温经活血方对糖尿病周围神经病变大鼠Nrf2/HO-1/NQO1信号通路的影响

目的:探究温经活血方对糖尿病周围神经病变(DPN)大鼠的神经保护作用,以及Nrf2/HO-1/NQO1信号通路所发挥的作用。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导构建DPN大鼠模型,模型构建成功后,选择60只DPN大鼠随机分成DPN模型组、温经活血方低剂量组、温经活血方中剂量组、温经活血方高剂量组和二甲双胍组,每组12只,并给予相应药物处理。另取12只大鼠作为对照组。末次给药24 h后,检测大鼠行为学变化;试剂盒检测血清中SOD、MDA和GPH-Px水平;HE染色观察坐骨神经病理变化;Western blotting检测坐骨神经中Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达水平。结果:对照组大鼠坐骨神经结构正常,DPN模型组大鼠坐骨神经中轴突萎缩变性、髓鞘溶解,温经活血方低、中、高剂量组和二甲双胍组大鼠坐骨神经病理损伤有不同程度的改善。与对照组比较,DPN模型组大鼠体质量,机械截断阈值和热截断阈值,血清中SOD和GSH-Px水平,以及坐骨神经中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白相对表达量均明显降低(P<0.05),血糖水平和MDA水平均明显升高(P<0.05)。与DPN模型组比较,温经活...     

加减薯蓣丸通过Akt/GSK3β/Nrf2通路改善APP/PS1小鼠神经元凋亡

目的:探讨加减薯蓣丸对APP/PS1模型小鼠神经保护的效应和作用机制。方法:5月龄雄性APP/PS1小鼠20只和野生型小鼠10只,分为空白组、模型组、加减薯蓣丸组(14 g·kg-1·d-1),灌胃28 d,空白组、模型组给予等体积生理盐水;APP/PS1背景和野生型背景原代神经元,分为空白组、模型组、加减薯蓣丸组、衣霉素组和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)抑制剂组,空白组、模型组给予10%空白血清,加减薯蓣丸组给予5%加减薯蓣丸含药血清干预,衣霉素组和PI3K/Akt抑制剂组分别在加减薯蓣丸基础上加用2 mg·L-1的衣霉素和10μmol·L-1的LY294002。采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测海马核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达; Western blot检测内质网应激相关蛋白糖调节蛋白78(GRP78),蛋白激酶样内质网激酶(PERK),磷酸化(p-) PERK,凋亡通路蛋白真核生物的翻译起始因子2的α亚基(e IF2α),p-eIF2α,增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和p-Akt,Akt,糖原激酶3β(GSK3β),Nrf2蛋白表达。结果:体内实验中,与空白组比较,模型组APP/PS1小鼠学习记忆能力显著下降(P 0. 01),海马Nrf2表达显著下调(P 0. 01);与模型组比较,加减薯蓣丸干预4周后,加减薯蓣丸组APP/PS1小鼠学习记忆能力明显提升,海马Nrf2表达水平显著增加(P 0. 01)。体外实验中,与空白组比较,模型组GRP78,p-PERK/PERK,p-eIF2α/e IF2α,CHOP,cleaved Caspase-3蛋白表达显著增加(P 0. 01);与模型组比较,加减薯蓣丸含药血清明显降低GRP78,p-PERK/PERK,p-eIF2α/e IF2α,CHOP,cleaved Caspase-3蛋白表达(P 0. 05,P 0. 01);而衣霉素抑制加减薯蓣丸对内质网应激诱导凋亡的保护效应(P 0. 05);与空白组比较,模型组p-Akt/Akt,Nrf2蛋白表达显著下降,GSK-3β表达显著增加(P 0. 01);与模型组比较,加减薯蓣丸含药血清干预后p-Akt/Akt,Nrf2蛋白表达显著增加,GSK-3β表达明显降低(P 0. 05,P 0. 01); LY294002抑制加减薯蓣丸对p-Akt/Akt,Nrf2和GSK3β蛋白表达的影响(P 0. 05,P 0. 01)。结论:加减薯蓣丸通过PI3K/Akt/GSK3β信号通路上调Nrf2蛋白表达,减轻内质网应激诱导的神经元凋亡,改善APP/PS1模型小鼠学习记忆能力。     

大豆异黄酮调节Nrf2/HO-1信号通路对多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织损伤的影响

目的 基于核因子E2相关因子2(nuclear factor-E2-related factor 2, Nrf2)/血红素加氧酶1(heme oxygenase 1, HO-1)通路探究大豆异黄酮(soy isoflavones, SIF)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)大鼠卵巢组织损伤的保护作用。方法 雌性SD大鼠采用来曲唑(1 mg·kg^-1)诱导建立PCOS模型,实验分为对照组、PCOS组、低剂量SIF组(L-SIF组50 mg·kg^-1)、高剂量SIF组(H-SIF组100 mg·kg^-1)和SIF+ML385组(SIF 100 mg·kg^-1+Nrf2抑制剂ML385 30 mg·kg^-1),每组12只。各组给予相应的药物进行干预,每日1次,连续干预4周。检测各组大鼠体重、空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin, FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(...     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨益气活血方对脑缺血损伤大鼠氧化应激反应的影响

目的:以氧化应激损伤为切入点探讨益气活血方对脑缺血损伤大鼠的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为模型组,假手术组,尼莫地平组(20 mg·kg~(-1)),益气活血方高、中、低剂量组(2. 916,1. 458,0. 729 g·kg~(-1)),连续灌胃14 d后,采用结扎双侧颈总动脉法建立急性脑缺血损伤模型,透射电镜观察突触超微结构,生化法检测脑匀浆中总超氧化物歧化酶(T-SOD),丙二醛(MDA),乳酸脱氢酶(LDH),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)酶的水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定大鼠缺血区脑皮层血红素氧化酶-1(HO-1),核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白和m RNA表达。结果:透射电镜观察结果显示益气活血方对脑缺血损伤程度有明显改善作用。与假手术组比较,模型组大鼠脑匀浆MDA水平显著上升,T-SOD,GSH-Px水平显著降低(P 0. 01),LDH,Na+-K~+-ATP酶,Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶及ATP酶的活性均明显降低(P 0. 05,P 0. 01),脑组织中HO-1,Nrf2蛋白含量以及HO-1,Nrf2 m RNA表达显著降低(P 0. 01)。与模型组比较,益气活血方中、高剂量组可明显降低脑组织中MDA含量,升高T-SOD,GSH-Px的水平(P 0. 05,P 0. 01);益气活血方高剂量组可显著增加LDH,Na+-K+-ATP酶,Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶和总ATP酶活性(P 0. 05,P 0. 01),益气活血方中、高剂量组大鼠脑组织中HO-1,Nrf2蛋白含量明显升高(P 0. 05,P 0. 01),益气活血方高剂量组HO-1,Nrf2 m RNA表达明显升高(P 0. 05,P 0. 01)。结论:益气活血方可能通过Nrf2/HO-1信号通路抑制氧化应激水平实现对脑缺血损伤的保护作用。     

欧前胡素通过Nrf2/HO-1抗氧化途径对哮喘模型小鼠气道炎症的影响

目的探究欧前胡素对哮喘模型小鼠气道炎症的影响及其作用机制。方法将50只雄性BALB/c小鼠随机分成5组,即对照组、模型组及欧前胡素低、中、高剂量(15、30、60 mg/kg)组。采用HE、Masson、PAS染色观察小鼠肺组织病理学改变;ELISA法检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中免疫球蛋白E(Ig E)及白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-13、γ-干扰素(IFN-γ)水平;双氢罗丹明(DHR)-123法检测小鼠BALF中活性氧(ROS)的含量;检测小鼠肺组织中蛋白羰基含量及丙二醛(MDA)水平;抗氧化酶试剂盒检测小鼠BALF中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)水平及总抗氧化能力(TAOC);免疫组织化学法和Western blotting法检测小鼠肺组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)及血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达水平。结果与模型组比较,欧前胡素能够减少哮喘小鼠肺组织炎症细胞的渗出、杯状细胞的增生和胶原沉积;减少BALF中ROS、总Ig E和卵清蛋白(OVA)特异性Ig E的表达;降低IL-4、IL-5、IL-13、蛋白羰基、MDA的量并增加IFN-γ、SOD、GSH水平及TAOC;提高肺组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平。结论欧前胡素对OVA诱导的哮喘模型小鼠具有治疗作用,其作用机制可能与Nrf2/HO-1通路活化有关。     

醒脑静注射液对急性脑梗死外周血单个核细胞Nrf2、HO-1、NQO1表达及临床疗效的影响

目的:观察醒脑静注射液对急性脑梗死(ACI)核因子E2相关因子(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)以及临床疗效的影响。方法:2015年1月~2015年11月在我院住院ACI患者70例,随机分为对照组及治疗组各35例,2组均进行常规治疗,治疗组加用醒脑静30ml加入0.9%生理盐水注射液250ml,静脉滴注,每日1次,连用14d。比较2组治疗前以及治疗后7、14d外周血Nrf2、HO-1和NQO1水平,观察治疗前后2组ACI患者神经功能缺损量表(CNS)评分、血生化指标以及临床疗效。结果:治疗组治疗后CNS评分与对照组比较明显降低,治疗后两组Nrf2、HO-1和NQO1水平与治疗前比较均明显升高;治疗组治疗后以上指标均显著优于对照组。结论:醒脑静是对ACI有显著疗效,其作用机制可能通过上调ACI患者Nrf2、HO-1和NQO1水平,起到改善患者神经功能缺损和临床综合疗效的作用。     

鬼箭羽对糖尿病大鼠心肌组织氧化应激损伤及NFE2L2/HMOX1信号通路的影响

目的：探讨鬼箭羽对糖尿病大鼠心肌组织氧化应激损伤及核因子E₂相关因子2(NFE2L2)/血红素加氧酶1(HMOX1)通路的影响。方法：从72只大鼠中随机选取60只大鼠构建糖尿病模型,剩余12只大鼠作为对照组,将造模成功的60只大鼠分为模型组、鬼箭羽低剂量组、鬼箭羽高剂量组、吡格列酮组、鬼箭羽高剂量+ML385组,每组12只。各给药组大鼠分别给予相应药物,模型组和对照组大鼠灌胃给予等体积的生理盐水,1次/d,持续4周。检测各组大鼠给药前、后空腹血糖及心脏功能相关指标心率(HR)、平均动脉压(MAP)、左室收缩压(LVSP)的变化;HE染色检测心肌组织病理损伤;ELISA法检测心肌组织中肌红蛋白(Mb)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)水平;试剂盒检测氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的水平;TUNEL染色观察心肌细胞凋亡情况;Western blotting检测心肌组织中Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、NFE2L2、HMOX1蛋白表达情况。结果：与对照组比较,模型组大鼠给药前、...     

参七糖络丸激活Nrf2/HO-1/NQO1信号通路改善2型糖尿病小鼠骨骼肌氧化应激损伤

目的：基于核因子E₂相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)/醌氧化还原酶1(NQO1)通路探讨参七糖络丸对2型糖尿病小鼠骨骼肌氧化应激损伤的干预作用及机制。方法：选取SPF级7周龄雄性db/db小鼠60只适应性饲养1周,按随机数字表法分为模型组、参七糖络丸低、中、高剂量组(19、38、76 g·kg^-1))和二甲双胍组(0.26 g·kg^-1)灌胃,每组12只,另选12只同周龄雄性db/m小鼠为空白组。连续干预8周。检测小鼠空腹血糖(FBG);采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测空腹血清胰岛素(FINS)水平,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(HOMA-ISI);口服葡萄糖耐量实验(OGTT)、胰岛素耐量实验(ITT);生化试剂盒检测骨骼肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠骨骼肌组织病理学改变;免疫荧光法(IF)检测骨骼肌组织中活性氧(R...     

茶多酚激活Nrf2/HO-1通路减轻阿司匹林诱导的GES-1细胞损伤的机制研究

目的 探讨茶多酚(tea polyphenols, TP)对阿司匹林诱导的人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响及分子机制。方法 采用阿司匹林(19.27 mmol·L^-1)和不同浓度的茶多酚(50、100、200μmol·L^-1)处理GES-1细胞24 h,将GES-1细胞随机分为对照组、阿司匹林组(19.27 mmol·L^-1)、阿司匹林19.27 mmol·L^-1+茶多酚50μmol·L^-1组、阿司匹林19.27 mmol·L^-1+茶多酚100μmol·L^-1组、阿司匹林19.27 mmol·L^-1+茶多酚200μmol·L^-1组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测GES-1细胞增殖水平,采用流式细胞术和TUNEL实验检测GES-1细胞凋亡水平。采用二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测GES-1细胞活性氧(ROS)水平。采用试剂盒检测GES-1细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧...     

黄连红曲药对调控Nrf2/HO-1通路改善非酒精性脂肪肝的作用研究北大核心CSCD

目的:研究黄连红曲对非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic Fatty Liver Disease, NAFLD)的疗效及机制。方法:62只SD大鼠随机分成正常对照组(12只)和造模组(50只),采用高脂饲料加脂肪乳灌胃造模8 w,造模成功后将模型组随机分为模型对照组、黄连红曲1.1、2.1 g/kg组和奥贝胆酸0.5 mg/kg组,每组8只。采用全自动生化仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C),血糖(GLU)含量,谷丙转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活力;比色法检测血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)含量;生化法测定肝脏TC、TG、FFA含量;ELISA法检测血清胰岛素含量;HE和油红O染色分别观察肝脏病理和脂质沉积情况;qPCR检测肝脏Nrf2和Ho1 mRNA表达;免疫组化检测肝脏Nrf2的表达;WB检测肝脏Nrf2、HO-1蛋白表达情况。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠体质量增加,肝指数增加,血脂TC、TG、LDL-C含量和肝脏脂质TC、TG、FFA含量显著升高,血清ALT、AST活力升高,血清MDA含量增加,SOD活力、GSH-Px含量降低,胰岛素抵抗指数增加,肝脏出现脂肪样变及大量脂滴,Nrf2、Ho1 mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.05或P<0.01);与模型对照组比较,黄连红曲组大鼠体质量减轻,血脂降低,肝脏脂质含量降低,肝功能得到改善,胰岛素抵抗指数降低,肝脏病理学显示大鼠肝脏脂质沉积减轻,脂滴减少;肝脏Nrf2、Ho1 mRNA和蛋白表达明显上调(P<0.05或P<0.01)。结论:黄连红曲药对可以改善大鼠NAFLD,其机制可能与上调Nrf2/HO-1通路减轻氧化应激损伤有关。     

基于Nrf2/HO-1通路探讨益气活血化浊解毒方改善大鼠脑缺血再灌注损伤的实验研究

目的：研究益气活血化浊解毒方对大鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的脑保护作用,及其与核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路活性的相关性。方法：72只SD大鼠随机分为6组(n=12):假手术组、模型组、尼莫地平组和益气活血化浊解毒方高、中、低剂量组。除假手术组外均采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型。再灌注后假手术组、模型组大鼠给予生理盐水,尼莫地平组和益气活血化浊解毒方各剂量组给予相应剂量药液。连续灌胃3 d后,对比各组间大鼠神经功能缺损评分;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测脑梗死体积;原位末端标记法(TUNEL)检测脑组织细胞凋亡情况;Western blot检测脑组织Nrf2和HO-1蛋白的表达情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测脑组织Nrf2和HO-1 mRNA的表达情况;试剂盒检测脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量。结果：与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分与脑梗死体积显著增高(P<0.01),大鼠脑组织凋亡细胞显著增多(P<0.01),Nrf2...     

地黄益智方对Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠细胞凋亡相关基因表达的影响

目的:观察地黄益智方对Aβ1-40所致老年性痴呆模型大鼠脑细胞凋亡相关基因表达的影响。方法:120只大鼠随机分为空白组、模型组、地黄益智方小、中、大剂量组。采用大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1-40复制老年性痴呆模型,造模24h后开始灌胃给药,连续4周。Real-Time PCR动态检测各组大鼠大脑皮层CDK6、Bax、Caspase-3表达变化;ELISA法动态检测Tau磷酸化。结果:Aβ1-40造模2周后CDK6、Bax、Caspase-3表达升高,Tau磷酸化升高;小、中、大剂量(1.2g、2.4g、4.8g浸膏/kg)地黄益智方可改善Aβ1-40诱导Tau磷酸化,以及CDK6、Bax、Caspase-3表达。结论:Aβ1-40可致老年性痴呆模型大鼠脑细胞Tau蛋白异常磷酸化,促使细胞周期调控基因CDK6、细胞凋亡调控基因Bax、caspase3表达,地黄益智方可以改善Aβ1-40导致的细胞周期、细胞凋亡基因表达。     

基于Nrf2/HO-1信号通路的中药及其有效成分抗心血管疾病作用研究进展

心血管疾病是我国居民死亡的首要原因,因其在遗传背景、发病原因、疾病发展走向等方面存在非常大的个体差异性,目前指南指导下的西医规范化治疗的残存死亡风险率仍然很高。中药具有多靶点、多途径、多层次的独特优势,可有效弥补西药的不足,在心血管疾病的治疗中被广泛应用。氧化应激是导致心血管疾病发生的重要原因之一,核因子E2相关因子2(Nrf2)是该反应的中枢调节者,当其被激活后可向核内转移并启动下游通路信号传导,发挥抗氧化应激作用。作为机体最重要的内源性保护体系之一,Nrf2/血红素加氧酶-1(Nrf2/HO-1)信号通路是Nrf2发挥作用的最经典途径。近年来运用现代分子生物学等方法研究并阐明中药通过调控该通路治疗心血管疾病已取得一定的成果。基于此,本文总结了Nrf2/HO-1信号通路与心血管疾病的关系,并归纳分析了中药有效成分、中药药对有效成分、中药提取物及中药复方调节该信号通路干预心血管疾病的的作用方式及可能机制,以期为抗心血管疾病药物的研发与利用提供理论参考。     

三焦祛湿方对C-BSA诱导膜性肾病小鼠肾脏保护作用及其对Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的 探索三焦祛湿方对阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）诱导膜性肾病（MN）小鼠肾脏保护作用及其对核因子E₂相关因子2（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）信号通路影响。方法 雌性BALB/c小鼠60只,随机分为正常组10只,模型组50只。模型组小鼠尾静脉注射C-BSA（6.5 mg·kg^-1）,造模成功小鼠按体质量随机分为模型组、三焦祛湿方低剂量（3.71 g·kg^-1）组,三焦祛湿方高剂量（7.42 g·kg^-1）组及盐酸贝那普利（1.3 mg·kg^-1）组,分别给予各组相应剂量的药物灌胃,1次/d,连续4周。分别于造模前、造模后及治疗后检测24 h尿蛋白定量。给药后,腹主动脉取血检测血尿素氮（BUN）,血清肌酐（SCr）,甘油三酯（TG）,总胆固醇（TC）,总蛋白（TP）,白蛋白（Alb）水平,肾组织行苏木素-伊红（HE）,马松（Masson）,过碘酸-六胺银（PASM）染色,光镜下观察小鼠肾组织病理形态变化,免疫荧光检测肾组织免疫球蛋白G（IgG）沉积情况,采用免疫荧光法检测肾组织中活性氧（ROS）表达情况。蛋白免疫印迹法（Western blot）观察肾组织Nrf2蛋白在细胞质和细胞核的表达情况,以及其下游因子血红素氧合酶-1（HO-1）,醌还原型辅酶Ⅰ（NADH）脱氢酶1（NQO1）蛋白表达水平。结果 模型组小鼠24 h尿蛋白水平显著升高（P<0.01）,血清TG,TC水平显著升高（P<0.01）,TP,Alb水平显著降低（P<0.01）;光镜下观察肾脏病理改变,可见肾小球体积增大,基底膜增厚,嗜复红蛋白沉积,“钉突”形成;荧光显微镜下可见IgG沿毛细血管襻弥漫性沉积;肾组织ROS表达水平显著升高（P<0.01）;肾组织细胞核内Nrf2蛋白表达显著升高（P<0.01）,细胞质Nrf2蛋白表达显著降低（P<0.01）,HO-1和NQO1蛋白表达显著升高（P<0.01）;给药后,各治疗组小鼠24 h尿蛋白水平显著降低（P<0.01）,血清TG,TC水平显著降低（P<0.01）,TP,Alb水平明显升高（P<0.05,P<0.01）;各治疗组肾组织病理损害明显改善;肾组织ROS表达水平显著降低（P<0.01）;肾组织细胞核内Nrf2蛋白表达显著降低（P<0.01）,细胞质Nrf2蛋白表达不同程度升高（P<0.05,P<0.01）,HO-1和NQO1蛋白表达显著升高（P<0.01）。结论 三焦祛湿方可能通过调控膜性肾病肾组织Nrf2/HO-1信号表达,缓解肾组织氧化应激,进而降低24 h尿蛋白定量,降低血脂水平,提高血清蛋白含量,减轻肾脏病理损害,起到明显的肾脏保护及延缓病程进展的作用。     

益心方调控SIRT1/Nrf2/HO-1信号通路改善大鼠心肌缺血再灌注后损伤

目的 探讨中药复方益心方改善心肌缺血再灌注后损伤的作用及其机制。方法 将75只清洁级大鼠分为5组：假手术组(Sham),缺血再灌注组(IR),益心方+缺血再灌注组(YXF+IR),益心方+缺血再灌注+SIRT1抑制剂组(YXF+IR+EX527),益心方+缺血再灌注+SIRT1激动剂组(YXF+IR+SRT1720),每组各15只。再灌注7 d后超声心动图检测心功能;免疫荧光法检测心肌细胞凋亡率和组织活性氧(ROS)的活性;ELISA检测血清中的心肌酶水平;Western Blot检测相关蛋白表达。结果 与Sham组比较,IR组大鼠的左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)降低,心肌凋亡指数和ROS活性升高,血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、过氧化氢(H₂O₂)、琥珀酸脱氢酶(SDH)水平升高,超氧化物歧化酶(SOD)水平降低,沉默信息调节因子1(SIRT1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达下降,B淋巴细胞瘤-2相关蛋白X(Bax)...     

补肾化痰益智法对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响

目的: 观察补肾化痰益智法对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响并探讨其可能机制。方法: 随机将APP/PS1双转基因小鼠分为模型组、西药多奈哌齐组(6.5×10^-4g·kg^-1·d^-1)、补肾化痰益智方高、低剂量组(15.6,7.8 g·kg^-1·d^-1), 每组10只。空白组为10只同月龄相同遗传背景C57BL/6J小鼠。从3月龄开始对小鼠分别实施灌胃治疗, 每日1次。空白组、模型组均给予等容积的生理盐水灌胃。连续灌胃3个月后,进行跳台实验及穿梭箱实验评定各组小鼠的学习记忆能力;采用比色法检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量。结果: 跳台实验结果显示,与模型组比较, 各组小鼠的潜伏期明显延长和出错次数明显减少(P < 0.01);穿梭箱实验结果显示,与模型组比较,各组小鼠的主动回避次数明显增加(P < 0.01,P < 0.05),主动回避潜伏期、被动回避潜伏期明显缩短(P < 0.01);西药组和补肾化痰益智方高、低剂量组小鼠脑组织中SOD活性较模型组显著升高(P<0.01),MDA含量明显降低(P<0.01)。结论: 补肾化痰益智方对APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆具有一定的改善作用,且可能与其抗氧化作用有关。     

百合育子方对少弱精子症大鼠睾丸锌稳态、CFTR和Keap1/Nrf2/HO-1信号通路影响

目的 观察百合育子方（BYF）对少弱精子症（OAS）大鼠精液参数和睾丸组织结构的影响及机制。方法 35只雄性SD大鼠随机选取7只作为正常组,其余28只大鼠予雷公藤多苷进行OAS造模后随机分为模型组、BYF低、高剂量组和左卡尼汀组各7只。BYF低、高剂量组分别予6.3、12.6 g/（kg·d）BYF灌胃,左卡尼汀组予左卡尼汀100 mg/（kg·d）灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃。检测精液参数;HE染色观察睾丸组织形态;检测血液和睾丸组织锌含量;锌离子探针检测睾丸游离锌离子含量;采用ELISA检测大鼠血清睾酮水平及睾丸组织碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LDH）、乙醇脱氢酶（ADH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量;Western Blot检测金属反应元件结合转录因子1(MTF1)、锌转运蛋白（ZNT）4、ZnT8、锌铁转运蛋白（Zip）8、Zip12、核因子E2相关因子2(Nrf2)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、血红素氧合酶1(HO-1)、组蛋白脱乙酰基酶2(HDAC2)、囊性纤维化跨膜转运调节蛋白（CFTR）、水通道蛋白（AQP）3和AQP9蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组睾丸结构紊乱,可见少量精子细胞,游离锌水平降低;模型组精子计数和活力、血清和睾丸组织锌含量、血清睾酮水平、睾丸组织ADH、ALP、LDH、SOD、GSH-Px含量、ZnT4、ZnT8、Zip8、Zip12、MTF1、 Keap1、Nrf2、HO-1、HDAC2、CFTR、AQP9蛋白表达降低,睾丸组织MDA含量、AQP3蛋白表达增加（P<0.05）。与模型组比较,干预组睾丸组织有不同程度的恢复,精子细胞数量增多,游离锌离子水平升高;干预组精子计数和活力、睾丸组织锌含量、睾丸组织ALP、LDH、SOD含量、ZnT4、ZnT8、Zip8、Zip12、Nrf2、HO-1、HDAC2蛋白表达升高,睾丸组织MDA含量降低（P<0.05）;BYF高剂量组血清锌含量、血清睾酮水平、睾丸组织ADH含量、MTF1、Keap1、CFTR、AQP9表达增加,睾丸组织AQP3表达降低（P<0.05）;左卡尼汀组血清锌含量、睾丸组织ADH、GSH-Px含量、KEAP1表达增加,睾丸组织AQP3表达降低（P<0.05）。结论 百合育子方可改善OAS大鼠的精液参数和睾丸组织结构,其作用机制可能与调节锌稳态、CFTR/AQP和Keap1/Nrf2/HO-1信号通路,改善氧化应激,提高血清睾酮有关。     

藿苓益智方对阿尔茨海默病模型小鼠神经细胞凋亡线粒体通路的作用研究

目的:探讨藿苓益智方对阿尔茨海默病线粒体通路神经细胞凋亡的调控作用.方法:采用Aβ的活性片段Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡建立阿尔茨海默病的细胞模型.本实验设置六个组,即对照组、Aβ25-35组、Aβ25-35+盐酸多奈哌齐组、Aβ25-35+藿苓益智方提取物(50、100、200μg/ml)组.利用流式细胞仪、荧...     

芹菜素通过调节ERK/Nrf2/HO-1信号通路对多囊卵巢综合征大鼠卵巢功能的影响

目的 探究芹菜素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢功能的影响。方法 60只大鼠随机分为对照组,模型组,芹菜素低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),阳性对照组(戊酸雌二醇0.1 mg/kg),每组10只。计算各组大鼠卵巢指数,观察卵巢组织病理学变化,ELISA法检测血清AMH、FSH、LH、DHEA、E₂、T水平,试剂盒法检测血清MDA、SOD、GPx水平,Western blot法检测卵巢组织p-ERK、ERK、HO-1、Nrf2蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠体质量和卵巢指数,AMH、E₂、SOD、GPx水平,p-ERK/ERK、Nrf2、HO-1蛋白表达降低(P<0.05),FSH、LH、T、DHEA、MDA水平升高(P<0.05),卵巢组织存在病理学损伤;与模型组比较,芹菜素各剂量组和阳性对照组大鼠体质量和卵巢指数,AMH、E₂、SOD、GPx水平,p-ERK/ERK、Nrf2、HO-1蛋白表达升高(P<0.05),FSH、LH、T、DHEA、MDA水平降低(P<0.0...     

参芪益智颗粒对APP/PS1转基因小鼠LRP1和RAGE蛋白表达的影响

目的:探究参芪益智颗粒对APP/PS1转基因小鼠学习认知功能及脑组织LRP1和RAGE表达的影响。方法:分别以APP/PS1双转基因小鼠和Aβ_(25-35)刺激的BV-2细胞为研究对象,检测小鼠学习记忆能力、海马组织病理形态学、细胞存活率、LRP1和RAGE的基因和蛋白表达,测定胞内Aβ_(1-42)含量。结果:动物实验显示,与空白组相比,模型组动物在Morris水迷宫实验中进入平台区域时间及次数明显减少,海马CA1区神经细胞数量减少且排列紊乱,脑组织LRP1基因和蛋白表达下调,RAGE基因和蛋白表达上调。与模型组相比,参芪益智颗粒3.2 g/kg、6.3 g/kg、12.6 g/kg组可明显增加动物进入平台区域时间及次数,明显改善海马CA1区神经细胞数量减少和排列紊乱等病变,上调或下调脑组织LRP1和RAGE的基因和蛋白表达水平。细胞实验显示,Aβ_(25-35)刺激BV-2细胞后该细胞存活率明显降低,细胞内LRP1基因表达水平下调,RAGE基因表达水平上调,胞内Aβ_(1-42)含量明显增加,与模型组相比,参芪益智颗粒12.5、25μg/ml可明显增加该损伤细胞的细胞存活率,明显上调细胞内LRP1基因表达水平,下调细胞内RAGE基因表达水平,明显降低细胞内Aβ_(1-42)含量。结论:参芪益智颗粒可改善APP/PS1转基因小鼠学习记忆功能及海马病变,降低胞内Aβ_(1-42)含量与其调控脑内LRP1和RAGE的表达有关。