四神方对三硝基苯磺酸诱导的小鼠炎症性肠病的免疫调节作用的实验研究

目的 观察四神方对三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid, TNBS)诱导的小鼠实验性炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)的免疫调节作用。方法 取56只BALB/c小鼠，随机分为乙醇对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶(salicylazosulfapyridine, SASP)组和四神方组。小鼠麻醉后直肠内灌注50%乙醇溶液(含有1.5 mg的TNBS)制备IBD模型。造模2 d后，开始分别使用0.5 g/kg SASP或者2.3 g/kg四神方灌胃给药，连续8 d。观察小鼠的一般状态和疾病活动指数(disease activity index, DAI)评分、结肠组织学、结肠中髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)变化。使用ELISA法检测人重组干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素(IL-12/23 p40)的水平；使用MTT法检测脾脏中以及肠系膜淋巴结(MLNs)中T淋巴细胞增殖；使用流式细胞术检测相关协同刺激因子的表达。结果 四神方有效改善小鼠IBD模型一般状况及DAI评分，缓解结肠局部炎性损伤，...     

蚤休复方对TNBS诱导炎症性肠病小鼠的治疗作用及其机制研究

目的:探讨蚤休复方对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的炎症性肠病(IBD)实验小鼠的治疗作用及其机制。方法:BALB/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶组和蚤休复方组,后3组应用TNBS诱导建立小鼠IBD模型。造模同时柳氮磺吡啶组、蚤休复方组分别给予0.5g/kg柳氮磺吡啶10g/kg蚤休复方提取物灌胃,每日1次,连续28d。实验终点时分析小鼠存活率、疾病活动指数(DAI)、结肠重量/长度比值、结肠黏膜组织病理,以及采用MILLIPLEXRMAP的小鼠细胞因子/趋化因子磁珠试剂盒定量检测32种细胞因子和趋化因子。结果:与模型组比较,蚤休复方组小鼠存活率增高,结肠重量/长度比值降低,IBD疾病活动指数和结肠病理评分明显降低(P0.05);在细胞因子的血清水平方面,蚤休复方组小鼠血清CCR5配体MIP-1ɑ明显低于模型组(P=0.045),而CXCR3配体CXCL9(MIG)、CXCL10(IP-10)和IL-12P70显著高于模型组(P=0.006,P=0.027,P=0.030)。结论:蚤休复方提取物对TNBS诱导的IBD具有较好的治疗作用,其作用机制可能与IFN-γ协同刺激巨噬细胞产生CXCL9(MIG)、CXCL10(IP-10)等因子,进而影响T细胞活化、趋化,产生类TLR4激动剂作用相关。     

化浊解毒消痈方及拆方对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2平衡的研究

目的:观察化浊解毒消痈方对溃疡性结肠炎大鼠Th1/Th2平衡的影响,以探讨其作用机制。方法:将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照柳氮磺胺吡啶组、化浊解毒消痈全方组、化浊方组、解毒方组、每组10只。以三硝基苯磺酸/乙醇法建立溃疡性结肠炎大鼠动物模型,造模成功后分别予化浊解毒消痈方31.8g/kg、化浊方19.3g/kg、解毒方19.3g/kg灌胃,SASP组予柳氮磺胺吡啶(0.5 g/kg)灌胃,模型组及正常组每日以蒸馏水10ml/kg灌胃,均连续14d。观察各组大鼠一般情况及疾病活动指数(DAI)评分、组织病理学、SOD含量、血清及结肠组织IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4变化情况。结果:化浊解毒消痈全方(31.8g/kg)、化浊方(19.3g/kg)、解毒方(19.3g/kg)和柳氮磺胺吡啶肠溶片(0.5g/kg)可改善大鼠的一般情况,降低DAI评分,提高SOD含量,同时能降低血液及结肠组织中IFN-γ水平,提高IL-4水平,降低IFN-γ/IL-4比值,其中以化浊解毒消痈全方组(31.8g/kg)作用效果更为显著。结论 :化浊解毒消痈方药能显著改善造模大鼠症状,通过下调Th1细胞因子分泌和上调Th2细胞因子水平,恢复Th1/Th2平衡,发挥抗炎治疗作用。     

黄葵总黄酮对TNBS诱导克罗恩病小鼠肠纤维化的影响

目的:观察黄葵总黄酮(TFA)对克罗恩病(CD)模型小鼠肠纤维化的影响。方法:80只小鼠随机分为正常对照组、模型组和黄葵总黄酮低、中、高剂量组。除正常对照组外,其余各组均以三硝基苯磺酸(TNBS)诱导建立CD小鼠模型。造模开始时黄葵总黄酮低、中、高剂量组分别予125、250、500mg/kg黄葵总黄酮灌胃,正常对照组与模型组灌胃等量生理盐水,每日1次,连续28d。实验第2、3、4周统计各组小鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分,实验结束统计并比较各组小鼠的结肠长度/重量比值、结肠组织纤维化评分、结肠组织病理评分、Masson胶原染色评分。结果:与模型组相比,TFA组小鼠DAI评分明显降低,结肠重量/长度比值明显降低,结肠组织炎症明显减轻,结肠病理评分和纤维化评分明显降低,Masson胶原染色百分比明显降低。TFA各剂量组组间比较,中剂量组略具优势,但差异无统计学意义(P0.05)。结论 :TFA对TNBS诱导的CD小鼠模型结肠有一定的抗纤维化作用,可用于CD的治疗。     

红萸饮对葡聚糖硫酸钠诱导炎症性肠病小鼠的作用

目的 探讨红萸饮对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导炎症性肠病小鼠的作用及机制。方法 将50只小鼠随机分为正常组、模型组及红萸饮低、中、高剂量组(8.95、17.89、35.76 g/kg),每组10只。以2.5%DSS自由饮用建立炎症性肠病(IBD)模型，红萸饮组分别灌胃给予低、中、高剂量红萸饮，正常组、模型组灌胃给予等体积生理盐水，连续7 d。每天记录小鼠体质量、粪便、精神状态等一般情况，并行疾病活动指数(DAI)评分。第14天处死所有小鼠，记录结直肠长度，HE染色观察组织病理学变化，ELISA法检测血清IL-6、TNF-α水平，Western blot法、免疫组化法检测结肠组织Bax、Bcl-2、caspase-3蛋白表达。结果 与正常组比较，模型组小鼠DAI评分、结肠组织病理评分、血清IL-6、TNF-α水平、结肠组织Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),Bax蛋白表达降低(P<0.01),结肠长度缩短(P<0.01),肠壁组织受损；与模型组比较，红萸饮各剂量组小鼠DAI评分、结肠组织病理评分、血清IL-6、TNF-α水平、结肠组织B...     

益气、活血、健脾、补肾代表方对小鼠实验性结肠炎的防治作用

目的:探讨益气活血健脾补肾法对小鼠实验性结肠炎的作用。方法:雌性BALB/C小鼠以葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠分别形成结肠急慢性炎症,以柳氮磺胺吡啶(SASP)、益气法、活血法、健脾法及补肾法进行治疗,评估小鼠疾病活动指数(DAI)及结肠组织学损伤积分。结果:模型组DAI评分(第4、5、6、7天)、结肠损伤积分均明显高于正常对照组;SASP、活血、健脾及补肾法组DAI评分(第6、7天)、结肠损伤积分均低于模型组。慢性炎症模型组DAI评分为0;模型组结肠损伤积分均明显高于正常对照组,SASP、活血及补肾法组结肠损伤积分均低于模型组。结论:活血及补肾法方药对实验性小鼠结肠炎防治作用较好。     

基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路探讨化浊解毒消痈方对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜的保护作用

目的 基于PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路探讨化浊解毒消痈方对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的作用。方法 将48只小鼠随机分成正常组、模型组、美沙拉嗪组(阳性药，0.45 g/kg)和化浊解毒消痈方高、中、低剂量组(28.68、14.34、7.17 g/kg),每组8只。除正常组外，其余各组小鼠均采用2.5%葡聚糖硫酸钠(DSS)自由饮用7 d建立溃疡性结肠炎模型，造模后各组灌胃给予相应剂量药物。给药7 d后，分析小鼠疾病活动指数(DAI)评分，HE染色观察结肠组织病理学改变，RT-qPCR和Western blot法检测结肠组织PERK、eIF2α、ATF4、CHOP mRNA和蛋白表达。结果 与模型组比较，化浊解毒消痈方各剂量组和美沙拉嗪组小鼠DAI评分降低(P<0.05),结肠组织病理形态得到改善，结肠组织PERK、eIF2α、ATF4、CHOP mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),其中高剂量组作用与美沙拉嗪组相当。结论 化浊解毒消痈方能抑制结肠上皮细胞的过度凋亡，对UC小鼠结肠损伤具有保护作用，其作用机制可能与抑制PERK/eIF2α/ATF4/CHO...     

四神丸对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜PPAR-γmRNA和蛋白表达的影响

目的:观察四神丸对三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)/乙醇灌肠所致溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型大鼠结肠黏膜PPAR-γm RNA和蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法:将Wistar大鼠60只随机分为空白组、模型组、四神丸组(5 g/kg)及柳氮磺吡啶(SASP,0.3 g/kg)组,采用TNBS/乙醇灌肠法复制UC大鼠模型,灌胃给药后肉眼观察结肠大体形态损伤并评分,采用RT-PCR和免疫组化法检测PPAR-γm RNA和蛋白的表达。结果:模型组大鼠结肠组织黏膜层可见炎症和溃疡形成;与空白组比较,模型组大鼠结肠组织PPAR-γm RNA和蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,四神丸组PPAR-γm RNA和蛋白的表达量升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论:四神丸对TNBS/乙醇法所致UC大鼠模型结肠黏膜PPAR-γm RNA和蛋白的表达有上调作用,提示四神丸治疗UC的作用机制可能与调控PPAR-γ相关信号转导途径有关。     

芦荟多糖对炎症性肠病小鼠免疫功能及OX40、OX40L表达的影响

目的观察芦荟多糖对炎症性肠病(IBD)小鼠免疫功能及对OX40、OX40L表达的影响并探讨其机制。方法采用三硝基苯磺酸(TNBS)诱导法制备IBD小鼠模型,随机分为模型组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组(514 mg/kg)及芦荟多糖低(150 mg/kg)、中(300 mg/kg)、高(600 mg/kg)剂量组,每组10只,另设正常对照组10只,连续给药10 d后,计算各受试小鼠疾病活动指数(DAI)积分,苏木素-伊红(HE)染色观察肠黏膜组织损伤情况,检测胸腺及脾脏指数、碳粒吞噬指数、溶血素水平及结肠组织中OX40、OX40L蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组小鼠结肠黏膜组织细胞排列稀疏紊乱,可见大量炎性细胞浸润,疾病活动指数积分、胸腺系数、脾脏系数、吞噬指数K、校正吞噬指数α、半数溶血值、结肠黏膜组织中OX40、OX40L蛋白表达水平均明显增高(P0.05);与模型对照组比较,芦荟多糖低、中、高剂量组小鼠肠炎症状明显减轻,疾病活动指数积分、胸腺系数、脾脏系数、吞噬指数K、校正吞噬指数α、半数溶血值、结肠黏膜组织中OX40、OX40L蛋白表达水平均显著降低(P0.05)。结论芦荟多糖可能通过下调OX40、OX40L表达,减弱炎症性肠病小鼠免疫功能而实现对IBD的治疗作用。     

化浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜病理形态及免疫调控的影响

目的观察化浊解毒方对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠黏膜病理形态及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)含量的影响,探讨其作用机制。方法将60只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为正常组15只及造模组45只,造模组采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法诱导UC大鼠模型,并将造模成功的大鼠(42只)按照随机数字表法分为模型组、美沙拉嗪组及化浊解毒方组,每组14只。造模后,模型组予蒸馏水4 mL/(kg·d)灌胃;美沙拉嗪组予美沙拉嗪混悬液0.3 g/(kg·d)灌胃;化浊解毒方组予化浊解毒方混悬液20 g/(kg·d)灌胃。灌胃14 d后,比较各组大鼠疾病活动指数(DAI)评分、结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分及血清TNF-α、IFN-γ含量。结果与正常组比较,模型组、美沙拉嗪组、化浊解毒方组DAI评分均升高(P0.05);与模型组比较,美沙拉嗪组、化浊解毒方组DAI评分均降低(P0.05);与美沙拉嗪组比较,化浊解毒方组DAI评分降低(P0.05)。与正常组比较,模型组、美沙拉嗪组、化浊解毒方组溃疡、炎症及病变深度评分均升高(P0.05);与模型组比较,化浊解毒方组溃疡、炎症及病变深度评分均降低(P0.05),美沙拉嗪组溃疡、炎症评分均下降(P0.05),病变深度评分无明显变化(P0.05);与美沙拉嗪组比较,化浊解毒方组溃疡、炎症及病变深度评分均降低(P0.05)。与正常组比较,模型组血清TNF-α、IFN-γ均升高(P0.05),美沙拉嗪组、化浊解毒方组血清TNF-α均升高(P0.05);与模型组比较,美沙拉嗪组、化浊解毒方组血清TNF-α、IFN-γ均降低(P0.05);与美沙拉嗪组比较,化浊解毒方组血清TNF-α、IFN-γ均降低(P0.05)。结论化浊解毒方能够调整血清细胞因子,进而调控免疫机制,降低DAI,改善UC模型大鼠结肠黏膜的病理损伤。     

半夏泻心汤对溃疡性结肠炎小鼠肠道黏膜屏障功能保护作用及ZO-1和Occludin表达的影响

目的:观察半夏泻心汤对溃疡性结肠炎(UC)小鼠肠道黏膜屏障功能的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法:建立三硝基苯磺酸(TNBS)诱导小鼠实验性溃疡性结肠炎模型,实验按随机数字表法分为正常对照组、模型组、半夏泻心汤4. 5 g/kg组、半夏泻心汤9. 0 g/kg组和阳性对照组,连续给药21 d后考察小鼠DAI变化,测量结肠长度并进行CMDI及HS评分,测定MPO活性、DAO及D-LA水平、L/M值,检测ZO-1和Occludin的表达。结果:与正常对照组比较,模型组DAI、CMDI、HS、MPO活性、D-LA和DAO水平、L/M值明显升高,结肠长度ZO-1和Occludin表达明显降低;与模型组比较,半夏泻心汤4. 5 g/kg组、半夏泻心汤9. 0 g/kg组及阳性对照组DAI、CMDI、HS、MPO活性、D-LA和DAO水平、L/M值明显降低,结肠长度ZO-1和Occludin表达明显升高。结论:半夏泻心汤可能通过升高ZO-1和Occludin表达,从而保护溃疡性结肠炎小鼠肠道黏膜的屏障功能。     

宁夏枸杞粗提物抗大鼠溃疡性结肠炎的作用

目的探讨宁夏枸杞粗提物对大鼠溃疡性结肠炎的作用。方法采用三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇溶液(含TNBS20~25mg,乙醇浓度30~50%,大鼠TNBS给药剂量80~90mg/kg)建立溃疡性结肠炎大鼠模型,分别给予柳氮磺胺吡啶(SASP)、宁夏枸杞粗提物以及SASP和枸杞粗提物联合用药后,观察各组大鼠一般情况、结肠病变大体形态及病理变化,并检测大鼠血清SOD和结肠组织中MPO活性。结果宁夏枸杞粗提物能明显降低结肠炎大鼠的死亡率,改善一般情况,缩小溃疡面积。枸杞粗提物组、SASP组DAI评分和CMDI评分明显降低,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);模型组大鼠血清SOD和结肠MPO活性与正常组比较,均有统计学差异(P0.05);宁夏枸杞粗提物组大鼠血清SOD和结肠MPO活性与模型组相比,均有统计学差异(P0.05);与SASP组相比,无统计学差异(P0.05);联合用药组大鼠血清SOD和结肠MPO活性与粗提物组及SASP组相比,均有统计学差异(P0.05)。结论宁夏枸杞粗提物具有抗大鼠溃疡性结肠炎的作用,可升高大鼠血清中SOD,降低结肠组织中MPO活性;联合用药抗溃疡性结肠炎作用优于单用宁夏枸杞粗提物和SASP,实验结果为进一步研究宁夏枸杞抗溃疡性结肠炎的作用机制提供了实验依据。     

黄蜀葵花乌梅复方提取物对TNBS诱导克罗恩病小鼠的治疗作用及其机制研究

目的:探讨黄蜀葵花乌梅复方提取物对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的克罗恩病(CD)实验小鼠的治疗作用及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)等炎症因子的影响。方法:BABL/c小鼠随机分为正常对照组、模型组、柳氮磺吡啶组和黄葵乌梅复方组,后3组应用TNBS诱导建立小鼠CD模型。造模开始时,柳氮磺吡啶组和黄葵乌梅复方组分别给予0.5g/kg柳氮磺吡啶和6g/kg黄蜀葵花乌梅复方提取物灌胃,每日1次,连续28d。实验终点时分析实验动物的存活率、结肠长度/重量比值、结肠组织病理,以及结肠组织中炎症因子TNF-α和IFN-γ含量。结果:与模型组相比,黄蜀葵花复方组小鼠存活率明显增高,结肠重量/长度比值明显降低,结肠组织炎症和隐窝损害明显减轻,结肠病理评分和结肠组织TNF-α、IFN-γ含量明显降低。结论:黄蜀葵花和乌梅复方提取物可用于CD的治疗,其作用机制可能与显著降低炎症因子TNF-α和IFN-γ含量有关。     

四逆散对溃疡性结肠炎小鼠NF-κB激活及MIF和细胞因子表达的影响

目的:研究四逆散对溃疡性结肠炎(UC)小鼠NF-κB激活及MIF和细胞因子表达的影响。方法:选用昆明小鼠,用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)复制UC模型。实验分为正常对照组、模型组、四逆散(1.0、2.0 g/kg)组和柳氮磺吡啶肠溶片(0.1 g/kg)阳性对照组,灌胃给药1次/d,连续3 w,观察小鼠一般状况并进行疾病活动指数(DAI)评分。用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10含量;取结肠,进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)、结肠组织学评分(HS)和形态学分析;实时定量PCR检测结肠组织中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)及对应的受体CD74基因表达,Western blot检测结肠组织中磷酸化核因子抑制蛋白-κB(p IκB-α)和核转录因子κB(NF-κB)p65蛋白表达。结果:四逆散(1.0、2.0g/kg)可显著改善UC模型小鼠的一般状况及DAI、CMDI和HS评分,降低血清促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α含量及结肠组织中MIF、CD74 mRNA及p IκB-α、NF-κBp65蛋白表达水平,升高血清抗炎因子IL-4、IL-10的含量,减轻促炎因子对结肠黏膜造成损伤。结论:四逆散对TNBS诱导的小鼠UC具有较好的治疗作用,其作用机制可能与抑制MIF、CD74表达和IκB-α的磷酸化,进而抑制NF-κB的活化及纠正促炎因子和抗炎因子之间的平衡密切相关。     

大黄牡丹汤对实验性结肠炎小鼠模型的治疗作用

目的探讨大黄牡丹汤对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠实验性结肠炎的治疗作用及机理。方法采用TNBS法制作实验性结肠炎小鼠模型,给予大黄牡丹汤治疗,观察小鼠的一般状态、DAI评分和结肠组织学变化,并检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果大黄牡丹汤对TNBS结肠炎小鼠的一般状况及DAI评分有改善作用,并能缓解结肠局部的炎症,降低血清中TNF-α的水平。结论大黄牡丹汤对TNBS诱导的小鼠结肠炎有一定的防治作用,其机制可能与抑制TNF-α的分泌有关。     

化浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠炎症免疫细胞因子的影响研究

目的研究化浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)及血浆P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)含量的影响,探讨该方治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法取60只雄性Wistar大鼠,随机选取15只大鼠作为正常组,其余45只大鼠采用TNBS/无水乙醇法诱导溃疡性结肠炎模型。然后将造模成功大鼠随机分为模型组、美沙拉嗪组及化浊解毒方组,每组14只。正常组常规饲养,模型组予0.9%NaCl溶液4 mL/(kg·d)灌胃,美沙拉嗪组予美沙拉嗪混悬液0.3 g/(kg·d)灌胃,化浊解毒方组予化浊解毒方混悬液20 g/(kg·d)灌胃,均1次/d,连续14 d。记录各组大鼠疾病活动指数(DAI)评分,观察结肠组织病理学变化,检测血清IL-1β及血浆VIP、SP含量。结果模型组大鼠DAI评分及血浆SP含量和血清IL-1β含量均明显高于正常组(P均0.05),血浆VIP含量明显低于正常组(P均0.05),结肠黏膜水肿、充血、溃疡明显。美沙拉嗪组、化浊解毒方组大鼠DAI评分及血浆SP含量和血清IL-1β含量均明显低于模型组(P均0.05),血浆VIP含量均明显高于模型组(P均0.05),结肠黏膜水肿、充血、溃疡明显减轻;且化浊解毒方组血浆VIP含量明显高于美沙拉嗪组(P0.05),DAI评分及血清IL-1β含量均明显低于美沙拉嗪组(P均0.05),结肠黏膜病理变化明显轻于美沙拉嗪组,但2组血浆SP含量比较差异无统计学意义(P0.05)。结论化浊解毒方能够有效改善溃疡性结肠炎大鼠结肠病理损伤,其作用机制可能与平衡细胞因子,进而抑制炎症免疫损伤有关。     

解毒活血方灌肠对溃疡性结肠炎小鼠结肠炎症及肠道菌群的影响

目的 探讨解毒活血方灌肠对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)小鼠结肠炎症的抑制作用及对肠道菌群组成、多样性和代谢功能的影响。方法 80只雄性C57BL/6小鼠,随机分为正常组、模型组、西药组、中药组,每组20只。自由饮用3%葡聚糖硫酸钠溶液7天建立UC模型,造模成功后西药组以浓度为1.33 g/kg美沙拉秦灌肠剂灌肠,中药组以生药浓度为12.24 g/kg混悬液灌肠,模型组、正常组给予生理盐水灌肠。干预14天后计算小鼠疾病活动指数(disease activity index, DAI),测量结肠长度,观察结肠黏膜形态作黏膜损伤指数(colonic mucosa damage index, CMDI),结肠组织行苏木精—伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色行组织学损伤评分(colon histopathological score, CHS)。留取小鼠结肠内粪便,采用16S rRNA测序技术检测粪便肠道菌群丰度、多样性及代谢功能的变化。结果 (1)与正常组相比,模型组DAI升高(P<0.01)、结肠长度缩短(P<0.05),CMD...     

四神丸及拆方对大鼠实验性溃疡性结肠炎的影响

目的:观察四神丸、二神丸及五味子散对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitro-Benzenesulfonicacid, TNBS)诱导的溃疡性结肠炎大鼠(Ulcerative colitis, UC)的治疗作用,并从自噬的角度探讨其中机制及配伍意义。方法:采用TNBS灌肠法复制UC大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型对照组、美沙拉嗪0.36 g/kg组、四神丸3.4 g/kg组、二神丸3.2 g/kg组、五味子散3.2 g/kg组,每组10只;另设正常对照组10只。每日灌胃给予相应药物或蒸馏水,连续7 d。每日对大鼠的一般情况进行疾病活跃指数评分(Disease Activity Index, DAI);HE染色观察结肠组织病理变化;ELISA法检测结肠组织中白细胞介素(Interleukin, IL)-1β和肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor, TNF)-α含量;荧光Tunel法检测结肠下层黏膜组织中细胞凋亡情况;电镜检测结肠下层组织细胞中自噬小体;Western Blot法检测结肠程序性死亡受体-1(Beclin)-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达。结...     

健脾清肠通络方对三硝基苯磺酸钠诱导重症炎症性肠病肠纤维化小鼠作用机制研究

目的 探讨健脾清肠通络方对三硝基苯磺酸钠（TNBS）灌肠诱导重症炎症性肠病小鼠肠纤维化的抑制作用。方法 将40只C57BL/6雄性小鼠根据体质量编号,随机分为正常组、模型组、健脾清肠通络方组和美沙拉嗪组。除正常组小鼠外,其余3组小鼠均建立TNBS诱导炎症性肠病肠纤维化模型,正常组和模型组给予等体积（0.3 mL/d）生理盐水,健脾清肠通络方组和美沙拉嗪组分别用健脾清肠通络方、美沙拉嗪给小鼠灌胃,干预2周。观察各组小鼠体质量、疾病活动指数（DAI）评分、结肠长度及质量,小鼠结肠组织大体评分比较,小鼠血清结缔组织生长因子（CTGF）和Ⅲ型前胶原（PCⅢ）表达及结肠组织转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达。结果 与空白对照组比较,模型组小鼠体质量明显减轻（P <0.05）、DAI评分明显增加（P <0.05）,结肠长度明显缩短（P <0.05）、结肠质量明显增加（P <0.05）;经健脾清肠通络方和美沙拉嗪干预后,小鼠体质量、DAI评分、结肠长度和结肠质量均有不同程度的改善（P <0.05）。与空白对照组相比,模型组小鼠结肠组织大体评分、病理评分均增加（P ...     

芦荟大黄素对结肠炎小鼠模型脾脏T细胞亚群的影响

目的 观察芦荟大黄素(Aloe-emodin,AE)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的结肠炎小鼠模型脾脏T细胞亚群的影响。方法 将40只BALB/c小鼠随机分为4组,即乙醇对照组、模型组、AE组及柳氮磺吡啶(SASP)组。后3组以TNBS灌肠制备小鼠结肠炎模型,8 h后给予生理盐水、AE(150 mg·kg-1)或SASP(260 mg·kg-1)灌胃治疗,连续6 d。每天进行疾病活动指数(DAI)评分,6 d后处死小鼠,评估各组结肠组织学损伤指数(TDI)及脏器指数,应用流式细胞仪检测各组小鼠脾脏CD4+/CD8+T细胞及Th1、Th2、Tc1、Tc2细胞亚群的变化情况。结果 AE灌胃治疗可明显降低TNBS结肠炎小鼠的DAI评分和TDI评分(P < 0.01或P < 0.05);与模型组比较,AE组小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞水平明显降低,而CD8+细胞比例升高,CD4+/CD8+比值降低((P < 0.05或P < 0.001),脾指数下降;AE组小鼠脾脏的Th1细胞、Tc1细胞水平均明显降低(P < 0.05或P < 0.01),而Th2细胞明显升高(P < 0.001),Th1/Th2比值、Tc1/Tc2比值也明显降低(P < 0.01)。结论 芦荟大黄素可能通过调节CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群的平衡,抑制Th1型/Tc1型细胞分化,诱导以Th2型为主的免疫反应,从而减轻TNBS结肠炎小鼠的炎症病理损伤。