孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道炎症和重塑的影响及其机制

目的探讨孟鲁司特对慢阻肺大鼠气道炎症及重塑的作用及其影响气道重塑的机制。方法采用烟熏联合气管内注入脂多糖的方法建立大鼠慢阻肺模型(B组),对照组(A组)大鼠正常饲养,C组和D组大鼠分别在制作模型过程的最后2周给予孟鲁司特1mg/(kg·d)和孟鲁司特4mg/(kg·d)灌胃处理。实验结束后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞计数及分类。观察肺组织病理切片的气道炎症及重建情况,并行气道炎症评分及气道平滑肌厚度测定。免疫组化法检测大鼠肺组织碱性成纤维生长因子(b FGF)表达情况。结果与A组相比,B组大鼠BALF中白细胞总数及气道炎症评分明显增高,气道平滑肌显著增厚,b FGF表达水平显著增高(P0.05)。C组和D组大鼠BALF中白细胞总数及气道炎症评分较B组降低,气道平滑肌增厚不如B组明显,b FGF表达水平较B组降低(P0.05)。以上各项指标在C组和D组之间无明显差异(P0.05)。b FGF的表达与支气管平滑肌厚度正相关(r=0.78,P0.01)。结论孟鲁司特有抑制气道炎症及气道重塑的作用,其抑制气道重塑的机制与其抑制b FGF的表达有关。     

不同糖皮质激素治疗对肥胖哮喘小鼠全身和气道的影响

目的对比布地奈德雾化治疗和地塞米松口服治疗对肥胖哮喘小鼠的疗效和炎症改变。方法将75只C57/6J小鼠随机分为5组,正常组(A组)、哮喘组(B组)、肥胖哮喘组(C组)、布地奈德雾化治疗组(D组)、地塞米松口服治疗组(E组),建立饮食诱导的慢性肥胖哮喘模型。末次激发后24 h,取肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类,ELLISA法测定血清中IL-17浓度,肺组织病理切片观察各组小鼠炎症评分,测定气管壁总面积(WAt)、气道平滑肌面积(WAm)和管腔基底膜周长(Pbm)。结果除A组外,其余四组小鼠均出现不同程度的哮喘发作,实验结束前B组无小鼠死亡,C组有2只小鼠死亡,D组有1只小鼠死亡,而E组有5只小鼠死亡。C组BALF中白细胞总数,中性粒细胞数、嗜酸性粒细胞数、血清IL-17浓度以及病理切片炎症评分、气管壁总厚度(WAt/Pbm)、气道平滑肌厚度(WAm/Pbm)明显高于A、B两组。两治疗组的BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数,以及病理切片炎症评分均较C组下降,但气管壁总厚度(WAt/Pbm)、气道平滑肌厚度(WAm/Pbm)改善不明显(P0.05)。E组血清IL-17浓度较C组下降(P0.05),但D组和C组无显著性差异(P0.05)。结论雾化布地奈德能够改善肥胖哮喘小鼠的气道炎症,但不能改善气道重建和全身炎症。地塞米松口服治疗虽有助于改善肥胖哮喘的全身炎症反应,但气道重建无益,且带来更高的病死率。     

银杏叶提取物对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道及肺血管重塑的影响

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道及肺血管重塑的干预作用。方法将清洁级同龄雄性Wistar大鼠90只称重后,按照随机数字表法,随机分为A、B、C、D、E和F组,每组15只。B、C、D、E、F五组采用烟雾吸入、脂多糖气管内注入等进行COPD造模,C、D组分别在1~14 d和29~42 d腹腔内注射GBE(0.40 ml/kg/d),E、F组分别在1~14 d和29~42 d腹腔内注射红霉素(10 mg/kg2),43 d后对各组大鼠肺脏行病理学检测。结果 B、C、D、E、F五组均有COPD特征性改变,但程度不同。各组标准肺泡数的比较:A组与B、C、D、E、F组相比,差异均有统计学意义(P0.05),B组与C、E两组相比较差异均有统计学意义(P0.05)。各组平均肺泡面积的比较:A组与B、C、D、E及F组相比差异均有统计学意义(P0.05);B组与C、E两组相比较差异均有统计学意义(P0.05),C组与D、F两组相比较差异有统计学意义(P0.05)。各组细支气管结构改变和肺泡内肺动脉的结构改变在统计学上意义上表现均相同:B组与A、C、D、E、F组相比较差异均有统计学意义(P0.05),A、C、D、E、F各组之间比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 GBE对COPD大鼠模型气道重塑及肺血管重塑有抑制作用,与红霉素组干预作用相类似。     

布地奈德上调支气管哮喘小鼠肺组织IDO、抑制气道炎症和气道高反应性的研究

目的 研究布地奈德对急性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠肺组织吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)表达、气道炎症和气道高反应性的干预作用.方法 18只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组.卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型.末次激发24 h后,测定气道对乙酰胆碱的反应性,HE染色观察气道炎症细胞浸润,ELISA法检测血清总IgE、OVA特异性IgE(OVA-sIgE)以及支气管肺泡灌洗液(BALF) Th2细胞因子(IL-4和IL-13).Western blot检测肺组织IDO蛋白表达.结果 正常组小鼠气道阻力随乙酰胆碱浓度增加仅轻度增加,哮喘组气道阻力较正常组显著增高,布地奈德组气道阻力较哮喘组显著下降(P＜0.05);哮喘组血清总IgE和OVA-sIgE、BALF炎症细胞总数和嗜酸粒细胞分类计数、Th2细胞因子水平较正常组显著增高,布地奈德组炎症指标较哮喘组显著降低(P＜0.05);哮喘组肺组织IDO)较正常组显著下降,布地奈德组肺组织IDO较哮喘组显著增高(P＜0.05).结论 布地奈德抑制急性哮喘模型气道炎症和气道高反应性,可能与上调肺组织IDO有关.     

哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液中血管内皮生长因子和血小板源性生长因子的变化及缬沙坦的干预

目的观察血管内皮生长因子（VEGF）和血小板源性生长因子（PDGF）在哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中的变化,探讨两者与哮喘气道重塑的关系以及缬沙坦的干预作用。方法50只Wistar大鼠随机分成5组,每组10只：A组（正常对照组）、B组（哮喘组）、C组[15mg／（kg·d）缬沙坦]、D组[30mg／（kg·d）缬沙坦]和E组[50mg／（kg·d）缬沙坦]。分别观察各组肺组织切片的病理改变,用酶联免疫吸附法（EHSA）检测各组大鼠BALF中VEGF和PDGF的水平。结果哮喘大鼠肺组织出现了气道重塑的病理改变;与A组比,B组BALF中VEGF和PDGF水平显著增高（P〈0．01）,与B组比,缬沙坦干预后的C组、D组和E组BALF中VEGF和PDGF均显著减少（P〈0．05或P〈0．01）。结论VEGF和PDGF在哮喘大鼠BALF中浓度增高,可能参与了哮喘发病和气道重塑过程。缬沙坦能明显降低哮喘大鼠BALF中VEGF和PDGF的水平,有助于改善哮喘大鼠气道重塑的病理生理过程,其作用机理还有待进一步研究。     

慢性烟曲霉暴露对支气管哮喘大鼠气道黏蛋白MUC5AC表达的影响

[目的]探讨慢性烟曲霉暴露对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道黏蛋白MUC5AC表达的影响.[方法]将56只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为7组(每组8只):慢性哮喘(A)组、慢性哮喘+烟曲霉孢子吸入1周(B)、3周(C)和5周(D)组、慢性哮喘+生理盐水吸入(E)组、卵清白蛋白(OVA)致敏生理盐水激发(F)组和OVA致敏生理盐水激发+烟曲霉孢子吸入(G)组.测定各组大鼠基础气道阻力和应用乙酰胆碱后气道阻力变化率,RT-PCR测定肺组织MUC5AC mRNA的表达,免疫组织化学染色测定各组大鼠气道上皮细胞MUC5AC的表达,酶联免疫吸附(ELISA)法测定BALF中IL-13水平,肺组织切片过碘酸雪夫染色(PAS)观察气道上皮杯状细胞增生程度.[结果]B、C和D组大鼠肺组织MUC5AC mRNA(MUC5AC mRNA/β-actin mRNA)(分别为1.9±0.4、2.3±0.6、2.9±0.8)、气道上皮细胞MUC5AC表达(A值)(分别为278±58、566±64、891±80)、BALF上清液IL-13[分别为(96±16)、(136±22)、(197±34)μg/L]及杯状细胞/上皮细胞面积(分别为16％±5％、23％±7％、36％±9％)均高于A、E、F及G组(均P＜0.05);C和D组大鼠气道阻力变化率(分别为61.91％±5.26％、84.69％±6.38％)均高于A、E、F及G组(均P＜0.05).B、C和D组哮喘大鼠MUC5AC的A值及MUC5AC Mma/β-actin mRNA与气道上皮杯状细胞增生程度(PAS染色区面积/上皮细胞面积)呈正相关(r值分别为0.578和0.614,均P＜0.05),与气道反应性(Raw变化率)呈正相关(r值分别为0.638和0.564,均P＜0.05).[结论]慢性烟曲霉暴露可上调哮喘大鼠气道上皮黏蛋白MUC5AC的表达,促进杯状细胞增生,加重气道高反应.     

布地奈德上调支气管哮喘小鼠肺组织IDO、抑制气道炎症和气道高反应性的研究

目的研究布地奈德对急性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠肺组织吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)表达、气道炎症和气道高反应性的干预作用。方法 18只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组。卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型。末次激发24h后,测定气道对乙酰胆碱的反应性,HE染色观察气道炎症细胞浸润,ELISA法检测血清总IgE、OVA特异性IgE(OVA-sIgE)以及支气管肺泡灌洗液(BALF)Th2细胞因子(IL-4和IL-13)。Western blot检测肺组织IDO蛋白表达。结果正常组小鼠气道阻力随乙酰胆碱浓度增加仅轻度增加,哮喘组气道阻力较正常组显著增高,布地奈德组气道阻力较哮喘组显著下降(P0.05);哮喘组血清总IgE和OVA-sIgE、BALF炎症细胞总数和嗜酸粒细胞分类计数、Th2细胞因子水平较正常组显著增高,布地奈德组炎症指标较哮喘组显著降低(P0.05);哮喘组肺组织IDO较正常组显著下降,布地奈德组肺组织IDO较哮喘组显著增高(P0.05)。结论布地奈德抑制急性哮喘模型气道炎症和气道高反应性,可能与上调肺组织IDO有关。     

罗格列酮对内毒素致大鼠肺组织炎症的作用机制

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ激动剂罗格列酮对内毒素（LPS）致大鼠肺组织炎症的影响及其作用机制。方法将36只SD大鼠随机分为生理盐水对照组（A组）、罗格列酮对照组（B组）、LPS模型组（C组）,以及低、中、高剂量罗格列酮组（D组、E组、F组）。HE染色观察各组肺组织炎症;检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中的细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数;酶联免疫吸附法检测BALF中的TNF-α、IL-1β和IL-8。结果与A组比较,C组肺组织炎症积分,BALF中的细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数及TNF-α、IL-8、IL-1β均明显增加;与C组比较,D、E、F组除IL-1β外,肺组织炎症积分,BALF中的细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数及TNF-α、IL-8均明显下降,E、F组与C、D组及F组与E组比较,均有统计学差异（P均〈0．05）。结论罗格列酮能下调TNF-α和IL-8表达,减轻肺组织炎症反应。     

维生素D辅助布地奈德治疗儿童哮喘对气道炎症及重塑影响

目的探讨维生素D辅助布地奈德治疗儿童支气管哮喘,对减轻气道炎症反应及气道重塑的影响。方法随机选取2017年6月至2019年5月于我院住院的支气管哮喘患儿96例,随机分为2组,两组均给予抗炎及对症支持等治疗基础上,A组雾化吸入布地奈德联合口服维生素D治疗,B组单独雾化吸入布地奈德治疗。随访3个月,对比两组患儿治疗前后血清IL-17、MMP-9、TIMP-1水平、肺功能情况(PEF、FVC、FEV_1)。结果治疗后两组患儿血清MMP-9水平均较前下降,A组下降明显(P0.05);血清TIMP-1水平均较前下降,A组下降显著(P0.05);血清IL-17水平均较前下降,A组下降显著(P0.05);肺功能均得到改善,A组改善明显(P0.05)。结论维生素D辅助布地奈德雾化吸入治疗支气管哮喘有效,可减少炎症因子释放、改善气道重塑,改善肺功能。     

碱性成纤维细胞生长因子在COPD大鼠模型气道重塑中的作用

目的通过构建慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在COPD气道重塑的作用和可能机制。方法2005年7月至8月,于广西医科大学动物实验中心,将40只8周龄、雄性、平均体重为(220±15)g的Wistar大鼠随机分为COPD组(A组)、COPD bFGF组(B组)、COPD anti-bF-GF组(C组)和对照组(D组),每组10只。A、B、C3组COPD模型制备:经气管内注入脂多糖(LPS)和反复烟,复制成。A组为COPD对照组;B组:每周1次经尾静脉内注入0·1μgbFGF;C组:每周1次经尾静脉内注入0·1μganti-bFGF;D组:舱外饲养4周。4周后对各组大鼠气道进行病理学评分;检测并比较各组支气管平滑肌指数(平滑肌厚度/气道内径)及胶原指数(胶原厚度/气道内径);用免疫组化法观察bFGF在支气管肺内表达。结果与D组相比,A组、B组、C组大鼠的小气道都存在不同程度病理改变,差异均有显著性意义。与A组比较,B组肺组织病理评分显著增高、平均肺泡面积显著扩大、支气管平滑肌指数和胶原指数显著增高、bFGF吸光值均显著增高,而C组肺组织病理评分显著降低、平均肺泡面积显著缩小、支气管平滑肌指数和胶原指数显著降低、bF-GF吸光值均显著减少。结论bFGF参与了大鼠COPD模型气道炎症和气道重塑过程,而anti-bFGF可以抑制这一过程。     

蛋白酶抑制剂对全氟异丁烯吸入致 ALI 大鼠氧化应激的影响

目的：研究探讨蛋白酶抑制剂(抑肽酶)对全氟异丁烯(PFIB)吸入致 ALI 大鼠炎症因子的影响。方法健康清洁级成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠40只,根据体质量随机分成5组：生理盐水对照组(简称 A 组)、ALI 组(简称 B 组)、抑肽酶治疗组(5 mg/kg、15 mg/kg 和30 mg/kg,简称 C、D、E 组,),每组8只。将 B、C、D、E 组大鼠经头部暴露于自制 PFIB 动态吸入染毒系统装置染毒5 min。染毒30 min 后,各组大鼠均经腹腔注射生理盐水或配置好的不同浓度抑肽酶溶液。24 h后结束实验,处死大鼠,获取 BALF、肺组织样本,检测肺湿重与肺干重比(W/D),BALF 总蛋白含量,肺组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,光镜下肺组织病理学和免疫组织化学检查,并将数据进行统计学分析。结果 B 组、C 组、D 组、E 组的肺湿与干重比、BALF总蛋白含量和 MDA 含量升高,与 A 组比较差异有统计学意义(P <0.05),B 组、C 组、D 组、E 组的 SOD 含量下降,与 A 组比较差异有统计学意义(P <0.05)。E 组肺湿与干重比、BALF 总蛋白及MDA 含量均低于 B 组、C 组、D 组,差异有统计学意义(P <0.05);E 组 SOD 含量高于 B 组、C组、D 组,差异有统计学意义(P <0.05)。肺组织病理学检查显示,C 组、D 组、E 组较 B 组的肺组织水肿情况减轻、炎性细胞浸润减少,肺损伤程度降低,以高剂量最为显著。免疫组织化学检查示, C 组、D 组、E 组的核因子κB 的表达较 B 组为低。结论蛋白酶抑制剂抑肽酶能通过抗氧化应激及抑制炎性反应,来减轻 PFIB 吸入导致的 ALI。     

瘦素对大鼠气道平滑肌β_2肾上腺素能受体表达的影响

目的观察瘦素(LP)对大鼠气道平滑肌细胞β2肾上腺素能受体(β2-AR)表达的影响,探讨LP参与哮喘发病的机制。方法组织贴块法原代培养大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs),随机分为空白对照组(A组),LP 50 ng/L组(B组),LP 100 ng/L组(C组),LP 200 ng/L组(D组)及LP拮抗剂组(LP 200 ng/L+LP拮抗剂200 ng/L)(E组)分别干预24 h,采用Western印迹法及实时荧光半定量RT-PCR测瘦素受体(Ob-R)及β2-AR的表达。结果与A组相比,B、C、D组Ob-R表达明显升高,而β2-AR表达下降,证实LP可以上调Ob-R的表达并抑制β2-AR的表达;E组Ob-R表达较B、C、D组下降(P<0.05),与A组相比(P>0.05);E组β2-AR表达较B、C、D组升高(P<0.05),与A组相比(P>0.05)。结论 LP呈浓度依赖抑制大鼠气道平滑肌细胞β2-AR的表达。     

急性期和慢性期哮喘小鼠模型在哮喘致病过程中的对比研究

目的 比较卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的急性期和慢性期哮喘小鼠模型在气道炎症、气道重塑和气道高反应方面的差异,明确在哮喘致病过程中肺组织的病理变化.方法 48只BALB/c小鼠随机分为急性组和慢性组,其中急性组包括正常对照组(A1组)和急性哮喘组(A2组),慢性组包括正常对照组(B1组)和慢性哮喘组(B2组).OVA致敏和激发方法分别构建急性早期哮喘模型和慢性期哮喘模型后,测定气道阻力,BALF细胞计数和分类计数,酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测IL-4、IL-5、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ).HE染色观察气道炎症,AB-PAS和Masson染色测定气道重塑.结果 与正常小鼠相比,A2组和B2组小鼠气道阻力均明显升高,但B2组小鼠气道阻力在基础值即发生明显改变.相比于慢性组哮喘小鼠,急性组哮喘小鼠BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞数,IL-4、IL-5和IFN-γ水平,肺组织气道血管周围炎症细胞聚集,以及气道黏液分泌水平等炎症性改变更为明显.相比于A2组,B2组哮喘小鼠BALF中TGF-β1和VEGF水平,气道平滑肌增厚,上皮下胶原沉积,上皮下纤维化等改变更为显著.结论 在急性早期哮喘中主要是以炎症性改变为主,但在哮喘早期即开始出现轻度的重塑性改变;而在慢性期哮喘中虽然存在炎症性改变,但影响哮喘症状的因素却主要以器质性改变为主.     

不同剂量虫草活力素对大鼠支气管哮喘模型慢性气道炎症的作用机制研究

目的 对不同剂量虫草活力素(简称虫草)在大鼠支气管哮喘(简称哮喘)模型慢性气道炎症中的抑制作用及相关机制进行初步探讨.方法 Wister大鼠,随机分为对照组、单纯模型组、虫草20 mg/kg、50 mg/kg组、布地奈德(BUD)组及BUD联合虫草素干预组.卵蛋白致敏建立大鼠哮喘模型后给予药物干预8周,对各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)进行细胞分类计数及观察肺组织的病理变化,同时应用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清和BALF的哮喘相关细胞因子水平.结果 与单纯模型组比较,虫草两种剂量治疗组均降低慢性哮喘大鼠BALF的细胞总数和嗜酸粒细胞数,差异有统计学意义(P<0.05),并呈剂量相关性;HE染色显示大剂量虫草、BUD治疗组及联合用药组较单纯模型组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及黏膜肺组织水肿等炎症表现明显减轻;较单纯模型组,虫草治疗组血清及BALF的白介素4(IL-4)、IL-14水平下降,干扰素γ升高,差异有统计学意义(P<0.05),并呈剂量相关性.结果 一定剂量的虫草可通过上调T辅助细胞1(Th1)相关细胞因子,下调Th2相关细胞因子,减少嗜酸粒细胞等炎症细胞渗出,抑制哮喘的慢性气道炎症,并与糖皮质激素具有协同作用.     

川芎嗪对哮喘大鼠转录因子GATA-3表达的影响

目的 观察川芎嗪对哮喘大鼠转录因子GATA-3表达的影响.方法 72只SPF级SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、川芎嗪小剂量组(C组,20 mg/kg)、川芎嗪中剂量组(D组,40 mg/kg)、川芎嗪大剂量组(E组,80 mg/kg)和地塞米松组(F组),每组12只.以卵蛋白腹腔注射并雾化吸入制备大鼠哮喘模型,用动物呼吸机测定气道反应性评价造模效果.采用免疫组化半定量法测定肺组织GATA-3含量.结果 给予乙酰胆碱(Ach)激发后,比较各组大鼠呼气相气道阻力(Re),显示造模成功;B、C、D、E和F组的GATA-3表达量显著高于A组,其差异均有统计学意义(P<0.01);C、D、E和F组的GATA-3表达量和B组比较,差异均有统计学意义(P<0.01); 川芎嗪剂量的增加与GATA-3的表达呈负相关趋势;两两比较E组和F组差异无统计学意义.结论 哮喘大鼠存在GATA-3高表达;川芎嗪减低气道高反应性,抑制GATA-3的表达,纠正Th1/Th2失衡,从而治疗哮喘.     

抗纤维化药物对肺间质纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液中头孢噻肟浓度的影响

目的 探讨抗肺纤维化药物对支气管肺泡灌洗液(BALF)中头孢噻肟浓度的影响.方法 将120只Wistar雄性大鼠随机分成5组,即正常对照组(A组)、模型组(B组)、干扰素组(C组)、盐酸氨溴索组(D组)、地塞米松组(E组)各24只,除A组外均采用气管内注入博莱霉素的方法制作肺间质纤维化模型.造模后C、D、E组分别每天腹腔内注入γ-干扰素3万U/只、盐酸氨溴索7 mg/只、地塞米松0.1 mg/只.各组分别于给药后第7、14、28天,每次取6只大鼠,鼠尾静脉注射头孢噻肟600 mg/kg后行支气管肺泡灌洗,另各组剩余6只于第28天分别尾静脉注射头孢噻肟1 200 mg/kg亦行支气管肺泡灌洗,取BALF采用液相色谱-质谱联用法测定头孢噻肟浓度,并取肺组织行病理观察.结果 第7天D组、E组BALF头孢噻肟浓度低于B组,C组高于B组,E组与B组有显著性差异(P=0.012).第14天D组、E组BALF头孢噻肟浓度升高,而C组下降,三组均高于B组,D组与B组有显著性差异(P=0.000).第28天E组头孢噻肟浓度继续升高,明显高于其他各组,而D组锐降,C组继续下降,且均低于B组,C组、E组与B组有显著性差异.结论 地塞米松可提高纤维化期BALF中头孢噻肟的浓度,干扰素、盐酸氨溴索则无.     

表皮生长因子受体对支气管哮喘大鼠气道炎症的影响

目的 探讨表皮生长因子受体(EGFR)在支气管哮喘(简称哮喘)大鼠急慢性气道炎症的作用以及阻断EGFR的激活对气道炎症的影响.方法 将45只sD大鼠按随机数字表法分为对照组(A1、A2、A4组)、哮喘组(B1±、B2、B4组)和治疗组(C1、C2、C4组),每组5只,其中1、2和4分别表示激发1、2和4周.治疗组在每次卵清白蛋白激发前1 h给予酪氨酸激酶抑制剂(TKI)金雀异黄素(genistein)20 mg/kg腹腔注射.末次激发后收集BALF行细胞总数及分类计数.肺组织HE染色并行气道黏膜下炎症评分.免疫组织化学及免疫荧光染色观察气道上皮EGFR表达及其酪氨酸磷酸化(活化的ECFR)程度.两组数据间的比较采用单因索方差分析,多组间比较采用g检验.结果 (1)B组各时段BALF中细胞总数及各类细胞绝对计数均高于A组相应时段组(均P<0.05),嗜酸粒细胞在2周末达高峰;C组各时段BALF中细胞总数[分别为(48±6)、(51±9)和(57±12)×105]及嗜酸粒细胞计数[分别为(2.5±0.5)、(2.7±0.6)和(2.6±0.5)×105]均低于相应B时段组[细胞总数分别为(70±10)、(88±8)和(72±10)×105>,嗜酸粒细胞数分别为(5.6±0.8)×105、(6.6±0.6)×105和(4.3±0.4)×105],差异有统计学意义(均P<0.05);C组各时段BALF中中性粒细胞及淋巴细胞计数与相应时段B组比较差异无统计学意义;C1组BALF中上皮细胞数[(2.5±0.5)×105]低于B1组[(4.9±0.7)×103](q=4.671,P<0.05),C4组BALF中上皮细胞数[(5.7±1.2)×105]高于B4组[(4.3±0.4)×105](q=4.012,P<0.05).(2)C4组气道黏膜下炎症评分(3.6±0.6)低于B4组(5.1±0.6)(q=4.923,P<0.05).(3)B组各时段各级气道EGFR蛋白表达均高于相应时段A组(均P<0.01);气道上皮EGFR活化程度A组分别为(1.84±0.26)、(1.43±0.29)和(1.67±0.32),B组分别为(3.69±0.43)、(3.57±0.29)和(4.46±0.47),C组分别为(3.12±0.24)、(3.00±0.28)和(2.69±0.54),B组各时段气道上皮EGFR活化程度均高于相应时段A组(均P<0.05);C组各时段气道上皮EGFR活化程度均弱于相应时段B组(均P<0.05).(4)相关分析显示气道上皮EGFR表达及其活化程度均与BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞、中性粒细胞及淋巴细胞绝对计数,以及气道炎症评分呈明显正相关.结论 哮喘大鼠气道上皮EGFR参与气道炎症,TKI金雀异黄素有一定抑制哮喘大鼠急慢性气道炎症的作用.     

大鼠胰岛B细胞功能对Th1/Th2淋巴细胞分化的影响

目的　探讨大鼠胰岛B细胞功能对Th1/Th2淋巴细胞分化的影响及其机制。方法　 2 0 0 2 - 11～ 2 0 0 3- 0 9在北京大学人民医院将 4 0只雄性SD大鼠随机分A、B、C、D和E组 ,每组 8只。A组 :腹腔注射链脲菌素(STZ)建成 1型糖尿病模型 ;B组 :腹腔注射卵清蛋白 (OVA )致敏 OVA激发建成哮喘大鼠模型 ;C组 :腹腔注射STZ OVA致敏和激发 ;D组 :腹腔注射STZ 皮下注射胰岛素 OVA致敏和激发 ;E组为对照组。检测各组血清C肽浓度、支气管肺泡灌洗液 (BALF)IL 4和IFN γ质量浓度。结果　与对照组比较 ,A、C组的血清C肽浓度显著下降 ,而BALF的IFN γ质量浓度显著增高 ,IL 4质量浓度显著下降 ;与C组比较 ,D组经注射胰岛素后 ,其BALF中的IFN γ质量浓度显著降低 (137 6 3± 9 94vs 111 0 0± 12 14 ,P <0 0 5 ) ,IL 4质量浓度显著增高 (11 0 0± 3 93vs15 6 3± 2 6 7,P <0 0 5 )。结论　大鼠胰岛B细胞功能对Th1/Th2淋巴细胞的分化有调节作用。     

布地奈德干预对卵白蛋白致敏小鼠抗原激发后气道炎症及气道重塑的影响

目的　观察早期及延迟应用布地奈德对支气管哮喘 (简称哮喘 )小鼠气道炎症和气道重塑的防治作用。方法　40只小鼠分为 5组,每组 8只。鸡卵白蛋白(OVA)致敏 /激发组 (A组 ),生理盐水对照组(B组),布地奈德 (BUD)早期治疗组 (C组 ),BUD延迟治疗组 (D组 ),OVA延迟对照组(E组)。小鼠于第 0、14天以OVA致敏,从第 1次致敏后第 24天开始雾化吸入 2.5%的OVA激发并持续 18d,建立气道重塑模型;分别在早期(抗原激发前 1d始)和延迟(第 1次抗原激发后第 18天始)雾化吸入BUD(0.5mg/ml),观察抗原激发及BUD应用后支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸粒细胞(EOS)数、上清液白细胞介素 5(IL-5)和γ干扰素 (IFN-γ)水平的变化,同时对肺组织切片行苏木精 伊红(HE)、过碘酸雪夫(PAS)、Masson三色染色,测定支气管壁周围EOS计数、定量杯状细胞百分比及黏液分泌评分并测定气道平滑肌增生高度及胶原面积。结果　经过反复抗原激发,A组BALF中EOS数为(57.460±11 060)×104 /ml,B组为[ (0.050±0.020)×104 /ml],两组比较差异有统计学意义(P<0.01);A组BALF中IL- 5水平及IFN -γ水平分别为(52.9±2.8)pg/ml、(39.5±3.2)pg/ml,B组分别为(16.8±1.5)pg/ml、(63.8±3.3)pg/ml,两组比较差异有统计学意义 (P<0.01 );A、B组支气管壁周围EOS数分别     

虫草活力素对大鼠慢性支气管哮喘模型气道重塑作用初探

目的对虫草活力素（简称虫草）在大鼠支气管哮喘（简称哮喘）模型气道重塑中的作用及相关机制进行初步探讨。方法 50只Wister大鼠[6～8周龄,（200±20）g],随机数字表法分为阴性对照组（A）、慢性哮喘单纯模型组（B）（卵清白蛋白系统致敏和反复激发）、慢性哮喘＋虫草50mg/kg治疗8周组（C）、慢性哮喘＋布地奈德（BUD）8周治疗组（D）及慢性哮喘＋BUD联合虫草8周治疗组（E）。肺组织切片HE染色观察病理变化并检测气道管壁厚度,采用免疫组织化学法检测气道转化生长因子β1（TGF-β1）表达水平,应用逆转录PCR法检测肺组织A2a腺苷受体（A2aAR）mRNA表达。数据统计采用ANOVA检验进行组间分析,Mann-Whitney检验进行组内两两比较,Spearman等级相关分析。结果①HE染色显示所有药物干预组较单纯模型组炎症细胞浸润、平滑肌肥厚及黏膜肺组织水肿等炎症表现明显减轻,以D和E组最为明显;②5组气道管壁厚度依次分别为（9.89±2.09）、（21.72±3.16）、（14.94±1.96）、（12.29±2.75）和（12.25±2.32）μm2/μm,F=31.37,P〈0.0001,所有药物干预组气道壁厚度均高于对照组（C组、D组和E组与A组比较后的P值分别为0.0001、0.0524、0.0524）,且低于单纯模型组（C组、D组和E组与B组比较后的P值均〈0.0001）,差异有统计学意义,C组气道壁较D组和E组增厚,差异有统计学意义（P值分别为0.0232和0.0147）;③5组TGF-β1表达强阳性率分别为（2.08±1.63）%、（29.37±5.08）%、（12.30±3.26）%、（10.78±3.35）%及（7.43±2.84）%,F=86.45,P〈0.0001,所有药物干预组TGF-β1蛋白表达均高于对照组（C组、D组和E组与A组比较后的P值均〈0.0001）,且低于单纯模型组（C组、D组和E组与B组比较后的P值均〈0.0001）,差异有统计学意义;E组较C组的蛋白表达有统计学意义下降（P=0.0052）;④5组肺组织A2aARmRNA表达相对强度依次为（0.35±0.06）、（0.27±0.10）、（0.52±0.07）、（0.24±0.05）及（0.47±0.08）,F=26.46,P〈0.0001,C组和E组A2aARmRNA表达高于A组（P值分别为0.0001及0.0007）、B组（P值分别为0.0002及0.0003）和D组（P值均〈0.0001）,差异有统计学意义,D组表达低于A组,差异有统计学意义（P=0.0003）;⑤所有大鼠支气管壁厚度与气道TGF-β1蛋白表达存在正相关（r=0.80,P〈0.01）,而C组大鼠肺组织A2aARmRNA表达和TGF-β1蛋白表达呈负相关（r=-0.68,P=0.03）。结论虫草对哮喘模型的气道重塑具有一定的改善作用,其机制可能通过增加慢性哮喘模型大鼠肺组织A2aARmRNA转录,抑制气道TGF-β1的生成,从而减轻气道重塑,且虫草与糖皮质激素联合应用对于降低TGF-β1的表达具有潜在协同作用。