蛋白转导结构域介导BCR/ABL对慢性粒细胞白血病患者T细胞的活化作用

目的　研究蛋白转导结构域 (PTD)介导的BCR ABL融合蛋白对慢性粒细胞白血病(CML)患者T细胞的特异性活化作用。方法　利用基因工程技术将PTD基因与CMLb3a2bcr abl基因融合并原核表达 ,纯化的PTD BCR ABL融合蛋白与CML患者外周血单个核细胞 (PBMNC)体外共孵育 ,用流式细胞仪分别检测CD4+ 、CD8+ T细胞的早期活化抗原CD6 9的表达。结果　PTD BCR ABL抗原体外激活CD8+ T细胞的最佳浓度为 10 0 μg ml,时间为 3d。在此刺激条件下 ,15例CML患者中 ,10例表现CD8+ T细胞早期活化 ,CD6 9表达率为 (15 .0 1± 3.75 ) % ;4例表现CD4+ T细胞早期活化 ,CD6 9表达率为 (10 .32± 3.0 8) % ;其中有 3例CD8+ 和CD4+ T细胞同时活化 ;而对照的BCR ABL抗原刺激组无一例表现CD8+ 或CD4 + T细胞活化 ,其CD6 9表达率分别为 (1.36± 0 .31) %和 (1.4 1± 0 .4 3) % ,与PBS空白对照组相比差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　PTD能将外源性BCR ABL抗原转导入抗原呈递细胞内 ,加工呈递后激活抗原特异性CD8+ 及CD4+ T细胞。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者外周血T淋巴细胞亚群及活化分子表达的研究

目的　探讨阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)患者T淋巴细胞的功能及活化状态与PNH临床的关系。方法　应用流式细胞术及免疫磁珠分选术 ,测定了 18例PNH患者外周血单个核细胞 (PBMNC)及CD59+ 和CD59-PBMNC中CD3 + 、CD4+ 及CD8+ 细胞表型 ,并测定了新诊断的未经治疗的 6例PNH患者外周血中NK细胞及CD4+ CD2 8+ /CD4+ 、CD8+ CD2 8+ /CD8+ 、CD4+ HLR DR+ /CD4+ 、CD8+HLR DR+ /CD8+ 及CD8+ CD3 8+ /CD8+ 淋巴细胞表面分子表达比值。结果　PNH患者PBMNC中CD3 +CD8+ /CD3 + CD4+ 细胞比值增加 ,为 1.2 2± 0 .5 1,对照组为 0 .86± 0 .2 7,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。分选后PNH患者CD59-PBMNC中CD3 + CD8+ /CD3 + CD4+ 细胞比值增加 ,为 2 .31± 1.5 6 ,CD59+PBMNC为 0 .6 2± 0 .2 7,两者比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。CD3 + CD8+ /CD3 + CD4+ 细胞比值与骨髓衰竭 (BMF)的级差相关分析呈正相关。PNH患者CD4+ CD2 8+ /CD4+ 细胞比值明显减少 ,为 0 .5 2±0 .11(对照为 1.0 0± 0 .0 6 ) ,而CD8+ HLR DR+ /CD8+ 增加 ,为 0 .4 5± 0 .2 6 (对照为 0 .10± 0 .0 6 )。结论　PNH患者CD3 + CD8+ /CD3 + CD4+ 细胞比值增加 ,病变表型细胞更易发生在CD8+ 细胞群中。CD4+ 细胞中CD2 8+ 辅助刺激因     

骨髓增生异常综合征表皮生长因子受体的表达及其与细胞凋亡的关系

目的　探索骨髓增生异常综合征 (MDS)造血细胞中表皮生长因子受体 (EGFR)表达及其与细胞凋亡的关系。方法　取 18例MDS患者骨髓有核细胞经离心涂片机制片 ,用免疫酶标记方法(碱性磷酸酶 抗碱性磷酸酶系统 ,APAAP)及TdT介导的dUTP缺口末端 (荧光素 )标记 (TUNEL)法先后在同一标本上检测EGFR表达和凋亡信号。 9名正常人骨髓作对照。另外 ,18例MDS中有 15例、9名正常人中有 6名经流式细胞仪分选CD3 4+细胞并制备涂片后按上述方法进行EGFR和凋亡检测 ,并分析两者间的关系。结果　①MDS骨髓细胞EGFR表达 [(38.6± 2 4.6 ) %]高于正常对照 [(18.1±14 0 ) %](P <0 .0 5 ) ;②MDS细胞凋亡主要发生在EGFR阴性细胞 (16 .1%) ,EGFR阳性细胞中凋亡细胞仅占 1.4%(P <0 .0 1) ,EGFR表达与细胞凋亡呈负相关 (r =- 0 .70 1;tr=3.6 0 ;P <0 .0 1) ;③CD3 4+细胞EGFR表达阳性率RAEB RAEB t CMML组高于RA RAS组 ,分别为 (2 0 .6± 2 7.9) %和 (8.9±11 8) %,但差异无显著性 ,细胞凋亡率RAEB RAEB t CMML组低于RA RAS组 ,分别为 (18.2± 12 5 ) %和 (4 5 .2± 2 0 .5 ) %(P <0 .0 5 )。结论　MDS造血细胞过度表达EGFR。EGFR表达增高可能预示MDS的恶性增殖倾向并通过某种途径抑制细胞凋亡。因此抗EGFR治疗有希望成为治疗MDS     

正常人骨髓、脐血及动员后外周血CD_(34)~ 细胞粘附分子的研究

目的　探讨正常人骨髓、脐血及动员后外周血CD3 4 细胞粘附分子的表达及外周血干细胞动员的可能机制。方法　采用CD3 4 MultiSortKit免疫磁珠分离系统 ,分离纯化出正常人骨髓、脐血及动员后外周血CD3 4 细胞 ,流式细胞术检测其纯度 ,选择与CD3 4 细胞相关的粘附分子CD4 4、CD11a、CD18、CD4 9d、CD54 、CD58及CD62L,进行免疫荧光标记及短期液体培养后再行免疫荧光标记 ,流式细胞术检测。结果　动员后外周血CD3 4 细胞粘附分子表达CD4 4为 (92 .7± 2 .2 ) % [骨髓 (93.1± 2 .3) % ]、CD11a为 (5 6 .3± 6 .0 ) % [骨髓 (6 1.8± 7.8) % ]、CD18为 (6 5 .2± 6 .0 ) % [骨髓 (70 .6± 7.5 ) % ]、CD4 9d为 (39.4±7 2 ) % [骨髓 (6 6 .9± 5 .1) % ]、CD54 为 (2 0 .9± 4.1) % [骨髓 (2 4.1± 3.8) % ]、CD58为 (77.9± 5 .8) % [骨髓(81.9± 5 .6 ) % ]及CD62L为 (4 5 .9± 5 .6 ) % [骨髓 (6 3.9± 4.3) % ],其表达均较骨髓为低 ,尤以CD4 9d和CD62L为著。脐血CD3 4 细胞CD11a为 (5 5 .5± 6 .5 ) %、CD18为 (6 6 .7± 7.5 ) %、CD4 4为 (90 .3± 4.0 ) %、CD4 9d为 (6 3.7± 6 .7) %、CD62L为 (5 0 .8± 5 .9) % ,其表达亦较骨髓为低 ,尤以CD62L为著 ,但脐血CD54 的表达[(2 9.1± 4.9) % ]较骨     

转染反义VEGFl21 cDNA恢复K562细胞β1整合素的活化功能

为了探索血管内皮细胞生长因子 (VEGF)在K5 6 2细胞 β1整合素活化功能中的作用 ,利用转染正义 (S)、反义 (As)VEGF12 1cDNA及空载体 (V ,pcDNA3 )的不同K5 6 2细胞株 ,通过流式细胞术检测其粘附分子VLA 4(CD4 9d/CD2 9)和VLA 5 (CD4 9e/CD2 9)表达及 β1整合素的可活化性。结果显示 :K5 6 2 /V ,K5 6 2 /S和K5 6 2 /As细胞 β1整合素VLA 4 (CD4 9d/CD2 9)与VLA 5 (CD4 9e/CD2 9)的表达率均在 92 %以上 ,但经 β1整合素活化剂 8A2抗体激活后 ,K5 6 2 /As细胞可活化表位 9EG7表达率较K5 6 2 /V细胞明显提高 (75 .6± 10 .5vs 4 1.2± 2 .1% ,P <0 .0 1)。结论 :转染反义VEGF12 1cDNA能增加K5 6 2细胞 β1整合素的可活化性     

血透中枸橼酸钠和肝素对静脉穿刺留置导管封管的比较研究

目的　比较血透中枸橼酸钠和肝素对静脉穿刺留置导管封管的效果。方法　 4 3例患者随机分成两组 ,研究组 (A组 ) 2 1例 ,对照组 (B组 ) 2 2例。A组用 5 %的枸橼酸钠 1.2毫升注入留置导管动静脉管腔 ,B组用 1%的肝素。结果　导管留置时间、导管堵塞、出血、血流量、静脉压A、B组分别为(31± 7)天Vs(2 8± 6 )天 ,9%Vs 9% ,5 %Vs 9%。 (2 18± 2 1)ml/minVs(2 2 0± 2 0 )ml/min ,(80± 14 )mmHgVs(76± 13)mmHg。组间比较 P >0 .0 5。结论　枸橼酸钠封管安全、有效 ,为中心静脉置管封管的又一好方法     

289例中晚期肿瘤病人外周血T淋巴细胞表型分析

目的 :分析中晚期肿瘤病人外周血T淋巴细胞亚群测定值的特点 ,探讨其影响因素及临床意义。方法 :采用流式细胞术检测 2 89例中晚期肿瘤病人外周血T淋巴细胞亚群水平。结果 :2 89例中晚期肿瘤病人外周血T淋巴细胞亚群测得值分别为CD3+ 细胞 5 9 0 7± 14 2 8,CD4 + 2 4 70± 10 70 ,CD8+ 33 4 5± 12 72 ,CD4 /CD80 89± 0 5 6。除性别对CD3表达的影响具有统计学意义外 (P =0 0 0 3) ,其余指标不受患者性别及年龄的影响 (P >0 0 5 )。结论 :中晚期肿瘤患者普遍存在T淋巴细胞介导的细胞免疫功能下降。     

脑梗塞患者活化血小板的检测

目的 :检测脑梗塞患者体内活化血小板的含量。方法 :用流式细胞仪 (FCM)检测活化血小板标志物CD6 2 p、CD6 3的含量 ,并与正常对照组比较。结果 :脑梗塞患者血小板CD6 2 p、CD6 3的表达量为 47 2 6± 19 6 8、5 2 14± 16 89,均明显高于正常对照组CD6 2 p,CD6 3的表达量 4 5 1± 3 16 ,6 73± 2 6 7(P <0 0 1)。结论 :脑梗塞患者血栓的形成与血小板的活化密切相关 ,且活化血小板的检测可以作为脑梗塞早期诊断一项较特异的指标。     

体外构建人巨核祖细胞/胃癌细胞融合体生成血小板的研究

目的构建脐血巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体产生功能性血小板。方法免疫磁珠分选人脐带血CD34+细胞,通过RPMI1640培养基体外静态培养,加入定向分化因子TPO、FL、IL-3、IL-6产生巨核祖细胞;复苏胃癌SGC7901细胞;采用聚乙二醇(PEG)化学融合法制备巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体,HAT筛选系统分选融合细胞,继续培养;流式细胞仪检测培养孔上层液中类血小板颗粒表面CD41、CD62p表达,血小板聚集试验、粘附试验检测血小板功能,瑞氏染色观察颗粒形态。结果免疫磁珠分选的CD34+细胞培养7 d可增殖80倍,与胃癌SGC7901细胞株经PEG化学融合法融合成巨核祖细胞/胃癌细胞,融合率为(36.91±1.08)%;融合细胞培养10 d可增殖4倍,产生(6.1±1.21)×106/ml的类血小板颗粒;瑞氏染色后观察,其形态与正常血小板相似。类血小板颗粒表达血小板特异性标志CD41及血小板活化后标志CD62p,与正常血小板比较,CD62p在类血小板颗粒中表达略降低:正常血小板(74.11±1.71)%、类血小板颗粒(71.04±1.64)%;CD41表达明显降低:正常血小板(88.83±3.26)%、类血小板颗粒(72.51±2.79)%(t=6.59,P<0.05);聚集试验表明具有正常血小板相似的聚集功能;血小板粘附试验:正常血小板(40.43±1.63%)、类血小板颗粒(35.53±4.06%)。结论通过PEG细胞化学融合法构建的脐带血巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体能产生功能性血小板。     

急性白血病Ki-67的表达研究

目的　检测急性白血病Ki 6 7的表达 ,探讨细胞增殖在白血病发生中的作用。方法　运用免疫组织化学技术检测Ki 6 7在 2 5例急性白血病患者骨髓组织切片上的Ki 6 7表达 ,以良性血液病患者作为正常对照组。结果　 2 5例急性白血病Ki 6 7表达水平 [(34.18± 17.2 0 ) % ]明显高于对照组 [(12 .17± 6 .2 3) % ,P <0 .0 1];急性淋巴细胞性白血病的Ki 6 7表达 [(31.19± 14 .2 5 ) % ]与急性非淋巴性白血病 [(36 .2 8± 11.87) % ,P>0 .0 5 ]无差异 ;缓解的白血病患者Ki 6 7水平接近对照组。结论　增殖作用增强可能在白血病发生发展中起重要作用 ,Ki 6 7可作为细胞增殖的良好标志。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

恶性血液病患者配偶生活质量评估

目的了解恶性血液病患者配偶的生活质量,提高其生活质量,以更好地配合患者治疗。方法应用生活质量综合评定问卷(GQOLI)对83例恶性血液病患者配偶及正常对照组人群进行生活质量评估。结果恶性血液病患者配偶的GQOLI总分及躯体功能、心理功能、社会功能和物质生活维度得分均较正常对照组显著降低(P<0.01或P<0.05),其中女性配偶GQOLI总分及心理功能和社会功能维度得分较男性配偶显著降低(P<0.01或P<0.05)。结论恶性血液病患者配偶的生活质量较正常人群下降,其中女性配偶生活质量下降更明显,需要积极进行心理干预。