IL—5在哮喘发病机制中的作用

气道慢性非特异性炎症是支气管哮喘 (哮喘 )的重要特征 ,嗜酸粒细胞 (ＥＯＳ)在哮喘气道炎症中发挥极其重要的作用。白细胞介素 5 (ＩＬ 5 )对ＥＯＳ具有重要的调节作用 ,从而参与哮喘的发病过程。1　ＩＬ 5的生物学特征1.1　ＩＬ 5的结构　ＩＬ 5是一种异二聚体糖蛋白 ,相对分子质量 2 5 0 0 0～ 40 0 0 0。鼠ＩＬ 5 (ｍＩＬ 5 )由 113氨基酸组成 ,而人ＩＬ 5 (ｈＩＬ 5 )由 115个氨基酸组成 ,两者在ＤＮＡ水平有 77%的同源性 ,蛋白质水平有 70 %的同源性。人 /鼠ＩＬ 5的功能分析显示 ,ｈＩＬ 5的最后 3 6个氨基酸残基可由ｍＩＬ 5的氨基…     

重组人单链白细胞介素12融合基因的构建、真核表达及生物学活性测定

目的 探讨用生物学技术获取具有生物学活性的重组人白细胞介素１２（ｒｈＩＬ－１２）的方法。方法 从经佛波醇酯（ＰＤＢｕ）刺激的ＥＢ病毒转化的人Ｂ淋巴母细胞株ＮＣ－３７中提取ｍＲＮＡ,经逆转录－聚合酶链反应分别获得ｈＩＬ－１２ｐ４０和ｐ３５亚单位编码序列的ｃＤＮＡ,运用重组聚合酶链反应技术。将两段基因通过多肽接头（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３ＤＮＡ序列连接后进行基因重组,构建了重组人单链ＩＬ－１２融合基因（ｒｈ－ｓｃＩＬ－１２）。进一步将ｒｈｓｃＩＬ－１２融合基因插入ｐｃＤＮＡ３．１（＋）真核表达载体中,构建ｒｈｓｃＩＬ－１２真核表达载体「ｐｃＤＮＡ３．１（＋）－ｒｈｓｃＩＬ－１２」,转染ＣＯＳ－７细胞,结果 经Ｇ４１８筛选获ＣＯＳ－ｒｈｓｃＩＬ－１２融合蛋白稳定表达株,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ显示该融合蛋白相对分子质量为７     

小鼠IL-3 cDNA转染的骨髓基质细胞促进造血的实验研究

骨髓基质细胞是造血微环境中的重要组成部分。我们借助逆转录病毒载体将小鼠白细胞介素 3(ＩＬ 3)ｃＤＮＡ导入小鼠骨髓基质细胞 ,利用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)检测基质细胞是否导入外源性ＩＬ 3基因 ,并观察其对造血细胞增殖活性的影响。材料和方法1　材料　逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ及ｐＵＣ ＩＬ 3质粒由刘昕博士馈赠 ,工具酶购自宝灵曼及新英格兰公司 ,ＢＡＬＢ ｃ小鼠购自本校动物中心。2　重组ＩＬ 3ｃＤＮＡ的构建[1 ] 　用ＸｈｏⅠ将载体ｐＬＸＳＮ线性化并将ＩＬ 3ｃＤＮＡ由ｐＵＣ ＩＬ 3质粒上切下 (片段约 1.2ｋｂ) ,经Ｖ型槽回收…     

白介素—10在抗肝纤维化中的作用

白介素 10 (ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ 10 ,ＩＬ 10 )是一种主要由Ｔｈ2 细胞产生 ,抑制Ｔｈ1细胞释放细胞因子 (ＩＦＮ γ和ＩＬ 2等 )的免疫调节性细胞因子[1] 。相对分子质量约为 35 0 0 0～ 40 0 0 0 ,前体为 178肽 ,活性形式为非共价键连接的寡二聚体。1　ＩＬ 10的主要生物学特性人的ＣＤ+ 4、ＣＤ+ 8Ｔ细胞、Ｂ细胞 ,尤其经非淋巴瘤细胞病毒(ＥＢ病毒 )诱导转化的Ｂ细胞均能产生ＩＬ 10。小鼠的ＩＬ 10主要由ＣＤ4+ Ｔ细胞、肥大细胞和活化的Ｂ细胞产生。正常情况下Ｔ细胞只有在抗原或多克隆活化剂剌激后才产生ＩＬ 10。在炎症反应中 …     

人白细胞介素—3cDNA5‘端的修饰及其在大肠杆菌中的高效表达

人白细胞介素－３是一种作用于早期造血干细胞的重要调节因子。为了实现ＩＬ－３魇核细胞中的高效表达，设计合成了一对ＰＣＲ引物，采用ＰＣＲ方法对ｈＩＬ－３ｃＤＮＡ５端进行插入和定点修饰，在不改变编码氨基酸的前提下，提高Ａ和Ｔ的含量，并昼采用大肠杆菌使用频率高的密友子。以期提高Ｎ末端起始区的翻译效率。ＰＣＲ产物经酶切后定向克隆入ｐＧＥＭ５Ｚｆ质粒。     

一种新的细胞因子——白细胞介素—15

白细胞介素１５（ＩＬ－１５）是新发现并克隆的细胞因子，已在酵母菌中表达成功。ＩＬ－１５含１１４个氨基酸，由非淋巴细胞分泌。尽管ＩＬ－１５与ＩＬ－２氨基酸序列上无同源性，但二者蛋白三级结构和功能相似。ＩＬ－１５能引起ＰＨＡ活化的Ｔ细胞、Ｂ细胞、ＮＫ细胞及ＣＴＬＬ细胞的增殖，也能诱导ＬＡＫ细胞。ＩＬ－１５通过与ＩＬ－２Ｒ的β、γ亚单位及另一未知亚单位组成的ＩＬ－１５Ｒ结合而引起靶细胞被激活，实现其免疫     

绒毛膜促性腺激素测定在妇产科的应用

人绒毛膜促性腺激素(简称HCG)是一种糖蛋白激素,在水中极易溶解,分子量为45,000～50,000,具有抗原性。其分子由两个亚基组成,共237个氨基酸。α亚基含92个氨基酸,与人黄体生成索(LH)的α-亚基相似,β-亚基含145个氨基酸,为HCG之特异亚基。HCG分子台有大约10个涎酸分子,涎酸分子的含量改变不仅使HCG分子的结构和表面电荷改变,而且影响这种激素的生物学活性。涎酸分子含量高则HCG具有较长的半寿期和较强的生物学活     

膜结合型白细胞介素6受体β亚基突变体的构建及其对白细胞介素6信号的影响

目的 探讨只含白细胞介素６（ＩＬ－６）受体β亚基（ｇｐ１３０）胞外第二、三个ＦＮⅢ（ＣＢＤ）区的膜结合型ｇｐ１３０突变体（ｍｇｐ１３０）能否传导ＩＬ－６信号。方法 首先用重叠延伸ＰＣＲ方法扩增出ｍｇｐ１３０ｃＤＮＡ,将其克隆到真核表达载体ｐＲｃ／ＲＳＶ中;用脂质体转染法将此表达载体导入骨髓瘤细胞系ＳＫＯ－００７和Ｊｕｒｋａｔ细胞中,通过点杂交证明其得到有效表达;用阻滞电泳法比较野生型ｇｐ１３０和ｍｇｐ１３０分子传导ＩＬ－６信号的情况。结果 在ＳＫＯ－００７细胞中ＩＬ－６能激活ＡＰＲＦ,而将野生型和突变的ｇｐ１３０ｃＤＮＡ的表达载体分别导入细胞后,ＡＰＲＦ活性均得到增强,但野生型ｇｐ１３０增强的程度较突变体为高;在Ｊｕｒ－ｋａｔ细胞中ＩＬ－６不能激活核因子,导入野生型和突变的ｇｐ１３０ｃＤＮＡ的表达载体后,ＩＬ－     

Rh血型的分子生物学

编码Ｒｈ血型抗原的基因有两个：ＲｈＣＥ基因和ＲｈＤ基因，其中ＣＥ基因的构成已被阐明，全长约７５ｋｂ，包含１０个外显子和９个内含子。两种基因的ｃＤＮＡ皆已被克隆，ＣｃＥｅ ｃＤＮＡ和ＤｃＤＮＡ之间仅有４１个核苷酸的不同，相应的ＲｈＣｃＥｅ和ＲｈＤ蛋白之间有３６个氨基酸残基的差异。     

什么是Fas/FasL系统?

答 :ＦａｓｒｙｍｎｄｒｉｔＦａｓ配体 (ＦａｓＬ)是细胞表面的两种跨膜蛋白。目前研究认为ＦａｓＬ是死亡因子 ,Ｆａｓ则是它的受体。当一个细胞的ＦａｓＬ与另一个细胞的Ｆａｓ结合时 ,可以导致表达Ｆａｓ的细胞凋亡。Ｆａｓ又称Ａｐｏ 1,即ＣＤ95分子。人Ｆａｓ基因定位于 10号染色体ｑ2 3,基因长度约 2 5Ｋｂ ,人ＦａｓｃＤＮＡ长度为 2 5 34ｂｐ。人ＦａｓＬ基因定位于 1号染色体ｑ2 3,基因长度约 8Ｋｂ。Ｆａｓ/ＦａｓＬ系统与自身免疫疾病、肿瘤发生、移植物耐受等均有密切关系。什么是Fas/FasL系统?@秦雪…     

类胰岛素生长因子系统与内膜异位症

1　类胰岛素生长因子 (IGF)的生物化学IGFs是小分子量多肽 ,IGF 1有 70个氨基酸 ,IGF 2有 76个氨基酸[5] 。两种分子有 6 2 %的氨基酸同源性。它们的结构与胰岛素相似 ,是包括含有 3个二硫键桥的多肽链。IGF 1的基因编码区位于 12染色体长臂上 ,含 6个外显子 ;IGF 2的基因编码区位于 11染色体短臂上 ,与胰岛素基因毗邻[1 ,2 ] 。IGF主要合成部位是肝细胞 ,其合成受GH和营养因子的调节[3] 。IGF系统有 2种不同的受体 :IGF 1受体和IGF 2受体。IGF 1受体与胰岛素受体非常近似 ,并且可能存在一些交叉反应。二者均为四联片段异构体…     

白介素—1对造血调控的研究进展

白介素－１（ＩＬ－２）是一种具有多种功能的细胞因子。本文综述了ＩＬ－１的蛋白结构和基因特性，重点研究了ＩＬ－１对造血调控，包括粒系、巨核素、红系和淋巴系的影响。     

肺癌患者肺泡巨噬细胞IL-10生成量

ＩＬ 10是由单核巨噬细胞产生的一种自动调节因子。ＩＬ 10能抑制血管生成的分子的产生 ,激活的巨噬细胞还可增加血管生成抑制剂的生成量。本研究检测了肺癌患者肺泡巨噬细胞(ＡＭｓ)ＩＬ 10的生成量 ,与对照组进行了比较 ,并检测了系统化疗的影响。材料和方法　 2 5名原发性肺癌患者 ,平均年龄 6 9 3(5 7～5 9)岁 ,研究前未接受任何常规抗癌治疗。其中 5名为小细胞肺癌 ,2 0名为非小细胞肺癌患者 ;对照组 14人 ,男 9人 ,女 5人 ,年龄 5 2 8(2 5～ 73)岁。ＡＭｓ放在含有 10 %热灭活胎牛血清的ＲＰＭＩ16 40介质中 ,在含有或不含有ＬＰＳ ,…     

白细胞介素-10与静脉血栓形成

与静脉血栓形成相关的静脉壁的炎症是由促炎和抗炎细胞因子的动态平衡调节的,而白细胞介素-10(IL-10)作为一种有力的抗炎细胞因子,在调节与静脉血栓形成相关的炎症中有重要作用[1]。本文就IL-10与静脉血栓形成有关的文献作一综述。1IL-10概述IL-10是1989年Fiorentino等发现的小鼠Th2细胞株D10.G4.1产生一种能抑制Th1细胞株细胞因子mRNA转录的细胞因子,当时被称为细胞因子合成抑制因子(cytokine syn-thesis inhibitory factor,CSIF)。成熟的IL-10分子由160个氨基酸残基组成,在氨基酸序列中含有2个糖基化位点,3个半胱氨酸和9个甲硫氨酸。小鼠和人的IL-10基因都定位于1号染色体,均由5个外显子和4个内含子组成,它们在DNA和氨基酸水平上分别有81%和73%的同源性。人IL-10可作用于小鼠细胞,而小鼠IL-10对人的细胞却无作用。IL-10通过和细胞膜上的IL-10受体(IL-10R)结合而发挥其生物学作用。IL-10主要由单核/巨噬细胞、B细胞、T细胞(包括CD8 细胞、Th1细胞和Th2细胞等)、中性粒细胞、肥大细胞、内皮细胞、血管...     

氯吡格雷羧酸代谢物SR26334对人脐静脉内皮细胞全基因表达谱的影响

本研究探讨氯吡格雷无抗血小板活性的羧酸代谢成分SR26334对体外培养人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)基因表达谱的影响及其对内皮细胞作用的分子机制。SR26334 10μmol/L与人脐静脉内皮细胞共培养48h;运用Affymetrix HU133 plus2.0全基因组表达芯片检测氯吡格雷羧酸代谢物对人脐静脉内皮细胞基因表达谱的影响,用分子注释系统MAS3.0软件进行聚类分析。用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)验证基因表达谱。结果表明:氯吡格雷羧酸代谢物SR26334 10μmol/L作用内皮细胞48 h后,基因芯片分析筛选出差异表达大于1.5倍的基因235个,其中上调基因176个,下调基因59个,包括DNA依赖的转录调节、转录、从RNA聚合酶Ⅱ启动子开始转录的正调节、细胞周期、细胞分割、蛋白氨基酸去磷酸化等相关基因,RT-PCR检测结果与基因芯片结果一致。结论:氯吡格雷羧酸代谢物SR26334在基因水平通过多条通路调节内皮功能。     

电转人IL－6受体基因在大鼠急性髓细胞白血病模型中的表达

应用平方波脉冲电转法将编码人ＩＬ－６受体的ｃＤＮＡ转入不表达ＩＬ－６Ｒ的ＢＮＭＬ大鼠急性早幼粒细胞白血病ＬＴ１２细胞中，转染细胞经含６００μｇ／ｍｌ的Ｇ４１８半固体。液体二步法培养，筛出Ｇ４１８抗性细胞；ＦＡＣＳ检测显示该细胞与ＦＩＴＣ标记的抗ＩＬ－６Ｒ单抗呈显著的荧光强度；￣（１２５）Ｉ－ＩＬ－６受体结合实验表明，ｋｄ＝４．７ｎｍ，每个细胞ＩＬ－６Ｒ数为４０００左右；Ｎｏｒｔｈｅｒｎ－Ｂｌｏｔ发现该细胞的ＲＮＡ与￣（３２）Ｐ标记的１．５ｋｂ的ＩＬ－６ＲｃＤＮＡ探针呈明显的杂交信号，证明我们已成功地建立了高表达人ＩＬ－６Ｒ的ＬＴ１２－ＩＬ－６Ｒ￣＋的大鼠急性白血病细胞模型。     

040 从孕妇血浆中分离胎儿DNA行肌营养不良的产前诊断

肌营养不良 (ＤＭ)是一种常染色体显性遗传病 ,发病与染色体 19ｑ13上ＤＭ激酶基因 (ＤＭＰＫ) 3′非翻译区微卫星ＤＮＡ三核苷酸(ＣＴＧ)重复数目的增加有关。患者为该座位上 (ＣＴＧ) 50 ～(ＣＴＧ) 40 0 0 的杂合子。通过检测不同来源标本 (包括妊娠 10～11周滋养细胞 )中基因组ＣＴＧ重复片断大小 ,可对ＤＭ进行分子诊断。作者以一例丈夫患ＤＭ(ＣＴＧ重复 70次 )而自身正常的孕妇为研究对象 ,评价了用孕妇血浆诊断胎儿ＤＭ的可行性。分离孕妇血浆中的胎儿ＤＮＡ、滋养细胞ＤＮＡ以及孕妇和父亲外周血淋巴细胞ＤＮＡ ,通过对ＣＳＦＰＯ…     

Ael亚型的分子生物学研究

目的　研究汉族ABO血型系统Ael亚型分子基因基础。方法　在标准血清学鉴定的基础上 ,对 2例汉族Ael亚型进行PCR SSP基因分型。并根据第 6、7外显子及两侧内含子的保守序列设计引物进行扩增 ,PCR产物经割胶纯化后直接序列分析。结果　PCR SSP基因分型排除了其中一个等位基因为A2 、B、O1和O2 基因的可能。DNA序列分析表明 ,该Ael亚型基因与A1基因相比 ,有 (798～ 80 4 )G插入和C(I 5 / 5 32 )T两处突变 ,推测的蛋白质除羧基端 86个氨基酸残基与A1糖基转移酶不同外 ,还比A1转移酶多 37个残基。结论 (798～ 80 4 )G插入和C(I 5 / 5 32 )T两处突变揭示了Ael亚型的分子基础     

心血管术后发生多器官功能障碍综合征存活者与死亡者血浆中不同的细胞因子表达

心肺分流术后患者常会发生全身炎症反应综合征 ( SIRS)或多器官功能障碍综合征 ( MODS)。马丁路德金大学心外科的研究者对心脏术后发生 MODS生存者和死亡者的血浆促炎因子和抗炎因子浓度进行了前瞻性临床研究。他们检测了 16名男性患者术后 4d的白介素 6、白介素 8、白介素 10、白介素 18、转化生长因子和前降钙素的血浆浓度 ,患者的急性生理与慢性健康状况评分系统 ( APACHE )评分都在 2 4分以上 ,并且在心血管重建术后有两个或两个以上的器官功能障碍。结果显示 :在死亡病例中 ,促炎因子中白介素 8和前降钙素水平显著升高 ,并在…     

中华血液学杂志2002年第23卷关键词索引

关键词基本按照中国医学科学院医学信息研究所 1998年出版的《医学主题词表 (英汉对照 )》标引 ,按照汉语拼音字母及论文发表的先后顺序排列。Ｂ白细胞介素 2　ＩＬ 2基因修饰增强树突状细胞抗原提呈功能及其机制 (孙黎飞 ,刘江 ,曹雪涛 ,等 ) (5 ) :2 47白细胞介素 3　转ＩＬ 3基因骨髓基质细胞对异基因骨髓移植后小鼠造血重建的促进作用 (蒋激扬 ,张敬妹 ,郝洁 ,等 ) (8) :40 7　骨髓基质细胞表面ＣＤ4 0 分子配基化促进ＩＬ 6和Ｆｌｔ3配体的释放及其作用 (傅晋翔 ,刘艳 ,张学光 ) (11) :5 85白细胞介素 4　Ｔｈ1细胞在再生障碍性贫血发…