细胞破碎-回流提取红豆杉中紫杉醇含量

目的 以东北红豆杉侧枝及叶为原料,采用细胞破碎与回流提取相结合的方法提取紫杉醇并测定其含量.方法 通过对细胞破碎-回流提取法的破碎时间、破碎功率、乙醇浓度等单因素实验确定最佳单因素水平并通过正交实验,确定了以乙醇为提取剂提取红豆杉中紫杉醇类化合物的最佳工艺条件.然后采用高效液相色谱法测定紫杉醇含量.结果 最佳提取条件:细胞破碎-回流提取破碎功率为70 W,乙醇浓度为95%,细胞破碎时间为40 min.高效液相色谱法测定紫杉醇回收率为86.22%～99.07%,精密度RSD为3.45%,重现性RSD为3.41%,红豆杉叶中紫杉醇含量为0.173 3 mg/g,红豆杉侧枝中紫杉醇含量为0.171 8 mg/g.结论 采用细胞破碎-回流提取方法提取红豆杉中紫杉醇可较大提高提取效率;用高效液相色谱法测定紫杉醇含量方法准确、可行.     

云南红豆杉中紫杉醇粗品的提取及测定方法

红豆杉中紫杉醇含量很少,为了更有效地利用有限的植物资源,有关方面都在不断地改进提取方法。用85％乙醇在60℃浸泡过夜,连续提取3次,可提高粗品的产量。紫杉醇粗品纯度测定方法通常采用目视法,为提高其准确性,用紫外吸收光谱法,以氯仿作溶剂,在275±1nm处进行测定可得到较好结果。     

红豆杉提取紫杉醇后残渣中紫杉烷类成分的含量测定

目的：测定红豆杉氯仿提取紫杉醇后残渣中紫杉烷类成分的含量。方法：用紫外分光光度法测定氯仿提取紫杉醇后红豆杉残渣的醋酸乙酯、正丁醇提取物的紫杉烷类成分的含量,测定波长为227nm。结果：3种红豆杉残渣的醋酸乙酯提取液中紫杉烷类成分的含量测定结果为东北红豆杉〉南方红豆杉〉曼地亚红豆杉,东北红豆杉树皮〉东北红豆杉枝叶;正丁醇提取液中紫杉烷类成分的含量测定结果为曼地亚红豆杉〉南方红豆杉〉东北红豆杉,东北红豆杉树皮〉东北红豆杉枝叶。结论：常法提取紫杉醇后的红豆杉残渣中仍留有紫杉烷类成分,可作为二次开发利用的再生资源。     

天然紫杉醇分离难点研究

从红豆杉树皮中提取分离紫杉醇,采用１％柠檬酸渗漉,柱层分析分离,最后用溴加成分离紫杉醇和ｃｅｐｈａｌｏｍａｎｎｉｎ,可容易得到高纯度的紫杉醇。     

回流法与超临界CO2流体萃取法提取东北红豆杉中紫杉醇的研究

目的:优选提取东北红豆杉中紫杉醇的方法和条件。方法:考虑不同影响因素,采用正交设计,对乙醇回流提取法和超临界CO2流体萃取法从东北红豆杉中提取紫杉醇工艺进行比较,采用高效液相色谱法测定紫杉醇含量。结果:乙醇回流提取量为0.438 mg/g,超临界萃取量为0.512 mg/g。结论:提取东北红豆杉中紫杉醇,超临界CO2流体萃取方法优于乙醇回流法。     

曼地亚红豆杉双黄酮结构表征和Taxol定量

目的:对曼地亚红豆杉黄酮类成分进行研究,对其不同药用部位紫杉醇含量进行测定。方法:采用反复硅胶柱层析进行分离纯化,根据理化性质、光谱特征鉴定其结构。采用HPLC法测定曼地亚红豆杉枝叶、主根、须根三种药用部位中紫杉醇的含量,色谱柱为C18ODS(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水(3∶1),流速0.8 ml/min,检测波长228 nm。结果:从曼地亚红豆杉中分离得到三个双黄酮类化合物并进行结构鉴定为金松双黄酮(Ⅰ)、银杏黄素(Ⅱ)、7,7″,4′-Tri-O-Methylamentoflavone(Ⅲ)。曼地亚红豆杉枝叶、主根、须根中紫杉醇含量依次为:0.0308、0.02191、0.01983 mg/g。结论:化合物Ⅰ~Ⅲ为首次从该种植物中得到;曼地亚红豆杉中除树皮外的药用部位枝叶的含量最高,主根次之,须根含量最低。     

曼地亚红豆杉研究进展

曼地亚红豆杉Taxus media是东北红豆杉T.cuspidata和欧洲红豆杉T.baccata的天然杂交种。其枝叶中的紫杉醇量较高,是利用红豆杉树皮提取抗癌药物紫杉醇的最佳替代原料。综述了曼地亚红豆杉的生物学特性及品系、生理生态、繁殖技术、细胞培养、紫杉醇生物合成相关酶基因的克隆及表达和分离纯化工艺等方面的研究进展。     

高效液相色谱法测定红豆杉枝叶中紫杉醇的含量

目的 研究红豆杉枝叶中紫杉醇的含量测定方法,并对人工种植的云南红豆杉中紫杉醇的含量进行调查研究.方法 采用甲醇和二氯甲烷超声提取样品,HPLC梯度洗脱.结果 紫杉醇的理论塔板数为5628,分离度为1.42,拖尾因子为1.01.回归方程为y=4×107X 39 942,r=0.999 7.在0.004 2～0.020 1/ml之间的线性关系良好.日内和日间精密度的RSD均小于2.0%,重复性实验的RSD为0.3%(n=5),最低检测限为1.0μg/ml,加样回收率为85.19%,84.95%,82.37%,RSD(n=5)分别为3.7%,4.87%,3.6%.人工种植的云南红豆杉中紫杉醇的平均含量达140mg/kg.结论 该方法缩减了红豆杉药材的前处理步骤,节约了实验时间,适用于红豆杉枝叶中紫杉醇含量测定;同时也证明中国恩茅地区人工种植的红豆杉具备提取紫杉醇的价值,有较高的开发利用价值.     

正交试验优选超声辅助提取南方红豆杉醇提药渣中多糖的工艺

目的：对南方红豆杉醇提药渣中的多糖进行超声辅助提取,优化提取工艺参数,并将醇提药渣中多糖与生药中多糖的提取率差异进行对比,为其资源再利用提供实验依据。方法：以南方红豆杉醇提后的药渣为研究对象,采用超声辅助水提-醇沉提取多糖,并以葡萄糖为对照品,苯酚-硫酸法测定多糖含量。采用单因素试验筛选影响提取的主要因素,再以正交试验最终优选提取工艺。结果：南方红豆杉醇提药渣中多糖的最佳提取工艺为料液比1∶30、超声功率50W、超声时间20min;与南方红豆杉中多糖提取率相比,得率从5.12%下降到3.73%,纯度从70.53%提高到89.53%。结论：本研究优化所得南方红豆杉醇提药渣中的多糖提取工艺稳定可行,实现了药渣资源的再利用。     

不同海拔高度三峡库区南方红豆杉紫杉醇含量变化研究

目的 考察不同海拔高度红豆杉紫杉醇的含量,探求外部因子对三峡库区红豆杉药用部位中紫杉醇含量的影响.方法 采用HPLC法,Hypersil ODS2色谱柱,流动相为甲醇-水(60:40),柱温25℃,检测波长227 nm,比较不同海拔高度南方红豆杉紫杉醇的含量.取三峡库区南方红豆杉800,1000,1200,1500m海拔高度的树种,分别测定其药用部分的含量.结果 1000,1200m紫杉醇的含量明显高于800,1500m紫杉醇的含量.结论 三峡库区红豆杉药用部位紫杉醇含量随海拔高度分布各不相同.总体呈对称分布.     

HPLC测定比较曼地亚红豆杉和南方红豆杉不同部位的紫杉醇含量(英文)

目的:分析和比较曼地亚红豆杉和南方红豆杉不同部位的抗癌活性成分紫杉醇的含量。方法:利用85%乙醇提取和CH2Cl2萃取得到相关成分;通过高效液相色谱法进行了方法学研究并对紫杉醇含量进行了测定和比较。结果:得到了紫杉醇等相关成分,建立了一个简单而可靠的方法学研究,以此为基础,检测分析并比较了两种植物不同部位中紫杉醇的含量,其中以南方红豆杉的树叶中紫杉醇含量最高,达到了5.18×10-5(w/w)。结论:该方法能准确简便地提取红豆杉植物中的紫杉醇并分析其含量,可为合理开发红豆杉提供一定的科学依据。     

基于Box-Behnken设计优选南方红豆杉多糖微波提取工艺研究

目的：采用中心组合（Box-Behnken）设计优选南方红豆杉[Taxus mairei（Lemee et Levl.）S.Y.Hu ex Liu]枝条中多糖的微波提取工艺。方法：在单因素实验基础上,采用Box-Behnken设计对影响南方红豆杉枝条中多糖提取率的主要因素（料液比、提取时间、提取次数）进行优化,建立影响因素与响应值之间的数学模型,确定最佳超声提取工艺条件。结果：南方红豆杉枝条中多糖最佳超声提取工艺为：料液比21.48（V/W）,提取时间13.78min,提取次数3次,微波频率为1887MHz。结论：采用响应面法对南方红豆杉中多糖的提取条件进行优化,该方法合理可靠,能为生产工艺提供理论依据。     

超临界CO2萃取云南红豆杉枝叶中紫杉醇的研究

目的:采用超临界CO2从云南红豆杉枝叶中萃取紫杉醇。方法:以云南红豆杉枝叶为原料,先以纯CO2做萃取溶剂,除去原料中的脂类,再加入甲醇为夹带剂提取紫杉醇。用HPLC法检测萃取物中紫杉醇的含量。结果:紫杉醇的最佳萃取条件为:红豆杉枝叶粉碎至直径0.6~0.8 mm,萃取压力34 MPa,萃取温度40℃,甲醇为夹带剂。结论:SPE法较传统溶剂法,提取率有所提高,且使用有机试剂少,有利于环境保护,耗时少,生产周期短,效率高。     

红豆杉细胞培养物中紫杉醇的快速分离柱高效液相色谱法测定

目的:用快速分离柱高效液相色谱法测定红豆杉细胞培养物中的紫杉醇。方法:红豆杉细胞培养物中的紫杉醇用20%的甲醇提取,用固相萃取预分离和富集,然后以ZORBAX Stable Bound(4.6×50mm,1.8μm)C18快速分离柱为固定相,水和乙腈梯度洗脱为流动相分离,流速为2.0ml/min,用紫外二极管矩阵检测器检测。在该色谱条件下,紫杉醇在4.0min内可达到基线分离。结果:标准回收率为88%~93%,相对标准偏差为2.8%~3.4%。结论:快速分离柱高效液相色谱法是红豆杉细胞培养物中紫杉醇快速测定的可靠方法。     

东北红豆杉不同部位紫杉醇的分布与含量

作者提取了东北红豆杉 Taxus cuspidata 雌株和雄株不同部位的新鲜嫩枝,用 HPLC测定了紫杉醇的含量并评价了叶的不同采集处理方法与紫杉醇含量的关系。     

红豆杉中紫杉醇含量与生态环境的关系

紫杉醇是从红豆杉植物（Ｔａｘｕｓ）中提取出的抗肿瘤药物。紫杉醇含量与红豆杉的种属无明显关系，而与红豆杉的生态环境密切相关。低温，低于蔽阴处，富含有机质的土壤（５〈ｐＨ〈７）是高含量紫杉的红豆杉的三大必要生态条件。我国云南西部地区有着丰富的红豆杉资源及适合富含紫杉醇的红豆杉的生态环境，红豆杉Ｔａｘｕｓ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ，Ｔ．ｍａｉｒｅｉ，Ｔ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ紫杉醇含量最高，东北地区的红豆杉的     

南方红豆杉总黄酮、总多糖与紫杉醇配伍增效减毒作用研究

目的:研究南方红豆杉中总黄酮、总多糖及其与紫杉醇配伍抗肿瘤的增效减毒作用。方法:采用MTT比色法,观察南方红豆杉中总黄酮、总多糖及其与紫杉醇配伍对4T1、A549、MCF-7细胞增殖抑制率的影响;利用等效线图探讨联合用药的行为。采用均匀设计分组,培养S180肉瘤ICR小鼠,观察配伍对荷瘤小鼠移植瘤生长的抑制情况;血液细胞分析仪检测血常规。结果:体外总多糖、总黄酮能够增强紫杉醇对4T1、A549细胞的抑制作用;总多糖能够增强紫杉醇体外对MCF-7细胞、体内对S180荷瘤小鼠移植瘤的抑制作用,体内减轻紫杉醇抗肿瘤时的骨髓抑制毒副作用。结论:紫杉醇可以通过配伍南方红豆杉总黄酮、总多糖达到增效减毒作用。     

朝鲜产东北红豆杉树皮中多糖提取工艺的比较研究

目的:建立朝鲜红豆杉树皮中多糖含量测定的方法.方法:分别采用超声波、微波及传统水浴提取3种方法提取朝鲜红豆杉树皮多糖,用苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量,测定波长为487nm.结果:葡萄糖浓度在11.8～118μg·mL-1呈现良好的线性关系.结论:3种方法中微波提取最佳,其次是水浴和超声法,3种方法提取的多糖含量分别为11.06%,10.88%,8.50%.     

红豆杉的细胞工程学研究进展

利用红豆杉Taxus的培养细胞作为提取抗癌新药紫杉醇(Taxol)的原料来源的研究已取得了极大进展。到目前已知对红豆杉属的10个种或变种进行过细胞培养的研究,有些种培养细胞的紫杉醇含量高于原植物。通过加入生物合成前体和/或真菌诱导子等措施可以显著提高红豆杉培养细胞中紫杉醇的含量。紫杉醇酶标免疫含量测定的研究成功标志着培养细胞中紫杉醇的微量含量测定可以快速进行,为快速筛选高产紫杉醇细胞系提供了有力的检测手段。红豆杉的毛状根培养、固定化培养及胚培养等均已研究成功,为生产紫杉醇提供了多条途径。     

RP-HPLC法测定云南红豆杉提取物中紫杉醇的含量

<正>紫杉醇是从红豆杉科植物中分离出的一种抗癌新药,是迄今为止最有希望的抗癌天然产物,有关紫杉醇含量测定方法很多,我们采用RP-HPLC法,所用的流动相为乙腈:水系统,经过对我所研制的数批云南红豆杉提取物中紫杉醇的含量测定,方法简便,灵敏度高,效果满意。