消痰散结方对胃癌组织核转录因子活性表达影响的研究

目的：通过建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,观察消痰散结方对胃癌组织核转录因子（NF-κB）活性表达的影响,探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法：采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植模型,随机分成模型组,消痰散结低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,采用EMSA方法检测胃癌组织NF-κB活性的表达。结果：①消痰散结方低、中、高剂量组的平均瘤重与模型组相比,有显著差异（P〈0.01）;②消痰散结方低、中、高剂量组NF-κB的活性表达与模型组相比逐渐降低,且呈明显的剂量依赖效应。消痰散结方低剂量组NF-κB的活性表达与模型组相比有统计学意义（P〈0.05）,消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κB的活性表达与模型组相比,P〈0.01,有显著统计学意义,但组间相比无统计学意义。结论：①消痰散结方有明显的抑制胃癌细胞生长的作用;②消痰散结方可能通过抑制NF-κB活性而阻断胃癌细胞增殖进程,可有效抑制胃癌发展。     

消痰散结方对裸鼠人胃癌组织环氧化酶(COX-2)蛋白表达的影响

目的:通过观察消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45原位移植模型COX-2蛋白表达的影响,探讨其抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法:采用OB胶粘贴法,建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植模型,随机分成模型组,消痰散结方低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,运用免疫组化方法检测胃癌组织环氧化酶(COX-2)蛋白的表达。结果:①消痰散结方低、中、高剂量组的平均瘤重与模型组相比,有显著差异(P<0.01);②消痰散结方中剂量组COX-2蛋白阳性表达率与模型组相比P<0.05,有统计学意义;③消痰散结方高剂量组COX-2蛋白阳性表达率与模型组相比有显著统计学意义,P<0.01,与5-Fu组相比无统计学差异,P>0.05。结论:消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45细胞原位移植瘤有较好的抗肿瘤作用,抑制胃癌细胞增殖作用是多靶点的,有较好稳定下调胃癌细胞COX-2蛋白表达的作用,并且呈剂量依赖性。     

消痰散结方对裸鼠人胃癌细胞增殖相关蛋白表达的影响

目的:探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法:采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,随机分成模型组,消痰散结低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,观察消痰散结方干预胃癌组织NF-κBP65蛋白、COX-2蛋白表达的影响及相关性。结果:①消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κBP65蛋白的阳性表达与模型组相比P0.05,有统计学意义;②消痰散结方中剂量组COX-2蛋白阳性表达率与模型组相比P0.05,有统计学意义,消痰散结方高剂量组COX-2蛋白阳性表达率与模型组相比有显著统计学差异,P0.01;③胃癌细胞中NF-κBP65蛋白与COX-2蛋白表达存在正相关(r=0.952,P0.01)。结论:胃癌MKN-45细胞中存在着活化的NF-κB及高表达的COX-2蛋白,并且存在线性相关,消痰散结方可能通过其抑制NF-κB活性,阻断了NF-κB对COX-2的活性调控,使胃癌细胞增殖受到抑制,从而阻断胃癌发展,控制胃癌复发与转移。     

消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白及mRNA表达的影响

目的:通过观察消痰散结方对裸鼠人胃癌MKN-45原位移植模型端粒酶逆转录酶(hTERT)蛋白及mRNA表达的影响,探讨其抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法:采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,随机分成模型组、消痰散结方低剂量组、消痰散结方中剂量组、消痰散结方高剂量组、5-Fu组,每组8只,运用免疫组化、实时荧光定量RT-PCR方法检测hTERT蛋白及mRNA的表达。结果:①消痰散结方低、中、高剂量组的平均瘤重与模型组相比,有显著差异(P<0.01);②消痰散结方中、高剂量组hTERT蛋白的阳性表达率与模型组相比有统计学意义(P<0.05或P<0.01);③消痰散结方中、高剂量组hTERTmRNA含量与模型组相比有统计学意义(P<0.05)。结论:①消痰散结方有明显的抑制胃癌细胞生长的作用;②消痰散结方通过下调hTERT蛋白及mRNA的表达而抑制端粒酶的活性,使癌细胞端粒长度逐渐缩短,丧失无限增殖能力,起到抑制肿瘤细胞生长、增殖的作用。     

消痰散结方对裸鼠胃癌原位移植瘤模型E-cad基因甲基化的影响

目的:研究消痰散结方对胃癌裸鼠原位移植瘤模型基因甲基化的影响,探讨消痰散结方抗癌作用机制。方法:培养胃癌细胞系MKN-45,制备胃癌裸鼠原位移植瘤模型,造模后分为模型对照组和中药组,分别给予生理盐水和消痰散结方水煎剂。称重法测定抑瘤率,RT-PCR法测定E-cad基因表达,Methylight法测定E-cad基因甲基化水平。结果:消痰散结方能抑制肿瘤生长以及转移,抑瘤率达45.17%。消痰散结方能逆转E-cad基因甲基化,增加E-cad mRNA表达,与模型对照组比较,差异有非常显著性意义(P0.01)。结论:消痰散结方可以有效抑制胃癌细胞生长和转移,逆转E-cad基因甲基化可能是其作用机制之一。     

消痰散结方对胃癌基质金属蛋白酶表达的影响

目的：观察消痰散结方对裸鼠胃癌组织及体外培养的胃癌细胞中基质金属蛋白酶表达的影响，探讨消痰散结方抑制胃癌浸润转移的可能作用机理。方法：体外常规培养人胃癌MKN-45细胞株；体内建立裸鼠人胃癌皮下种植模型，采用免疫组化(SP法)检测裸鼠胃癌组织和胃癌细胞中基质金属蛋白酶的表达。结果：中药组胃癌组织和胃癌细胞中基质金属蛋白酶(MMP2、MMP14)的表达水平明显低于生理盐水组和空白对照组。结论：消痰散结方具有抑制胃癌细胞浸润转移作用的机理可能与其影响基质金属蛋白酶的表达，减少对细胞外基质和基底膜的降解有关。     

消痰散结方治疗中晚期胃癌的疗效观察

目的：观察消痰散结方治疗中晚期胃癌的疗效．方法：将78例中晚期胃癌患者随机分为中药组和化疗组，中药组给予消痰散结方，化疗组给予FM方案化疗，观察对比两纽疗效．结果：中药组总有效率82．5%，化疗组总有效率51．3%，两组有显著统计学差异（P〈0．05）．结论：中药消痰散结方治疗中晚期胃癌有良好作用．     

消痰散结方对胃癌组织细胞粘附分子CD44、CD49的影响

目的:探讨消痰散结方对胃癌的抑制作用及其可能的作用机制。方法:用流式细胞仪检测消痰散结方和化疗药环磷酰胺(CTX)对胃癌组织细胞粘附分子表达的影响。结果:消痰散结方的抑瘤率达45.2%,且消痰散结方能降低 CD44、CD49 d 的表达。结论:消痰散结方可能通过影响肿瘤组织间质中某些粘附分子的表达而起到阻滞肿瘤生长转移的作用。     

裸鼠人胃癌MKN-45细胞核转录因子NF-κBP^65蛋白与增殖细胞核抗原表达的相关性

目的：通过观察胃癌细胞核转录因子NF-κBP^65白与增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达及关系,探讨消痰散结方抑制胃癌细胞增殖的作用机制。方法：采用OB胶粘贴法建立裸鼠人胃癌MKN-45原位移植瘤模型,随机数字表法分成模型组,消痰散结低、中、高剂量组,5-Fu组,每组8只,观察消痰散结方干预对胃癌组织核转录因子NF-κBP^65白、增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响及相关性。结果：①消痰散结方中、高剂量组、5-Fu组NF-κB的P65蛋白的阳性表达与模型组相比P〈0.05,有统计学意义;②消痰散结方低、中、高剂量组、5-Fu组的PCNA阳性表达率与模型组相比有统计学意义,P〈0.05;③胃癌细胞NF-κBP^65白与PCNA表达存在正相关（r=0.857,P〈0.01）。结论：胃癌MKN-45细胞中存在着活化的NF-κB及高表达的PCNA,并且存在线性相关,消痰散结方可能通过其抑制NF-κB活性,阻断了NF-κB对PCNA的活性调控,使胃癌细胞增殖受到抑制,控制胃癌复发与转移。     

胃癌组织的PCNA mRNA表达及其临床意义

目的:检测PCNA mRNA 在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理特征之间的关系.方法:采用逆转录-聚合酶链反应检测77例胃癌患者胃癌组织中PCNA mRNA 表达.结果:在高分化胃癌PCNA mRNA 的阳性表达率明显低于中、低分化者(P<0.05);有淋巴结转移胃癌的PCNA mRNA 阳性表达率明显高于无淋巴结转移者(P<0.05));PCNA 阳性表达率随浸润深度增加而升高;在I期胃癌阳性表达率明显低于Ⅲ/Ⅳ期者(P<0.05).结论:PCNA 在胃癌的mRNA 表达与肿瘤浸润深度、分化程度、临床分期及淋巴结转移有关.     

蜈蚣败毒饮对小鼠阴道上皮增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响

目的:研究蜈蚣败毒饮对银屑病模型小鼠的影响,探讨蜈蚣败毒饮治疗寻常型银屑病的机理,为临床治疗银屑病提供实验依据。方法:采用雌化小鼠阴道上皮作为模型,复方青黛丸为阳性对照组,设生理盐水组、正常对照组、蜈蚣败毒饮低、中、高剂量组和复方青黛丸组,观察蜈蚣败毒饮对小鼠阴道上皮增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。结果:蜈蚣败毒饮高剂量组表达最弱,生理盐水组表达最强,中药各组表达强度依次是:高剂量中剂量低剂量。正常组未见增强,PCNA阳性细胞低表达。结论:中药蜈蚣败毒饮能显著抑制小鼠阴道上皮增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,抑制作用呈一定的量-效依赖关系。     

康莱特注射液对Lewis肺癌小鼠增殖细胞核抗原表达的影响

目的通过检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,阐明康莱特注射液的抑瘤作用及其可能的作用机制。方法50只C57小鼠复制Lewis肺癌模型后,随机分为5组。分别腹腔注射相应药物14 d后处死,称瘤质量,计算抑瘤率,免疫组化法检测各组小鼠肺癌组织中PCNA蛋白表达。结果CTX组、康莱特低剂量组、康莱特中剂量组、康莱特高剂量组抑瘤率分别为60.71%,45.24%,47.02%,55.36%;PCNA的阳性表达率分别为(90.78±5.51)%,(53.63±3.56)%,(72.87±4.12)%,(67.61±3.23)%,(53.51±3.20)%。结论抑制PCNA在肿瘤细胞中的表达可能是康莱特注射液抑制肿瘤生长的机制之一。     

康莱特注射液对Lewis肺癌小鼠增殖细胞核抗原表达的影响

目的通过检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达，阐明康莱特注射液的抑瘤作用及其可能的作用机制。方法50只C57小鼠复制Lewis肺癌模型后。随机分为5组。分别腹腔注射相应药物14d后处死，称瘤质量，计算抑瘤率，免疫组化法检测各组小鼠肺癌组织中PCNA蛋白表达。结果CTX组、康莱特低剂量组、康莱特中剂量组、康莱特高剂量组抑瘤率分别为60．71％，45.24％，47.02％，55.36％；PCNA的阳性表达率分别为（90．78±5.51）％，（53.63±3．56）％，（72．87±4．12）％，（67．61±3．23）％，（53.51±3．20）％。结论抑制PCNA在肿瘤细胞中的表达可能是康莱特注射液抑制肿瘤生长的机制之一。     

Effect of Lichong Decoction on expression of IGF-I and proliferating cell nuclear antigen mRNA in rat model of uterine leiomyoma

Objective

To study the effect of Lichong Decoction (Lichong Decoction for strengthening anti-pathogenic Qi and eliminating blood stasis) on the expression of insulin-like growth factor-l (IGF-I) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) mRNA in a rat model of uterine leiomyoma.

Methods

Fifty female Wistar rats were randomized into a normal control group, model group, Lichong Decoction group, Guizhifuling Capsule (Capsule containing Cassia Twig and Poria) group, and Mifepristone group. The uterine leiomyoma model was established by peritoneal injections of exogenous estrogen and progesterone hormone. The ultrastructural changes in cells of rat uterine tissues were observed with transmission electron microscopy, and the expression of IGF-I and PCNA mRNA was detected by real-time fluorescent quantitative PCR.

Results

Following treatment, cells in the Lichong Decoction group appeared to be arranged normally, the cellular morphology were almost in a normal state, hyperplasia and hypertrophy of the chondrio-some was reduced, collagen fibers were arranged in a regular manner, without obvious hyperplasia, and the expression of IGF-I and PCNA mRNA was significantly decreased compared with the model group (P<0.01).

Conclusions

The effect of Lichong Decoction on uterine leiomyoma is related to its function in reducing the expression of IGF-I and PCNA mRNA.     

芪丹煎剂抗胃癌转移的配伍研究

目的：研究苠丹煎剂（黄芪、丹参、补骨脂等）抗胃癌转移的组方配伍合理性及最佳组合。方法：从肿瘤细胞转移抑制率和NK细胞活性两方面对芪丹煎剂的处方组成进行配伍研究。结果：黄芪、丹参、补骨脂和枸杞对胃癌转移抑制率和提高NK细胞活性的作用有统计学意义（P〈0．05）。结论：芪丹煎剂中抑制胃癌细胞转移和提高机体免疫的最主要因素是药材黄芪，其次是丹参、补骨脂、枸杞。     

胃癌组织的PCNA mRNA表达及其临床意义

目的：检测PCNA mRNA在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理特征之间的关系。方法：采用逆转录一聚合酶链反应检测77例胃癌患者胃癌组织中PCNA mRNA表达。结果：在高分化胃癌PCNA mRNA的阳性表达率明显低于中、低分化者（P〈0．05）;有淋巴结转移胃癌的PCNA mRNA阳性表达率明显高于无淋巴结转移者（P〈0．05））;PCNA阳性表达率随浸润深度增加而升高;在Ⅰ期胃癌阳性表达率明显低于Ⅲ／Ⅳ期者（P〈0．05）。结论：PCNA在胃癌的mRNA表达与肿瘤浸润深度、分化程度、临床分期及淋巴结转移有关。     

小归芍超临界提取物对人胃癌BGC-823细胞Bcl-2、PCNA基因表达的影响

目的：研究小归芍超临界提取物对人胃癌BGC-823细胞Bcl-2、PCNA基因表达的影响。方法：通过培养人胃癌BGC-823细胞方法,采用Western Blotting分别检测Bcl-2和PCNA基因蛋白的表达量。结果：小归芍超临界提取物单用体外作用48h能够明显抑制人胃癌细胞BGC-823细胞Bcl-2及PCNA的表达,可能是其抑制肿瘤细胞增殖的机制之一。     

黄芪多糖对胃癌细胞的生长抑制和促凋亡作用

目的研究黄芪多糖对胃癌细胞的生长抑制及诱导凋亡作用。方法用RPMI1640培养液对低分化人胃腺癌细胞株MKN45、高分化人胃腺癌细胞株MKN28进行传代培养,取对数生长期细胞培养24h后分别予不同浓度的塞来昔布和黄芪多糖,空白阴性对照组只加培养液不加细胞。用噻唑蓝（MTT）法观察黄芪多糖及塞来昔布对胃癌细胞株MKN45和MKN28增殖的影响;用流式细胞术方法测药物作用后细胞凋亡和细胞周期变化。结果黄芪多糖和塞来昔布均可抑制胃癌细胞株MKN45和MKN28的增殖,效应呈浓度和时间依赖性,塞来昔布各浓度组加药24、48 h后,MKN45、MKN28均明显低于空白阴性对照组（P〈0.05,P〈0.01）;而黄芪多糖5～20 mg/mL范围内加药24、48 h后MKN45、MKN28均明显低于空白阴性对照组（P〈0.01）,而黄芪多糖2～2.5 mg/mL浓度组加药48 h MKN28低于空白阴性对照组（P〈0.05）。黄芪多糖可诱导MKN45细胞凋亡,阻滞MKN45细胞周期于G1期,但对MKN28细胞凋亡和细胞周期无明显影响;塞来昔布可诱导MKN45细胞凋亡,但对MKN28细胞凋亡及2种细胞的细胞周期均无明显影响。结论黄芪多糖能抑制胃癌细胞增殖,其机制之一是影响细胞周期使之阻滞于G1期,诱导细胞凋亡。     

阿魏酸钠和白芍总苷对小鼠H22肿瘤生长与血管内皮细胞生长因子及增殖细胞核抗原表达的影响

目的探讨阿魏酸钠及白芍总苷对小鼠H22肿瘤生长及血管生成的影响。方法昆明小鼠前腋下皮下接种小鼠H22肝癌细胞,第2天ip阿魏酸钠(200、100、50mg/kg)或ig白芍总苷(200、100、50mg/kg),每3天测量1次肿瘤体积。用免疫组化法标记肿瘤血管及测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。MTT法检测阿魏酸钠对H22肿瘤细胞体外增殖的影响。结果阿魏酸钠组小鼠H22肿瘤体积、质量增长明显较模型组缓慢(P<0.05),同时阿魏酸钠组的肿瘤微血管密度及VEGF、PCNA阳性细胞较模型组显著减少(P<0.05),阿魏酸钠对小鼠H22肿瘤细胞体外增殖无显著抑制作用。白芍总苷各剂量组的肿瘤生长、微血管密度、H22肿瘤细胞增殖与模型组相比均无显著性差异。结论阿魏酸钠可以显著抑制小鼠H22肿瘤的生长及血管生成,且能抑制VEGF的表达。但在体外实验中不能抑制H22肿瘤细胞的增殖。白芍总苷尚不能被证明有抑制小鼠H22肿瘤生长的作用。阿魏酸钠对肿瘤组织VEGF表达的抑制作用可能是其抗H22肿瘤及抗血管生成的一个重要原因。