凋亡相关基因Livin、Smac／DIABLO在胃癌组织中的表达及其意义

背景与目的：作为一种促凋亡基因,Smac／DIABLO与凋亡抑制基因Livin相互作用,共同参与调控细胞癌变的起始及发展。本研究检测凋亡抑制蛋白Livin及线粒体促凋亡蛋白Smac／DIABLO在胃癌组织中的表达．观察其表达水平与胃癌各临床病理因素的关系。方法：应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法检测75例手术切除的胃癌组织、20例癌旁组织及正常胃组织中Livin mRNA和Smac／DIABLO mRNA的表达,Westernblot结合及免疫组化SP法检测两种蛋白的表达及组织学定位。结果：正常胃组织及癌旁组织中均无Livin mRNA表达,胃癌组织中Livin mRNA表达显著上调,相对表达量为6．374±4．759,低分化胃腺癌组织及有淋巴结转移组的相对表达量显著高于中高分化胃腺癌组织（P〈0．05）,其表达与肿瘤大小、浸润深度及TNM分期无关,Livin蛋白的表达结果与之相符;胃癌组织中Smac／DIABLO mRNA的表达（0．731±0．420）低于正常胃组织（1．104±0．276）及癌旁组织（1．061±0．737）,但差异无统计学意义（P〉0．05）,Smac／DIABLO mRNA表达水平与胃癌各临床病理因素无关;Smac／DIABLO蛋白表达与mRNA表达存在差异。Smac／DIABLO在肠型胃癌（84．38％）与弥漫型胃癌（60．65％）中的表达有一定差异（P〈0．05）。结论：Livin与Smac／DIABLO在不同阶段和不同病理类型胃癌中的表达及相关性存在差异,Livin基因高表达与胃癌的发生及分化转移密切相关。     

胃癌组织中Livin蛋白的表达及相关性研究

目的探讨胃癌组织中Livin、Fas、FasL蛋白的表达情况及它们之间的相关性。方法用免疫组织化学SP法检测41例胃癌和10cm以外的癌旁正常胃组织中Livin、Fas和FasL蛋白的表达情况。结果Livin在胃癌组织中的阳性率为78．5％,在正常胃组织中的阳性率为14．6％,两者相比有显著性差异（P〈0．05）。Livin的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、部位、浸润深度、肿瘤分化程度、淋巴转移、远处转移和IUCC分期均无明显关系（P〉0．05）,与Fas,FasL的表达无明显相关性（P〉0．05）。结论Livin的过表达与胃癌的形成密切相关。     

Tau mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义

 目的 探讨Tau mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测正常胃组织与胃癌组织中Tau mRNA的表达。结果Tau mRNA在胃癌组织中的表达高于在正常胃组织中的表达（P<0.05）,并且高中分化胃癌组织Tau mRNA的表达低于低分化胃癌组织,无淋巴结转移胃癌组织Tau mRNA的表达低于有淋巴结转移胃癌组织且差异有统计学意义(P均<0.05),TNM分期Ⅲ+Ⅳ期Tau mRNA的相对含量明显高于I+Ⅱ期（P<0.05）,Tau mRNA含量在不同年龄、性别、病变长度中无明显差异（P均＞0.05）。结论胃癌组织中Tau mRNA表达水平的升高与胃癌的分化程度及转移有密切的关系。     

Livin在小细胞肺癌组织中的表达

目的：探讨凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族中的新成员Livin在小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）组织中的表达及其与临床病理的关系。方法：采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测SCLC组织中LivinαmRNA和LivinβmRNA的表达,并用western blot分析Livin蛋白的表达。结果：30例SCLC组织中有19例Livin表达,阳性率为63.33%,其表达与患者年龄、性别、肿瘤的TNM分期、淋巴结转移和肿瘤大小均无关（P〉0.05）。而16例癌旁正常肺组织中Livin低表达,阳性率为12.5%（P〈0.01）。结论：Livin在SCLC组织中异常表达,有望成为小细胞肺癌诊断和基因治疗的新靶点。     

Livin、Ki-67蛋白在胃癌中的表达及意义

目的：通过检测胃癌组织中Livin、Ki-67表达与其临床病理指标的关系，探讨两者表达的相关性芨在癌变发生发展中的意义。方法：采用免疫组织化学方法测定Livin、Ki-67在40例胃癌中的表达，分析与胃癌临床病理指标的关系。结果：Livin和Ki-67与淋巴结转移、分化程度有统计学关联（P〈0．05）；与性别、年龄、不同浸润深度、不同临床分期间无关（P〉0．05）。Livin、Ki-67在胃癌组织中的表达无关联（P〉0．05）。结论：Livin、Ki-67可能有助于判断胃癌的恶性程度及进展情况，对于胃癌手术的根治和术后化疗有一定指导意义。     

PDGF-D在胃癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨血小板衍生生长因子-D（PDGF-D）mRNA在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法：用RT-PCR方法检测58例胃癌及相对应的癌旁标本中PDGF-D的表达,分析其与临床病理特征的关系。结果：PDGF-D在胃癌组织中表达率（98.28%）明显高于癌旁组织（87.93%）（P〈0.05）,胃癌组织中PDGF-D表达水平（0.703±0.336）明显高于癌旁组织（0.465±0.208）（P〈0.05）。PDGF-DmRNA的表达水平与胃癌的淋巴结及远处转移和复发及无瘤生存期长短有关（P〈0.05）,与其它临床特征无关（P〉0.05）。结论：PDGF-D在胃癌的发生、发展和转移、复发中可能起着重要的作用。检测PDGF-D的表达可作为预测胃癌转移和复发的有意义指标。     

DNA修复酶（MGMT）在胃癌中表达与病理类型及转移的相关性

目的：研究胃癌组织中06-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶表达及其临床意义。方法：采用SABC免疫组织化学方法检测46例胃癌组织MGMT的表达。结果：胃癌中MGMT总阳性率为47．83％（22／46）。MGMT在浸润浆膜组和有淋巴结转移组阳性率明显增高,与浸润肌层和无转移组差异有显著性（P〈0．05）;胃体部癌MGMT阳性率较高,与贲门部比较有统计学意义（P〈0．05）。MGMT在胃癌中的表达与性别、年龄、分化程度相关性不明显（p〉0．05）。结论：MGMT在胃癌中的表达与浸润深度、淋巴结转移和癌的部位有关。     

Livin蛋白在食管癌中的表达及与p53蛋白相关性研究

目的：探讨凋亡抑制蛋白Livin在食管癌组织中的表达及其与p53蛋白之间的关系。方法：采用免疫组织化学S-P法检测Livin蛋白和p53蛋白在食管癌组织和癌旁正常食管组织中的表达情况。结果：Livin在食管癌组织中的表达明显高于癌旁正常食管组织（P〈0.01）。Livin表达与癌组织浸润深度和淋巴结转移呈正相关（P〈0.05）,而与癌组织分化程度无关（P〉0.05）。p53在食管癌组织中表达明显高于癌旁正常食管组织（P〈0.01）。在食管癌组织中Livin与p53表达无关（P〉0.05）。结论：Livin在食管癌组织中异常表达,有望成为食管癌诊断和基因治疗的新靶点。抑癌基因p53的失活与凋亡抑制基因Livin在食管癌的发生方面无相互促进作用。     

肿瘤干细胞标志物CD133在胃癌中的表达及其临床意义

目的：探讨CD133在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测38例手术切除的胃癌原发组织、癌旁正常胃粘膜组织和其中8例肝转移灶组织中CD133mRNA的表达，免疫组织化学方法检测肿瘤组织中CD133蛋白的表达情况，分析CD133的表达与临床病理参数的关系。结果：胃癌癌旁、原发、转移组织中CD133mRNA的灰度相对值分别为0．189±0．149、0．3054-0．118和0．359±0．139，癌旁与原发组织之间差异有统计学意义（P〈0．01），原发与转移组织之间差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组化检测肿瘤组织中CD133蛋白表达，阳性细胞稀少。原发组织CD133mRNA的表达与肿瘤大小和Ki-67表达相关（P〈0．05），与性别、年龄、浸润深度、淋巴结转移分期、TNM分期、组织分化程度及p53表达均无关（P〉0．05）。结论：CD133的表达与胃癌的发生有关，与转移的关系有待进一步研究，可能在胃癌的诊断中起一定的作用。     

凋亡抑制蛋白Livin在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变表达

[目的]探讨凋亡抑制蛋白Livin在宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌中的表达及意义。[方法]采用免疫组织化学SP法检测81例宫颈癌、74例CIN和20例正常宫颈组织中Livin的表达情况。[结果]Livin在正常宫颈组织中不表达,在CIN和宫颈癌中表达上调,阳性率分别为31.08%（23/74）和67.90%（55/81）。Livin在CINⅢ组织中的阳性率高于CINⅠ～Ⅱ。Livin表达与肿瘤临床分期、分化程度及淋巴结转移有关（P〈0.05）,而与病理类型、肿块生长类型无相关性（P〉0.05）。[结论]Livin过表达可能与CIN和宫颈癌的发生发展有关,提示肿瘤的恶性程度及不良预后。     

PDGF-D及其受体在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨血小板衍生生长因子-D（PDGF-D）及其受体PDGFRβmRNA在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法用RT-PCR方法检测58例胃癌及相对应的癌旁标本中PDGF-D及PDGFRβ mRNA的表达,分析其与临床病理特征的关系。结果PDGF-D及PDGFRβ在胃癌组织中的阳性表达率（98.28%,72.41%）均高于癌旁组织（87.93%,53.45%）,P均＜0.05。PDGFRβ与PDGF-D的表达呈正相关（r=0.40,P＜0.05）。PDGF-D mRNA的表达水平与胃癌的淋巴结及远处转移和复发有关（P＜0.05）,与其他临床病理特征无关（P＞0.05）。结论PDGF-D在胃癌的发生、发展和转移、复发中可能起着重要的作用,可作为预测胃癌转移和复发的有意义指标。     

livin在人胃癌组织中的表达及其沉默后对胃癌细胞凋亡的影响

目的探讨凋亡抑制蛋白livin在人胃癌组织中的表达及其与临床病理的关系,研究小分子干扰RNA(siRNA)对胃癌细胞系(SGC-7901)livin基因表达的抑制作用,以及livin基因沉默后对胃癌细胞凋亡的影响。方法采用RT-PCR方法和Western blot法检测胃不同组织中livin基因mRNA和蛋白的表达,分析livin表达与临床病理的关系;设计两条针对人源livin基因的siRNA,分别转染SGC-7901细胞;RT-PCR法检测转染前后livin基因的表达情况,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测转染前后细胞增殖能力的变化以及细胞对5-氟尿嘧啶(5-Fu)、顺铂的半数抑制浓度(IC_(50))的改变,流式细胞术检测转染前后细胞凋亡变化。结果40例胃癌组织中,livin表达阳性率为47.5%(19/40);在癌旁组织和良性病变胃黏膜组织中,livin表达呈阴性。组织分化程度差、淋巴结转移者的livin表达率高(P<0.05)。livin特异性siRNA转染48h后,SGC-7901细胞中的livin mRNA表达受到抑制,细胞增殖能力减弱,对5-Fu和顺铂凋亡敏感性增加,同时IC_(50)降低(P<0.05)。结论livin在胃癌组织中表达增高,且与组织分化程度和淋巴结转移有关,可作为辅助胃癌预后判断的分子标志之一;RNA干扰可明显抑制livin基因表达,并使胃癌细胞的凋亡敏感性增加;livin有可能成为通过诱导细胞凋亡增强胃癌治疗效果的一个分子靶点。     

乳腺癌中Livin 和Survivin基因mRNA的表达及其临床意义

目的 探讨凋亡抑制基因Livin和Survivin在乳腺癌组织中的mRNA水平表达情况、两者间的相关性及其临床意义。方法 采用实时定量多聚酶链式反应(qRT-PCR)检测乳腺癌组织和癌旁正常组织中Livin和Survivin基因的mRNA表达情况。结果 61例乳腺癌中Survivin和Livin基因mRNA水平的阳性表达率分别是62.3%(38例)和54.1%(33例),Survivin的表达与临床分期、淋巴结转移和HER-2表达有关(P＜0.05),Livin的表达仅与淋巴结转移有关(P＜0.05)。在38例Survivin阳性表达病例中有21例Livin呈阳性表达,而两者之间不存在相关性(P＞0.05)。Survivin基因和Livin基因阳性表达患者3年总生存率明显低于阴性表达患者(P＜0.001和P＜0.001)。结论 乳腺癌组织中Survivin和Livin基因在mRNA水平表达上调与乳腺癌的发生发展密切相关,且两者与淋巴结转移的相关表明它们的高表达与乳腺癌较差预后有关,并可能成为乳腺癌中新的治疗靶点。     

Livin和caspase-3在食管鳞癌组织中的表达及相关性分析

目的 探讨食管鳞癌组织中Livin与caspase-3的表达情况,以及两者与临床病理特征的关系。方法 采用免疫组织化学SP法检测36例食管鳞癌组织及20例癌旁正常食管组织中Livin和caspase-3蛋白的表达,分析其与食管鳞癌临床病理特征的关系。结果 食管鳞癌组织中Livin 的阳性表达率为69.4％,高于癌旁正常组织中的10.0％（P=0.000）;caspase 3在食管鳞癌组织中的阳性表达率为38.9％,低于癌旁正常组织中的80.0（P=0.003）。两者表达与组织分化程度、浆膜浸润和淋巴结转移有关,与性别、年龄无关。Livin与caspase-3的表达在食管鳞癌组织中呈负相关（r=-0.337,P=0.045）。结论Livin和caspase-3在食管鳞癌的发生、发展过程中起重要作用。     

雌激素相关受体β在胃癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨雌激素相关受体β在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法 选取109例胃癌手术标本和42例癌旁正常组织,采用免疫组化SP法检测ERRβ表达,分析ERRβ与胃癌临床病理特征及患者预后的关系。结果 ERRβ在胃癌组织中阳性表达率为68.8％,高于癌旁正常组织的16.7％ （P＜0.05）。ERRβ表达与肿瘤浸润深度（P=0.016）、淋巴结转移（P=0.028）、分化程度（P=0.005）关系密切,而与年龄、性别、远处转移和肿瘤大小等无关。109例患者的中位生存时间（OS）为21.0个月,ERRβ阳性表达者中位OS为11.0个月,低于阴性表达者的34.0个月（P＜0.001）。Cox多因素分析显示,ERRβ表达是影响胃癌预后的独立因素。结论 ERRβ在胃癌组织中表达增高,且与患者预后有关,可作为判断胃癌患者预后的有效分子标志物。     

CD133 mRNA在胃癌患者外周血单核细胞中的表达及意义

[目的]通过检测胃癌患者外周血单核细胞中CD133的表达,探讨其与临床病理特征的关系。[方法]于术前抽取30例胃癌患者、15例胃溃疡患者、15名健康志愿者外周静脉血,密度梯度离心法分离单核细胞。半定量反转录聚合酶链反应检测CD133 mRNA表达水平。分析胃癌患者外周血CD133 mRNA表达与临床病理特征的关系。[结果]胃癌患者外周血中CD133mRNA表达水平明显高于胃溃疡患者和健康志愿者（0.2804±0.1835 vs 0.0984±0.1321,t=6.724,P〈0.001;0.2804±0.1835 vs 0.0282±0.0597,t=-7.327,P〈0.001）。CD133 mRNA表达与肿瘤最大直径、淋巴结转移、TNM分期有关（P〈0.05）,而与性别、分化程度、淋巴管浸润、血管浸润、浸润深度无关。Spearman相关分析显示,CD133 mRNA表达与淋巴结转移呈正相关（P〈0.01）。[结论]胃癌患者外周血中CD133 mRNA的表达与胃癌的发展、转移及预后密切相关。     

Livin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：探讨凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein,IAP）家族的新成员Livin及其两种异构体Livinα和Livinβ在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其与NSCLC临床病理的关系。方法：采用逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）检测NSCLC组织中LivinαmRNA和LivinβmRNA的表达。结果：58例NSCLC组织中LivinmRNA表达阳性率为74．1％,而在癌旁组织低表达（5．1％,P〈0．01）。LivinmRNA表达与患者年龄,病理分型、肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期均无明显相关关系。结论：Livin在非小细胞肺癌组织中特异性地高表达,可能与肿瘤的发生、发展密切相关,可能成为诊断和治疗的新靶点。     

凋亡抑制因子Livin在肺癌组织和血清中的表达

目的：探讨凋亡抑制蛋白Livin在非小细胞肺癌组织和血清中的表达及其与组织类型、临床分期的关系。方法：采用免疫组化法和酶联免疫吸附法（ELISA）分别对40例肺癌组织和血清,20例癌旁组织和良性病变组织,20例健康者血清中Livin的表达水平进行检测。结果：非小细胞肺癌患者组织和血清中Livin水平明显高于对照组（P〈0．05）;组织中Livin蛋白的表达与淋巴结转移有关,但与肺癌临床分期、病理类型、分化程度无关。血清中Livin水平与淋巴结转移、临床分期有关,但与病理类型、分化程度无关;组织和血清间Livin水平无相关性。结论：Livin作为一种新的凋亡抑制蛋白,对非小细胞肺癌诊断、淋巴结转移的判断具有一定的临床价值。