柴胡的质量评价研究△

目的:建立柴胡的质量评价方法。方法:采用薄层色谱法进行定性鉴别;紫外分光光度法,测定柴胡中总皂苷的含量;利用HPLC法,采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)、乙腈-水为流动相,流速:1.0ml.min-1,检测波长:210nm,测定柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。结果:柴胡总皂苷在0.03256～0.1628mg、柴胡皂苷a在0.258～2.580μg、柴胡皂苷d在0.238～2.380μg范围内呈良好的线性关系,r分别为0.9969、0.9996、0.9997;平均回收率:柴胡总皂苷为99.73%,柴胡皂苷a为100.40%,柴胡皂苷d为99.70%;RSD:柴胡总皂苷为2.07%,柴胡皂苷a为1.72%,柴胡皂苷d为1.50%。结论:定性鉴别薄层色谱特征明显,专属性强,本研究建立的紫外分光光度法测定柴胡总皂苷及高效液相法测定柴胡皂苷a、d含量的方法,简单、易行、快速,结果准确可靠,能较全面地控制柴胡的质量,并为在安全剂量范围内正确使用柴胡提供依据。     

青海产小叶黑柴胡中皂苷类成分的含量分析

目的测定青海产小叶黑柴胡中总皂苷、柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的含量,为其质量评价和开发利用提供参考。方法采用分光光度法测定小叶黑柴胡中总皂苷的含量;采用高效液相色谱法测定小叶黑柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量。结果小叶黑柴胡中总皂苷含量>2.77%,柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量分别高于0.54%和0.14%,其中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的含量远高于中国药典中柴胡含量项下的标准。结论本方法简便快速,结果准确、稳定,适用于小叶黑柴胡中皂苷类成分的含量测定。青海产小叶黑柴胡具有较高的药用价值。     

不同产地柴胡中柴胡皂苷的含量测定

目的测定不同产地柴胡中柴胡皂苷a及柴胡总皂苷的含量。方法以柴胡皂苷a为指标 ,采用高效液相色谱法和可见分光光度法。结果柴胡皂苷a分别在 0 9～ 7 2 μg(r =0 9998)及0 0 4～ 0 36 g·L-1(r =0 9999)内线性关系良好。柴胡皂苷a的平均回收率分别为 98 5 % (n =6 ,RSD =2 1% )和 97 3% (n =6 ,RSD =1 9% )。柴胡皂苷a的含量以陕西最高 ,内蒙最低 ;柴胡总皂苷以内蒙最高而山西最低。结论此方法简便、快速 ,便于对柴胡药材进行质量评价     

高效液相色谱法测定不同产地柴胡的皂苷a含量

目的:建立柴胡皂苷a的含量测定方法,并测定41种不同产地柴胡中的皂苷a含量。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),伊利特C18柱,以乙腈-水(40∶60)为流动相,流速:1.0mL·min-1,检测波长:210nm。结果:柴胡皂苷a在1.92~19.20μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9994。平均回收率为96.74%,RSD为1.6%。结论:不同产地柴胡中的皂苷a含量差异较大。     

大孔吸附树脂分离纯化柴胡总皂苷工艺研究

目的以柴胡皂苷a含量为指标,考察柴胡总皂苷的最佳分离纯化工艺。方法建立柴胡皂苷a的HPLC测定法,色谱柱为ODS-C18柱(150×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水(70:30),流速为1mL.min-1,检测波长为210nm。以柴胡皂苷a为指标,比较不同型号大孔树脂对于柴胡总皂苷的分离纯化能力,对吸附流速、洗脱溶剂及用量、洗脱流速进行考察。结果柴胡皂苷a在50～250μg.mL-1的范围内,浓度与其峰面积具有良好的线性关系(r=0.9991),平均加样回收率为99.22%,RSD=1.07%(n=6)。确定D101大孔树脂为柴胡总皂苷的纯化材料,其最佳工艺条件是吸附流速为1BV.h-1,洗脱溶剂为70%乙醇,用量为5BV,洗脱流速为2BV.h-1。柴胡总皂苷精制品中柴胡皂苷a含量可达到3%左右。结论该含量测定方法操作简便、重复性好,可用于测定柴胡总皂苷精制品中柴胡皂苷a的含量。D101大孔树脂分离柴胡总皂苷工艺稳定可行,树脂可重复利用,对于柴胡总皂苷的分离精制具有良好的应用前景。     

不同产地柴胡中总皂苷及柴胡皂苷a含量测定

<正>柴胡(Bupleurum Chinense DC.)为伞形科柴胡属植物北柴胡的根,为常用的中药之一,具有疏肝升阳、和解表里的功效[1]。柴胡皂苷a(saikosaponin a)(化学结构式见图1)是其主要活性成分之一,而不同产地柴胡中其含量相差较大,为了评价不同产地柴胡的优劣,作者采用高效液相色谱法(HPLC)和可见分光光度法分别对柴胡皂苷a及柴胡总皂苷进行了含量测定。     

高效液相色谱法测定柴胡中柴胡皂苷a与柴胡皂苷d的含量

目的:对中药柴胡有效成分柴胡皂苷a、柴胡皂苷d进行含量测定,比较10种不同产地的含量差异,为该药材质量标准制定提供依据.方法:采用高效液相色谱法(HPLC).伊利特Cis柱,以乙腈-水(40:60)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长210 nm.结果:柴胡皂苷a在2.76～41.4 μg、柴胡皂苷d在3.32～49.8μg范围内,线性关系良好,平均回收率分别为101.39%、102.14%,RSD分别为2.7%、2.8%(n=5).结论:该方法准确灵敏、稳定可靠.柴胡皂苷a、柴胡皂苷d可作为控制柴胡质量的指标性成分.     

高效液相色谱法测定定西市栽培北柴胡中柴胡皂苷a的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定定西市不同产地栽培北柴胡药材中柴胡皂苷a含量的方法。方法:色谱柱为C18,流动相为甲醇-乙腈-水(20∶35∶45),流速为1.0mL.min-1,检测波长为208nm。结果:柴胡皂苷a进样量在1.02~5.10μg范围内线性关系良好,平均加样回收率为96.8%(RSD=2.03%)。不同产地栽培北柴胡中柴胡皂苷a的含量不同(0.22%~0.67%)。结论:本研究为柴胡的栽培和资源利用及质量控制提供了一定的科学依据。     

不同采收期柴胡中挥发油及总皂苷的含量测定

目的:测定不同采收期柴胡中挥发油及总皂苷的含量。方法:采用挥发油提取器提取柴胡中的挥发油;以柴胡皂苷a为指标,采用可见分光光度法分别对不同采收期柴胡中的总皂苷进行含量测定。结果:柴胡挥发油的含量以7月份最高,11月份最低;柴胡总皂苷的含量以5月份最高,9月份最低。结论:本方法简便、快速,可以为柴胡确定最佳采收期提供科学依据。     

树脂联用富集与纯化柴胡总皂苷

目的 考察大孔吸附树脂对柴胡总皂苷的吸附解吸性能,优选纯化柴胡总皂苷的最佳树脂;采用离子交换树脂对柴胡总皂苷进行进一步的脱色纯化,建立柴胡总皂苷的富集与纯化方法. 方法采用静、动态吸附与解吸实验,优选出对柴胡皂苷吸附与解吸较好的NKA-9型大孔吸附树脂,用于除去水溶性杂质、富集总皂苷;采用弱碱性阴离子交换树脂D900对其进行进一步脱色纯化. 通过高效液相色谱法和紫外分光光度法,测定富集与纯化各个阶段柴胡总皂苷含量的变化. 结果 7种不同性质的大孔吸附树脂中,NKA-9树脂的吸附与解吸率相对较高. 同时确定NKA-9树脂上样量和洗脱条件,洗脱率>95%. 再经D900离子交换树脂脱色后,总皂苷纯度>70%. 结论 通过树脂联用技术可简便、快速地富集纯化柴胡总皂苷,为其工业化生产提供依据.     

北柴胡中新皂甙的结构鉴定

从北柴胡(Bupleurum chinese DC.)根醇提液的正丁醇部分得到7个化合物,经鉴定分别为柴胡皂甙a(saikosaponina,1),柴胡皂甙d(saikosaponind,2),柴胡皂甙c(saikosaponinc,3),柴胡皂甙f(saikosaponinf,4),柴胡皂甙b₃ (saikosaponin b₃,5),柴胡皂甙b₂(saikosaponin b₂,6)和柴胡皂甙t(saikosaponint,7),化合物7为新化合物,用化学和波谱法确定其结构为3β,16β,28-三羟基-11-α-甲氧基-12-齐墩果烯-3-O-β-D-葡萄糖基-(1→3)-β-D-呋糖甙。化合物1～6均为首次自北柴胡中分离鉴定。     

柴胡皂甙v的结构鉴定

从北柴胡(Bupleurum chinense DC.)根的乙醇提取液的EtOAc部分及BuOH部分得到4个化合物,经鉴定分别为柴胡皂甙v(saikosaponinv,1),柴胡皂甙l(saikosaponinl,2),2″-O-乙酰柴胡皂甙b2(2″-O-acetyl-saikosaponinb2,3),2″-O-乙酰柴胡皂甙a(2″-O-acetyl-saikosaponina,4),化合物1为新化合物,用化学和波谱方法确定其结构为3β,16α,23,28 四羟基-齐墩果-11,13(18)-二烯-30-酸-3-O-[β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)-β-D-吡喃呋糖基]-30-[木糖醇(1→1)]-β-D-吡喃葡萄糖基-6-酯,化合物2～4为首次自北柴胡中分离鉴定。     

Studies on antinephritic effects of plant components in rats (1). Effects of saikosaponins original-type anti-GBM nephritis in rats and its mechanisms

This study was designed to clarify the anti-nephritic effects of the saikosaponins that are contained in Bupleurum falcatum L. crude saikosaponin at 1.0 mg and 5.0 mg/kg, i.p. prevented urinary protein excretion and elevation of serum cholesterol content on the 10th day after the injection of anti-GBM serum. Moreover, crude saikosaponin at 1.0 mg and 5.0 mg/kg, i.p. significantly inhibited histopathological changes such as hypercellularity and adhesion. On the other hand, saikosaponin a (5.0 mg/kg, i.p.) and d (1.0 mg and 5.0 mg/kg, i.p.) also prevented urinary protein excretion, elevation of serum cholesterol content, and histopathological changes. In the second study, to clarify the anti-nephritic mechanisms of saikosaponins on this model, we investigated the effect of saikosaponins on platelet aggregation, release of corticosterone and reactive oxygen species scavengers activity. Crude saikosaponin and saikosaponin d significantly inhibited the increase in platelet aggregation, and saikosaponin d enhanced the serum and intra-adrenal corticosterone levels. Crude saikosaponin and saikosaponin a inhibited the decrease in activity of scavengers (SOD, catalase, glutathione peroxidase). These results indicate that saikosaponins were effective on this model, and anti-nephritic mechanisms of saikosaponins were party due to anti-platelet, corticosterone releasing and enhancing action on the activity of reactive oxygen species scavengers.     

与功效和毒性相关的柴胡化学成分研究进展

目的 总结与功效和毒性相关的柴胡化学成分研究现状,明确柴胡的功效成分与毒性成分,为进一步研究柴胡化学成分与功效、毒性间的相关性提供文献依据和思路.方法 对近20年来国内外发表的相关文献进行分析、整理和归纳.结果 柴胡的主要化学成分是柴胡皂苷、挥发油、黄酮类、多糖和植物甾醇等,其中皂苷类和挥发油类是柴胡的主要化学成分;柴胡的药理活性研究主要集中在皂苷类、挥发油、黄酮类和多糖;柴胡毒性研究主要集中在柴胡提取物、皂苷类和挥发油,其毒性靶器官主要为肝脏.结论 柴胡皂苷类和挥发油类成分既是柴胡保肝作用的有效成分,又是其产生肝毒性的成分,如何最大化的发挥其“疏肝解郁”的功效,限制其“柴胡劫肝阴”肝毒性的产生,是目前制约柴胡化学成分研究的关键.对于柴胡的功效和毒性研究应放在中医证侯的背景下进行综合评价和科学认知,探讨其“有效治疗窗”和“药物安全窗”,以保证临床用药的安全、有效.     

柴胡皂苷类化学成分的LC-MS分析

目的建立柴胡皂苷类成分的LC-MS分析方法,研究柴胡皂苷类的化学成分。方法 60%乙醇回流提取柴胡;运用LC-MSn联用技术得到各化合物的总离子流图和多级质谱图,从而对各色谱峰进行鉴定。结果从柴胡提取物中鉴定出23个化合物。结论 HPLC-MSn法可用于柴胡中皂苷类成分的结构分析,为建立快速、准确的质量评价方法提供了参考。     

Simultaneous determination of Saikosaponin a,c and d in different parts of wild bupleurum from Shanxi Province

Asa traditional Chinese herbal medicine exhibiting analgesic, fever-reducing and anti-inflammatory effects, Radix Bupleuri (Chai-Hu) is commonly used for the treatment of influenza, which is derived from the dried roots of Bupleurum chinense DC. and Bupleurum scorzonerifolium Willd. Among of diverse chemical components, saikosaponins are the key active components of the herb medicine. In the present study, we established a method of high performance liquid chromatography (HPLC) coupled with evaporative light scattering detection (ELSD) for simultaneous determination of saikosaponin a, c and d in root, stem, leaf and flower of Bupleurumchinense (B chinense) collected from different areas of Shanxi Province, China. The results from 16 samples of root, stem, leaf and flower of B chinense demonstrated that the total contents of the three saikosaponins in the root of B chinense collected from Dongshan Taiyuan, Xishan, Tianlongshan and Pangquangou were 4.26 mg/g, 3.22 mg/g, 4.23 mg/g and 3.05 mg/g, respectively. However, there was scarcely any saikosaponins in the stem, leaf and flower of B chinensecollected from above-mentioned areas. The method of HPLC coupled with ELSD was suitable for quality control of Radix Bupleuri. The result also confirmed that the root of B chinense was the best medicinal part.     

Cytotoxicity and anti-hepatitis B virus activities of saikosaponins from Bupleurum species

Saikosaponins, the main active constituents of Bupleurum spp., have been shown to possess immunomodulatory, hepatoprotective, anti-tumor and anti-viral activities. In this study, saikosaponins a, c and d were evaluated for cytotoxicity and anti-hepatitis B virus ( HBV) activities. Results showed that, with the exception of saikosaponins a and d, HBV-transfected human hepatoma cells (2.2.15 cells) cultured with saikosaponin c showed a significantly lower level of HBeAg in culture medium. Saikosaponin c also possessed activity in inhibiting HBV DNA replication; this inhibitory effect was not due to the cytotoxicity of saikosaponin c or its effect on 2.2.15 cell proliferation. Although saikosaponin d exhibited cytotoxicity on 2.2.15 cells, it failed to inhibit HBV multiplication. The cytotoxicity of saikosaponin d against HepG2 human hepatocellular carcinoma cells was due to the induction of apoptosis through the activation of caspases 3 and 7, which subsequently resulted in poly-ADP-ribose-polymerase (PARP) cleavage. DNA fragmentation was clearly noted at more than 6 h after HepG2 cells exposure to saikosaponin d. The present study concludes that saikosaponin c exhibits anti-HBV activity and saikosaponin d possesses potent cytotoxicity against human hepatocellular carcinoma cells.     

不同产地北柴胡质量的化学模式识别研究

目的:建立北柴胡药材质量评价的化学模式识别方法.方法:采用RP-HPLC法定量分析国内15个不同产地的北柴胡样品中三种柴胡皂苷的含量,系统聚类分析法对其进行化学模式识别研究.结果:15个产地的北柴胡样品按其质量等级划分为四类,其中山西太原和陕西宝鸡的北柴胡药材中指标成分含量较高.结论:该方法可用于北柴胡药材的质量评价.     

产地对北柴胡皂苷类物质含量及急性毒性影响的实验研究

目的对不同产地北柴胡药材全组分、醇-水提取物中皂苷类物质的含量和急性毒性大小进行比较研究,探讨产地对柴胡皂苷类物质含量与毒性的影响。方法运用UV法、HPLC法、经典急性毒性实验法,进行北柴胡药材全组分、醇-水提取物柴胡总皂苷和皂苷a的含量测定及急性毒性比较研究。结果不同产地北柴胡药材全组分柴胡总皂苷含量大小依次为：河北柴胡〉内蒙柴胡〉山西柴胡〉河南柴胡,皂苷a的含量为：河北柴胡〉内蒙柴胡、山西柴胡〉河南柴胡,其最大给药量（MLD）大小为：河南柴胡〉山西柴胡〉内蒙柴胡〉河北柴胡;不同产地北柴胡药材醇-水提取物总皂苷含量大小依次为：河北柴胡〉内蒙柴胡〉山西柴胡〉河南柴胡,皂苷a的含量为：河北柴胡〉山西柴胡〉内蒙柴胡〉河南柴胡,其最小致死量（MTD）为：内蒙柴胡〉山西柴胡〉河南柴胡〉河北柴胡。河北产地的北柴胡药材全组分、醇-水提取物中柴胡总皂苷及皂苷a含量均较其他产地北柴胡药材含量高,其对应的全组分MLD、醇-水提取物MTD均较其他产地北柴胡药材的小,毒性最大。结论产地对柴胡皂苷类物质含量与毒性有一定的影响,且柴胡毒性大小与皂苷类物质含量有一定的相关性。