硒化合物在HepG2和Hela细胞中代谢生成硒蛋白的效应比较

目的比较亚硒酸钠(Na_2SeO_3)、硒代蛋氨酸(SeMet)和甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)3种硒化合物在HepG2和Hela细胞中代谢生成硒蛋白P(SEPP)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)的差异。方法将培养好的细胞分为对照组、Na_2SeO_3组、SeMet组和MeSeCys组。加入0.01μmol/L和0.1μmol/L的硒化合物作用48 h和72 h,收集细胞培养上清液和裂解液。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法对上清中的SEPP和裂解液中的GPx进行定量检测。结果与对照组比较,0.1μmol/L SeMet和MeSeCys处理的Hela细胞生成的SEPP和GPx浓度显著升高(P0.05)。与Hela细胞比较,0.1μmol/L 3种硒化合物处理的HepG2细胞生成的SEPP和GPx浓度均显著升高(P0.05)。结论硒化合物在肝癌细胞HepG2中代谢生成硒蛋白的效应比在宫颈癌细胞Hela中更明显。     

高硒干扰肝细胞内糖与一碳单位代谢的体外研究

目的 探究高硒环境对人正常肝细胞内硒蛋白以及糖代谢和一碳单位代谢相关酶表达的影响。方法 用10个剂量浓度(0、0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.5、1、5和10μmol/L)的硒代蛋氨酸(SeMet)对人正常肝细胞干预48 h后，采用免疫印迹法检测细胞内硒蛋白P1(SELENOP1)、谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1,GPX1)、糖酵解旁路关键酶3-磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)以及一碳代谢通路关键酶丝氨酸羟甲基转移酶1(serine hydroxymethyltransferase 1,SHMT1)、亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)和蛋氨酸合成酶(methionine synthase, MS)的表达。结果 SeMet在0～10μmol/L范围内，硒蛋白(GPX1和SELENOP1)的表达先升高后降低，GPX1和SELENOP1的拐点分别在0.5和0.1μmol/L;丝氨酸从头合成通路关...     

抑制高硒致肝细胞内糖代谢重塑的体外干预研究

目的 观察外源性丝氨酸或甘氨酸对体外高硒培养的肝细胞内硒蛋白和内源性丝氨酸合成与代谢酶表达的影响及其剂量-反应关系。方法 以L02细胞为干预对象，实验分为抑制实验与剂量-反应实验。抑制实验中设置空白对照组、高硒(SeMet)对照组、丝氨酸对照组和高硒+丝氨酸干预组。其中，SeMet和丝氨酸的浓度均为0.05μmol/L,空白对照组给予等量生理盐水。剂量-反应实验中，SeMet的浓度为0.05μmol/L,丝氨酸或甘氨酸的干预浓度梯度均为0、0.05、0.1、0.5、1、5、10、50、100和500μmol/L。采用免疫印迹法检测裂解液中磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)、丝氨酸羟甲基转移酶1(serine hydroxymethyltransferase 1,SHMT1)、亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)以及硒蛋白P(selenoprotein P,SELENOP)和谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1,GPX1)的...     

硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对LLC-PK_1细胞DNA合成影响的比较

采用~3H-TdR掺入实验观察了D,L-硒代蛋氨酸与亚硒酸钠对猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK_1)DNA合成代谢的影响。结果显示,两种硒化合物对DNA的合成均呈双相效应,在硒浓度为0.5～50μmol/L时,能促进DNA的合成,并且D,L-硒代蛋氨酸的作用比亚硒酸钠更为有效;随硒浓度的增高,两种硒化合物均呈现对LLC-PK_1细胞DNA合成的抑制作用,亚硒酸钠的毒性作用明显大于D,L-硒代蛋氨酸,亚硒酸钠浓度为400μmol/L时,LLC-PK_1细胞DNA合成的抑制率为94.1%,而D,L-硒代蛋氨酸浓度为400μmol/L时,仅呈现对LLC-PK_1细胞DNA合成的轻度抑制作用,与文献结果比较,LLC-PK_1细胞对硒的毒性作用有较高的耐受性。     

砷和硒对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的 研究不同浓度硒、砷对体外培养的人脐静脉血管内皮细胞增殖率的影响,为硒拮抗砷的毒性作用提供理论依据.方法 人脐静脉血管内皮细胞体外培养,当细胞处于对数生长期时进行实验.分为加砷组、加硒组和加砷加硒组.加砷组和加硒加砷组As3+浓度分别为0、0.05、0.1、0.5、1.5、3、6、12μmol/L.加硒组硒的浓度分别为0.05、0.1、0.5、1、2μmol/L.加硒加砷组硒的浓度为0.1μmol/L.采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活性.结果 HUVEC给予As2O3处理48h后,随着As3+浓度的增加,对细胞生长的抑制作用逐渐增强.硒浓度为0.1μmol/L时,细胞活性高于正常对照组(P<0.05);硒浓度为1、2μmol/L时,细胞活性降低.当As3+浓度为0.1μmol/L时,适量硒(0.1μmol/L)对低浓度的砷起拮抗作用(P<0.05).结论 砷可以抑制内皮细胞的生长,适量浓度的硒可以拮抗砷对细胞增殖的影响.     

硒甲基硒代半胱氨酸对乳腺癌细胞凋亡及Caspase蛋白表达影响的研究

目的研究硒-甲基硒代半胱氨酸(Se-methylselenocysteine,MSC)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase的影响,探讨其诱导细胞凋亡的作用。方法不同浓度的MSC(12.5、25、50、100、200μmol/L)RPMI-1640培养液作用于人乳腺癌MDA-MB-231细胞24h、48h,MTT法检测MSC对细胞增殖的抑制作用,Western blot法检测caspase3,8,9蛋白表达,SPSS16.0进行数据录入及统计学分析。结果 MSC对MDA-MB-231细胞的增殖具有抑制作用,呈现时间-浓度依赖性(P0.01),其中200μmol/L浓度抑制作用最明显。24h及48h后,凋亡相关蛋白caspase9和caspase3的蛋白表达较空白对照组明显上调(P0.01),变化呈浓度依赖性;而caspase8蛋白表达无显著性变化(P0.05)。结论 MSC能抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖,诱导其凋亡,呈现时间浓度依赖性;其发生可能与线粒体途径的细胞凋亡有关。     

硒对砷致人脐静脉血管内皮细胞抗氧化功能及血管细胞黏附分子-1和胞间黏附分子-1表达的影响

目的 观察硒对不同剂量砷致体外培养的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)抗氧化功能及胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响.方法 调节处于对数期的HUVEC细胞密度为1.0×105/ml,分别加入0(含10％标准胎牛血清,对照)和砷浓度为0.05、0.1、0.5、1.5、3.0、6.0、12.0 μmol/L的三氧化二砷溶液及在此基础上加入0.1 μmol/L亚硒酸钠溶液培养48 h.采用分光光度法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测ICAM-1和VCAM-1的表达.结果 随着砷暴露浓度的升高,HUVEC细胞培养液中SOD、GSH-Px活力均呈下降趋势,而MDA含量和ICAM-1、VCAM-1的表达呈升高趋势.与对照组相比,砷浓度为0.1～12.0μmol/L时,HUVEC细胞培养液中SOD 、GSH-Px活力均降低,ICAM-1的表达均升高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);砷浓度为0.5～12.0 μmol/L时,HUVEC细胞培养液中MDA的含量和VCAM-1的表达均增加,差异有统计学意义(P＜0.01).砷浓度为0.05、0.5μmol/L时,加硒组HUVEC细胞培养液中SOD活力均高于不加硒组,差异有统计学意义(P＜0.05);砷浓度为0.05、0.1μmol/L时,加硒组HUVEC细胞培养液中GSH-Px活力均高于不加硒组,MDA含量和ICAM-1、VCAM-1的表达均低于不加硒组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 一定浓度的砷可使血管内皮细胞抗氧化功能降低,脂质过氧化反应增强,黏附分子表达增强,而硒可在一定程度上拮抗砷的损伤作用.     

油酸钠致L02肝细胞脂肪变性和炎症效应

目的观察油酸钠导致的L02肝细胞脂肪变性和炎症效应。方法不同浓度油酸钠孵育L02肝细胞24 h,检测细胞活性。选定75、150和300μmol/L油酸钠分别与L02肝细胞培养24 h,油红染色观察细胞脂质蓄积情况,检测细胞中甘油三酯含量和上清液中白介素6(interleukin 6, IL-6)含量,免疫印迹法检测沉默信息调节因子1(silent information regulator 1, SIRT1)和核因子-κB(nuclear factorκB,NF-κB)的表达,流式细胞仪检测细胞表面Toll样受体2(Toll-like receptor,TLR2)和TLR4的表达。结果随着油酸钠浓度增加,细胞活性下降,细胞生长抑制率升高。75、150和300μmol/L油酸钠干预L02肝细胞甘油三酯含量明显高于对照组(P0.01、P0.001和P0.001),上清液中IL-6含量显著升高(P0.05、P0.01和P0.001),细胞内脂质明显蓄积。150和300μmol/L油酸钠干预L02肝细胞TLR2表达显著高于对照组(P0.05和P0.001),TLR4表达未见显著上升。油酸钠各剂量组SIRT1蛋白表达低于对照组,NF-κB p65表达高于对照组。结论油酸钠引起L02肝细胞脂肪变性可能与TLR2/NF-κB介导的炎症通路有关。     

HPLC-ICP-MS测定硒蛋白中硒代氨基酸的方法

目的建立一种适用于检测硒蛋白中硒代氨基酸的有效方法。方法硒蛋白样品采用酸脱蛋白质的方法,在酸性条件下使蛋白质变性沉淀,取沉淀物运用蛋白酶K、胰蛋白酶、链蛋白酶酶解硒蛋白样品;在5 mmol/L的柠檬酸铵中加2%的甲醇溶液作为流动相,并用柠檬酸或氨水精确调节流动相的p H值(p H=4.9),用离子交换柱分离硒代半胱氨酸(Se Cys)、硒代蛋氨酸(Se Met)等硒代氨基酸,通过ICP-MS检测其含量,并运用方法学验证实验结果。结果所建立的硒蛋白中硒代氨基酸检测方法,检出限分别为3.5μg/kg、11.2μg/kg,线性范围(以Se计)为0μg/L~200μg/L,加标回收率为75%~120%。结论经实验证明,该检测方法适用于食品营养强化剂硒蛋白中硒代氨基酸的分析,此方法的建立对食品的成分分析和食品的开发利用具有重要意义。     

硒对砷诱导人脐静脉血管内皮细胞诱导型一氧化氮合酶和内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的研究适量硒对砷诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(HUVEC-304细胞)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达的影响。方法调整HUVEC-304细胞密度为1.0×105/ml,分别加入终浓度为0.05、0.1、0.5、1.5、3.0、6.0、12.0μmol/L三氧化二砷以及0.1μmol/L亚硒酸钠+0.05、0.1、0.5、1.5、3.0、6.0、12.0μmol/L三氧化二砷染毒48 h,并设立对照(正常培养液)组。检测培养液中iNOS和eNOS的活力,采用逆转录聚合酶连反应(RT-PCR)测定iNOS mRNA和eNOS mRNA的表达。结果随着三氧化二砷染毒浓度的升高,HUVEC-304细胞培养物中eNOS的活力呈逐渐下降的趋势,而iNOS的活力呈逐渐上升的趋势。与对照组比较,1.5～12.0μmol/L三氧化二砷染毒组HUVEC-304细胞培养物中iNOS mRNA的表达均较高,eNOS mRNA的表达均较低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与相应浓度三氧化二砷单独染毒组比较,0.05、0.1、1.5μmol/L三氧化二砷+0.1μmol/L亚硒酸钠联合染毒组HUVEC-304细胞培养物中的iNOS的活力及其mRNA的表达均较低,0.05、0.5、1.5μmol/L三氧化二砷+0.1μmol/L亚硒酸钠联合染毒组eNOS的活力及其mRNA的表达均较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论硒对砷诱导HUVEC-304细胞iNOS和eNOS的异常表达具有一定的抑制作用。     

氢醌诱导下肝细胞XPV基因mRNA表达规律的研究

目的研究氢醌(HQ)对L-02肝细胞XPV基因mRNA表达的影响及其规律,探讨XPV基因在HQ所致肝细胞毒性过程中分子作用机制。方法体外培养的L-02肝细胞经40μmol/L的HQ诱导后,采用实时荧光定量PCR法检测不同时间点(6、12、24和48h)XPV基因mRNA的表达;并检测不同剂量(0、5、10、20、40、80和160μmol/L)HQ诱导24h后,各浓度组XPV基因mRNA的表达。结果在24h的时间范围内,XPV基因在mRNA水平上的表达无论是染毒组(40μmol/L)还是正常对照组,均具有随时间的延长而增加的趋势;到24h时,相对表达量达到最大值,当培养时间达到48h时,该基因的表达则有所下降;此外,在各时间处理组(6h、12h、24h和48h)中,染毒组L-02肝细胞内XPV基因在mRNA水平上的表达均高于正常对照组。各剂量HQ作用24h后,L-02肝细胞内XPV基因mRNA的表达在0～80μmol/L范围内随着剂量的增加而增加,以正常对照组XPV基因的相对表达量为1,各染毒剂量组内XPV基因mRNA的相对表达量分别增至1.20、2.02、2.37、2.67、4.40和2.32倍;80μmol/L时其相对表达量达到峰值,160μmol/L的HQ作用后,其表达却有所下降,但仍高于正常对照组。结论HQ可以诱导XPV基因mRNA的表达变化,并且呈现一定的时间和剂量依赖性,提示XPV基因可能参与了肝细胞对HQ的应答过程。     

氢醌对人L-02肝细胞泛素结合酶Rad6B表达的影响

目的研究氢醌(HQ)对人L-02肝细胞中泛素结合酶Rad6B表达的影响。方法将L-02肝细胞用不同浓度(0、5、10、20、40、80和160μmol/L)的HQ处理24h之后,采用实时荧光定量PCR技术检测Rad6B在mRNA水平上的表达;采用Western blot方法检测Rad6B在蛋白质水平上的表达。结果在0～160μmol/L的范围内,HQ可诱导Rad6B在mRNA和蛋白质水平上表达的增加,具有随着剂量的增加而升高的趋势;并且各染毒剂量组(5、10、20、40、80和160μmol/L组)肝细胞Rad6B在mRNA和蛋白质水平上的表达均明显地高于对照组(0μmol/L组)(P<0.01);当HQ的作用浓度达到160μmol/L时,Rad6B的表达水平达到最大值,其mRNA和蛋白质表达的相对定量值分别为4.35和0.85。结论HQ可使L-02肝细胞的Rad6B表达增加。     

Differential responses to selenomethionine supplementation by sex and genotype in healthy adults

A year-long intervention trial was conducted to characterise the responses of multiple biomarkers of Se status in healthy American adults to supplemental selenomethionine (SeMet) and to identify factors affecting those responses. A total of 261 men and women were randomised to four doses of Se (0, 50, 100 or 200 μg/d as L-SeMet) for 12 months. Responses of several biomarkers of Se status (plasma Se, serum selenoprotein P (SEPP1), plasma glutathione peroxidase activity (GPX3), buccal cell Se, urinary Se) were determined relative to genotype of four selenoproteins (GPX1, GPX3, SEPP1, selenoprotein 15), dietary Se intake and parameters of single-carbon metabolism. Results showed that supplemental SeMet did not affect GPX3 activity or SEPP1 concentration, but produced significant, dose-dependent increases in the Se contents of plasma, urine and buccal cells, each of which plateaued by 9-12 months and was linearly related to effective Se dose (μg/d per kg0·75). The increase in urinary Se excretion was greater for women than men, and for individuals of the GPX1 679 T/T genotype than for those of the GPX1 679 C/C genotype. It is concluded that the most responsive Se-biomarkers in this non-deficient cohort were those related to body Se pools: plasma, buccal cell and urinary Se concentrations. Changes in plasma Se resulted from increases in its non-specific component and were affected by both sex and GPX1 genotype. In a cohort of relatively high Se status, the Se intake (as SeMet) required to support plasma Se concentration at a target level (Se(pl-target)) is: Se(in) = [(Se(pl - target) - Se(pl))/(18.2ng d kg?.??/ml per mu g)] .     

Biomonitoring of selenoprotein P in human serum by fast affinity chromatography coupled to ICP-MS

Most of the Se in human serum is bound to selenoprotein P (SEPP1) in which Se is present in form of selenocysteine. The SEPP1 is a new possible biomarker for the Se status and for this reason we developed a fast, simple and reliable method for the quantitative determination of SEPP1 in serum by affinity chromatography coupled to ICP-MS. It is possible to separate SEPP1 from other selenoproteins in serum in only 5?min, which allows high sample throughput in clinical laboratories. Measured and certified concentrations of total Se and Se(SEPP1) are in good agreement for the reference material SRM 1950. The SEPP1 concentration was stable in serum samples of 3 persons for a minimum of 2 weeks. Further results of method validation were described including internal and external quality assurance.The analytical method was applied for a biomonitoring study of the SEPP1 and total Se concentration in human serum of 50 occupationally non-exposed persons living in northern Germany. Concentration ranges and mean concentrations for Se(SEPP1) are 31.1–59.7 and 46.2?μg/L, respectively. The corresponding values for total Se are 62–120 and 83.5?μg/L. The mean percentage of total Se in serum present as SEPP1 is 58%.     

hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中的作用

目的探讨hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中的修复作用。方法取不同浓度的Cr(Ⅵ)(0、2、8和32μmol/L)处理L-02肝细胞24h,分别测定细胞内活性氧簇(ROS)与hOGG1 mRNA表达水平和线粒体内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)与hOGG1基因表达的人类8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶蛋白(hOGG1蛋白)水平。结果 8μmol/L和32μmol/L剂量组与对照组比较,细胞内ROS平均水平及线粒体内8-OhdG平均水平均明显增加(P<0.05),而hOGG1基因mRNA水平和线粒体内hOGG1蛋白水平,与对照组比较,2μmol/L剂量组两者水平均上升(P<0.05),32μmol/L剂量组两者水平均降低(P<0.05)。结论 Cr(Ⅵ)可诱导细胞内ROS水平增加,引起线粒体DNA氧化损伤,而hOGG1基因表达水平的改变,影响了线粒体DNA的修复能力。hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中起到了重要的作用。     

二甲双胍对子宫内膜异位症在位内膜细胞增殖与凋亡的影响

目的研究二甲双胍（metformin）对体外培养子宫内膜异位症（EMS）在位内膜细胞增殖与凋亡的影响。方法选择2012年1月至7月于河北医科大学附属邢台市人民医院妇科就诊的50例EMS患者的在位子宫内膜为研究对象,并纳入研究组（均经腹腔镜或开腹手术确诊）。选择同期在本院因宫颈病变、子宫纵隔、卵巢畸胎瘤、单纯卵巢囊肿行手术治疗的88例患者的子宫内膜为对照组（均排除EMS）。两组患者的年龄等一般临床资料比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。建立细胞模型,以不同浓度（1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L、1 000μmol/L）二甲双胍干预24h、48h、72h,通过3-（4,5二甲基噻唑-2）-2,5二苯基四氮唑溴盐（MTT）法检测不同浓度二甲双胍对EMS在位内膜细胞增殖的影响,并应用流式细胞术（FCM）检测细胞周期改变及细胞凋亡情况,应用酶联免疫吸附（ELISA）法测定检测其对Bcl-2、Bax表达水平的影响。本研究遵循的程序符合河北医科大学附属邢台市人民医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并与受试对象签署临床研究知情同意书。结果不同浓度二甲双胍对对照组患者的正常在位内膜细胞增殖无明显抑制作用。二甲双胍干预48h、72h后,EMS患者的在位内膜细胞增殖明显受到抑制（P〈0.05）,以二甲双胍浓度为1 000μmol/L时最为明显（P〈0.01）,并呈时间-剂量依赖性。二甲双胍干预后EMS患者在位内膜细胞G1期比例明显高于对照组（P〈0.05）。二甲双胍浓度为10μmol/L、100μmol/L、1 000μmol/L时,EMS在位内膜细胞的Bcl-2表达水平较对照组降低,Bax表达水平较对照组升高,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论二甲双胍可显著抑制EMS在位内膜细胞增殖,促进其凋亡,阻滞细胞周期进程。     

罗格列酮与全反式维甲酸对人胃癌SGC7901细胞株生长和凋亡的影响

目的 研究PPARγ激动剂罗格列酮（RSG）与全反式维甲酸（ATRA）对人胃癌SGC7901细胞株生长和凋亡的影响及其机制的研究.方法 体外培养SGC7901细胞,实验分为空白对照组、10μmol/L ATRA组、12.5 μmol/L RSG、25 μmol/L RSG组,10 μmol/L ATRA和25 μmol/L RSG联合组.MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪测定细胞周期,HE染色检测细胞形态,免疫细胞化学检测PPARγ蛋白,RT-PCR检测PPARγmRNA.结果 10 μmol/L ATRA、12.5 mmol/L RSG、25 mmol/L RSG及两药联合时皆可抑制SGC7901细胞的增殖,且存在浓度及时间依赖,两药联合作用72 h时,生长抑制率为（29.73±0.69）%.ATRA、RSG皆可使细胞周期G0/G1期延长,S期下降,两药联合作用时,S%为（12.87±0.35）%,细胞形态向正常方向转化,细胞的PPARγ蛋白核内表达及PPARγmRNA表达上调,两药联合后作用进一步加强,PPARγ/GAPDH的浓度比值高达0.646.结论 ATRA、RSG均可抑制SGC7901细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞分化和上调PPARγ蛋白及PPARγmRNA的核内表达,ATRA和RSG联合较单药作用效果更强.     

N-乙酰半胱氨酸在有或无caspase抑制条件下对Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞凋亡的拮抗作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)在有或无caspase抑制条件下,对Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞线粒体依赖性凋亡的拮抗作用。方法将L-02肝细胞随机分成对照组、Cr(Ⅵ)处理组、Z-VAD-fmk预处理组[Z-VAD-fmk预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)]、NAC预处理组[NAC预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)]、联合预处理组[Z-VAD-fmk和NAC分别预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)],Cr(Ⅵ)终浓度为20μmol/L,处理6h。流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光分光光度法检测线粒体膜电位(△ψm)和通透性转运孔(PTP)的改变,单细胞凝胶电泳法观察细胞凋亡形态及细胞DNA损伤情况。结果终浓度20μmol/L的Cr(Ⅵ),处理6h,可诱导细胞凋亡,在有或无caspase抑制条件下,NAC均明显减轻了Cr(Ⅵ)引起的肝细胞线粒体膜电位下降及PTP孔开放(P<0.05),使细胞DNA损伤程度减轻(P<0.05),从而对细胞凋亡有明显拮抗作用(P<0.05),但与非caspase抑制条件下相比,caspase抑制条件下NAC的保护效果有明显降低(P<0.05)。结论在有或无caspase抑制条件下,NAC对Cr(Ⅵ)诱导的L-02肝细胞凋亡具有重要拮抗作用,caspase在该凋亡过程中不起决定性作用。     

Selenium deficiency decreases antioxidative capacity and is detrimental to bone microarchitecture in mice

Selenium (Se), an essential mineral, plays a major role in cellular redox status and may have beneficial effects on bone health. The objective of this study was to determine whether Se deficiency affects redox status and bone microarchitecture in a mouse model. Thirty-three male C57BL/6J mice, 18 wk old, were randomly assigned to 3 groups. Mice were fed either a purified, Se-deficient diet (SeDef) containing ～0.9 μg Se/kg diet, or Se-adequate diets containing ～100 μg Se/kg diet from either selenomethionine (SeMet) or pinto beans (SeBean) for 4 mo. The Se concentration, glutathione peroxidase (GPx1) activity, and GPx1 mRNA in liver were lower in the SeDef group than in the SeMet or SeBean group. The femoral trabecular bone volume/total volume and trabecular number were less, whereas trabecular separation was greater, in the SeDef group than in either the SeMet or SeBean group (P < 0.05). Bone structural parameters between the SeMet and SeBean groups did not differ. Furthermore, Serum concentrations of C-reactive protein, tartrate-resistant acid phosphatase, and intact parathyroid hormone were higher in the SeDef group than in the other 2 groups. These findings demonstrate that Se deficiency is detrimental to bone microarchitecture by increasing bone resorption, possibly through decreasing antioxidative potential.