BDNF、TrkB在岛叶慢性电点燃大鼠海马中的表达及与学习记忆的关系

目的研究岛叶慢性电点燃癫痫模型大鼠的学习记忆功能,检测脑源性神经营养因子（brain-derivedneurotrophic factor,BDNF）、酪氨酸蛋白激酶受体B（Tyrosine receptor kinase B,TrkB）在海马组织中表达,探讨BDNF、TRKB与岛叶点燃大鼠学习记忆的关系。方法成年SD大鼠随机分为模型组、假手术组、空白对照组,建立大鼠岛叶慢性电点燃模型。用避暗试验方法检测岛叶慢性电点燃模型大鼠学习记忆功能,采用免疫组化和western blot方法分别检测BDNF、TrkB蛋白在海马组织中表达水平,用RT-PCR检测两因子基因表达水平。结果岛叶慢性电刺激点燃成功后第1天（即0周）,学习记忆能力点燃组与空白对照组、假手术组差异无统计学意义（P〉0.05）。点燃2周点燃组避暗试验结果的LT为（48.87±3.42 s）、EN为（2.75±0.99次）;点燃3周点燃组避暗试验结果的LT为（48.71±2.77 s）、EN为（2.75±1.15次）,与点燃当天（即点燃0周）相比学习记忆功能增强（P〈0.05）,点燃4周后与对照组比学习记忆功能明显下降（P〈0.05）。BDNF、TrkB表达均在24h达到高峰（P〈0.05）,空白对照组、假手术组无明显变化。组间比较、峰值及增幅均出现在2～3周内（P〈0.01）,4周后较前几周组明显下降（P〈0.05）。结论岛叶电点燃大鼠学习记忆功能与BD-NF、TrkB在海马中表达总变化趋势一致。BDNF、TrkB与岛叶点燃大鼠学习记忆功能密切相关。     

突触素与杏仁核点燃大鼠学习记忆的关系

目的研究杏仁核刺激点燃大鼠学习记忆功能,检测突触素（Synaptophysin）P38在模型大鼠海马中的表达,探讨P38与杏仁核点燃大鼠学习记忆的关系。方法成年SD大鼠随机分组。模型组：通过慢性电刺激大鼠杏仁核,建立点燃模型;只植入电极的假手术组及空白对照组;采用避暗试验检测各组大鼠学习记忆功能。采用免疫组化、wcsternblot检测不同时间P38蛋白在杏仁核组织中表达水平。结果模型组点燃2周组、3周组与0周组相比较学习记忆功能增强（P〈0．05）。点燃4周组与0周组比学习记忆功能明显下降（P〈0．05）,有统计学意义。P38分子生物学检测显示：Arc在点燃组内蛋白的表达在1周开始增加,2-3周达到高峰,4周明显下降。结论杏仁核电点燃大鼠学习记忆功能检测及P38在杏仁核点燃海马组织中表达变化相对应。P38是维持杏仁核点燃大鼠学习记忆功能重要因子之一。     

BDNF、TrkB在大鼠海马CA_3区的表达及其与学习记忆的关系

目的:研究BDNF及其受体TrkB在大鼠海马CA3区时空分布变化及其与学习记忆的关系。方法:采用免疫组织化学实验,观察BDNF及TrkB在正常大鼠发育期、成年期和老龄期海马CA3区的定位分布及时间变化。成年组和老龄组于免疫组织化学染色前接受水迷宫试验,研究BDNF及TrkB的分布变化与学习记忆的关系。结果:生后15~20d,海马CA3区阳性细胞最多。成年期细胞染色强,核大而圆无着色。老龄期阳性细胞数量少,染色淡,发生了明显退行性变化。水迷宫定向航行实验中平均潜伏期成年组和老龄组有显著性差异(P<0.01);空间搜索实验中NE象限停留时间成年组和老龄组有显著性差异(P<0.01)。结论:海马CA3区BDNF及TrkB的时空表达基本一致。表达高峰为生后15~20d。老龄期呈增龄性下降,细胞出现退行性变化。BDNF及受体TrkB的表达与学习记忆能力呈平行关系,BDNF及受体TrkB在学习记忆中发挥着重要作用。     

慢性酒精中毒大鼠学习记忆障碍与海马p-CREB表达

目的 通过建立慢性酒精中毒致大鼠学习记忆障碍模型,定量分析大鼠海马各亚区磷酸化环磷酸腺苷反应单元结合蛋白(p-CREB)的分布与表达.方法 60只成年雄性SD大鼠随机平均分为4组:对照组、低浓度染毒组(LAA组)、中剂浓度染毒组(MAA组)、高浓度染毒组(HAA组).对照组以生理盐水灌胃,LAA组、MAA组和HAA组分别按照每天每只5ml/kg、10ml/kg、15ml/kg标准用55%酒精灌胃造模.通过Morris水迷宫检测大鼠学习记忆损伤情况,采用免疫组织化学SABC染色法检测海马CA1、CA3区及齿状回p-CREB的分布及表达.在Olympus显微镜及图像分析系统下,测定海马p-CREB阳性细胞数.结果 慢性酒精中毒后LAA组、MAA组和HAA组大鼠海马各亚区p-CREB免疫阳性细胞数量逐渐减少.对照组海马p-CREB 阳性反应物分布较多,以CA3和CA1区着色最深,齿状回颗粒细胞层未见表达;LAA组、MAA组和HAA组海马CA1区和CA3区p-CREB免疫阳性细胞数[分别为(85.45±4.32)个,(74.42±8.94)个,(73.56±7.64)个和(245.29±15.36)个,(206.90±15.37)个,(201.96±11.37)个]与对照组海马CA1区和CA3区p-CREB免疫阳性细胞数[分别为(90.54± 6.38)个,(273.79±16.87)个]比差异有统计学意义( P <0.05),MAA组和HAA组海马CA1区和CA3区p-CREB免疫阳性细胞数与LAA组比差异有统计学意义( P <0.05).结论 高浓度白酒灌胃6周,大鼠学习记忆功能有不同程度损伤,各染毒组大鼠海马各亚区p-CREB有不同程度表达,提示p-CREB在大鼠慢性酒精中毒学习记忆障碍中可能起重要作用.     

Orexin-A对戊四氮慢性点燃癫痫大鼠学习记忆功能的影响

目的 探讨Orexin-A对戊四氮(PTZ)慢性点燃癫痫大鼠学习记忆功能的影响.方法 健康成年雄性Wistar大鼠随机分为对照组(生理盐水)和戊四氮组.点燃成功后每组分别脑室内注射10μlorexin-A(1.4 nmol/μl)或等量生理盐水,利用Morris水迷宫实验进行学习记忆能力检测.结果 致痫组戊四氮点燃癫痫的成功率达80%.与非致病组比较,慢性点燃大鼠搜寻平台的潜伏期明显延长(F=200.956,P<0.01);大鼠在平台所在象限的游泳时间和120 s内穿越平台区域的次数显著减少(P<0.01).脑室内注射orexin-A后,航行定位实验中致痫组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),非致痫组大鼠的逃避潜伏期也明显缩短(P<0.05).在空间搜寻实验中,orexin-A能明显增加穿越平台象限的次数[(10.83±1.84),(4.67±3.34)]和平台所在象限的游泳时间[(39.73±2.03)s,(33.76±2.96)s],尤其是对致痫组大鼠的怍用更明显(P<0.01),搜寻站台的效率明显提高.结论 Orexin-A能改善慢性点燃癫痫大鼠的空间学习记忆能力.

Abstract：

Objective To investigate the effects of orexin-A on learning and memory of pentyleneterazol (PTZ)-kindled epileptic rats.Methods Adult Wistar rats were randomly divided into control group(normal saline,NS)and PTZ group.The PTZ-kindled rats were randomly divided into,orexin-A group and NS group administrated by intracerebroventricular(i.c.v.)injection of 10μl orexin-A(1.4 nmol/μl)or 10μl NS.Using Morris water msze experiment,the ability of learning and memory was measured in all rats.Results Eighty percent of rats in PIZ group were kindled successfully after intraperitoneal injection of 35mg/kg PTZ every day for 30 days.Compared to control group,the escape latency in the PTZ-kindled rats was significantly increased in place navigation test(PNT)(F=200.956,P<0.01),whereas a remarkable reduction of time spent in the target quadrant and number of pool circlings in 120 seconds Was observed during probe trials.Following injection of orexin-A,the latency of escape platform was significantly declined in both PTZ-kindled((39.73±2.03)8,(33.76±2.96)s)and NS rats,increased the number of crossing the platform(10.83±1.80)vs(4.67±3.34).In addition,the treatment with orexin-A markedly increased swim velocity and number of pool circlings in beth groups(P<0.01),particularly to the PTZ-kindled rats.Conclusion Spatial learning and memory in the PIZ-kindled rats can be improved by treatment with orexin-A.     

基于BDNF/TrkB介导的海马突触可塑性研究补肝散对衰老大鼠学习记忆功能的影响

目的 基于肝气虚理论和海马突触可塑性探讨衰老机制,观察补肝散对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力的影响.方法 40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、吡拉西坦组和补肝散组,各10只.模型组、吡拉西坦组、补肝散组腹腔注射400 mg/kg D-半乳糖制备衰老大鼠模型,空白对照组腹腔注射等量生理盐水,每日1次,...     

大鼠电点燃岛叶致痫模型建立后神经肽Ghrelin的表达

目的电点燃大鼠岛叶建立致痫模型,检测致痫大鼠神经肽Ghrelin变化特征,并探讨其意义。方法将雄性SD大鼠用数字表法随机分为空白对照组、假手术组和点燃组,又将点燃组分为点燃后1、3、7 d和10 d4个亚组。立体定向下将电极植入大鼠岛叶,建立致痫模型,观察大鼠行为学,监测大鼠脑电情况;Nissl染色观察海马区神经元变化情况,用放射免疫法（RIA）和免疫荧光法分别检测血清和下丘脑中Ghrelin的表达水平。结果点燃后各亚组血清Ghrelin表达水平均降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;下丘脑Ghrelin表达也明显减少,差异有统计学意义（P〈0.05）;各时间亚组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论电刺激岛叶可建立稳定的点燃模型,癫痫发作后Ghrelin水平明显降低,血清Ghrelin水平可以反映下丘脑中相应神经肽的变化趋势。     

大鼠岛叶与杏仁核电点燃癫痫模型的相关性研究

目的 电刺激Sprague-Dawley大鼠岛叶、杏仁核及同时刺激岛叶、杏仁核建立复杂部分性癫痫模型,探讨岛叶癫痫的可能发病机制.方法 健康雄性SD大鼠60只,随机分成三组:岛叶点燃组(IK)、杏仁核点燃组(AK)、岛叶杏仁核同时点燃组(BK).分别将双极电极植入左侧岛叶、左侧杏仁核和同时植入岛叶杏仁核;测定后放阈后每日给予两次电刺激,刺激参数:强度为后放阈1.5倍,频率60 Hz,波宽1 ms,持续时间1 s.结果 岛叶组和杏仁核组后放阈值差异有统计学意义(P<0.05);三组点燃时间差异有统计学意义,岛叶组点燃最快,岛叶杏仁核同时点燃组点燃最慢(P<0.05);三组点燃率无明显差异.结论 岛叶是一个癫痫症状发作区;岛叶癫痫的发生、发展与杏仁核点燃存在差异;同时点燃表现为点燃的拮抗作用.     

海马及皮层的氧自由基损伤与大鼠学习能力和记忆能力的关系

目的：探讨海马及皮层的氧自由基损伤与大鼠学习能力和记忆能力的关系。方法：分别制备海马和皮层氧自由基损伤的大鼠模型,采用条件性回避反应法分析海马损伤模型和皮层损伤模型的学习能力改变和记忆能力改变的差异。结果：皮层损伤模型学习能力的下降甚于记忆能力的下降;而海马损伤模型记忆能力的下降甚于学习能力的下降。结论：皮层和海马在学习和记忆均有作用,且皮层偏重于学习功能,而海马偏重于记忆功能。     

解忧方对抑郁大鼠模型海马BDNF及受体TRKB表达的影响

目的：观察中药解忧方对慢性应激抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB表达的干预作用。方法：建立慢性应激抑郁大鼠模型，采用免疫组化染色方法，观察解忧方对模型大鼠海马BDNF、TrkB表达的干预作用。结果：慢性应激抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB的表达明显低于正常组，解忧方能明显上调其表达。结论：解忧方能上调节BDNF、TrkB的表达，营养神经元，发挥抗抑郁作用。     

脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B在大鼠小脑的表达

目的研究脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B在大鼠小脑的时空分布变化。方法采用免疫组织化学方法实验,观察脑源性神经营养因子及酪氨酸激酶受体B在正常大鼠发育期、成年期和老龄期小脑内的定位分布及时间变化。结果发育期小脑皮质的外颗粒层、梨状细胞层和内颗粒层均有BDNF表达,梨状细胞层的阳性Purkinje细胞染色明显。成年期内颗粒层阳性细胞逐渐增多,梨状细胞层的Purkinje细胞BDNF表达及阳性细胞数量达高峰。老年期阳性细胞染色强度呈增龄减低,Purkinje细胞发生了轻度的退行性变,TrkB表达在小脑皮质分布模式类似BDNF的表达。结论小脑皮质BDNF及TrkB的时空表达基本一致。表达高峰为生后20天。老龄期呈增龄性下降,细胞出现退行性改变。     

针刺影响慢性脊髓损伤大鼠BDNF及其受体TrkB的表达

目的 :探索针刺治疗慢性脊髓损伤的作用机理。方法 :采用大鼠后路渐进性脊髓压迫动物模型 ,然后手术减压 ,并进行电针治疗。观察联合行为评分 (CBS)和脑源性神经营养因子 (BDNF)及其受体TrkB的免疫组化变化。结果 :脊髓损伤后BDNF和TrkB在神经元及胶质细胞表达增强 ,经过电针治疗后 ,BDNF和TrkB在神经元和胶质细胞的表达下降。CBS值显示 ,电针组明显优于减压组 ,电针组与减压组比较统计学差异具有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :电针治疗可以促进脊髓损伤大鼠的行为功能恢复 ,BDNF及其受体TrkB介导了电针的治疗过程 ,与促进行为功能恢复有关。     

NGF、BDNF和NT3在AD大鼠海马中的分布及表达变化

目的 观察NGF、BDNF和NT3在Alzheimer disease（AD）大鼠海马中的分布及其表达变化。方法 采用海马注射Aβ淀粉蛋白的方法建立AD模型。10d后对大鼠进行灌注,取脑,冰冻切片,用NGF、BNDF和NT3抗体行免疫组织化学染色。对海马恒定视野内NGF、BDNF和NT3的阳性细胞进行记数并进行统计学分析。结果 AD组海马中的NGF阳性细胞较正常组显著增多（P〈0．01）．且染色增强。BDNF阳性细胞较正常组明显减少（P〈0．01）．染色强度减弱。而NT3的阳性细胞数及染色强度与正常组比较差异均没有统计学意义（P〉0．05）。结论 NGF、BDNF和NT3在AD的海马中发生了不同的变化,提示NGF、BDNF和NT3在AD中发挥了不同的作用．尤其是BDNF阳性细胞的减少可能与AD的神经功能减退有关。     

TrkB和配体BDNF在宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织中的表达及意义

目的观察酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase B,TrkB)及其配体脑源性生长因子(brain-derived neurotrophic fac-tor,BDNF)在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变组织中的表达情况,探讨TrkB及配体BDNF与宫颈癌发生发展的关系与临床意义。方法采用免疫组织化学方法(S-P法)对不同分级30例宫颈癌、89例宫颈上皮内瘤变进行TrkB及配体BDNF表达的检测,并与18例正常宫颈组织中TrkB及配体BDNF表达比较。结果 TrkB及配体BDNF在正常宫颈组织中大多数呈阴性表达,在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变中呈阳性表达,其表达强度随病变程度增加而增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TrkB及配体BDNF的高表达与宫颈癌的发生发展关系密切,检测TrkB及配体BDNF有助于预测宫颈癌的发生发展,两者联合检测有可能作为宫颈癌及癌前病变诊断的生物学标志。     

不同时程吗啡依赖戒断大鼠海马CA1区BDNF 及PSD-95的表达

目的观察不同时程吗啡依赖大鼠戒断1周后海马CA1区脑源性神经生长因子(BDNF)及突触后致密质95(PSD-95)的表达变化,探讨吗啡依赖戒断对海马CA1区的影响。方法建立不同时程(1周、2周、4周)吗啡依赖大鼠模型并自然戒断1周后,应用RT-PCR方法观察海马CA1区BDNF及PSD-95的表达情况。结果吗啡依赖1周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较生理盐水对照组下降(P<0.01),吗啡依赖2周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠有所上升(P<0.05),但仍低于生理盐水对照组(P<0.01),吗啡依赖4周戒断组大鼠海马CA1区的BDNF及PSD-95表达较吗啡依赖1周戒断组大鼠、吗啡依赖2周戒断组大鼠均下降(P<0.01)。结论BDNF及PSD-95在吗啡依赖大鼠自然戒断1周后的海马CA1区的表达降低,吗啡依赖戒断对海马CA1区损伤明显。     

DeBDE对学习记忆能力及BDNF基因表达的影响

目的研究十溴联苯醚（decabromod iphenylether,DeBDE）暴露对雄性大鼠学习记忆能力及海马组织中BDNF基因表达的影响。方法雄性SD初断乳大鼠经口灌胃给予不同剂量100,300,500 mg/（kg.d）的DeBDE染毒,对照组给予溶剂玉米油。60 d后用Morris水迷宫测试其学习记忆能力,并用定量PCR检测其大脑海马组织中脑源性神经生长因子的表达。结果高、中剂量组大鼠空间学习、记忆能力较对照组明显降低,差异有统计学意义;低剂量组大鼠学习记忆能力与对照组比较,差异无统计学意义;高、中、低剂量组大鼠海马组织中BDNF基因的表达都显著降低,且随染毒剂量增加表达有逐渐下降的趋势。结论 DeBDE可以损害大鼠的学习记忆能力,可能和降低海马BDNF的表达有关。     

新生豚鼠胆红素脑病时皮层及海马BDNF及其mRNA表达影响的实验研究

目的探讨胆红素脑病时BDNF及其mRNA在大脑皮层及海马的表达及其作用.方法应用免疫组化、原位杂交技术进行实验研究,镜下计数大脑皮层及海马区BDNF及BDNFmRNA阳性神经元细胞数、阳性神经元细胞平均灰度.结果注射胆红素后4 h组与对照组相比皮层BDNF的表达降低,海马BDNF的表达变化不明显;8 h组表达均较同剂量4 h组增加.与对照组相比注射胆红素后BDNFmRNA的表达4 h、8 h组呈持续增加,且8 h组BDNFmRNA表达高于4 h组,并与时间、剂量存在一定关系.结论在胆红素脑病早期皮层BDNF表达降低,海马变化不明显,随损伤时间及程度加重表达增高;BDNFmRNA在胆红素脑病早期表达即增快,随损伤时间及程度加重进一步增高;实验提示BDNF在胆红素脑病时可能发挥其神经元保护作用.     

糖尿病大鼠脑缺血再灌注脑组织BDNF表达及UPP阻断的影响

目的探讨糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注模型中脑源性神经营养因子（BDNF）的表达及阻断泛素蛋白酶体途径（UPP）对它的影响。方法将SD大鼠随机分成正常对照组（A组）、假手术组（B组）、非糖尿病组（C组）、糖尿病组（D组）和糖尿病治疗组（E组）,免疫组织化学方法观察再灌注3h、6h、24h、48h及阻断UPP后脑组织中BDNF的动态变化。结果脑缺血再灌注后,各脑梗死组BDNF表达均增加,24h达高峰,48h后下降;UPP阻断后E组脑组织中BDNF阳性细胞计数较C组、D组明显增加（P〈0．05）。结论UPP阻断可通过促进内源性BDNF表达产生神经保护作用。