乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群HPA-15基因多态性分析

目的分析乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群血小板特异性抗原HPA-15基因多态性,为临床血小板输注提供依据。方法采用聚合酶链-序列特异性引物技术(PCR-SSP)对乌鲁木齐地区100名无血缘关系的哈萨克族献血者的HPA-15系统进行基因分型,计算基因型频率和基因频率。结果哈萨克族献血人群HPA-15a/15a、HPA-15a/15b、HPA-15b/15b基因型频率分别为0.21、0.53、0.26。HPA-15a、HPA-15b的基因频率分别为0.475和0.525。HPA-15a、HPA-15b抗原不配合率分别为0.1997和0.1747。结论乌鲁木齐地区哈萨克族HPA-15抗原不配合概率高,可能导致产生同种免疫性血小板抗体的概率增加,在临床血小板输注中的作用值得重视。     

四川德阳地区血小板捐献者HPA-1～6w、HPA-15及HPA-32bw～35bw多态性研究

目的 了解四川德阳地区血小板捐献者HPA-1～6w、15及32bw～ 35bw的多态性,并评估32bw～35bw位点是否纳入血小板库常规检测.方法 采用PCR-测序分型(SBT)方法,对205名德阳地区血小板捐献者的HPA-1～6w、15及32～ 35bw位点测序后,采用直接计数法计算等位基因频率,与中国南北方人群及澳...     

贵州黔东南州苗族人群HPA-1～5、15多态性调查

目的 调查贵州省黔东南州苗族健康随机献血人群人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA) 1-5、15系统基因多态性分布特点.方法 采用聚合酶链-序列特异性引物技术(PCR-SSP)对贵州省黔东南州无血缘关系苗族随机献血人群100例血样进行HPA-1～5、15系统基因分型.结果 贵州省黔东南州苗族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、15a基因频率分别是0.950、0.900、0.830、0.985、0.975、0.585,HPA-1b、2b、3b、4b、5b、15b基因频率分别是0.050、0.100、0.170、0.015、0.025、0.4150;与其他研究比较:HPA-1与新疆维吾尔族、海南黎族、中国汉族相比较差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-2与新疆维吾尔族、海南黎族、菲律宾、泰国相比较差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-3与我国其它研究相比较差异均有统计学意义(P＜0.05);HPA-4与其它研究相比较差异无统计学意义(P＞0.05);HPA-5与国内新疆维吾尔族相比较差异有统计学意义(P＜0.05);HPA-15与新疆维吾尔族、海南黎族族、印度尼西亚相比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 贵州省黔东南州苗族人群HPA分布具有本地人群特点.本组HPA数据分布符合Hardy-Weinberg平衡定律,可以作为贵州省黔东南州苗族HPA基因分布频率数据库和血小板供者HPA资料库.     

SSP法和测序法对广州汉族人群HPA-6多态性调查

目的:调查广州汉族人群HPA-6多态性.方法:采用SSP法和测序法对200例广州汉族无偿血小板献血员进行HPA-6基因分型.结果:HPA-6a和-6b的基因频率分别为0.977 5和0.022 5,符合Hardy-Weinberg平衡.与中国其他地区人群及亚洲其他地区人群比较差异无显著性,但和其他洲人群分布存在统计学差异:在随机输血中HPA-6抗原不配合的机会为0.043 0.结论:获得广州汉族人群HPA-6频率数据.对建立本地血小板供者库和开展血小板同型输注具有指导意义.     

2458名中国汉族人类HPA-1～6、15基因多态性的研究

目的分析中国汉族人群HPA-1～6、15系统的基因多态性,研究中国南、北方汉族人群HPA-1～6、15的基因分布。方法采用Luminex结合序列特异性寡核苷酸探针(flow-sequence specific oligonucleotide probes,FLOW-SSO)方法对2 458名深圳巿机采血小板无偿捐献者(其中南方人群1 554人,北方人群904人)进行HPA-1～6,15系统基因分型。采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-sequence specific primer,PCR-SSP)方法对有疑问的标本及罕见抗原(如HPA-1b/1b、2b/2b、5b/5b等)做进一步确认。结果中国汉族人群中HPA-1～6、15基因频率分别为,HPA-1a 0.991 7,HPA-1b 0.008 3,HPA-2a 0.955 2,HPA-2b 0.044 8,HPA-3a 0.558 6,HPA-3b 0.441 4,HPA-4a0.998 0,HPA-4b 0.002 0,HPA-5a 0.986 2,HPA-5b 0.013 8,HPA-6a 0.985 6,HPA-6b 0.014 4,HPA-15a 0.545 2,HPA-15b 0.454 8。南、北方汉族人群HPA-1～6、15比较,在HPA-1和HPA-3系统(χ2=15.032 0、5.418 8,P0.05);基因频率分布差异有统计学意义。经χ2检验,符合Hardy-Weinbery遗传定律。结论中国汉族人群中HPA-3和HPA-15杂合程度最高,在中国南北方汉族人群中HPA-1和HPA-3系统基因多态性分布存在明显的地域差异。为了给免疫性血小板减少症患者提供相合血小板输注,在中国建立血小板供者资料库是必要的。     

广州地区无偿献血者HPA-1—6,15基因分型及频率调查

目的研究人类血小板基因多态性,为人类群体遗传学研究及临床输血实践提供重要数据和依据。方法通过PCR-SSP方法对广州地区706名无偿献血者的HPA1—6,15系统进行基因分型,并统计其频率。结果706份样本中HPA-3和-15基因型的杂合程度最高,其a/a、a/b、b/b的频率分别为HPA-3:0.2918、0.4830、0.2252;HPA-15:0.2691、0.5170、0.2139,不配合率较高,均达到35%以上。HPA-1、-2、-4、-5系统均以a/a纯合子为主,a基因的频率范围为0.9583—0.9993,且均未发现b/b纯合子。1b、4b的基因频率很低,分别为0.0028和0.0007。本地区的HPA-1a与中国北方、英国白人、美国黑人有统计学差异(P<0.05)。HPA-2与中国南方、北方、美国黑人和日本人有统计学差异(P<0.05);HPA-5与英国白人和美国黑人存在统计学差异(P<0.05)。HPA-6频率分别为0.9575,0.0397,0.0028。结论本研究对广州地区HPA献血员的筛查可为建立HPA供者库和对探讨由HPA引起的免疫性疾病的预防和治疗提供相关数据和研究手段。     

大连地区汉族人群HPA-15基因多态性分析

目的分析大连地区汉族人群血小板特异性抗原HPA-15基因多态性,探讨其在血小板输注中的临床意义。方法采用PCR-SSP法对大连地区100名汉族无血缘关系血小板捐献者的HPA-15系统进行基因分型。结果大连地区汉族人群HPA-15aa、HPA-15ab、HPA-15bb基因型频率分别为0.3600、0.4400、0.2000。HPA-15a、HPA-15b的基因频率分别为0.5800、0.4200。与我国其他地区汉族人群比较,分布差异无统计学意义。在随机输血中,HPA-15抗原不配合概率为0.3685。结论在随机输血中,HPA-15抗原不配合概率高,在血小板输注中应加以重视。     

广州地区汉族献血人群HPA-21多态性调查

目的 了解广州汉族献血人群人类血小板抗原(HPA)-21多态性.方法 设计HPA-21的序列特异性引物(SSP),采用SSP法对200名广州汉族无偿血小板献血者作HPA-21基因分型,并采用DNA测序验证.结果 200名献血者中,198例为HPA-21a/-21a纯合子,2例为HPA-21a/-21b杂合子,并经DNA测序证实.广州汉族献血人群HPA-21a和HPA-21b的等位基因频率分别为99.50％和0.50％,与Hardy-Weinberg平衡吻合;在随机输血中HPA-21抗原不配合的机会为0.99％.结论 所获得的广州汉族献血人群HPA-21基因频率数据,有助于建立本地血小板供者库和开展血小板同型输注.     

潍坊地区汉族献血者血小板特异性抗原HPA-1-16系统基因多态性研究

目的研究汉族人群血小板特异性抗原HPA-1-16系统基因多态性区域分布特点,建立HPA基因型资料库。方法采用PCR-SSP技术对102名潍坊地区汉族无血缘关系的志愿捐献血小板者作HPA-1-16系统基因分型,计算基因型频率、基因频率。结果从HPA-1、5、6系统分别检出1例a/b基因型,HPA-4系统检出2例a/b基因型,检出HPA-2a/2b 11例(基因频率占0.1078);HPA-3、15系统表现出较高的杂合度,其中3a/3a、3a/3b、3b/3b基因型频率分别为0.3039、0.5392、0.1569,15a/15a、15a/15b、15b/15b基因型频率分别为0.3529、0.4608、0.1863;HPA- 7-14、16系统只检出a基因,呈单特异性。结论潍坊地区汉族人HPA-2、3、15系统具有多态性,是HPA配合性输注关注重点。在随机输血中供受者HPA-2系统不配合的机会为9.68%、HPA-3系统不配合的机会为36.95%、HPA-15系统不配合的机会为36.8%。     

PCR-SSP在人类血小板抗原1—6、15系统基因分型中的应用

目的探索PCR-SSP技术在人类血小板抗原(HPA)-1、2、3、4、5、6、15系统的基因分型中的应用。方法合成23条序列特异性引物,通过调节引物浓度、Mg2+离子浓度和探索最佳PCR扩增条件,建立HPA-1—6、15系统同步扩增基因分型方法。用该法盲检100名献血者HPA-1—6、15系统的基因分型结果,与用美国G&T公司的HPA-1—6、15系统的基因分型试剂所测试的这100名献血者的基因分型结果进行比较。结果该分型方法和美国G&T公司试剂同时检测100名随机献血者,其HPA-1—6、15分型结果完全一致,符合率达100%,基因频率分别是:HPA-1a和1b为1和0,HPA-2a和2b为0.98和0.02,HPA-3a和3b为0.63和0.37,HPA-4a和4b为0.997和0.003,HPA-5a和5b为0.997和0.003,HPA-6a和6b为1和0,HPA-15a和15b为0.548和0.450。结论该分型方法具有简便、快速、准确的特点,适合常规HPA基因分型。     

人类血小板抗原1～4系统基因分型

目的 :建立人类血小板抗原 1～ 4系统序列特异性引物 (PCR SSP)分型方法。方法 :合成 14条引物 ,采用PCR SSP方法对 2 5名健康献血者的HPA 1～ 4系统进行基因分型 ;分型结果与采用等位基因特异性寡核苷酸点杂交 (PCR ASO)获得的结果进行比较。结果 :以PCR SSP方法对HPA 4个系统进行分型均取得了明确、满意的结果 ,且与PCR ASO方法获得的结果完全一致。结论 :人类血小板抗原PCR SSP基因分型方法具有简便、快速、准确等优点 ,具有广泛的应用前景。     

新疆汉族人群血小板抗原1—5、15系统基因多态性分析

目的调查研究与血小板输注无效关系密切的人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)1—5及15系统基因在新疆汉族人群中的遗传多态性。方法采用聚合酶链-序列特异性引物(PCR-SSP)法对101例无血缘关系的新疆汉族血样进行HPA基因分型。结果新疆汉族HPA-1a、2a、3a、4a、5a、15a基因频率分别是0.9851、0.9208、0.5446、1、0.9505、0.4653,HPA-1b、2b、3b、4b、5b、15b基因频率分别是0.0149、0.0792、0.4554、0、0.0495、0.5347,新疆汉族HPA基因频率与维吾尔族人群相比,HPA-1a、1b基因频率差异具有统计学意义(P<0.05)。结论HPA-1、2、3、5、15系统均具有多态性,HPA-3、15系统具有高度多态性。     

盐城地区汉族人血小板抗原HPA-1～17，Caba基因多态性分析

目的：研究盐城地区汉族人群血小板特异性抗原人类血小板同种抗原1～17（HPA1～17）,Caba的基因分布,建立本地区固定机采血小板供者 HPA数据库。方法应用序列特异性引物聚合酶链式反应（PCR‐SSP）技术,对盐城市中心血站200名汉族固定血小板献血者的血液进行HPA1～17,Caba基因分型。用χ2检验统计分析各 HPA血型系统基因分布的期望值与观察值,验证其是否符合 Hardy‐Weinberg平衡定律,并与国内外人群相比较。结果盐城地区200名汉族血小板献血者的HPA‐1a、2a、3a、4a、5a、6a、15a的基因频率分别为0．9950、0．9375、0．5725、0．9925、0．9850、0．9875、0．5425,呈多态性分布,HPA7～14、16～17及Caba呈单线性分布;不配合率大于10％的HPA系统有HPA‐2～3、15。结论本研究已确认盐城地区200名固定血小板供者 HPA基因分布特征,与国内其他地区、其他国家相比有本地区人群特点;在此基础上建立本地区已知 H PA基因型固定机采血小板供者数据库,为临床血小板HPA血型配合性输注提供可能。     

岳阳地区血小板捐献者HPA1～17,HLA-A和B基因多态性研究

目的 研究湖南省岳阳地区机采血小板捐献者人类血小板抗原（HPA） 1-17及人类白细胞抗原HLA-A和B基因分布及多态性.方法 分别采用PCR-SSP法和PCR-SSO法对200名岳阳地区机采血小板捐献者进行HPA1-17和HLA-A和B基因分型,计算基因频率、基因型频率,并与其他人群进行比较.结果 岳阳人群HPA1-17系统中,HPA7-14和HPA16-17的基因型均为aa型,不具有多态性;HPA1,2,4和5主要以aa型为主,aa基因型频率分别是0.970 0,0.900 0,0.985 0和0.980 0,未检出bb型;仅在HPA3,6和15中检出bb型,bb基因型频率分别是0.185 0,0.035 0和0.465 0;杂合度最高的是HPA15,其aa,ab和bb基因型频率分别是0.305 0,0.230 0和0.465 0,HPA3杂合度居次,其aa,ab和bb基因型频率分别是0.380 0,0.435 0和0.185 0.HLA-A位点检出12个等位基因,频率最高的3个是A＊11（0.3325）,A＊02（0.295 0）和A＊24（0.205 0）;HLA-B位点检出28个等位基因,频率最高的5个是B＊ 40（60）（0.177 5）,B＊ 46（0.142 5）,B＊ 13（0.100 0）,B＊51（0.082 5）和B＊ 15（75）（0.077 5）.结论 岳阳地区机采血小板捐献者HPA1-17和HLA-A,B基因多态性与南方汉族接近,但也呈现出自身特点,需建立该地HLA/HPA基因分型血小板供者库服务于临床.     

上海地区汉族人群人类血小板抗原基因的多态性研究

目的研究上海地区汉族人群人类血小板抗原HPA-1～16系统基因多态性分布,为快速寻找更合适的血小板输注提供实验依据。方法采用PCR-SSP方法对137名上海地区汉族健康成年人进行HPA-1～16系统基因分型。结果HPA-1～6和HPA-15的基因频率分别为HPA-1a 0．9854,HPA-1b 0．0146,HPA-2a 0.9453,HPA-2b 0．0547,HPA-3a 0．5511．HPA-3b 0．4489,HPA-4a 0．9964,HPA-4b 0．0036,HPA-5a 0．9891,HPA-5 b0．0109,HPA-6a 0．9781,HPA-6b 0．0219,HPA-15a 0．5292,HPA-15b 0．4708;其余HPA系统只检测到a等位基因,其基因频率均为1．0000。经χ^2检验,符合Hardy-Weinberg遗传定律。结论HPA基因多态性分布存在明显的种族和地域性差异。HPA-1～6和HPA-15系统基因频率分布具有多态性,其中HPA-3和HPA-15系统杂合度最高,抗原分布不配合比例相对高,在临床配合性血小板输注中必须加以重视。HPA-3基因多态性分布更具有上海地区特点。     

贵州地区随机人群血小板抗原基因频率调查和不配合率分析

目的研究贵州地区随机人群HPA-1—5,15基因多态性分布特点及不配合率分析,为本地区HPA免疫性疾病的防治和建立HPA资料库提供参考数据。方法采用PCR-SSP方法对本地区1 270例随机人群进行HPA-1—5,15系统基因分型、计算基因频率和等位基因不配合率,得出相关数据,并与国内外不同地区人群进行比较,阐明本地区特点。结果本地区HPA-1、2、4、5以aa基因型为主基因型,表型频率0.883-0.997,除8例HPA-2bb纯合子外,HPA-1、4、5未检出bb基因型;HPA-3和15高度杂合,表型频率分别为3aa=0.371、3ab=0.486、3bb=0.143、15aa=0.265、15ab=0.493、15bb=0.242。本地HPA各系统与其他地区比较差异显著的有,HPA-1、5高加索人、埃及和美国白人,HPA-2成都和埃及,HPA-3广州和青岛,HPA-4青岛,HPA-15与各地均无差异。不配合率由高到低依次为HPA-15=0.375、HPA-3=0.362、HPA-2=0.110、HPA-5=0.051、HPA-1=0.012、HPA-4=0.004。结论本地区随机人群HPA-1-5、15系统1、2、4和5以aa基因型为主,3和5高度杂合,呈多态性分布。在本地区应该高度警惕HPA-3和15系统同种抗体导致的PTP、PAT和PTR的可能性,其次为HPA-2和5,由HPA-1和4系统产生同种免疫的机率较低。本研究证实HPA多态性分布存在人群、地域和人种的差异。     

徐州地区汉族人群血小板HPA1～17等位基因的研究

目的调查徐州地区汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性及特点,为人类遗传学提供资料,为本地区临床血小板免疫性减少症患者提供血小板输注配型参考。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对徐州地区100名无血缘关系的汉族成年人进行HPA1～17等位基因分型。在包含引物混合液的96孔反应板中,按照相同的循环条件扩增PCR产物。结果在徐州地区汉族人群的HPA1～17系统中,呈多态性分布的等位基因是HPA1a、HPA2a、HPA3a、HPA4a、HPA5a、HPA6a、HPA15a,其频率分别为0.995 0、0.935 0、0.590 0、0.9950、0.980 0、0.975 0、0.575 0,HPA7～14、16～17呈单线性分布。结论徐州地区汉族人群HPA的基因有地区特点,人类血小板抗原HPA的基因具有民族多态性。     

湖北土家族人群HLA-DRB1基因多态性研究

目的研究湖北土家族人群HLA-DRB1基因多态性,了解其分布特征,为开展群体遗传学相关研究奠定基础。方法采用聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针(PCR-SSOP)流式细胞技术对342份无血缘关系健康的湖北恩施土家族人群样本进行HLA-DRB1等位基因分型检测,分析等位基因分布频率,并与其他地区人群进行比较。结果共检出13种等位基因,其中以DRB1*09(0.174 0)、DRB1*04(0.136 0)、DRB1*12(0.125 7)、DRB1*15(0.118 4)、DRB1*08(0.109 6)最为常见,未检出DRB1*03(18)。湖北土家族人群HLA-DRB1等位基因总体分布分别与湖南苗族人群比较P>0.05;分别与昆明汉族、云南纳西族比较P<0.05;分别与湖北汉族、内蒙古鄂温克族、宁夏回族、内蒙古蒙古族、西藏珞巴族、昆明彝族、新疆克尔克孜族比较,P<0.01。结论了解湖北恩施土家族人群的HLA-DRB1的遗传多态性,对于追溯土家族起源和民族间的血缘遗传关系具有重要意义。     

熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型的研究

目的探讨熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型,了解大连地区汉族人群HPA-15基因多态性。方法设计合成HPA-15等位基因特异性引物和1条公共引物,其中在2条等位基因特异性引物的5'末端分别加入具有不同长度并富含GC碱基的序列。使用这3条引物,进行实时PCR反应。在PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,进行基因分型。应用熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法对100名大连地区汉族人群的血液标本进行HPA-15基因分型。此外对熔解曲线分析法的重复性进行评价。结果 100个血液标本的熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法的基因分型结果是完全一致的。10个血标本的2次熔解曲线分析结果是一致的。大连地区汉族人群HPA-15a、-15b基因频率分别为0.58和0.42。大连地区汉族人群与国内部分地区汉族人群相比,HPA-15等位基因频率的差异无统计学意义(P>0.05)。与新疆维吾尔族人群相比,HPA-15等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HPA的熔解曲线基因分型方法具有快速、简单、准确、通量高、重复性好等优点,要优于常规的PCR-SSP法。在国内HPA-15等位基因分布存在着种族差异。     

应用PCR-SSP方法进行人类血小板抗原1～6系统的基因分型

目的研究采用PCR-SSP技术,建立人类血小板抗原1～6系统(HPA-1,2,3,4,5,6)的基因分型方法.方法合成18条序列特异性引物,通过调节引物浓度、Mg2+离子浓度和探索最佳PCR扩增条件,建立HPA-1～6系统同步基因分型技术.对第10届及第11届国际输血协会(ISBT)血小板基因定型协作组送检的考核样本进行盲检来验证.并应用该技术对198名深圳地区健康的血小板志愿捐献者进行基因分型.结果应用本研究的方法,对第10届及第11届ISBT送检的考核样本进行基因分型,结果与ISBT公布的结果完全一致,符合率达100%.对198名随机的血小板志愿捐献者观察到的基因频率分别是:HPA-1a和1b为0.9924和0.0076,HPA-2a和2b为0.9545和0.0455,HPA-3a和3b为0.5556和0.4444,HPA-4a和4b为0.9975和0.0025,HPA-5a和5b为0.9848和0.0152,HPA-6a和6b为0.9798和0.0202.结论本研究建立的HPA基因分型技术具有简便、快速、准确的特点,适合于常规HPA基因分型,具有广泛的应用前景.