儿童医院相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的临床特征和分离株分子特征

目的探讨儿童医院相关性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染的临床特征和分离株的分子特征。方法收集2010至2016年首都医科大学附属北京儿童医院符合医院相关感染MRSA感染的病例资料和致病分离株。分析其临床特点，采用PCR和测序对分离株进行多序列分型（MLST）和spa分型，采用多重PCR进行SCCmec分型，同时检测毒力基因携带，并对菌株的药物敏感性进行分析。结果共纳入150例，中位年龄为18个月。肺炎（55.3%）为最常见的疾病，其次为皮肤软组织感染（46.0%）。所有菌株共获得16种ST分型，其中ST239(46%)和ST59（28%）为最常见的克隆，共获得3种SCCmec分型，其中SCCmecⅢ最常见，占52.7%；获得32种spa分型，最常见的是t030(22.0%)和t437(23.4%)。所有菌株、MRSA-ST59和MRSA-ST239分离株的多重耐药率分别为84.0%、78.6%和81.2%。结论医院相关性MRSA感染常见于1岁以内婴儿，菌株的遗传背景复杂，最常见的流行克隆是ST239-SCCmecⅢ-t030和ST59-SCCmecⅣ-t437，菌株的多重耐药率高。     

儿科Panton-Valentine杀白细胞素基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子特征及Panton-Valentine杀白细胞素基因多态性和耐药特征

目的研究儿童感染Panton-Valentine杀白细胞素(PVL)基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株分子特征、PVL基因序列变异情况及耐药特征。方法对PVL阳性MRSA感染患儿临床资料进行回顾性调查,分析病例临床特征;采用PCR联合测序对MRSA临床分离株进行多位点序列分型(MLST);并应用分段PCR扩增PVL基因,拼接序列与日本ST30 CA-MRSA菌株NN1的PVL序列进行比对,分析序列变异与STs分型之间的关系,构建系统树对PVL基因的系统发生多样性进行分析;采用琼脂稀释法进行16种抗生素的体外药物敏感试验。结果在73例PVL阳性MRSA感染病例中:皮肤软组织感染35例(47.9%),肺炎27例(37.0%),其他严重感染及健康儿童分离株中也检测到PVL基因;社区感染55例(75.3%)。感染菌株MLST分型共有9种,最常见的3种为ST59、ST910、ST338,分别占53.4%、17.8%、9.6%。PVL序列检测及比对结果:共发现9个核苷酸位点变异,其中3个为非同义突变(16 C→A,62 C→T,527 A→G),其余均为同义突变;有9种不同的单体型序列,各STs分型在9种序列中呈散在分布;所研究的MRSA 71株为H型,仅2株R型。PVL阳性MRSA菌株对红霉素、克林霉素、头孢呋辛耐药率高达94.5%、86.3%和82.2%。结论 PVL阳性MRSA分离株来源广泛,以皮肤软组织感染和肺炎为主;分子分型以ST59型最为常见;lukSF-PV序列高度保守,序列变异主要为H型,R型罕见。     

住院新生儿鼻腔和体表定植金黄色葡萄球菌的分子特征及耐药性

背景：金黄色葡萄球菌（SA）在鼻腔和体表的定植可增加新生儿SA感染的风险,了解住院新生儿的SA定植状况、菌株分子型及耐药性有助于制定合理的治疗方案。 目的：探讨NICU患儿入院时体表的SA定植、菌株分子特征及耐药性。 设计：横断面研究。 方法：纳入2020年8月1日至2021年1月31日入住首都医科大学附属北京儿童医院NICU时入院日龄≤28 d且胎龄≥28周的新生儿,收集临床信息。并对入院后12 h 内体表部位采集的拭子进行细菌培养和菌落计数,采用Staphytect Plus试剂盒及PCR扩增nuc基因进行SA菌株鉴定,并分别进行抗生素耐药性检测。 主要结局指标：NICU住院新生儿体表定植的SA分子特征及耐药性。 结果：共纳入766例NICU住院新生儿,其中257例（33.6%）存在≥1个部位的SA定植,单部位、2个部位、≥3个部位SA定植组分别为135例（52.5%）、65例（25.2%）和57例（22.3%）,各组间的临床特征（男婴、入院日龄、剖宫产、入院前纯母乳喂养、入院前应用抗生素、入院时气管插管常频机械通气、住院天数）、菌株分型（MRSA、MSSA）、sarA基因状态差异均无统计学意义,PVL 阳性差异有统计学意义。≥2个部位定植组与1个部位定植组比较,PVL阳性 ［39（32.0%）vs 23(17.0%) ,P=0.005］和sarA 阳性［83（68.0%） vs 56 (41.5%),P<0.01］差异有统计学意义。鼻前庭、脐根部、腋下和腹股沟分别培养出176株、124株、72株和76株,MSSA占比分别为82.4%、77.4%、80.6%和80.3%,各部位SA菌株的MRSA和MSSA占比差异均无统计学意义。MSSA菌株最常见的克隆型为ST398- t309型,MRSA菌株最常见的克隆型为ST59-SCCmecIV-t437。PVL 、sarA和PVL+sarA基因检测阳性株,MRSA和MSSA阳性率差异均无统计学意义。所有的288株SA均对莫匹罗星、利奈唑胺及万古霉素敏感;15株美罗培南不敏感株,其中MRSA 14株（1株耐药,13株中介）,MSSA 1株（中介）;耐药率从高到低依次为青霉素、红霉素、头孢曲松和苯唑西林。 结论：NICU相对病情稳定的新生儿鼻腔和体表皮肤SA定植率为33.6%。≥2个部位定植与1个部位定植相比,PVL和sarA阳性更高。MSSA菌株最常见的克隆型为ST398-t309,MRSA菌株最常见的克隆型为ST59-SCCmecIV-t437。本次研究中所有定植的SA菌株均对莫匹罗星、利奈唑胺及万古霉素敏感,有对美罗培南耐药MRSA分子型菌株检出。     

腹泻儿童沙门菌多位点序列及耐药特征分析#br#

目的了解腹泻患儿临床分离沙门菌株的遗传基因型及耐药特征。方法收集2014年7月至2015年10月腹泻患儿大便标本,经大便培养分离鉴定沙门菌43株。用多位点序列分型技术(MLST)对43株沙门菌的靶基因进行PCR扩增和测序,通过eBURST方法对其进行进化聚类分析,并通过STAT2软件进行菌株基因遗传进化分析;检测菌株对临床常用抗生素的耐药性。结果 MLST分析显示,43株沙门菌可分为17个序列类型(ST),未发现新的型别;其中ST11和ST 34是优势ST型别,分别占32.56%、23.26%。43株沙门菌对阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、头孢他啶和头孢吡肟的耐药率分别为13.95%、27.91%、16.28%和11.63%,未发现哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南耐药菌株。结论沙门菌感染的腹泻患儿以ST11和ST34为优势克隆株,对三、四代头孢菌素均出现耐药,对哌拉西林/他唑巴坦或亚胺培南仍敏感。     

腹泻儿童沙门菌多位点序列及耐药特征分析

目的了解腹泻患儿临床分离沙门菌株的遗传基因型及耐药特征。方法收集2014年7月至2015年10月腹泻患儿大便标本,经大便培养分离鉴定沙门菌43株。用多位点序列分型技术(MLST)对43株沙门菌的靶基因进行PCR扩增和测序,通过eBURST方法对其进行进化聚类分析,并通过STAT2软件进行菌株基因遗传进化分析;检测菌株对临床常用抗生素的耐药性。结果 MLST分析显示,43株沙门菌可分为17个序列类型(ST),未发现新的型别;其中ST11和ST 34是优势ST型别,分别占32.56%、23.26%。43株沙门菌对阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、头孢他啶和头孢吡肟的耐药率分别为13.95%、27.91%、16.28%和11.63%,未发现哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南耐药菌株。结论沙门菌感染的腹泻患儿以ST11和ST34为优势克隆株,对三、四代头孢菌素均出现耐药,对哌拉西林/他唑巴坦或亚胺培南仍敏感。     

儿童肺炎金黄色葡萄球菌分离株的分子生物学特征及耐药性研究

目的了解儿童金黄色葡萄球菌(金葡菌)肺炎致病株分子特征及耐药性,供临床诊治参考。方法收集2016年1月至2017年3月首都医科大学附属北京儿童医院确诊为金葡菌肺炎患者分离株,采用头孢西丁纸片法和mecA检测鉴定耐甲氧西林金葡菌(MRSA)或甲氧西林敏感金葡菌(MSSA);对所有菌株进行多位点序列分型(MLST)和葡萄球菌蛋白A(spa)分型,并对MRSA菌株进行葡萄球菌盒氏染色体(SCCmec)分型;采用PCR方法检测21种超抗原(SAgs)基因、杀白细胞素(PVL)基因、黏附基因fnbB、cna;采用琼脂稀释法、E-test检测14种抗生素体外药物敏感性。结果共收集42株金葡菌,其中MRSA、MSSA各21株。MRSA的优势克隆为ST59-SCCmecⅣa-t437(71.4%);MSSA的分型较为分散,以ST25-t078(14.2%)最多见。42株金葡菌中有36株(85.7%)至少携带1种超抗原基因,最常见的超抗原基因型为sek-seq(21.4%);MRSA pvl基因携带率(52.3%)明显高于MSSA(14.2%),而MSSA fnbB及cna基因携带率(42.8%和47.6%)明显高于MRSA(均为9.5%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。本组金葡菌多重耐药率达90.4%(38/42株)。结论MRSA在儿童金葡菌肺炎致病株中检出率高,其主要克隆型为ST59-SCCmecⅣa-t437。儿童肺炎金葡菌分离株的超抗原基因携带率和多重耐药率较高,MRSA菌株常携带pvl基因,而MSSA菌株携带fnbB、cna更常见。     

儿童肺炎链球菌耐药性与pbp2b基因RFLP和PFGE图型分析

目的　监测肺炎链球菌对青霉素和其他抗生素的耐药情况 ;分析pbp2b基因扩增产物图谱与青霉素耐药性的相关性 ;对 3 1株青霉素耐药菌株进行血清分型 ;分析血清型 2 3F和血清型 6的青霉素耐药菌株的脉冲电场凝胶电泳 (PFGE)图型 ,初步了解北京地区耐药菌株分子流行病学上的特点。方法　 ( 1)抗生素药物敏感试验 ;( 2 )用聚合酶链反应 (PCR)和限制性内切酶片段长度多态性分析 (RFLP)方法 ,分析pbp2b基因扩增产物图谱与青霉素耐药性的相关性 ;( 3 )使用乳胶凝集的方法 ,对 3 1株青霉素耐药菌株进行血清分型 ;( 4 )使用PFGE图型方法分析 6株血清型 2 3F和 3株血清型 6的青霉素耐药菌株流行病学上的基本特性。结果　 ( 1)对青霉素的耐药性由 1997年 9 9%上升到 2 0 0 0年 14 6% (P >0 0 5)。对红霉素、复方磺胺甲基异唑和氯霉素耐药性分别由 1997年76 8%、74 7%和 2 2 6%上升到 2 0 0 0年的 87 4%、88 3 %和 40 8% (P <0 0 5) ;( 2 )通过PCR和RFLP方法分析青霉素耐药菌株和青霉素敏感菌株表明 ,pbp2b基因扩增图谱与青霉素耐药性之间有较好的相关性 ;( 3 )对 3 1株青霉素不敏感肺炎链球菌 (PRSP)做了血清型 2 3F和 6分型。前者为 6株 ( 19% ) ;后者为 3株 ( 9% )。 6株血清型 2 3F肺炎链球菌均为低水平     

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目的研究儿童肺炎耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离株的耐药性及基因分型,为临床诊疗提供参考。方法对2008年9月至2009年3月国内6家医院(中国医科大学附属盛京医院、温州医学院附属育英医院、重庆儿童医院、广东省妇幼保健院、复旦大学附属儿科医院、广州儿童医院)的47例肺炎患儿进行临床调查,采集下呼吸道的痰液标本作细菌培养,用头孢西丁纸片法鉴定MRSA,并用琼脂稀释法测定MRSA对12种抗生素的最低抑菌浓度(MIC);对MRSA进行多位点序列分型(MLST)检测,用多重PCR方法检测MRSA的葡萄球菌染色体盒mec(SCCmec)基因分型。结果从肺炎患儿中分离MRSA47株,MRSA感染肺炎多见于低龄儿童(15d至6岁),SCCmec基因分型中以Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅴ型为主,Ⅴ型和Ⅳ型中MLST分型结果均以ST59型多见。所有MRSA的分离株都对青霉素和苯唑西林耐药,对万古霉素敏感,对其他抗菌药物的耐药率较高并且存在多重耐药。结论儿童肺炎MRSA分离株多见于学龄期之前的儿童,SCCmec基因分型以Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅴ型常见,MLST分型以ST59为主;MRSA对多种抗菌药物具有较高的耐药性并且存在多重耐药。     

中国七城市儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染分离株分子学特征的研究

目的 探讨我国7个城市儿童耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)感染分离株的分子特征.方法 收集2005至2009年全国7个城市(北京、上海、深圳、广州、温州、沈阳、重庆)9所三级儿童医院分离的134株MRSA.采用PCR和测序对MRSA进行多位点序列分型(MLST)和spa分型,采用多重PCR进行SCCmec分型,同时检测pvl基因.结果 MRSA大多数来源于肺炎和皮肤软组织感染分离株,占82.1％;共检测到16个MLST型,最主要的ST型是ST59 (44.8％),其次是ST239(16.4％);SCCmec分型共有Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ型4型,其中Ⅳ型是最常见的SCCmec型(50.0％),其次是Ⅴ型(23.9％)和Ⅲ型(23.9％),Ⅳ型中最常见的亚型是Ⅳa(77.6％);检测到26种spa分型,最重要的spa型是t437 (47.8％);菌株的pvl携带率与菌株SCCmec分型有关,SCCmecⅣ和Ⅴ型菌株的pvl携带率大于Ⅱ和Ⅲ型(58.6％ vs.14.3％,P＜0.05),且差异有统计学意义.不同疾病来源和不同地区来源的菌株,其流行克隆不同.结论 2005至2009年我国儿童MRSA感染分离株的流行克隆为ST59-MRSA-Ⅳa(t437)和ST239-MRSA-Ⅲ(t037),可能分别属于社区获得性MRSA与医院获得性MRSA.因此,开展对于MRSA临床流行病学监测和分子生物学的研究十分必要,能够为制定本地区防治措施提供循证依据,从而有效降低MRSA在社区和医院内的发病.     

新生儿重症监护病房新生儿鼻部金黄色葡萄球菌定植和菌株的分子特征

目的 探讨NICU患儿鼻部金黄色葡萄球菌（简称金葡菌）的定植情况及分离株的基因型和毒力特征。 方法 采集NICU患儿的鼻拭子,分离培养金葡菌,采用头孢西丁纸片法和mecA检测鉴定甲氧西林耐药金葡菌（MRSA）或敏感金葡菌（MSSA）;分析所有菌株MLST和spa分型,并对MRSA菌株进行SCCmec分型,采用PCR方法检测pvl和sasX和21种超抗原毒力基因。 结果 从429例鼻拭子标本分离出79株金葡菌,定植率18.4%,其中MRSA 22株（27.8%）。79株金葡菌共检测出17种MLST型和29种spa型,最常见型分别为ST59（31.6%）和t437（22.8%）。22株MRSA最常见的SCCmec型为Ⅳa（81.8%）。ST59-Ⅳa-t437（63.6%）和ST188-t189（15.8%）分别是MRSA、MSSA最常见的流行克隆。最主要的毒力基因型为seb-sek-seq（10.1%）。MRSA株seb、sek、seq和pvl的携带率明显高于MSSA株,而sei携带率明显低于MSSA株。 结论 NICU患儿鼻部金葡菌定植率较高,ST59-Ⅳa-t437和ST188-t189分别是MRSA、MSSA最常见的流行克隆;分离株毒力基因携带率较高,MRSA与MSSA菌株的毒力基因型存在差异。     

维生素D受体基因多态性与维生素D缺乏性佝偻病易感性的研究

目的 通过研究维生素D受体(VDR)基因多态性与维生素D缺乏性佝偻病易感性的相关性,探讨维生素D缺乏性佝偻病的遗传易感因素。方法 利用限制性内切酶FokI,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR—RFLP)分析、基因测序等技术测定48例维生素D缺乏性佝偻病患儿(病例组)和92名正常儿童(对照组)的VDR基因多态性,比较两组VDR基因型和等位基因的分布频率,并计算基因型优势比(OR)。结果 在48例佝偻病患儿中FF、Ff和ff基因型分布频率分别为46％、33％和21％;而在92名正常儿童中FF、Ff和ff基因型分布频率分别为22％、52％和26％。两组VDR基因型的分布频率差异有显著性(x^2=8．912,P=0．012),病例组中FF基因型占明显优势(OR=3．046)。两组VDR基因等位基因的分布频率差异也有显著性(x^2=5．451,P=0．020),病例组中F等位基因分布频率高于对照组。结论 VDR基因多态性与维生素D缺乏性佝偻病有相关性,提示VDR基因多态性可能在决定个体维生素D缺乏性佝偻病遗传易感性方面有重要作用。     

沙眼衣原体垂直传播基因水平的快速检测

应用细胞培养法对８６名孕妇及其新生儿进行沙眼衣原体（ＣＴ）的分离，然后采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析法，对ＣＴ阳性的母婴标本进行基因鉴定。结果显示，８６例孕妇ＣＴ阳性２０例，阳性孕妇的亲手儿有８例感染，垂直传播率４０．０％。８对母婴相对标本鉴定后证实每对母婴感染的ＣＴ基因型一致。提示ＣＴ有很高的垂直传播率，应早期进行孕期筛查，降低新生儿ＣＴ感染率。     

Prevention of methicillin-resistant Staphylococcus aureus infections in neonates

Reports of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) infection in neonatal intensive care units (NICU) and normal newborn nurseries in Japan were investigated, and various methods of preventing transmission were evaluated. In the late 1980s, MRSA which had spread in adult wards also invaded NICU. Very low birthweight or premature infants had become the targets of MRSA infection and this has now become a serious problem. Recent reports have revealed that 87% of major NICU in Japan have suffered from MRSA infections. However, we have found that preventive measures can greatly reduce the risk of a newborn being infected by a carrier, while also controlling the disease caused by MRSA infection. Recently, MRSA infections in normal newborn nurseries have also become a serious problem in pediatric departments. Methicillin-resistant Staphylococcus aureus which can colonize in the newborn baby just after birth, is passed on to the newborn by carrier medical staff. It was found to be of great importance that infant's mothers hold and nurse their babies immediately after birth, and start breast-feeding while still in the delivery room. Furthermore, the most appropriate and ideal newborn nursery is one where mother and child are roomed together and there is little intervention by the hospital. In neonatal care, it is of utmost importance to treat carriers of MRSA bacteria, and to inhibit the spread of the bacterium in babies by taking standard precautionary measures.     

新生鼠败血症肺脏核因子-κB表达

目的探讨NF-κB信号途径在新生鼠败血症中的作用,为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段提供实验依据。方法应用10 d新生大鼠制备金黄色葡萄球菌败血症模型。采用电泳迁移率改变分析(EMSA)方法检测败血症新生鼠肺脏NF-κB的表达情况和应用吡咯-硫氨基甲酸酯(PDTC)后肺脏NF-κB活性变化情况。结果 金黄色葡萄球菌败血症新生鼠的肺脏NF-κB活性于注菌后1 h开始增强,3 h达高峰。PDTC对肺脏NF-κB活化有抑制作用,且剂量越大,抑制作用越强。结论新生鼠金黄色葡萄球菌败血症时肺脏NF-κB有明显激活,且存在一高峰期。抗氧化剂PUTC能对金黄色葡萄球菌败血症新生鼠肺脏NF-κB活化有所抑制,且存在量-效依赖关系。     

新生鼠败血症肺脏核因子-κB表达

目的：探讨NF-κB信号途径在新生鼠败血症中的作用,为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段提供实验依据。方法：应用10 d新生大鼠制备金黄色葡萄球菌败血症模型。采用电泳迁移率改变分析(EMSA)方法检测败血症新生鼠肺脏NF-κB的表达情况和应用吡咯-硫氨基甲酸酯(PDTC)后肺脏NF-κB活性变化情况。结果：金黄色葡萄球菌败血症新生鼠的肺脏NF-κB活性于注菌后1 h开始增强,3 h达高峰。PDTC对肺脏NF-κB活化有抑制作用,且剂量越大,抑制作用越强。结论：新生鼠金黄色葡萄球菌败血症时肺脏NF-κB有明显激活,且存在一高峰期。抗氧化剂PUTC能对金黄色葡萄球菌败血症新生鼠肺脏NF-κB活化有所抑制,且存在量-效依赖关系。     

Autopsy Diagnosis of 21-Hydroxylase Deficiency CAH in a Case of Apparent SIDS

A 5-month-old boy with no history of vomiting, early sexual development, or noticeable significant illness was found dead in bed. Autopsy demonstrated bilateral adrenal hyperplasia unequivocally shown on biochemical testing of blood and urine to be due to 21-hydroxylase deficiency. Genetic analysis of the CYP21 gene showed compound heterozygosity; 1 allele contained a pseudogene sequence (gene conversion) and the other contained a previously described I172N point mutation. On theoretical grounds, the genotype would have been expected to cause simple virilizing congenital adrenal hyperplasia but, because no other cause of death could be found, it is possible that it caused a fatally severe loss of enzyme activity in this child. If this assumption is valid, newborn screening would have prevented this death, had it been available.     

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目的探讨北方汉族原发肾病综合征(PNS)儿童血管紧张素原(AGT)基因M235T单核苷酸与血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性的关系。方法研究对象为2001—2005年首都医科大学附属儿童医院住院的148例北方汉族PNS患儿及50例正常儿童,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测AGT(M235T)、ACE(I/D)的多态性。结果PNS组携带ACE基因DD型、D等位基因、AGT基因MT型及同时携带D、T等位基因的频率高于正常对照组(P分别为0.004、0.032、0.036、0.004)。复发组D等位基因频率高于非复发组(P=0.000)。PNS患儿中高胆固醇+高三酰甘油(甘油三脂)血症组DD基因频率高于正常组(P=0.006)。激素耐药组DD基因频率(34.21%)高于激素敏感组(20.91%)。ACE基因的插入序列长度为289bp,存在2处单核苷酸多态性,分别为第103、151位各插入1个G。结论携带ACE基因D等位基因、AGT基因MT型、同时携带D(DD/ID)、T(MT/TT)等位基因的北方汉族儿童为PNS的易感人群。携带ACE(DD)基因PNS患儿易复发、可能易合并高胆固醇及高三酰甘油血症,可能会有激素耐药倾向。ACE基因插入序列长度及核苷酸序列与国外报道不同。     

Differentiation of homozygous hemoglobin E from compound heterozygous hemoglobin E-beta O-thalassemia by hemoglobin E mutation analysis.

OBJECTIVES: To facilitate the differential diagnosis of hemoglobin FE in newborn infants (homozygous hemoglobin E vs hemoglobin E-beta O-thalassemia). METHODS: The beta-globin gene in DNA from infants found to have hemoglobin FE in the California newborn screening program was amplified by the polymerase chain reaction, and the product was digested with Mnl I, which fails to cut the product when the hemoglobin E mutation is present. When both amplified alleles fail to be cut, homozygous EE is diagnosed. If only one allele is cut, a beta-globin allele without the E mutation is present (non-E), which is most likely a gene with a beta O-thalassemia mutation. RESULTS: Samples from 18 infants revealed an EE genotype, and from two samples a non-E/E genotype was determined. Clinical examination of these two patients confirmed a diagnosis of hemoglobin E-beta O-thalassemia. An independent clinical diagnosis agreed with DNA analysis for all 17 of the 20 infants for whom follow-up and family studies were available. The DNA results were obtained within a week, but the clinical diagnoses often could not be resolved unequivocally for months. CONCLUSIONS: The direct analysis of patient DNA samples for the hemoglobin E mutation allowed rapid and accurate diagnosis in this sample of infants with hemoglobin FE on the newborn screen. This rapid discriminatory test should reduce cost and simplify the diagnostic approach for these patients, which currently consists of expensive and lengthy follow-up until clinical data and family studies result in a diagnosis.     

新生鼠败血症时核因子-κB的表达

目的探讨核因子-κB(NF-κB)信号途径在新生鼠败血症中的作用,为临床寻求以NF-κB为靶点的治疗手段提供实验依据.方法新生10 d的Wistar大鼠,采用金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)皮下注射的方法制作败血症模型.(1)采用电泳迁移率改变分析(EMSA)方法检测金葡菌败血症新生鼠肺、肝脏 NF-κB活性的表达水平;(2)采用免疫组织化学方法检测金葡菌败血症新生鼠脾脏NF-κB P65活化的表达水平;(3)检测抗氧化剂--吡咯二硫氨基甲酸酯(PDTC)对金葡菌败血症新生鼠肺、肝脏NF-κB活化以及脾脏NF-κB P65活化的影响.结果金葡菌败血症新生鼠肺脏NF-κB活性1 h开始有增强,3 h达高峰,24 h已无明显激活.肝脏NF-κB在1 h也开始有激活,4 h达高峰,24 h无明显活化.脾脏NF-κB P65活化阳性表达在细菌刺激后1 h,细胞核内P65阳性细胞数(12.0±3.7)即明显增加;3 h阳性细胞数(51.4±5.9)增加最明显;而在24 h阳性细胞数明显减少(3.4±1.4),与对照组比较差异无显著性.应用PDTC 50～200 mg/kg对肺、肝脏NF-κB活化及脾脏NF-κB P65活化阳性表达均有抑制作用,且剂量越大,抑制作用越强.应用PDTC 200 mg/kg,对NF-κB活性抑制作用最强.结论新生鼠金葡菌败血症时肺、肝、脾脏NF-κB均有明显激活,且都存在一高峰期;抗氧化剂PDTC能对金葡菌败血症新生鼠肺、肝、脾脏NF-κB活化有所抑制,且存在量-效依赖关系.