玻璃体注射腺相关病毒2和慢病毒转染大鼠视网膜的比较

目的通过玻璃体注射重组腺相关病毒2载体(r AAV2)和慢病毒载体(LV),比较两者转染成年大鼠视网膜的异同。方法实验组大鼠60只,每组12只玻璃体内分别注射重组腺相关病毒2载体-增强绿色荧光蛋白(r AAV2-EGFP)、重组腺相关病毒2载体-神经突起素-增强绿色荧光蛋白(r AAV2-neuritin-EGFP)、慢病毒载体-红色荧光蛋白(LV-RFP)和慢病毒载体-神经突起素-红色荧光蛋白(LV-neuritin-RFP),对照组注射等量的生理盐水,4周后取材,采用免疫荧光和CTB-FITC检测2种病毒载体在视网膜中转染的细胞及转染率,然后分别采用Real-time PCR和Western blotting检测神经突起素(neuritin)在视网膜中的表达变化。结果 r AAV2能够转染约70%视网膜节细胞(RGCs),LV主要转染色素上皮细胞,RGCs转染率仅为30%;r AAV2-neuritin-EGFP组神经突起素mRNA表达约是r AAV2-EGFP组和对照组的16倍,蛋白表达约为3倍;LV-neuritin-RFP组神经突起素mRNA表达约是LVRFP组和对照组的5.5倍,蛋白表达约为1.7倍。结论 r AAV2玻璃体注射后,转染大部分RGCs且神经突起素表达量高于LV,LV主要转染色素上皮细胞,提示基因治疗眼科疾病和损伤时,涉及到转染RGCs时应采用r AAV2载体,转染色素上皮时宜采用LV载体。     

Complexin-1/2过表达重组载体对阿尔茨海默病小鼠记忆损伤的实验研究

目的　构建Complexin-1/2（CPLX-1/2）基因的重组腺相关病毒过表达载体pAAV- CPLX-1/2并研究其在阿尔茨海默病记忆损伤中的作用。 方法　将用Oligo 7软件对Genbank上小鼠CPLX-1/2 mRNA的CDS两端序列进行分析,合成CPLX-1/2基因,构建过表达载体并转化至大肠杆菌Top10;选取正确的克隆进行PCR和测序鉴定。重组腺相关病毒载体测序正确后,转染AAV293细胞,包装腺相关病毒。将重组腺相关病毒经脑立体定位注射到三转基因阿尔茨海默病(3XTg-AD)小鼠海马CA3区,经免疫组化和Western-Blot检测CPLX-1/2蛋白表达情况,水迷宫检测CPLX-1/2过表达对3XTg-AD小鼠记忆的影响。 结果　PCR及测序结果表明成功构建了含小鼠CPLX-1/2基因的重组腺相关病毒表达载体。CPLX-1/2在海马CA3表达显著增加。CPLX-1/2过表达显著改善3XTg-AD小鼠的记忆损伤。 结论　本研究成功构建了CPLX-1/2重组腺相关病毒过表达载体并在整体动物水平成功高效表达; CPLX-1/2过表达可显著改善3XTg-AD小鼠空间记忆的损伤。为在整体动物水平深入研究CPLX-1/2的功能提供了新的手段;研究结果提示CPLX-1/2可能作为AD记忆损伤治疗的关键靶点。     

重组人DcR3腺相关病毒的构建和表达

目的克隆人DcR3基因于腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)载体pAAV-IRES-hrGFP中,以获得高感染滴度及纯度的重组人DcR3腺相关病毒,为将其用于感染移植肝,研究其对大鼠移植肝的保护作用打下基础。方法用基因重组的方法构建含全长人DcR3基因的重组腺相关病毒骨架质粒,利用脂质体法将腺相关病毒载体系统共转染入病毒包装细胞AAV-293细胞中,合成重组DcR3腺相关病毒,经PEG/氯仿纯化,用SDS-PAGE鉴定其纯度,扫描电镜观察病毒颗粒形态,倍比稀释法测定重组病毒的感染滴度。并用重组病毒感染COS-7细胞鉴定DcR3的表达。结果正确构建组装重组人DcR3腺相关病毒,纯化后病毒感染滴度为1.1×1010U/mL。在重组DcR3腺相关病毒感染的COS-7细胞上清液中检测到了DcR3的表达。结论成功构建了重组人DcR3腺相关病毒,为下一步研究DcR3对大鼠移植肝的保护作用打下基础。     

rAAV-Fab转染小鼠骨骼肌体内表达分析

目的 乙肝表面抗体是一种保护性抗体,利用基因重组法构建含乙肝表面抗原抗体Fab基因的重组腺相关病毒(rAAV-Fab),通过转染小鼠腿部骨骼肌,观察此种转染途径,Fab的表达情况.方法 肌肉注射1011、5×1010、5×1093种滴度的rAAV-Fab,感染小鼠腿部肌肉组织,用荧光免疫吸附法检测血清中Fab含量变化.免疫组化分析表达分布.病理组织学检测转染后组织损伤.结果 小鼠肌注rAAV-Fab后,2个月内在血清中均有持续较高表达Fab,其后呈现较低趋势,直至第4个月观察结束.转染后,全身多个脏器组织切片均可检测到阳性信号,但3种病毒滴度转染比较,肝脏转染并无差异.主要脏器病理检查结果为阴性.结论 骨骼肌转染rAAV-Fab能够有效介导Fab基因在小鼠体内表达,转染广泛,且此方法安全有效,为进一步实验研究提供了依据.     

登革Ⅰ型病毒E蛋白在293T细胞中的分泌表达

目的 分泌表达登革Ⅰ型病毒prM/E基因,为研究该蛋白的免疫学功能和特性奠定基础.方法 用RT-PCR法获得登革Ⅰ型病毒广州分离株全长prM/E基因,在prM基因前添加乙型脑炎病毒的信号肽或同时替换E基因羧基末端的20%为乙脑病毒E基因相应的部分,分别将其克隆入真核表达载体pcDNAS/FRT中,获得三种重组质粒DlprME-pc5,D1JsprME-pc5,D1JsprM80E20JE-pc5.用脂质体法分别将重组质粒DNA转入293T细胞,通过免疫荧光、Western印迹检测外源基因在真核细胞中的分泌表达.结果 用免疫荧光法检测到分别转染了三种重组质粒的293T细胞的胞质中均有登革Ⅰ型病毒蛋白的表达.Western印迹检测转染了D1prME-pc5重组质粒的293T细胞上清中没有特异蛋白条带,转染了经基因改造的重组质粒D1JsprME-pc5和D1JsprM80E20JE-pc5的细胞上清中均存在登革Ⅰ型病毒的特异蛋白条带.结论 转染了三种重组质粒的293T细胞均可表达登革Ⅰ型病毒prM/E蛋白,只有在prM基因前添加了信号肽的重组质粒转染后蛋白才获得分泌表达.     

1b型丙型肝炎病毒NS3-4b重组腺相关病毒载体的构建及表达

目的 构建1b型丙型肝炎病毒(HCV) NS34b基因重组腺相关病毒载体并了解其在HEK 293细胞中的表达,为进一步研究HCV重组腺相关病毒疫苗及其树突状细胞疫苗奠定前期基础.方法 收集基因1b型的丙型肝炎病人血清,用RT-PCR的方法扩增NS3-4b全长片段,与腺相关病毒的表达载体pAAV.CMV.eGFP重组,构建pAAV.CMV.HCV.NS3-4b重组表达载体,转染HEK293细胞,检测其蛋白表达情况.结果 PCR扩增获得的NS3-4b条带与预期大小(2838 bp)一致,重组质粒经双酶切和测序证实NS3-4b基因已重组成功,重组质粒转染HEK 293细胞后Western Blot图可见有目的蛋白表达.结论 成功构建腺相关病毒重组HCV NS3-4b载体并且其能在真核细胞中表达.     

感染靶向性重组腺相关病毒载体在基因治疗中的研究进展

重组腺相关病毒(rAAV)是一种非常有希望的人体细胞基因治疗载体.它既可以转染分裂细胞又可以转染非分裂细胞.rAAV在宿主体内以定向整合的方式存在.AAV重组体在细胞内能长期稳定地表达,且在体内不引起明显的病理变化,然而它广泛的宿主范围是体内基因治疗的一个缺点,因为它不具备组织特异性或器官局限性转导能力从而难以增加其在基因治疗中的安全性和效率.因此,开发具有组织或器官靶向性的重组腺相关载体是腺相关病毒载体发展的方向.本文就近年来感染靶向性腺相关病毒在基因治疗中的进展作一综述.     

感染靶向性重组腺相关病毒载体在基因治疗中的研究进展

重组腺相关病毒（rAAV）是一种非常有希望的人体细胞基因治疗载体.它既可以转染分裂细胞又可以转染非分裂细胞.rAAV在宿主体内以定向整合的方式存在.AAV重组体在细胞内能长期稳定地表达,且在体内不引起明显的病理变化,然而它广泛的宿主范围是体内基因治疗的一个缺点,因为它不具备组织特异性或器官局限性转导能力从而难以增加其在基因治疗中的安全性和效率.因此,开发具有组织或器官靶向性的重组腺相关载体是腺相关病毒载体发展的方向.本文就近年来感染靶向性腺相关病毒在基因治疗中的进展作一综述.     

Smad 6和Smad 7基因腺相关病毒载体的构建及其表达

目的 :构建Smad 6和Smad 7基因腺相关病毒 (AAV)载体 ,并转染到人肾小管上皮细胞中表达。方法 :利用基因重组技术 ,采用BamHI和XhoI双酶分别将pcDNA3中的目的基因Smad6 /flag和Smad 7/flag融合基因片断切出 ,再克隆到质粒pAAV MCS中 ,构建重组质粒pAA Smad 6 /flag和pAA Smad 7/flag。采用磷酸钙沉淀法 ,以重组质粒或pAAV LacZ以及pAAV RC、pHelper共转染HEK2 93细胞 ,产生均有传染性的病毒颗粒。再将此病毒颗粒转染到培养的人肾小管细胞中 ,用免疫组化法检测其Smad 6和Smad 7转移基因的表达。结果 :成功地构建Smad 6和Smad 7基因的腺相关病毒载体 ,并可在肾小管上皮细胞中表达Smad 6和Smad 7。结论 :肾小管细胞能稳定、高效表达外源Smad 6和Smad 7,为今后建立Smad 6和Smad 7AAV基因治疗体内肾纤维化的模型奠定了良好的基础     

转化生长因子β3基因转染兔骨髓间充质干细胞诱导其向软骨表型的分化

背景：内源性诱导软骨分为就是通过一定的载体将目的基因整合入干细胞内,使其自行分泌诱导因子诱导自身进行分化。 目的：观察将转化生长因子β3通过腺相关病毒载体转染诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨表型转化的能力。 方法：取体外培养的第3代骨髓间充质干细胞进行重组腺相关病毒转染,将转染后3,6,9,12 d细胞裂解提取蛋白进行酶联免疫检测目的蛋白转化生长因子β3的体外表达。RT-PCR,免疫印迹western blot分别从基因和蛋白水平上检测1,2周Ⅱ型胶原的表达,甲苯胺蓝染色检测1,2周蛋白多糖的表达。 结果与结论：重组腺相关病毒转染后,骨髓间充质干细胞可以较稳定的表达目的蛋白转化生长因子β3,并且转染成功的骨髓间充质干细胞较阴性对照组能够更好的向软骨表型转化。证实转化生长因子β3可以腺相关病毒为载体转染骨髓间充质干细胞并诱导其向软骨表型分化。     

含HIV-1 Tat基因重组反转录病毒表达载体构建与表达Tat蛋白功能检测

目的 构建含HIV-1 Tat基因重组反转录病毒表达载体及评价表达Tat蛋白的功能。方法 使用HindⅢ将HIV-1 Tatl0l蛋白编码基因从pEN质粒中切出，插入到表达质粒IZRSpBMN-Z中，构建成重组反转录病毒表达质粒IZRS-Tat101。采用磷酸钙转染法将重组质粒LZRS-Tat101转染进含反转录病毒env、gal和pol编码基因的包装细胞phoenix(φNX)中，嘌呤霉素筛选获得稳定细胞系。免疫组化(IHC)染色检查Tat在临时转染和稳定转染φNX细胞中的表达水平。收集临时转染和稳定转染包装细胞分泌的病毒上清，并分别感染293细胞，Western blot检测Tat在293中表达。与此同时，收集感染293细胞培养上清，加入到HL3T1细胞(HeLa-HIV-1-LTR／CAT报告基因)中，共培养72h后收集细胞，提取蛋白作CAT活性检测。结果 ①含Tat101基因重组反转录病毒表达质粒转染包装细胞后，Tat在临时转染φNX中表达水平显著高于在稳定转染中的水平；②临时转染病毒感染293细胞，Tat在感染细胞中得到了表达，且分泌至上清中的Tat蛋白能够激活靶细胞HL3T1中HIV-1的LTR启动子，使得其下游的CAT基因得到表达。结论 重组LZRS-Tat101反转录病毒能够在其感染靶细胞中表达Tat蛋白，且表达蛋白具有转录激活功能。     

重组FoxP3腺相关病毒转染小鼠CD4+CD25 -T细胞的实验研究

目的：研究FoxP3（Forkhead Box P3）基因在小鼠T细胞的表达情况，以及重组FoxP3腺相关病毒（adeno-associatedvirus，AAV）对小鼠CD4^＋CD25^-T细胞功能的影响。方法：采用实时定量PCR检测CD4^＋CD25^-T细胞和CD4^＋CD25^-T细胞FoxP3 mRNA表达情况，利用基因重组技术构建FoxP3腺相关病毒载体，体外转染CD4^＋CD25^-T细胞，通过细胞增殖试验观察转染CD4^＋CD25^-T细胞功能变化。结果：CD4^＋CD25^-T细胞较CD4^＋CD25^-T相比高水平表达FoxP3基因mRNA，重组FoxP3腺相关病毒转染后的CD4^＋CD25^-T细胞对CD3单抗的刺激呈低反应性，并且能抑制新鲜分离CD4^＋CD25^-T细胞的增殖。结论：FoxP3基因转染的CD4^＋CD25^-T细胞在体外具有抑制T细胞活化增殖的功能。     

重组腺相关病毒介导黑色素瘤分化相关基因7对人肝癌细胞体内外抑制效应的研究

目的 观察PEG启动子调控腺相关病毒介导的黑色素瘤分化相关基因7(MDA-7)在体内外抑制肝癌细胞的生物学活性,探讨重组腺相关病毒介导MDA-7基因用于肝癌基因治疗的应用前景.方法 构建重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统,体外感染人肝癌细胞株HepG2细胞.Western印迹检测转染细胞内MDA-7蛋白;MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡变化.构建肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤模型,尾静脉注射rAAV-PEG-MDA-7,观察其对肝癌生长的抑制作用;ELISA方法检测血浆MDA-7蛋白浓度;TUNEL法分析MDA-7对肿瘤细胞的凋亡诱导情况;免疫组织化学分析MDA-7在肿瘤组织中的表达.结果 重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7可特异性转染HepG2细胞,MDA-7蛋白在HepG2细胞中高效表达,并呈时间依赖性.重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,GO/G1期细胞百分比明显增多,G2/M期的细胞显著减少(P＜0.05).全身系统性给予rAAV-PEG-MDA-7后,血清中可持续检测到MDA-7蛋白,且注射后2周浓度达高峰(200 ng/m1);肿瘤生长受抑制,抑瘤率为62%(P＜0.05);免疫组化结果显示MDA-7在肿瘤组织中表达;TUNEL结果显示rAAV-PEG-MDA-7可诱导肿瘤细胞凋亡.结论 构建出的重组腺相关病毒rAAV-PEG-MDA-7表达系统具有良好的肿瘤靶向性,通过抑制肝癌细胞增殖和诱导其凋亡发挥抗肝癌作用.     

小鼠FoxP3基因腺相关病毒的制备与鉴定

目的:构建携带小鼠FoxP3基因的重组腺相关病毒,并检测其在NIH3T3细胞的表达情况。方法:将FoxP3通过内部核糖体进入位点(IRES)与报告基因增强型绿色荧光蛋白连接,构建同时含有目的基因和报告基因的重组腺相关病毒(rAAV)表达质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染HEK293细胞,收获并通过肝素亲和层析法纯化病毒,并对病毒纯度和滴度进行鉴定。利用携带FoxP3基因的重组病毒体外感染小鼠NIH3T3细胞,体外观察感染效率和目的基因转录情况。结果:包装成功的rAAV/FoxP3经纯化后获得了高纯度的rAAV/FoxP3,实时定量PCR检测rAAV/FoxP3的病毒滴度达到5.0×1012vg/mL,体外感染NIH3T3细胞,流式细胞术测定感染效率可达92.88%,实时PCR测定细胞内存在高水平FoxP3mRNA。结论:获得携带FoxP3-IRES-EGFP的rAAV,并可有效感染NIH3T3细胞,为进一步研究FoxP3的生物学功能提供了有效工具。     

乙脑病毒prME与E蛋白编码基因重组构建的DNA免疫试验研究

目的　研究乙脑病毒prME、E蛋白的体外表达特点 ,比较不同重组质粒所进行的DNA免疫效率。方法　分别将乙脑病毒 (JaGAr 0 1株 )prME、E蛋白编码基因 (2 0 0 1bp、15 0 0bp)构建于融合FLAG标记基因的真核表达载体pcDNA(FLAG) 3上 (pJME、pJE) ,脂质体法将二重组质粒转染于HepG2及COS 1细胞系 ;采用不同抗体系统 (anti FLAG、anti E) ,经Westernblot法检测乙脑病毒prME[相对分子质量 (Mr)约 72× 10 3]与E(Mr 约 5 4× 10 3)蛋白表达水平 ;将质粒肌注BALB c鼠 ,二次免疫后 3周 ,腹腔注射乙脑病毒 (10 5PFU 10 0 μl)作为病毒攻击并观察 2 1d。 80 %空斑减少中和实验法检测中和抗体滴度变化。结果　anti FLAG可检测到由质粒pJME、pJE编码的相应蛋白产物在转染细胞内表达 ,同时在pJME转染的细胞内检测到一个新的 11× 10 3的低Mr 蛋白。anti E仅在pJME转染的细胞内检测到E蛋白。肌注pJME可产生高水平中和抗体滴度以及诱导有效的保护性免疫 ,效果等同于普通灭活JE疫苗 ,但优于pJE。结论　pJME的体外表达水平优于pJE。DNA免疫实验结果与prME、E蛋白体外表达特点相一致     

重组9型腺相关病毒转染小鼠骨髓间充质干细胞

背景:重组9型腺相关病毒对心肌细胞具有良好的亲和力,是目前研究基因治疗心肌梗死的理想载体。目的:观察携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒(r AAV9-e GFP)对小鼠骨髓间充质干细胞的转染效率。方法:将携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒以不同感染复数(1×105,1×106,1×107)转染体外培养的第4代小鼠骨髓间充质干细胞,并在转染后1-7 d连续用荧光倒置显微镜观察骨髓间充质干细胞中增强型绿色荧光蛋白阳性表达情况,寻找最佳感染条件;采用流式细胞仪检测最佳感染复数下携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒对小鼠骨髓间充质干细胞的转染效率。结果与结论:转染后第1天,感染复数为1×107组可见增强型绿色荧光蛋白开始表达,转染后第2天,感染复数为1×105、1×106组开始表达;各组增强型绿色荧光蛋白表达强度随感染复数值的增高而增强,同时增强型绿色荧光蛋白的表达强度随着时间延长而逐渐增强;转染后第5天达到高峰,此时感染复数为1×107组转染效率约8%,结果表明携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组9型腺相关病毒对小鼠骨髓间充质干细胞转染效率较低。     

抗阿尔茨海默病重组腺相关病毒的制备与活性研究北大核心CSCD

目的:制备可表达抗阿尔茨海默病单链抗体AT8-scFv的重组腺相关病毒AAV8-AT8-scFv,并探究其体内外活性。方法:利用293T细胞对重组病毒进行包装与纯化;SDS-PAGE、RT-qPCR对重组病毒的理化性质进行表征;细胞感染、Western blot法检测重组病毒的体外感染活性;以BALB/c小鼠为动物模型进行免疫,ELISA法、活体成像检测重组病毒的体内表达情况。结果:成功制备重组腺相关病毒AAV8-AT8-scFv,该病毒具有较好的感染能力,并可在小鼠体内长期稳定表达。结论:成功获得具有良好生物学活性的重组腺相关病毒,为阿尔茨海默病的免疫治疗提供新思路。     

低氧启动腺相关病毒载体的构建及高感染滴度质粒辅助重组腺相关病毒的获取

目的构建低氧启动重组腺相关病毒载体 ,优化重组AAV的条件 ,获取高感染滴度低氧启动重组腺相关病毒 ,为基因治疗缺血性脑血管病提供高效的特异性表达目的基因的载体。方法AAVHelperfree系统购自stratagene ,HEK293细胞购自中国协和医科大学细胞中心 ,XL -10 -GoldE.coli购自stratagene ,胎牛血清 ,细胞培养基DMEM、IMDM、MEM、Hepes均购自Gibco,PIRES -EGFP购自Clontech ,pGL3、荧光素酶检测系统、T4DNA连接酶购自Promega;BamHI等内切酶购自Takala。采用PCR和同尾酶的方法合成5拷贝HRE -CMV -mp,酶切连接构建荧光素酶低氧启动腺相关病毒载体 ;扩增提取病毒载体质粒、辅助质粒和Cap、Rep蛋白质粒 ;大量培养HEK293细胞 ;质粒磷酸钙共转染 ;转染48h收获病毒(氯彷 -PEG8000) ;测定生物滴度、物理滴度、电镜观察病毒和病毒蛋白电泳。测定低氧2 %和正常氧压下荧光素酶的效价。结果获取感染滴度2×1011的低氧启动腺相关病素 ,低氧6h荧光素酶表达量是正常氧压时的59倍。结论重组AAV病毒载体是通过对AAV病毒进行改造 ,将自身的编码基因去除 ,使其能装载治疗基因及表达元件而产生的。rAAV载体具有转染效率高、重复性强 ,不激活免疫反应 ,可重复应用 ,不诱导基因突变的优势。但腺相关病毒载体长期稳定表达目的基因     

重组骨形成蛋白4/7融合基因腺相关病毒载体的构建与鉴定

背景：有研究表明骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)异源二聚体比同源二聚体的活性高20倍,但相关BMP 4/7融合基因的相关病毒载体的构建至今少有报道。 目的：构建重组人BMP-4/7 融合基因腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)载体并检测其表达。 方法：扩增BMP-4、7成熟肽基因;分别构建质粒pGEM-BMP-4和pGEM-BMP-7;采用DNA连接法获取BMP-4/7融合基因,克隆获得pGEM-BMP-4/7质粒,进行基因测序。AAV颗粒转染HEK293细胞,收获病毒载体AAV-BMP-4/7。用SDS-PAGE电泳检测BMP-4/7融合基因蛋白在大肠杆菌的表达。用不同感染复数的AAV-BMP-4/7转染骨髓间充质干细胞3 d,提取细胞总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和ELISA法检测融合基因BMP-4/7在骨髓间充质干细胞中的表达。 结果与结论：PCR 电泳,酶切鉴定及测序结果表明,装入pSNAV质粒中的BMP-4/7 基因正确,pSNAV-BMP-4/7重组成功。RT-PCR检测到骨髓间充质干细胞BMP-4/7融合基因的转录条带,ELISA检测显示经AAV转染的骨髓间充质干细胞中BMP-4/7蛋白随着感染复数的增加表达逐渐增高(P < 0.01)。结果证实,实验成功构建重组骨形成蛋白4/7融合基因腺相关病毒载体。     

宫颈癌与正常宫颈上皮VEGF和MMP-9的表达研究

目的:观察血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在宫颈癌中的表达,分析其对宫颈癌发病的可能影响。方法:免疫组化SP法检测VEGF和MMP-9在宫颈癌和正常宫颈黏膜的表达,探讨其在宫颈癌的作用以及二者之间的相关性并作统计学相关分析。结果:VEGF在宫颈癌及正常宫颈黏膜的上皮细胞、血管内皮细胞、腺上皮细胞和散在分布的炎症细胞均有表达,宫颈癌组表达明显高于正常黏膜对照组(P0.05);MMP-9在对照组正常宫颈黏膜的皮有弱阳性表达,而宫颈癌组在上皮细胞、内皮细胞和腺上皮细胞中有强表达,宫颈癌组表达明显高于对照组(P0.05)。VEGF与MMP-9表达呈正相关(r=0.442,P=0.002)。结论:EGF和MMP-9的表达可能对宫颈癌的发生和发展有重要作用,而且在宫颈癌中VEGF可能对MMP-9的表达也有调控作用。