１８００ ＭＨｚ模拟手机电磁场长期辐射对ＮＩＨ／３Ｔ３细胞周期和凋亡的影响

摘要：目的　探讨１８００ ＭＨｚ电磁辐射对ＮＩＨ／３Ｔ３细胞周期和凋亡的影响。方法　将ＮＩＨ／３Ｔ３细胞假暴
露或间断暴露（５ｍｉｎ开,１０ｍｉｎ关）在比吸收率（ｓｐｅｃｉｆｉｃａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｒａｔｅ,ＳＡＲ） 为２ Ｗ／ｋｇ,模拟全球
移动通信系统（ｇｌｏｂａｌｓｙｓｔｅｍｆｏｒｍｏｂｉｌｅｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ,ＧＳＭ）通话状态信号的１８００ＭＨｚ电磁场中。每
天暴露５ｈ,连续６０ｄ,期间每３～４ｄ传代一次。暴露完毕后,用ＣｅｌｌＣｏｕｎｔｉｎｇＫｉｔ ８ （ＣＣＫ ８） 检测细胞
活性;染色后用流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期的变化;用Ｃａｓｐａｓｅ ３活性检测试剂盒检测细胞凋亡
因子Ｃａｓｐａｓｅ ３的活性变化。结果　与假暴露组相比,暴露组细胞活力下降且培养９６ｈ 后明显下降（狋＝
３０．７８,犘＝０．０４８）;暴露组细胞处于Ｓ期（狋＝３．２６７,犘＝０．０２２） 和Ｇ２ 期（狋＝ ３．８４４,犘＝０．０２２９） 的
百分数较假暴露组有明显增加;细胞凋亡率明显增加（狋＝３．３４９,犘＝０．０４７）,Ｃａｓｐａｓｅ ３ 活性增高（狋＝
１３．５９３,犘＝０．０１３）。结论　ＮＩＨ／３Ｔ３细胞经６０ｄ１８００ ＭＨｚ模拟手机电磁辐射后,细胞活性下降,Ｓ期
和Ｇ２ 期阻滞,同时细胞凋亡率增加。
关键词：电磁辐射;ＮＩＨ／３Ｔ３细胞;细胞周期;细胞凋亡
中图分类号：Ｒ１４４　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００９ ６６３９ （２０１４）０３ ０２２６ ０４     

氧自由基诱导细胞调亡及硒与维生素E防护作用

目的：研究超氧阴离子诱导的细胞凋亡及硒、维生素Ｅ（ＶＥ）的影响。方法：以形态学及ＤＮＡ电泳观察黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶（Ｘ／ＸＯ）反应体系产生的超氧阴离子自由基（Ｏ＾－２）诱导成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３细胞凋亡及硒、ＶＥ的保护作用。结果：Ｏ＾－２的剂量为５ｎｍｏｌ／Ｌ及１０ｎｍｏｌ／Ｌ,作用时间５￣１０小时可诱导ＮＩＨ３Ｔ３细胞凋亡,而在细胞培养基中分别加入硒、ＶＥ使其浓度达到１．１５μｍｏｌ／Ｌ及２．３     

氧自由基诱导细胞凋亡及硒与维生素E的防护作用

研究超氧阴离子诱导的细胞凋亡及硒、维生素Ｅ（ＶＥ）的影响。方法：以形态学及ＤＮＡ电泳观察黄嘌呤／黄嘌呤氧化酶（Ｘ／ＸＯ）反应体系产生的超氧阴离子自由基（Ｏ－·２）诱导成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３细胞凋亡及硒、ＶＥ的保护作用。结果：Ｏ－·２的剂量为５ｎｍｏｌ／Ｌ及１０ｎｍｏｌ／Ｌ,作用时间５～１０小时可诱导ＮＩＨ３Ｔ３细胞凋亡,而在细胞培养基中分别加入硒、ＶＥ使其浓度达到１．１５μｍｏｌ／Ｌ及２．３０μｍｏｌ／Ｌ可显著抑制Ｏ－·２诱导的细胞凋亡。结论：硒及ＶＥ对Ｏ－·２诱导的细胞凋亡有保护作用,而且硒较ＶＥ的作用更为显著。     

甲基叔丁基醚对原癌基因和功能基因表达的影响

甲基叔丁基醚（ＭＴＢＥ）是一种新型的汽油添加剂,被用来提高汽油燃烧效率,减少汽车尾气中有害物质的排放。ＭＴＢＥ具有一定的动物致癌性,但其机制目前并不清楚。本研究采用免疫组织化学方法,检测了ＭＴＢＥ对体外培养的ＮＩＨ３Ｔ３细胞中ｃ－ｍｙｃ和ｐ２１蛋白表达的影响;采用点杂交方法,从ＲＮＡ水平检测了ＭＴＢＥ亚慢性染毒大鼠肝组织中原癌基因ｃ－ｍｙｃ基因和功能基因ＧＳＴ－Ｐ基因的表达情况。免疫组化结果显示,ＭＴＢＥ可诱导ｃ－ｍｙｃ基因的高表达,对ｐ２１蛋白的表达未见明显影响。点杂交结果显示,ＭＴＢＥ可明显诱导大鼠肝组织中ｃ－ｍｙｃ基因的高表达,而对ＧＳＴ－Ｐ基因的表达未见明显影响。上述结果提示,ＭＴＢＥ可诱导细胞中ｃ－ｍｙｃ基因表达活性增高,可能是其动物致癌性的机制之一。     

甲基叔丁基醚遗传毒性研究

甲基叔丁基醚（ＭＴＢＥ）是一种新型的汽油添加剂，被用来提高汽油辛烷值和减少汽车尾气中有害物质的排放。我们采用Ａｍｅｓ试验、程序外ＤＮＡ合成（ＵＤＳ）试验和细胞微核试验等反映不同遗传学终点的系列试验，检测了国产ＭＴＢＥ的遗传毒性。在Ａｍｅｓ试验（ＴＡ９８和ＴＡ１００菌株）中，在加和不加Ｓ－９的情况下，ＭＴＢＥ均未表现出致突变性。大鼠肝细胞ＵＤＳ试验显示，ＭＴＢＥ具有轻微的ＤＮＡ损伤作用。在ＮＩＨ３Ｔ３细胞微核试验中，ＭＴＢＥ呈现阴性结果。上述结果提示，ＭＴＢＥ在ＤＮＡ水平具有一定的遗传毒性     

烹调油烟颗粒有机提取物对大鼠肺II型细胞周期的影响

为观察菜油油烟颗粒有机提取物对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞周期影响,从大鼠肺组织中分离得肺Ⅱ型细胞,分别培养和染毒２４ｈ后,应用流式细胞仪进行测定。结果表明,在受试剂量范围内,菜油油烟颗粒提取物对细胞Ｓ期有促进作用,Ｇ２－Ｍ期提前;细胞增殖指数（ＰＩ）增加,二倍体指数（ＤＩ）随染毒剂量而增高。由此提示,菜油油烟颗粒有机提取物可以对大鼠肺Ⅱ型细胞的细胞周期产生影响,加速细胞分裂。     

甲基叔丁基醚的急性毒性研究

为研究国产甲基叔丁基醚（ＭＴＢＥ）的毒性,比较与国外产品的异同,选用大、小鼠及家兔,采用经口、呼吸道及皮肤等染毒途径,同时对国产及进口ＭＴＢＥ的急性毒性进行研究,结果表明：国产及进口ＭＴＢＥ的小鼠经口ＬＤ５０分别为２９４５．２和２９４４．４ｍｇ／ｋｇ,大鼠均为３４３３．６ｍｇ／ｋｇ。小鼠经呼吸道ＬＣ５０分别为７２９８８．３和９９６３０ｍｇ／ｍ３,大鼠为８５３２０和１０３４１０ｍｇ／ｍ３。急性中毒表现均为先兴奋,然后出现粘膜刺激症状,运动失调,活动减少,麻醉,最后死亡。兔经皮染毒仅见脱脂现象,无致炎、致敏或中毒作用。但对兔眼睛有较强致炎作用。结论：国产或进口ＭＴＢＥ的动物经口或经呼吸道急性毒性基本相同,均属低毒物,经皮属微毒物,但对兔眼有明显刺激和致炎作用     

硫酸铟对L929细胞周期及细胞凋亡的影响

目的探讨硫酸铟对小鼠成纤维细胞(L929)细胞周期和细胞凋亡的影响。方法用四氮唑蓝比色法(MTT),检测L929的存活情况;采用流式细胞仪检测硫酸铟对L929细胞周期、细胞凋亡(染毒浓度分别为1.5、3.0、4.5mmol/L,染毒时间为24h)的影响。结果硫酸铟可改变L929细胞周期及细胞凋亡率。细胞周期表现为S期细胞增多,而处于G1期的细胞减少,提示硫酸铟可能具有影响L929细胞周期的作用,进而抑制细胞增殖;硫酸铟可增加细胞凋亡率。结论硫酸铟可引起L929细胞毒性,细胞存活率呈浓度-时间依赖性下降;硫酸铟可影响细胞周期和诱导细胞凋亡。     

氯化甲基汞对小鼠卵巢细胞周期的影响

为探讨氯化甲基汞对雌性动物生殖系统的影响，采用氯化甲基汞给雌性昆明种小鼠急性染毒，剂量为１／２００ ＬＤ５０，１／２０ ＬＤ５０和１／２ ＬＤ５０，染毒后采用ＦＡＣ－Ｓｃａｎ流式细胞仪技术分析了氯化甲基汞对卵巢细胞周期的影响。结果表明：１／２０ ＬＤ５０组和１／２ ＬＤ５０组中处于Ｇ０／Ｇ１期时相的细胞百分数高于对照组（Ｐ〈０．０５），而１／２－ ＬＤ５０组和１／２ ＬＤ５０组的Ｓ期时相的细胞的百     

急性髓系白血病细胞自分泌GM-CSF及其凋亡的研究

要探讨急性髓系白血病（ＡＭＬ）原代细胞自分泌的粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对原代ＡＭＬ细胞凋亡的影响,应用放射免疫技术检测ＧＭ－ＣＳＦ水平,ＤＮＡ电泳检查梯状条带及流式细胞仪检测细胞凋亡率和ＢｃＩ－２蛋白表达的阳性细胞率和相对荧光强度（ＭＦＩ）。结果在５例原代ＡＭＬ细胞体外培养中,３例的培养上清液可检测到ＧＭ－ＣＳＦ,其自发细     

小蘗碱诱导人宫颈癌Hela细胞株凋亡的作用

目的:探讨中药黄连素对子宫颈癌Hela细胞株的增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法:以不同浓度的黄连素(10、20、40、80μmol/L),分12、24、48、72h四个时间点处理Hela细胞,光镜观察细胞形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;用透射电子显微镜及琼脂糖凝胶电泳检测凋亡发生情况。结果:黄连素可抑制Hela细胞增殖,作用呈明显的时效和量效关系,差异有统计学意义(P<0.01);黄连素可诱导Hela细胞凋亡,透射电子显微镜下可见凋亡细胞;琼脂糖凝胶电泳出现细胞凋亡典型的DNA"梯状"条带。结论:黄连素体外对Hela细胞具有增殖抑制作用和促进凋亡作用。     

大蒜素对子宫颈癌Hela细胞增殖的影响

目的:探讨大蒜素对宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的Hela细胞,倒置显微镜下观察Hela细胞的形态学变化;采用MTT法检测大蒜素对Hela细胞增殖抑制能力,采用流式细胞术分析大蒜素对Hela细胞凋亡的影响。结果:MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性;流式细胞术测定结果显示50μg/ml浓度的大蒜素可明显诱导Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期。结论:大蒜素对人宫颈癌Hela细胞的生长有抑制作用,其抑制作用与诱导Hela细胞凋亡和阻抑细胞周期有关。     

甲基叔丁基醚对小鼠肝细胞周期及DNA含量的影响

目的　探讨甲基叔丁基醚 (MTBE)对小鼠肝细胞生长周期动力学及细胞DNA含量的影响。方法　昆明种小鼠经呼吸道静式染毒 ,MTBE浓度为 10 8 0 ,14 4 0 0及 4968 0mg/m3,每日 1次 ,每次 4h ,连续染毒 2 0d。流式细胞仪技术研究MTBE对小鼠肝细胞周期、细胞增殖及细胞DNA含量的结果。结果　MTBE各染毒组小鼠肝细胞的G0 /G1,S ,G2 /M期细胞数及增殖指数PI与对照组相比差异未见显著性 (P >0 0 5 ) ;MTBE 14 4 0 0与 4968 0mg/m3染毒组小鼠肝细胞DNA指数低于对照组 (P <0 0 5 )。结论　MTBE对小鼠肝细胞周期、细胞增殖无显著影响 ,可以引起小鼠肝细胞DNA含量的减少     

菱角粗多糖对肿瘤细胞抑制作用

目的 分离提取菱角粗多糖并进行体外抑瘤作用研究。方法 采用乙醇分级沉淀法分离菱角粗多糖,苯酚硫酸法测定其糖含量,并采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定其对肿瘤细胞增殖的抑制作用,流式细胞术分析其中多糖组分F3诱导人脑胶质瘤细胞U251凋亡作用。结果 从菱角中分离得到3个粗多糖组分,菱角粗多糖具有抑制肿瘤细胞增殖及诱导肿瘤细胞凋亡的作用,流式细胞仪检测图谱上出现明显的亚二倍体峰,3个组分浓度在7.81,15.63,31.25,62.50,125.00μg/mL范围内对Hela和U251细胞增殖有抑制作用,最高抑制率均达70%以上,并存在明显的剂量效应关系。结论 菱角粗多糖能够抑制Hela和U251细胞肿瘤的增殖,并诱导其凋亡。     

越橘提取物花色苷对宫颈癌HeLa细胞的作用

目的:研究越橘提取物花色苷对宫颈癌Hela细胞的影响作用。方法:以不同浓度的越橘提取物花色苷作用于宫颈癌Hela细胞48h,采用MTT法观察越橘花色苷对Hela细胞的生长抑制作用,荧光染色观察细胞形态学改变,以流式细胞术观察DNA含量和细胞凋亡的变化情况,同时检测细胞培养上清液中IL-10、IFN-γ、TNF-α的变化。结果:Hela细胞用10、20、30、40mg/ml的越橘提取物花色苷处理48h后,随越橘花色苷浓度加大,细胞抑制率显著升高;荧光染色可见,浓染致密的颗粒状荧光,并呈现凋亡核固缩形态;流式细胞仪检测,细胞周期改变明显;IFN-γ和IL-10高于对照组,但IFN-γ与对照组有显著差别(P0.05);各组之间TNF-α变化不明显(P0.05)。结论:越橘提取物花色苷在体外对宫颈癌Hela细胞的生长有明显地抑制作用,可能与其改变细胞DNA周期、促进调亡有关。     

枸杞多糖对人宫颈癌细胞生长及细胞凋亡影响

目的观察枸杞多糖对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长及其细胞凋亡的影响。方法不同剂量的枸杞多糖作用于体外培养的宫颈癌Hela细胞，用苔盼蓝染色、四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法及流式细胞仪检测人宫颈癌Hela细胞存活率、抑制率及细胞凋亡等指标。结果枸杞多糖可明显抑制人宫颈癌Hela细胞的生长，抑制率司达96．85％，并呈剂量效应关系，细胞凋亡率可达36．8％。结论枸杞多糖对人宫颈癌Hela细胞生长具有抑制作用，其抑制机制可能是通过影响人宫颈癌细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。     

甲基叔丁基醚诱导中国仓鼠肺成纤维细胞细胞周期改变及凋亡适应性反应

目的研究低剂量甲基叔丁基醚(MTBE)诱导中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)的细胞周期改变及其对凋亡的适应性反应。方法实验设6个剂量组,每组3个平行样,分别用剂量为0、0.10、0.50、2.50、10.00 g/L的MTBE预处理CHL 6 h,并以等体积磷酸盐缓冲液为正常对照,用35.00 g/L的MTBE冲击染毒18 h,收集细胞,运用流式细胞仪碘丙锭(PI)单染术检测各剂量组细胞凋亡比例及细胞周期。结果 MTBE剂量高于30.00 g/L时,CHL的存活率明显下降,选取35.00 g/L的MTBE作为后续冲击染毒剂量。以0.50～10.00 g/L的MTBE预处理CHL 6 h后,可降低随后35.00g/L的MTBE导致的细胞凋亡率的增加,并使G2期阻滞减轻,细胞产生了适应性反应。结论 MTBE在0.50～10.00g/L可以诱导CHL对35.00 g/L剂量MTBE引起的凋亡产生适应性反应。     

STAT3信号转导通路调控人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的机制

目的:探讨信号传导和转录激活因子3(Stat3)通路与人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的关系,明确以Stat3为靶向的信号传导通路调控Hela细胞增殖、凋亡的分子机制。方法:人宫颈癌Hela细胞用酪氨酸激酶(JAK)抑制剂AG490处理,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖;流式细胞仪(FCM)测细胞凋亡及细胞周期;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测JAK2、Stat3、磷酸化Stat3(p-Stat3)、CyclinD1、Survivin的表达。结果:人宫颈癌Hela细胞中Stat3、p-Stat3、JAK2呈阳性表达。AG490呈时间和剂量依赖的方式抑制Hela细胞的增殖,促进其凋亡(P<0.05)。Western blot检测显示p-Stat3、CyclinD1、Survivin的表达水平随作用剂量的增大而逐渐下降(P<0.05),Stat3的表达未见明显变化(P≥0.05)。结论:Stat3信号转导通路与宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡密切相关,可能通过其下游靶基因蛋白CyclinD1、Survivin发挥作用。阻断Stat3信号通路可能为宫颈癌的防治提供一种新的策略。     

微囊藻毒素MC-LR对肝细胞毒性机理研究

目的 研究微囊藻毒类MC-LR的肝脏毒性机理。方法 采用四唑盐比色试验和流式细胞术检测微囊藻毒素MC-LR对原代培养的肝细胞和Hela细胞生长、细胞周期和凋亡的影晌。结果 微囊藻毒素在极低浓度时表现为抑制细胞生长或细胞毒作用,高浓度时可促进细胞生长。MC-LR导致肝细胞发生典型的凋亡样变化和细胞周期G₂/M期阻滞。提示微囊藻毒素可能具有影响肝细胞周期的作用,可诱导肝细胞增殖,同时又能诱导肝细胞凋亡。流式细胞术结果表明微囊藻毒素对Hela细胞周期有类似影晌趋势,但其程度远不如对肝细胞的影响明显。结论 微囊藻毒素对肝细胞的特异性作用可能是其肝脏毒性的机理之一。