Kir2.1与钾通道病

Kir2.1是内向整流钾通道(Kir)家族的重要成员之一,其编码基因为KCNJ2。Kir2.1异常可引起钾通道结构的缺陷、离子通道功能异常,病变可累及神经、肌肉、心脏等多器官和系统,通称为钾通道病。本研究综述了Kir2.1及其与钾通道病的研究进展。     

内向整流钾离子通道Kir3.x的门控机制

内向整流钾离子通道Kir3.x在多种细胞上表达,对控制细胞的电兴奋性起着重要的作用.Kir3.x通道的“开-关”受多种因素调控.Kir3.x通道上氨基酸残基特别是调节区域的氨基酸的突变严重影响通道的门控,并与多种疾病的发生有关.细胞内的pH值、PIP2、Gβγ和Na＋浓度的变化也影响Kir3.x通道的活化.     

KCNJ2在心脏离子通道病中的一因多效性

KCNJ2基因定位于第17号染色体,编码内向整流钾通道Kir2.1α亚单位。KCNJ2与遗传性长QT间期综合征(LQTS),遗传性短QT间期综合征(SQTS)及家族性房颤相关。本文就KCNJ2在心脏离子通道病中的研究进展作一综述。     

MPTP诱导的帕金森病小鼠模型纹状体中Kir 2基因的表达

目的 研究1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠模型纹状体中Kir 2家族基因各亚型(Kir 2.1、Kir 2.2、Kir 2.3、Kir 2.4)mRNA的表达.方法 构建MPTP诱导的5d亚急性PD小鼠模型,按造模病程设定时间点提取小鼠纹状体总RNA,用Kir 2家族各亚型基因的特异性引物逆转录为cDNA,以荧光染料SYBR green Ⅰ进行荧光实时定量PCR(real-time PCR).检测各特定时间点Kir 2.1、Kir 2.2、Kir 2.3、Kir 2.4 mRNA表达.结果 对不同时间点模型样本的real-timePCR检测发现,Kir 2家族4种亚型基因在MPTP诱导的PD模型小鼠纹状体中均有不同程度表达,其中Kir 2.3和Kir2.4 mRNA随PD病程进展其表达量显著增加(P＜0.05).结论 PD发病机制与纹状体Kir 2家族Kit 2.3、Kir 2.4等亚型基因的表达可能有潜在联系.实验提示Kir 2具有作为潜在PD研究靶点的可能性.     

MPTP诱导的帕金森病小鼠模型纹状体中Kir 2基因的表达

目的 研究1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)小鼠模型纹状体中Kir 2家族基因各亚型(Kir 2.1、Kir 2.2、Kir 2.3、Kir 2.4)mRNA的表达.方法 构建MPTP诱导的5d亚急性PD小鼠模型,按造模病程设定时间点提取小鼠纹状体总RNA,用Kir 2家族各亚型基因的特异性引物逆转录为cDNA,以荧光染料SYBR green Ⅰ进行荧光实时定量PCR(real-time PCR).检测各特定时间点Kir 2.1、Kir 2.2、Kir 2.3、Kir 2.4 mRNA表达.结果 对不同时间点模型样本的real-timePCR检测发现,Kir 2家族4种亚型基因在MPTP诱导的PD模型小鼠纹状体中均有不同程度表达,其中Kir 2.3和Kir2.4 mRNA随PD病程进展其表达量显著增加(P＜0.05).结论 PD发病机制与纹状体Kir 2家族Kit 2.3、Kir 2.4等亚型基因的表达可能有潜在联系.实验提示Kir 2具有作为潜在PD研究靶点的可能性.     

蛋白激酶C对内向整流钾离子通道的调节机制

内向整流钾离子(Kir)通道是在很多组织中广泛分布的一种钾离子通道,在维持钾离子平衡电位、调节细胞兴奋性和胰岛素分泌等方面发挥着重要的作用。Kir通道是众多调节因素作用的靶点,这些因素包括：K+、Mg2+、pH、ATP、G蛋白偶联受体（GPCR）,磷脂酰肌醇4,5二磷酸（PIP2）、蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶C(PKC)、花生四烯酸(AA)等。由于很多细胞外信号是通过PKC信号转导通路来调控Kir通道的,多年来为了更好地界定PKC在调控Kir通道功能中所扮演的角色及机制,人们进行了大量而深入的研究。本文对PKC调节Kir通道机制的研究进展及目前提出的一些新观点进行综述。     

利拉鲁肽对Kir6.2基因E23K位点突变β细胞胰岛素分泌功能的影响

目的 Kir6.2编码基因多态与糖尿病、胰岛素抵抗相关,本研究旨在探讨高糖环境下,利拉鲁肽对Kir6.2基因E23K位点突变的胰岛β细胞胰岛素分泌功能的影响及机制。方法 以NIT-1细胞为研究对象,构建Kir6.2基因过表达野生型和E23K突变型NIT-1细胞,并用利拉鲁肽在高糖环境下进行24 h干预。采用流式细胞仪检测NIT-1细胞凋亡率、细胞膜电位及钙离子浓度,Western blotting和免疫荧光检测细胞内胰岛素含量,ELISA检测培养液中胰岛素含量,并以此间接研究胰岛素的分泌情况。结果 NIT-1细胞最适高糖培养浓度为60 mmol/L,在此浓度下胰岛素合成量最高,利拉鲁肽体外干预浓度选择10 mmol/L。过表达野生型Kir6.2基因NIT-1细胞的胰岛素分泌高于Kir6.2基因E23K突变型NIT-1细胞。过表达野生型Kir6.2基因NIT-1细胞在高糖环境中细胞膜电位进一步降低,细胞内Ca²⁺含量增加,而Kir6.2基因E23K突变型NIT-1细胞与单纯高糖培养相比无显著改变。利拉鲁肽在高糖环境中可有效减少野生型和突变型NIT-1细胞的凋亡,降低...     

KCNQ1和KCNH2基因与家族性猝死的关系

目的：分析离子通道基因KCNQ1和KCNH2与家族性猝死（familial sudden death,FSD)的关系，以探讨其分子遗传机制。方法：在1个FSD大家系中，利用PCR直接测序技术，对KCNQ1和KCNH2基因的所有外显子和附近的部分内含子进行序列测定。结果：KCNQ1基因存在4种突变，其中3个位于外显子区域，但均为同义突变，另外1个位于内含子区域；而KCNH2基因未发现突变。结论：在该FSD家系中，KCNQ1基因存在4种突变，但均为非致病突变，KCNH2基因无突变发生；KCNQ1和KCNH2基因以外的基因可能才是FSD致病基因。     

大鼠野生型钾通道亚基Kir2.3基因真核表达载体的构建及其在PC12细胞中的表达

目的：克隆大鼠野生型钾通道亚基基因Kir2.3并构建真核表达载体pcDNA3-flag/Kir2.3,观察其在大鼠嗜铬细胞瘤（PC12）细胞中的表达。方法：从成年大鼠纹状体中提取总RNA,用RT-PCR方法获得大鼠野生型Kir2.3基因的全长cDNA,经限制性内切酶双酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3-flag质粒中。Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对,序列正确的重组质粒用脂质体转染PC12细胞,Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果：Kir2.3基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Western blot证实pcDNA3-flag/Kir2.3转染PC12细胞24 h后有Kir2.3的过表达,且至少持续72 h。结论：成功构建了大鼠野生型Kir2.3基因的真核表达载体,获得了瞬时表达大鼠野生型Kir2.3基因的PC12细胞克隆,为进一步研究Kir2.3的生物学功能以及Kir2.3在帕金森病发病机制中的作用奠定了良好的基础。     

人巨噬细胞源性泡沫细胞分化中Kir2.1通道的表达

目的 Kir2.1通道是控制骨髓源性巨噬细胞增殖、活化和凋亡的重要离子通道之一,并且还参与细胞分化。本研究观察Kir2.1通道mRNA及蛋白在人单核细胞源性巨噬细胞向泡沫细胞分化过程中的表达。方法 采用密度梯度离心加贴壁黏附法,从男性健康志愿者的外周血中分离单核细胞,经5d培养后分化为巨噬细胞。在建立人巨噬细胞源性泡沫细胞模型的基础上,采用RT-PCR,蛋白质印迹及免疫细胞化学方法研究Kir2.1通道的表达。结果 将巨噬细胞同30mg/L氧化修饰低密度脂蛋白(OxLDL)于37℃孵育60h后,细胞体积增大,并有许多红色的脂质颗粒沉积于细胞质内,细胞内的总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)及胆固醇酯(CE)的含量分别从(54.79±28.304)mg/g、(47.968±26.787)mg/g和(6.822±3.437)mg/g增加至(229.775±57.453)mg/g、(96.241±24.003)mg/g和(133.535±36.292)mg/g,CE/TC从(14.437±6.781)%提高到[(57.946±3.507)%(n=7,P<0.05)]。但是,Kir2.1通道mRNA的扩增量在巨噬细胞和分化的泡沫细胞之间无显著差异[(59.074±10.566)%vs(46.98±12.527)%,n=5,P＞0.05];同样,Kir2.1通道蛋白在巨噬细胞和分化的泡沫细胞之间亦无显著差异[(60.527±18.621)%vs(50.243±11.583)%,n=6,P＞0.05]。结论 人单核细胞源性巨噬细胞同30mg/LOxLDL孵育60h后可分化为泡沫细胞,但Kir2.1通道的表达无明显改变。     

围术期不同钾浓度溶液对血钾影响的临床实验研究

３０例非体外循环手术患者ＡＳＡ１～２级,随机分成３组（ｎ＝１０）,以静脉普鲁卡因平衡麻醉．每组输入不同含钾浓度的乳酸林格氏液．Ｃ组含钾浓度为４ｍｍｏｌ／Ｌ,Ａ１组为２０ｍｍｏｌ／Ｌ,Ａ２组为２５ｍｍｏｌ／Ｌ．所有溶液均含１％葡萄糖．每例患者入室后至麻醉前输给１０ｍＬ／ｋｇ,以后按１２ｍＬ·ｋｇ－１·ｈ－１输入并维持至切皮后６ｈ．分别在麻醉前切皮后２,４,６ｈ４个时相测定血钾、红细胞钾、尿量、尿钾、血气、血Ｈｃｔ、血糖等指标．结果麻醉前３组血钾均轻度下降（Ｐ＜００５）,以后Ｃ组显著下降（Ｐ＜００５）,Ａ１组保持原来水平,Ａ２组则上升至理想水平（Ｐ＜００５）．３组红细胞钾于麻醉前均明显高于正常,在切皮后６ｈ中,逐渐下降．与此同时,尿排钾显著增多,血ｐＨ和Ｈｃｔ在所有病人中都有不同程度降低（Ｐ＜００５）．本研究认为,以含钾浓度为２０～２５ｍｍｏｌ／Ｌ,速度为１２ｍＬ·ｋｇ－１·ｈ－１进行围术期补钾效果较好,可为临床实践提供具体而有用的参考     

KIO_3-KI混合试液中各组分含量测定的探讨

探讨了通过调节KIO3-KI混合试液酸度、用氧化还原滴定法分别测定这两种组分含量的新方法。该方法无需加热,相对误差好于以往方法,相对标准偏差也较满意。     

体外循环下心脏外科手术中补充钾离子的探讨

体外循环下心脏外科手术中，有大量稀释液经尿排出体外，同时排出大量钾离子。本文实验目的是探讨合理补充钾离子的方法。结果表明，循环前、中、后血钾与尿钾的相关性非常低。循环前与循环中、循环民循环后尿钾浓度均有显著差异；循环中与循环后无显著差异。纱能根据尿钾浓度而要根据实际测定值判定血钾浓度；补充尿中排出的钾离子时，应分为循环开始以前和以后两个阶段计算。     

醇钾及酚钾在甲基丙烯酸甲酯阴离子聚合中的应用

以正丁基锂（n-BuLi）为引发剂,叔丁醇钾（t-BuOK）和苯酚钾（POK）为副反应抑制剂,实现了甲基丙烯酸甲酯（MMA）在四氢呋喃（THF）溶剂中的阴离子聚合。采用凝胶渗透色谱（GPC）、核磁共振氢谱（¹H-NMR）等研究了产物的数均分子量、分子量分布（MWD）和分子结构。结果表明：t-BuOK与n-BuLi之间发生反离子交换反应使活性中心的反离子Li⁺被K⁺替换,从而在一定程度上抑制了MMA聚合过程中的副反应,当n（t-BuOK）/n（n-BuLi）≥10时,可在0℃下实现MMA的可控阴离子聚合;PMMA分子量分布较窄（1.22）,且数均分子量与设计值十分接近,MMA聚合的副反应得到了有效控制;进一步添加的POK能与活性中心的K⁺配合,促进对MMA聚合副反应的抑制,使MMA的可控阴离子聚合能在较高温度（40℃）下得以实现,所合成的聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）数均分子量分布窄（1.24）且数均分子量符合设计值。     

不同化学结构药物与hERG钾离子通道的相互作用

许多不同化学结构的药物可抑制hERG钾离子通道而引起QT间期延长和心律失常。本文首先介绍hERG钾离子通道在结构和功能上的独特之处,然后总结归纳了典型的具有hERG钾离子通道抑制作用的药物,深入分析其不同的作用模式特点,最后从结构上概括出hERG钾离子通道抑制剂所具有的共同特征,为今后在新化学实体设计中避免心脏不良反应提供有益的帮助。     

心脏直视术围术期电解质的管理

目的:了解体外循环围术期血清及尿液中钾离子的变化规律,探讨合理的补钾用量和方法。方法:选取低温体外循环下心脏直视术的病人47例。于围术期各时点测红细胞比积、血清钾,同时测尿量、尿钾浓度。结果:围术期血清钾除停机及停机后15min时高于4.0mmol/L外,其余时间均低于4.0mmol/L。停机后钾离子主要通过尿丢失。结论:转流期间每10min补钾0.134mmol/kg的方式易引起机体缺钾。适当增加转流初期钾的补充量有利于防治转流中、后的低钾血症。     

钾通道特性的研究进展

目的 介绍钾通道生理特性的研究进展。方法 根据钾通道生理特性及其与疾病关系的最新资料加以整理。结果 揭示不同离子通道的特性和作用，以及某些神经性疾病、心血管疾病的发生可能与离子通道的编码基因突变有密切关系。结论 由于大量各异的钾通道在脑内、心血管内丰富表达，但其所具有的作用大部分尚属未知，对于钾通道及其亚单位的研究还有待于进一步深入。     

体外循环心脏术后患者低钾的护理研究

目的了解体外循环围术期血清、尿液、骨骼肌以及红细胞中钾离子的变化规律,探讨合理的补钾用量和方法。方法选取低温体外循环下心脏直视术的病人47例。于围术期各时点测血常规、血清钾、红细胞钾浓度,同时测尿量、尿钾浓度。结果围术期红细胞内钾一直低于正常值;血清钾除停机及停机后15 m in时高于4.0mmol/L外,其余时间均低于4.0 mmol/L。结论转流期间每10分钟补钾0.134 mmol/kg的方式易引起肌体缺钾。适当增加转流初期钾的补充量有利于防治转流中、后的低钾血症。     

碘－淀粉比色法测定微量碘酸钾的含量

在一定酸度和适量淀粉试液存在下，微量碘酸钾与碘化钾试液反应显蓝色。在５９５ｎｍ处测定其吸光度，测得碘酸钾在０．２５～２．０μｇ／ｍｌ浓度范围内与吸光度呈线性关系（ｒ＝０．９９９９），摩尔吸光系数为１．０２×１０５。考察其显色条件，并进行了回收率试验，测定了碘酸钾片剂中微量碘酸钾的含量。