫层析法检测鼠疫F1抗原的研究

目的 研究胶体金免疫层析试纸条检测鼠疫F1抗原的敏感性和特异性.方法通过鼠疫F1抗原单克隆抗体(F1MAb)捕捉F1抗原的胶体金免疫层析(GICA)试纸条,检测308只强毒鼠疫耶尔森菌(鼠疫菌)感染鼠脏器标本和225份对照鼠(达乌尔黄鼠217只,小白鼠5只,豚鼠3只)标本,同时用鼠疫反向间接血球凝集试验(RIHA)微量法和细菌培养做平行检测.结果 225只对照鼠鼠疫细菌学检验及GICA和RIHA的F1抗原检测均为阴性,GICA和RIHA在1×108 cfu/ml水平上未发现与近缘假结核耶尔森菌有交叉反应.GICA、RIHA对鼠疫菌检测灵敏性为2.5×105、2.0×105cfu/ml;检测F1抗原灵敏性为1、10 μg/L.GICA与细菌学检验符合率为97.94%(522/533),Kappa值=0.959,阳性检出率组间比较,差异无统计学意义(x2=0.36,P＞0.05);与RIHA符合率为97.94%(522/533),Kappa值=0.959,阳性检出率组间比较差异有统计学意义(x2=9.09,P＜0.05).308只实验鼠样本细菌培养阳性284只,284份细菌培养阳性标本中,GICA有280份检测阳性,阳性率为98.59%,高于RIHA[阳性率为96.13%(522/533)],两组比较差异有统计学意义(x2=5.14;P＜0.05).GICA的敏感度为98.59%(280/284),特异度为97.19%(242/249),阳性预测值为97.56%(280/287),阴性预测值为98.37%(242/246),Youden指数为0.9578.结论 GICA检测鼠疫F1抗原敏感特异,快速简便,是鼠疫早期快速诊断中有应用价值的检测技术.     

2011年四川省巴塘县鼠疫自然疫源地调查结果分析

目的证实巴塘县是否存在喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地,为四川省鼠疫防治提供科学依据。方法对巴塘县进行鼠疫流行病学调查,同时进行实验室检测。结果细菌培养自毙喜马拉雅旱獭1份,分离鼠疫菌1株;胶体金检测牧犬血清52份,阳性血清12份,阳性率为23.08%;间接血凝试验(IHA)检测牧犬血清52份,阳性血清10份,最高滴度为1∶40 960,阳性率19.23%;反向血凝试验(RIHA)检测反向血液1份,其滴度为1∶12 800。结论四川省巴塘县为喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地,并且动物间鼠疫正在流行,做好鼠疫防治工作,防止人间鼠疫的发生。     

3种方法检测弓形虫IgG抗体的效能

目的 目的 比较3种不同的检验方法对弓形虫IgG抗体的检测效能, 并进行分析。方法 方法 采用临床上常用的金标法、 间接血凝试验 （IHA）、 酶联免疫吸附实验（ELISA）, 对304份血清标本进行弓形虫IgG抗体平行检测, 比较各检测方法的敏 感性、 特异性和Youden指数。结果 结果 金标法、 IHA、 ELISA这3种方法对弓形虫IgG抗体检测的敏感性分别为85.5%、 89.8% 和91.9%, 三者之间差异没有统计学意义 （χ2 = 4.12, P > 0.05）; 特异性分别是92.4%、 96.6%和97.5%, 差异亦无统计学意义 （χ2 =4.06, P > 0.05）。ELISA法的检测效率和Youden指数分别为94.1%和0.89, 高于IHA法和金标法。结论 结论 ELISA法检 测弓形虫IgG抗体的敏感性和特异性较高, 可自动化, 适合于大规模的弓形虫IgG抗体筛查。     

胶体金法结合涂片形态学特征快速鉴别结核分枝杆菌复合群的应用评价

目的 探讨结核分枝杆菌抗原胶体金法结合涂片形态学特征鉴别结核分枝杆菌复合群的应用价值。 方法 采用涂片形态学特征和结核分枝杆菌抗原胶体金法对853株分枝杆菌临床分离株进行鉴别并与传统菌种鉴定结果进行比较。 结果 涂片法鉴别结核分枝杆菌的敏感度为98.4%(750/762),特异度为96.7%(88/91);胶体金试验鉴别结核分枝杆菌的敏感度为99.0%(754/762),特异度为98.9%(90/91);两种方法均为阳性,可报告菌株中含有结核分枝杆菌复合群(MTC),其阳性预测值为100.0%（741/741）;两种方法均为阴性,可报告非结核分枝杆菌(NTM),其阴性预测值为100.0%（87/87）。 结论 结合涂片形态和结核分枝杆菌抗原胶体金两种方法鉴别结核分枝杆菌可以提高检测的准确性,是一种快速、简便,适于各级实验室使用的方法。