首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
相似文献
 共查询到16条相似文献,搜索用时 171 毫秒
1.
目的 探讨屋尘螨变应原Der p2的4个T细胞表位融合肽对哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果。方法 30只雌性BALB/c小鼠随机分为3组,分别为阴性对照组(PBS组)、阳性对照组(哮喘组)以及Der p2 T细胞融合肽治疗组(Der p2 T组)。用屋尘螨粗提取液致敏小鼠建立哮喘模型,PBS组以PBS缓冲液代替,Der p2 T组分别于小鼠致敏第25~27天雾化致敏前30 min行背部皮下注射相应治疗蛋白。最后一次雾化激发24 h后,收集各组小鼠血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)。采用ELISA法检测小鼠BALF中IFN-γ、IL-4、IL-13以及血清中屋尘螨粗提取液致敏的特异性IgE、IgG2a抗体水平,并行肺组织切片HE染色。结果 哮喘组小鼠BALF中的嗜酸性粒细胞数量为(5.57±0.64)×10~5个/ml,高于PBS组[(0.50±0.30)×10~5个/ml](P0.01)和Der p2 T组[(3.45±0.36)×10~5个/ml](P0.01)。PBS组、哮喘组、Der p2 T组小鼠BALF中IFN-γ含量分别为(267.00±21.98)、(155.80±20.53)pg/ml和(234.40±24.46)pg/ml;与哮喘组比较,Der p2 T组小鼠BALF中产生了较高的IFN-γ水平(P0.01)。PBS组、哮喘组、Der p2 T组小鼠BALF中IL-4含量分别为(23.40±5.96)、(53.28±8.26)pg/ml和(30.00±5.50)pg/ml;与哮喘组比较,Der p2 T组小鼠BALF中IL-4含量显著降低(P0.01)。与哮喘组[(308.10±28.32)pg/ml]比较,Der p2 T组小鼠BALF中IL-13含量[(174.50±25.99)pg/ml]显著下降(P0.01);PBS组鼠BALF中IL-13含量为(95.99±31.14)pg/ml。肺组织切片显示,Der p2 T组小鼠肺部炎症较哮喘组明显减轻,且炎性细胞浸润显著减少、气道上皮结构重塑。结论 Der p2 T细胞表位融合肽可有效改善哮喘小鼠变态反应性气道及肺部炎症,可作为屋尘螨哮喘患者特异性免疫治疗的候选疫苗。  相似文献   

2.
目的 探讨空调隔尘网中尘螨过敏原与哮喘发病的关系。方法 分别从芜湖市区食堂、商场、酒店和居民家中空调器隔尘网上,及其附近空气中采集灰尘样本各10份。用ELISA法检测粉尘螨1类过敏原(Der f 1)、屋尘螨1类过敏原(Der p 1)的浓度及其灰尘提取液过敏原性。结果 芜湖市区食堂、商场、酒店和居民家中空调器隔尘网灰尘中的过敏原Der f 1浓度分别为1.52、1.24、1.31 μg/g 和1.46 μg/g ;Der p 1浓度分别约为1.23、1.12、1.16 μg/g 和1.18 μg/g;2种过敏原在开机1 h后的空气中浓度显著高于开机前(P < 0.05)。ELISA分析结果显示,灰尘提取液中过敏原能与尘螨过敏性哮喘小鼠的IgE抗体产生结合反应。结论 芜湖地区居民空调器隔尘网中含有尘螨1类过敏原,可诱发哮喘。  相似文献   

3.
在屋尘螨多种变应原中,Der p1和Der p2是研制屋尘螨变应原疫苗主要的特异性抗原,而Der p2由于较Der p1更稳定和耐降解正逐渐取代后者.传统的过敏原特异性治疗的周期长、易产生不良反应、患者依从性差,口服DNA疫苗可以消除上述困难,但义难以克服消化道中的各种屏障,利用纳米粒子包被DNA疫苗可以有效保护DNA疫苗不被降解,因此得到了广泛认可.本文就纳米粒子-DNA 疫苗治疗屋尘螨抗原过敏的研究进展作一综述.  相似文献   

4.
在屋尘螨多种变应原中,Der p1和Der p2是研制屋尘螨变应原疫苗主要的特异性抗原,而Der p2由于较Der p1更稳定和耐降解正逐渐取代后者.传统的过敏原特异性治疗的周期长、易产生不良反应、患者依从性差,口服DNA疫苗可以消除上述困难,但又难以克服消化道中的各种屏障,利用纳米粒子包被DNA疫苗可以有效保护DNA...  相似文献   

5.
目的 目的 探讨粉尘螨1类变应原重组融合表位对哮喘小鼠的免疫治疗效果。 方法 方法 将40只小鼠随机分为阴性 对照组、 哮喘组、 Der f 1治疗组和重组融合变应原Der f 1A治疗组等4组。哮喘组、 Der f 1治疗组和Der f 1A治疗组小鼠 用粉尘螨提取液于第1、 7、 14 d进行3次腹腔注射致敏, 并于第21 d开始雾化吸入激发, 持续7 d。其中治疗组于雾化吸 入前30 min, 分别用Der f 1、 Der f 1A进行特异性免疫治疗。对照组用磷酸盐缓冲液 (PBS) 进行腹腔注射和雾化吸入。完 成雾化吸入激发后, 计数支气管肺泡灌洗液 (BALF) 中白细胞总数; 观察肺组织病理切片; 检测BALF与脾细胞培养上清 液 (SCCS) 中IL?5、 IFN?γ和血清中特异性IgE、 IgG2a水平。 结果 结果 与哮喘组相比, 免疫治疗组小鼠肺部炎症明显减轻, 且 BALF中白细胞总数明显降低; 免疫治疗组小鼠BALF和SCCS中IL?5水平显著降低, IFN?γ水平则显著升高; 血清中变应 原的特异性IgE抗体水平显著降低, IgG2a抗体水平则显著升高 (P均< 0.01)。 结论 结论 粉尘螨1类变应原重组融合表位能 够有效减轻小鼠的哮喘症状, 为诊断和治疗过敏性哮喘奠定了基础。  相似文献   

6.
尘螨是最常见的室内变应原来源之一,诱导人IgE反应最主要的尘螨是屋尘螨和粉尘螨。为了解变应原IgE组分检测的临床诊断意义和作用,该文就Der p1、Der p2和Der p10的研究进展进行综述。  相似文献   

7.
目的 探讨尘螨主要变应原DNA疫苗对尘螨提取液诱导的小鼠肺部变应性炎症的免疫治疗作用。方法 分别构建表达Derp1和Derp 2的真核表达质粒pCMV Derp 1和pDerp 2 IRES Derp1。 30只BALB/c小鼠随机分为正常组 (6只 )、对照组 (12只 )、单质粒组 (6只 )和混合组 (6只 )。后三组分别用空白质粒、pDerp 2 IRES Derp 1或混合的pDerp 2 IRES Derp 1和pCMV Derp 1免疫 ,4周后用尘螨提取液致敏、激发 ,观察肺部炎症、计分、肺泡灌洗液 (BALF)细胞总数和分类计数 ;酶联免疫吸附法 (ELISA)检测BALF中白细胞介素 4 (IL 4 )和γ干扰素 (IFN γ)水平。结果 细胞总数和嗜酸细胞(EOS)计数 :混合组 [(6± 4 )× 10 5/ml、0 0 5± 0 0 4 ]和对照组 [(2 1± 13)× 10 5/L、1 80± 1 39]比较差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;IL 4水平 :混合组 [(16 8± 2 33)g/L]与对照组 [(5 38± 2 5 6 )g/L]比较差异有显著性 (P<0 0 5 ) ,各组间IFN γ比较差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论 尘螨主要变应原的DNA疫苗可有效抑制尘螨提取液诱导的肺部变应性炎症 ,能表达两个主要变应原的DNA疫苗其抑制变应性炎症效果优于只表达一种变应原的疫苗。  相似文献   

8.
目的克隆屋尘螨Der p23基因,表达和纯化目的蛋白并进行过敏原性分析。方法提取屋尘螨总RNA,对Der p23基因进行RT-PCR(逆转录酶聚合酶链反应)扩增,经限制性内切酶双酶切,酶切产物与表达载体pET-32a(+)重组,转化入感受态大肠埃希菌溶液中。挑取阳性单克隆菌落进行扩大培养,提取目的蛋白并进行Ni~(2+)柱亲和层析纯化,通过Western blot检测其过敏原性。通过BLAST、MEGA、SWISS-MODEL分析重组蛋白Der p23的同源性和三级结构。结果 Der p23基因片段大小约为282bp。大量表达后,SDS-PAGE电泳显示,纯化的重组蛋白Der p23的分子质量单位约为32ku,且以包涵体的形式存在于沉淀物中。Western blot显示该重组蛋白可与尘螨过敏患者血清发生反应,表明其具有过敏原性。BLAST和MEGA分析,Der p23与Der f23的氨基酸序列同源性为77%。Der p23蛋白二级结构主要有β折叠和转角结构,从中预测出5个抗原表位。结论克隆表达和纯化获得了具有过敏原性的Der p23蛋白,为尘螨过敏疫苗和诊断试剂的研制奠定了理论基础。  相似文献   

9.
目的 目的 探讨害嗜鳞螨Ⅱ类变应原Lep d2对尘螨致敏哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果。方法 方法 将30只SPF级 BALB/c小鼠随机分为PBS组、 哮喘组、 Lep d2治疗组, 于实验开始时及实验第7、 14 天用尘螨提取液对哮喘组及Lep d2治 疗组小鼠腹腔注射致敏, 第21天开始雾化吸入激发, 连续7 d, 第25~27天开始, Lep d2免疫治疗组于雾化前30 min用 Lep d2变应原进行免疫治疗, PBS组及哮喘组用PBS进行腹腔注射及雾化吸入。最后1次雾化激发24 h后, 收集支气管 肺泡灌洗液 (BALF) 和血清, 并进行脾细胞培养。采用HE染色观察各组小鼠肺组织病理变化; 采用ELISA法测定BALF 和脾细胞培养液上清中IFN?γ、 IL?5、 IL?13及血清中特异性IgE (sIgE)、 sIgG2a抗体水平。结果 结果 哮喘组及Lep d2治疗组 小鼠出现哮喘急性发作症状, PBS组未出现该症状。哮喘组肺部炎性细胞浸润明显, PBS组及Lep d2治疗组肺部炎症较 轻。Lep d2治疗组BALF和脾细胞培养液上清中IFN?γ浓度均高于哮喘组 (P均<0.01), 但IL?5和IL?13浓度则均低于哮 喘组 (P均<0.01)。Lep d2治疗组sIgE抗体水平低于哮喘组 (P<0.01); 但sIgG2a抗体水平高于哮喘组 (P均<0.01)。结 结 论 论 害嗜鳞螨Ⅱ类变应原Lep d2疫苗可有效减轻哮喘小鼠肺部炎症。  相似文献   

10.
目的 观察以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)材料为佐剂制备的重组屋尘螨2类变应原(rDer p 2)纳米微粒疫苗(DEPN)对小鼠过敏性气道炎症的影响,并探讨其免疫治疗机 制。 方法 制备PLGA-rDer p 2纳米粒子并鉴定其特性。40只BALB/c小鼠随机分为5组,A组(对照组)均给予生理盐水(100 μl)。B、C、D和E组腹部皮下注射屋尘螨粗浸液(10 μg)免疫小鼠致敏,然后分别用PBS(100 μl)、2 mg 空白PLGA粒子(empty PLGA,EP)、100 μg rDer p 2、2 mg的DEPN纳米疫苗(载有100 μg rDer p 2)皮下注射进行免疫治疗,连续免疫治疗3 d,1次/d,各组用rDer p 2(50 μg)滴鼻激发,激发后第2天剖杀,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)并对细胞进行总计数和分类计数;HE染色和PAS染色(Periodic Acid?鄄Schiff Stain)观察小鼠肺部组织炎症和支气管黏液分泌;用ELISA检测BALF和脾细胞培养上清的细胞因子(IL-4、 IFN-γ)和血清中变应原特异性IgG2a和IgE抗体浓度。 结果 B、C 组肺部呈明显的变态反应性炎症,D、E组变应原诱导的肺部嗜酸粒细胞浸润和黏液分泌比B、C 组显著减轻。BALF中的细胞总数B组比A组明显增多,分类细胞以中性和嗜酸粒细胞为主,超过50%。rDer p 2特异性IgE抗体水平,D组(0.93±0.04)和E组(0.77±0.10)均低于B组(1.14±0.10)(P<0.01);特异性IgG2a抗体水平,D组(1.02±0.01)和E组(1.17±0.46)均高于B组(0.14±0.01)(P<0.01)。在BALF中,D组[(55.60±3.79) pg/ml]和E组[(48.60±4.50) pg/ml]IL-4水平均低于B组[(78.90±6.07) pg/ml](P<0.01);IFN-γ水平E组[(68.50±2.87) pg/ml]显著高于B组[(27.30±3.51) pg/ml] (P<0.01)。脾细胞上清的IL-4水平,D组[(56.3±4.85) pg/ml]和E组[(40.2±4.36) pg/ml]显著低于B组[(81.20±6.84) pg/ml] (P<0.01);IFN-γ水平,E组[(70.20±3.85) pg/ml]显著高于B组[(34.60±2.25) pg/ml] 。 结论 DEPN免疫治疗可抑制小鼠肺部过敏炎症,其机制可能与调节Th1/Th2平衡有关。  相似文献   

11.
Analysis by one-dimensional (1-D) SDS-PAGE/Western blotting of whole mite extract (larval and adult stages) with sheep sera taken 0-84 days after infection with the sheep scab mite, Psoroptes ovis revealed a progressive IgE antibody response, with a dominant high molecular weight allergen (MW 180 kDa) detected early during infection. Further analysis by two-dimensional (2-D) SDS-PAGE/Western blotting with post-infection sera, revealed a more complex picture with numerous (> 20) IgE reactive spots. Trypsin digest and Maldi-ToF analyses of these spots identified two house dust mite allergen homologues, namely tropomyosin (Der p 10) and paramyosin (Der p 11), and analysis of a third spot indicated an apolipoprotein-like IgE reactive protein (Der p 14). Further 1-D and 2-D SDS/Western blotting, with specific antibodies to the house dust mite allergens Der p 10, 11, and to the IgE reactive peptide of the high molecular weight house dust mite allergen, Der p 14 (vitellogenin/apolipophorin), provided firm evidence for the presence of these three allergens in extracts of the Psoroptes mite. These studies show for the first time that homologues of the house dust mite 10, 11 and 14 group allergens are represented as immunodominant allergens of the sheep scab mite, and may represent important vaccine candidates.  相似文献   

12.
目的探讨海南变态反应性疾病患儿对尘螨和仓储螨的特异性IgE水平。方法对海南变态反应性疾病患儿进行13种常见变应原皮肤点刺和7种螨的体外特异性IgE检测。结果 121例患儿中对屋尘螨和粉尘螨的皮肤点刺阳性率为100%,而对热带无爪螨的阳性率为85.8%。7种螨的体外特异性IgE依次为屋尘螨99.2%、粉尘螨95.0%、热带无爪螨87.6%、家嗜甜螨79.7%、害嗜鳞螨67.8%、腐食酪螨59.5%和粗脚粉螨52.9%。对仓储螨过敏的患儿同时都对屋尘螨和热带无爪螨过敏,并且IgE水平更高。除热带无爪螨外,其他仓储螨的特异性IgE有很好的相关性。结论除屋尘螨和粉尘螨外,热带无爪螨也是海南地区的重要致敏原,其他仓储螨亦有可能引起慢性变态反应性疾病。  相似文献   

13.
目的探讨重组变应原Der p1 T融合蛋白对屋尘螨粗提液诱导的哮喘小鼠特异性免疫治疗的效果。方法将30只雌性BALB/c小鼠随机均分为3组,分别为对照组、哮喘组和Der p1 T融合蛋白免疫治疗组(SIT组)。哮喘组和SIT组小鼠分别在第0、7、14天给予腹腔注射屋尘螨粗提液200μl/鼠(蛋白含量10μg/200μl),对照组小鼠注射等量PBS。哮喘组、SIT组小鼠于第21天采用屋尘螨粗提液雾化激发(蛋白浓度为0.5μg/ml),30 min/d,连续7 d,观察并记录小鼠哮喘发作情况,对照组使用等量PBS雾化激发。SIT组小鼠于第21天雾化前0.5 h,腹腔注射Der p1 T融合蛋白(100μg/ml) 200μl进行特异性免疫治疗,连续7d,对照组、哮喘组注射等量PBS。各组小鼠于末次雾化激发后24 h内取眼球血,收集血清,气管插管收集肺泡灌洗液(BALF),ELISA检测血清中特异性IgE和IgG2a抗体水平及BALF中细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4 (IL-4)、IL-10和IL-17A的含量;流式细胞仪检测脾组织中Th1/Th2和Th17/Treg细胞群落的改变;HE染色镜下观察小鼠肺组织病理形态。采用SPSS 18.0统计软件进行统计学分析。结果各组小鼠雾化激发后,对照组小鼠仅出现短暂的轻微烦躁症状,哮喘组小鼠表现出明显的烦躁不安、喘息、呼吸加快加深,SIT组小鼠经免疫治疗后,有轻微的喘息症状,症状较哮喘组小鼠有所改善。ELISA检测结果显示,哮喘组小鼠血清中特异性IgE抗体含量为(31.49±4.32) IU/ml,高于对照组的(8.53±1.92) IU/ml和SIT组的(16.68±2.45) IU/ml (P<0.01);哮喘组小鼠血清中抗原特异性IgG2a抗体含量为(19.56±3.89)μg/ml,低于对照组的(42.43±2.07)μg/ml和SIT组的(36.96±5.04)μg/ml (P <0.01)。哮喘组小鼠IFN-γ和IL-10水平分别为(134.23±22.49)和(22.43±8.27) pg/ml,低于对照组的(212.36±33.21)和(72.84±21.42) pg/ml (P<0.05、0.01);SIT组小鼠IFN-γ和IL-10水平分别为(183.76±24.66)和(61.05±7.97) pg/ml,与哮喘组相比,差异有统计学意义(P<0.05或0.01)。哮喘组小鼠IL-4和IL-17A水平分别为(165.45±34.59)和(464.21±41.36) pg/ml,高于对照组的(21.31±5.26)和(115.74±30.82)μg/ml (P<0.01);SIT组小鼠IL-4和IL-17A水平分别为(64.15±17.33)和(271.61±27.07) pg/ml,与哮喘组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。流式细胞仪检测结果显示,哮喘组小鼠脾组织CD4^+T淋巴细胞中Th1和Treg细胞比例分别为2.8%和4.9%,较对照组的3.7%和10.3%显著降低(P<0.05、0.01);SIT组Th1和Treg细胞比例分别为3.1%和8.8%,较哮喘组小鼠的有所升高(P<0.05、0.01)。哮喘组Th2和Th17细胞比例分别为2.8%和2.2%,较对照组的1.0%和0.3%显著升高(P<0.01),SIT组Th2和Th17细胞比例分别为1.7%和0.6%,较哮喘组小鼠有所降低(P<0.01)。肺组织病理切片结果显示,哮喘组小鼠肺组织终末细支气管有明显炎性细胞浸润,支气管平滑肌纤维断裂,上皮细胞脱落;SIT组小鼠肺组织病理变化较哮喘组的有明显好转,支气管壁增厚减少,炎性细胞浸润情况得到改善。结论 Der p1T融合蛋白对哮喘小鼠的特异性免疫治疗有一定的效果。  相似文献   

14.
We assessed the influence of current indoor levels of fungi, house dust mite allergen (Der p 1), and cat allergen (Fel d 1) on sensitization and asthma in adults. A total of 485 adults answered a questionnaire and had skin prick tests and lung function tests. Dust and air samples were collected from their bedrooms. The dust was analyzed for Der p 1, Fel d 1, and fungal biomass (ergosterol). Fungal propagules were measured in air samples. Current asthma was defined as having wheezed during the past 12 mo plus bronchial hyperreactivity (BHR) to methacholine. High exposure to total airborne fungi was associated with increased BHR, but perhaps paradoxically with a lower risk of being sensitized to fungi. Ergosterol levels in floor dust were a risk factor both for being sensitized to fungi and having wheezed within the last year. High Fel d 1 levels in floor dust were found to increase the risk of being sensitized to cats and in beds to increase the risk of current asthma. Although Der p 1 levels in homes were high, people exposed to high Der p 1 levels in floor dust were less likely to be sensitized to house dust mites or to have wheezed within the past year. Current indoor levels of fungi and Fel d 1, but not Der p 1, influenced sensitization and asthma in adults with high dust mite exposure.  相似文献   

15.
目的 探讨粉尘螨Ⅲ类重组变应原(Der f3)诱导的小鼠哮喘模型的致敏效果。方法 30只6~8周龄雌性SPF级BALB/c小鼠随机分为PBS组(阴性对照组)、卵清蛋白(OVA)组(阳性对照组)和Der f3组(实验组),OVA组和Der f3组分别使用OVA和纯化Der f3蛋白于第0、7、14天进行腹腔注射致敏,于第21d开始雾化吸入,连续7d,PBS组则换成PBS进行腹腔注射和雾化吸入。最后一次雾化吸入24h后,分别观察肺组织病理变化、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的白细胞计数,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定BALF和脾细胞培养上清中IL-4、IL-2、IL-17和IFN-γ的含量及血清中IgG1、IgE抗体水平变化;结果OVA组和Der f3组小鼠肺部支气管、血管粘膜下及周围肺组织有明显的炎性细胞浸润、支气管上皮细胞部分断裂及脱落,血管壁明显水肿等,而PBS组未见明显病理改变;Der f3组的BALF中白细胞总数[(19.99±1.03)×106个/ml]及嗜酸性粒细胞(EOS)[(1.81±0.07)×106个/ml]计数均明显高于PBS组(P<0.01);与PBS组相比:BALF中IL-4 [(80.99±9.06) pg/ml]、IL-17 [(209.69±31.86) pg/ml]呈高水平表达(P<0.01),而IL-2 [(8.29±1.27) pg/ml]和IFN-γ [(55.04±18.85) pg/ml]含量则显著下降(P<0.01);上述指标在脾细胞培养上清中出现类似的变化。Der f3组血清中IgE [(31.92±2.68) U/ml]、IgG1 [(16.46±4.32) μg/ml]的含量表现为Th2型反应增强趋势;但OVA组和Der f3组间所有指标差异均无统计学意义(P>0.05);结论 粉尘螨重组Der f3蛋白可成功建立小鼠变态反应性气道及肺部炎症动物模型。  相似文献   

16.
The polarization of the immune response toward a Th2 or a Th1 profile can be mediated by dendritic cells (DCs) following antigen presentation and interaction with T cells. Costimulatory molecules such as CD80 and CD86 expressed by DCs, the polarizing cytokine environment during DC--T-cell interaction, and also the nature of the antigen are critical in the orientation of the immune response. In this study, the effect of the cysteine protease Der p 1, one of the major allergens of the house dust mite Dermatophagoides pteronyssinus, on these different parameters was evaluated comparatively on monocyte-derived DCs obtained from healthy donors, from pollen-sensitive patients, or from patients sensitive to Dermatophagoides pteronyssinus. Results showed that Der p 1 induced an increase in CD86 expression only on DCs from house dust mite--sensitive patients. This was also associated with a higher capacity to induce T-cell proliferation, a rapid increase in the production of proinflammatory cytokines, tumor necrosis factor--alpha and interleukin (IL)-1 beta, and the type 2 cytokine IL-10. No changes in the release of IL-12 p70 were induced by Der p 1. Finally, purified T cells from house dust mite-sensitive patients stimulated by autologous Der p 1--pulsed DCs preferentially produced IL-4 rather than interferon-gamma. These effects were abolished in the presence of the inactive precursor of Der p 1 (ProDer p 1). Taken together, these data suggest that DCs from house dust mite--sensitive patients, in contrast to DCs from healthy donors and from pollen-sensitive patients, exposed to Der p 1 play a pivotal role in the enhancement of the Th2 response associated with the allergic reaction developed in response to house dust mite exposure. (Blood. 2001;98:1135-1141)  相似文献   

设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号