Rho/Rho激酶信号转导通路与他汀类药物

他汀类药物的多效性与Rho/Rho激酶信号转导通路密切相关。他汀类药物通过抑制类异戊二烯的生成而影响Rho的膜定位功能及其对下游效应分子Rho激酶的激活作用,继而引起一系列细胞生物学效应的改变。Rho/Rho激酶信号转导通路与他汀类药物关系的阐明,至少可部分解释他汀类药物调脂作用以外的更广泛的药理活性,以指导其在临床的应用。     

Rho激酶与疼痛及其抑制剂的临床应用

小分子GTP结合蛋白Rho及其下游Rho激酶对细胞的收缩、迁移、增殖、黏附和凋亡等活动具有重要的调控作用。该文通过阐述Rho/Rho激酶信号通路在疼痛的产生和持续过程中的作用及其抑制剂在临床研究中的使用案例,探讨Rho/Rho激酶作为镇痛药物的作用靶点的可能性。大量的实验和临床研究表明,Rho/Rho激酶通过其介导的细胞信号传导系统参与神经性疼痛、炎症性疼痛、糖尿病性周围神经疼痛、脑血管痉挛、血管痉挛性心绞痛及骨癌痛等,因此,Rho/Rho激酶可作为防治疼痛的潜在药物作用靶点,为临床上预防和治疗疼痛提供新的思路和策略。     

哮喘治疗新靶点——RhoA/Rho激酶及其抑制剂开发

RhoA/Rho激酶参与细胞有丝分裂、黏附、细胞骨架调整、肌细胞收缩及肿瘤细胞浸润等过程.RhoA/Rho激酶信号通路在气道炎症细胞迁移、趋化和浸润过程中起关键性的调控作用,是哮喘治疗药物的潜在靶点.本文综述RhoA/Rho激酶信号通路在哮喘气道炎症、气道重塑和气道高反应性(AHR)的作用及其机制以及Rho激酶抑制剂的开发近况.     

辛伐他汀通过Rho/Rho激酶信号通路抑制高血压模型大鼠的心血管重构研究

目的:研究辛伐他汀抑制高血压模型大鼠心血管重构的作用及其机制。方法:将60只大鼠均分为模型组和阴性对照组,模型组大鼠连续给药3周建立高血压模型,检测2组大鼠血压、主动脉结构变化和Rho激酶mRNA及其A蛋白的表达。然后将模型组大鼠分为低、中、高剂量(0.1、1、10mg/kg)辛伐他汀组(n=9),阴性对照组中选取9只大鼠作为对照组,每日灌胃相应药物1次,8周后处死大鼠,检测4组大鼠主动脉结构变化和Rho激酶mRNA及其A蛋白的表达。结果:与阴性对照组比较,模型组大鼠收缩压、舒张压、Rho激酶mRNA及其A蛋白表达均明显增加(P<0.01),主动脉内膜明显增生,内膜厚度增宽,表明高血压模型建模成功。与对照组比较,低、中、高剂量辛伐他汀组大鼠主动脉内膜增生程度、Rho激酶mRNA及其A蛋白表达均明显降低(P<0.05),且均呈剂量依赖性。结论:辛伐他汀可能通过Rho/Rho激酶信号通路抑制高血压模型大鼠的心血管重构。     

应用于心血管疾病的大鼠肉瘤蛋白同源蛋白激酶抑制剂的研究进展

最近的基础和临床研究已经将大鼠肉瘤蛋白同源蛋白激酶(Ras homologue kinase,Rho激酶)确认为一个与多种心血管疾病密切相关的重要靶点。越来越多的证据表明,Rho/Rho激酶信号途径在多种细胞活动中都发挥重要的作用,比如血管平滑肌细胞的收缩、肌动蛋白细胞骨架组织、细胞黏附和迁移、胞质分裂和基因表达等,这些细胞活动都与心血管疾病的发病机制有关。随着更多Rho激酶抑制剂的出现,Rho激酶抑制剂正逐渐成为治疗心血管疾病的研究热点。本文对Rho激酶抑制剂的最新研究进展进行了综述,同时简要介绍Rho激酶的相关内容。     

Rho激酶在肺动脉高压大鼠肺组织中的表达

目的探讨Rho激酶在肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及其作用机制。方法48只雄性SD大鼠,随机分为对照组和模型组,测大鼠平均肺动脉压力(mPAP)、右心室肥厚指数(RVHI)。采用RT-PCR及Western blot法,从基因和蛋白水平观察肺组织Rho激酶表达;Western blot法检测其底物肌球蛋白磷酸酶的磷酸化状态,作为该激酶功能活化标志。结果Rho激酶mRNA和蛋白在肺动脉高压早期即明显上调,后期仍维持于较高水平;肌球蛋白磷酸酶磷酸化水平也较对照组显著增高(P均<0.01),并与mPAP及RVHI均呈显著正相关(P均<0.01)。结论肺动脉高压大鼠肺组织中存在Rho激酶的表达上调与功能活化,提示Rho激酶在肺动脉高压发病机制中具有重要作用。     

Rho激酶在高血压中的作用及其与容积调节性氯通道的关系

高血压血管平滑肌重构伴随Rho/Rho激酶通路的激活,抑制Rho激酶可逆转血管平滑肌增生以及血压升高。同时,在高血压中有容积调节性氯通道开放,这与Rho激酶通路激活有关。该文就高血压过程中Rho激酶与容积调节性氯通道的关系做一综述。     

波依定对心力衰竭大鼠Rho/Rho激酶表达的影响

目的探讨波依定对升主动脉缩窄压力超负荷心力衰竭大鼠心肌细胞内Rho/Rho激酶表达的影响。方法制备升主动脉缩窄心力衰竭大鼠及假手术组模型。将升主动脉缩窄术后Wistar雌性大鼠随机分为3组,一组为假手术组,给予氧化钠溶液0.1ml,1次/d灌胃;一组为心力衰竭组,给予氯化钠溶液0.1ml,1次/d灌胃;一组为波依定组,给予波依定5mg/kg,1次/d灌胃;治疗4周。每组各10只大鼠。观察各组大鼠各项指标变化。结果心力衰竭组鼠心肌细胞RhoA、Rho激酶mRNA表达显著增高,波依定组心肌细胞RhoAmRNA、Rho激酶mRNA表达下降。结论心肌细胞RhoA、Rho激酶表达与充血性心力衰竭密切相关,波依定可有效降低心肌细胞内RhoAmRNA、Rho激酶mRNA表达,不恶化心力衰竭症状,可能为其可用于心力衰竭治疗的机制。     

法舒地尔对压力超负荷性大鼠左室重构的影响

目的分析压力负荷性大鼠心肌组织Rho/Rho激酶表达的改变,探讨Rho/Rock信号通路与左心室重构的关系及Rho/Rock信号通路选择性抑制剂法舒地尔对左室重构的影响。方法34只SD雌性大鼠随机取8只大鼠作为假手术对照组,其余26只建立腹主动脉缩窄高血压模型;1周后随机分为法舒地尔组和模型组。法舒地尔组用法舒地尔5mg/kg每天2次腹腔注射,共4周;模型组和假手术组腹腔等量注射生理盐水,观察各组大鼠指标变化。结果模型组心肌细胞内RhoA、Rho激酶mRNA表达和III型胶原含量较假手术组明显增加（P〈0.05）;法舒地尔治疗4周后,RhoA、Rho激酶mRNA表达及III型胶原含量显著下降,与模型组比较,差异显著（P〈0.05）。结论心肌细胞内RhoA、Rho激酶mRNA表达与左心室重构密切相关,法舒地尔可降低RhoA、Rho激酶mRNA表达,改善心肌重构。     

Rho激酶信号通路在两肾一夹肾性高血压大鼠心肌肥大中的作用及Fasudil干预

目的：了解Rho激酶介导的信号转导通路在两肾一夹（two-kidneys-one-clip,2K1C）肾性高血压大鼠心肌肥大发病机制中的作用以及特异性Rho激酶抑制剂Fasudil干预效应。方法：制备两肾一夹肾性高血压大鼠模型,实验设假手术组、模型组、实验组（Fasudil 10 mg·kg^-1.d^-1腹腔注射）。电子天平称量左心室质量并计算左心室质量与体质量比值;光学显微镜观察心肌组织形态学变化;Western blotting检测肌球蛋白结合亚基磷酸化（phosphorylation of myosin-binding submet,MBS-P）表达作为Rho激酶功能活化标志;RT-PCR检测Rho激酶mRNA表达。结果：术后12周,模型组大鼠出现较显著的心肌肥大（P〈0.01）,心肌组织Rho激酶活性及mRNA表达显著增加（P〈0.01）且Rho激酶活性及mRNA表达与心肌肥大程度间呈显著正相关（P〈0.05）。Rho激酶特异性抑制剂Fasudil在抑制大鼠心肌组织Rho激酶活化和mRNA表达的同时可有效抑制心肌肥大的发展（P〈0.01）。结论：Rho激酶介导的信号转导通路在2K1C肾性高血压大鼠心肌肥大发病机制中可能具有重要作用,Rho激酶特异性抑制剂Fasudil可有效抑制心肌肥大的发展。     

Rho激酶在远距缺血后处理抗心肌缺血/再灌注损伤中的作用

目的探讨Rho激酶在远距缺血后处理(remote ischemic postconditioning,RIPost C)中的作用及其可能的作用机制。方法 30只♂SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血/再灌注组(I/R)、远距缺血后处理组(RIPost C)、缺血/再灌注+Rho激酶阻断剂法舒地尔组(I/R+Fas),远距缺血后处理+Rho激酶激动剂溶血磷脂酸组(RIPost C+LPA),每组6只。全程监测动脉血压和Ⅱ导联心电图,实验结束后测定血浆肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性变化,HE染色观察心肌组织形态学变化,TTC染色法评价心肌梗死面积,Western blot测定磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)蛋白表达。结果与Sham组相比,其余各组MAP、HR均下降,ST段增高;与I/R组相比,RIPost C和I/R+Fas组MAP、HR升高,ST段降低,心肌组织病理形态有明显改善,炎性细胞浸润减轻,心肌梗死面积降低,CK、LDH释放减少,p-MLC表达降低;与RIPost C组相比,RIPost C+LPA组减弱了RIPost C的作用,抑制了上述指标的恢复。结论 Rho激酶信号通路可能参与了远距缺血后处理抗心肌缺血/再灌注损伤的作用。     

Rho激酶及其抑制剂的研究进展

Rho激酶是近十年来发现参与细胞运动的主要激酶之一，对细胞的分裂、收缩、粘附、迁移、分泌等活动具有重要调节作用。Rho激酶的高表达或过度激活与许多心脑血管疾病的发生发展密切相关，Rho激酶现在已经成为新药研发的重要靶点，而Rho激酶抑制剂的不断发现为心血管、神经系统等疾病的治疗提供了新的希望。为此，本文就Rho激酶及其抑制剂的研究做一简要综述。     

Rho／Rho激酶：一个心血管疾病治疗的新靶标

小分子GTP结合蛋白 (G蛋白 )是一种在调节不同细胞功能时起关键作用的单体G蛋白分子。G蛋白与GDP结合时处于失活状态 ,与GTP结合时转变为活性状态。目前 ,已发现有 10 0多种小分子G蛋白存在于酵母到人的真核细胞中 ,它们组成一个超家族。Rho是一种小分子G蛋白 ,其正确的膜定位功能有助于异戊二烯化作用 ,它在介导血管壁细胞间的信号传导中扮演着重要的角色。 1985年 ,从海兔属 (Aplysia)动物体内发现Rho基因是Ras基因的一个同源性基因。基于其结构和功能分析 ,Rho超家族可分为Rho ,Rac和Cdc4 2三个亚家族。许多细胞功能是通过肌动…     

辛伐他汀抑制心肌细胞Rho A、Rho GTPase表达对心室肥厚的影响

目的 探讨辛伐他汀对心力衰竭模型兔抑制心肌肥厚、改善心功能的影响及机制.方法 24只新西兰白兔,均分四组.除假手术组外,通过破坏主动脉瓣和缩窄腹主动脉,增加左心室前、后负荷,建立慢性心力衰竭模型;术后(除心衰对照组)早干预组(即起,连续8周)和晚干预组(第5周起,连续4周)予辛伐他汀每天5 mg/kg灌胃,实验结束取心肌细胞,Westem-blot检测细胞膜Rho A蛋白表达,[γ~-~(32)P]电泳分析Rho GTPase活性;实验前、结束时均行超声心动图检查.结果 心衰对照组室间隔厚度(LVSd)、左心室舒张期内径(LVIDd)、左心室后壁厚度(LVPwd)、左心室收缩期内径(LVIDs)、心脏重量(Hw)、左心室重量(LVW)、心脏/体重(HW/BW radio)、左心室/体重(LVW/BW radio)明显高于假手术和早、晚干预组(P<0.05,P<0.01);左室射血分数(EF)、左室长轴缩短率(FS)明显低于假手术组和早、晚干预组(P<0.05,P<0.01);心肌细胞膜Rho A蛋白表达、Rho GTPase活性明显高于假手术组和早、晚干预组(P<0.01).结论 辛伐他汀可抑制细胞膜RhoA蛋白表达、Rho GTPase活性,从而抑制心肌肥厚、改善心功能.     

1,25-二羟维生素D_3对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖及RhoA表达的影响

目的观察1,25-(OH)_2D_3对哮喘大鼠AMSCs增殖及Rho A表达的影响,探讨其在哮喘治疗中的作用。方法用卵白蛋白致敏和激发建立急性哮喘模型,原代培养急性哮喘大鼠的ASMCs,以1,25-(OH)_2D_3作为干预因素,CCK8法检测1,25-(OH)_2D_3对ASMCs增殖的影响,测定细胞增殖活力;用TNF-α、1,25-(OH)_2D_3和地塞米松(DXM)处理体外培养的急性哮喘大鼠ASMCs并分组:对照组(N)、哮喘组(A组)、1,25-(OH)_2D_3组(VD组)、DXM组、1,25-(OH)_2D_3+DXM联合治疗组(L组)。用Transwell小室检测细胞迁移;流式细胞仪测定细胞周期。同时采用Real time PCR和Western blot方法检测肺组织和ASMCs中Rho A的表达变化,研究其作用机制。结果 1,25-(OH)_2D_3在10-9~10-6mol/L浓度下能显著抑制ASMCs的增殖,且为浓度依赖性(P<0.05);1,25-(OH)_2D_3对哮喘大鼠的ASMCs的抗增殖作用呈现时间依赖性;1,25-(OH)_2D_3对哮喘大鼠的ASMCs迁移有明显的抑制作用;1,25-(OH)_2D_3显著抑制哮喘大鼠ASMCs细胞周期中G1/S期的转化;1,25-(OH)_2D_3抑制并减少了Rho A/Rho激酶信号通路中RhoA基因和蛋白的表达。结论 1,25-(OH)_2D_3能显著抑制哮喘大鼠ASMCs的增殖、迁移及细胞周期的进展,这种多重的抑制作用可能是其通过调控Rho A/Rho激酶信号通路而实现其调节哮喘气道炎症、AHR和气道重塑的作用机制之一。     

葛根素对Rho激酶在大鼠心肌缺血-再灌注损伤中作用的影响

目的 观察Rho激酶在大鼠心肌细胞缺血-再灌注损伤细胞凋亡中的作用,及葛根素对缺血-再灌注损伤中Rho激酶、细胞凋亡的影响. 方法 45只SD大鼠随机平均分为3组：空白对照组、模型对照组(缺血-再灌注+0.9%氯化钠溶液)和药物治疗组(缺血-再灌注+葛根素注射液),每组15只.Western blot法检测肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1 (MYPT1) 磷酸化水平,作为Rho激酶功能活化的标志,流式细胞仪检测细胞凋亡百分率. 结果 再灌注后MYPT1的磷酸化水平显著性增加,模型对照组为空白对照组的6.26倍( P<0.01),药物治疗组较模型对照组减少27.9%(P<0.05).药物治疗组心肌细胞的凋亡率较模型对照组呈下降趋势(P<0.01). 结论 Rho激酶在缺血-再灌注心肌细胞中有促MYPT1磷酸化水平上调作用,葛根素可减少缺血-再灌注心肌细胞凋亡的发生,从而发挥良好的心肌保护作用.     

Rho激酶促进细胞凋亡作用机制的研究进展

Rho激酶(ROCK)是小G蛋白Rho的下游效应因子,可能参与了细胞凋亡从发生到被吞噬清除的整个过程.一方面,ROCK通过其丰富的底物参与内源性和外源性途径对凋亡的激活,并与胞内其他信号通路产生广泛交联;另一方面,ROCK通过调控肌动蛋白-肌球蛋白骨架重组参与细胞皱缩、胞膜出泡及崩解等一系列细胞形态的改变.本文将对ROCK促凋亡的作用机制作一综述.     

水蛭素抑制 RhoA/Rho激酶信号通路对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症反应和纤维化的影响

目的探讨水蛭素抑制 RhoA/Rho激酶(ROCK)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠炎症反应和纤维化的影响。方法 2020年 1—6月,将 52只清洁级 SD大鼠随机数字表法分为造模组( 42只)和对照组( 10只)。造模组大鼠通过气管内滴注脂多糖( LPS)溶液建立 COPD模型,建模后的大鼠随机数字表法分为模型组、水蛭素组( 50 U/kg)、 ROCK激活剂组［溶血磷脂酸( LPA,40 μg/kg)组、水蛭素 +LPA组( 50 U/kg水蛭素 +40 μg/kg LPA)］,10只/组。药物组和激活剂组分别按照相应剂量进行干预;其余各组给予生理盐水干预。干预结束后,检测各组大鼠肺功能指标 -呼气峰值流速( PEF)及 0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)、用力肺活量比值( FVC);颈总动脉取血,检测血清中炎性因子指标［白细胞介素 -1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)］水平;分离肺组织,观察肺组织形态学变化、肺纤维化程度以及 RhoA/ROCK信号通路蛋白表达情况。结果对照组大鼠无肺组织损伤;与对照组 PEF(11.21±1.12)V/mL,FEV0.3(31.68±3.24)mL/s,FVC(8.56±0.85)V/mL,IL-1β(65.78±6.66)ng/L,TNF-α(100.32±10.02)ng/L相比,模型组大鼠肺组织损伤及纤维化较为严重, PEF(7.41±0.71)V/mL、FEV0.3(22.42±2.21)mL/s、FVC(4.61±0.46)V/mL较显著降低( P<0.05),而 IL-1β(158.63±15.89)ng/L、TNF-α(545.37±54.56)ng/L显著增加, RhoA、Rho激酶 1(ROCK1)蛋白表达也增加( P<0.05);与模型组相比,经水蛭素组大鼠肺组织损伤及纤维化程度得到改善, PEF(5.34±0.53)V/mL、FEV0.3(16.15±1.62)mL/s、FVC(8.21±0.82)V/mL较模型组显著增加( P<0.05)而 IL-1β(68.72±6.88)ng/L、TNF-α(115.35±11.55)ng/L显著降低, RhoA、ROCK1蛋白表达均显著降低(P<0.05); LPA可减弱水对 COPD大鼠炎症反应和肺纤维化的改善作用(P<0.05)。结论水蛭素可以降低炎症细胞浸润,改善肺组织损伤和肺纤维化,可能与抑制 RhoA/ROCK信号通路有关。     

磷脂酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路在肺部疾病中的作用研究进展

磷脂酸肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路是细胞内与增殖、分化和凋亡相关的信号通路，是机体自我保护的重要通路。PI3K被激活后会使其下游分子Akt磷酸化，进而抑制细胞凋亡、调控细胞生存及增殖。PI3K/Akt信号通路在众多肺系疾病，如急性肺损伤、肺炎、哮喘、肺纤维化、肺癌等的发展进程中起着重要作用。该文对PI3K/Akt信号通路在肺系疾病进展中的作用机制进行了综述。     

佳木斯地区无偿献血者Rho(D)阴性筛查及临床应用

Rho(D)的抗原性仅次于A和B抗原,大约2/3的Rho(D)阴性的人通过输血和妊娠可受D抗原红细胞免疫而产生抗－D。在输入不配合的Rho(D)阳性血后,轻者发生迟发性溶血性输血反应,重者引起急性输血反应甚至死亡。为了更好地服务于临床,建立稀有血型献血员队伍,本站两年来进行了大量的Rho(D)阴性筛选工作,报道如下。1 材料和方法1.1 检测对象1998-09~2000-05佳木斯市红十字中心血站所有无偿献血体检合格者的血样。1.2 试剂单克隆抗-D(IgM),德国产,购自长春生物制品研究所博德生物技术有限公司;3批不同批次的抗-D,菠萝酶,抗球蛋白试…