污水中气单胞菌分离方法的研究

我们对480件污水标本进行了单胞菌的分离,并对直接增菌法和前增菌法做了比较,具体做法:直接采样法采取的标本,37℃培养24h;前增菌采样法采取的标本,先放入37℃培养4～6h,然后从每件前增菌培养物中取出0.5～1ml,转种于10ml 普通氨苄青霉素硷性胨水中,37℃培养过夜。从上述增菌培养物中,用接种环划线分离于氨苄青霉素SS 琼脂平板上。37℃培养24h,观察结果。挑选1～2mm 直径大小,不发酵乳糖的菌落;半透明或不透明。但也要注意少数发酵乳糖的菌落。将挑选的可疑菌落,接种在0.1%去氧胆酸钠琼脂平板上,37℃培养后,做氧化酶试验,阳性者,做甘露醇、肌醇发酵试验。甘露醇阳性,肌醇阴性者,初步定为气单胞菌。然后做34项生化试验和10项生化反应作种间鉴别。两种分离方法,从240件标本中,直接增菌法检出168件阳性标本,阳性率为70.4%;而前增菌     

两种检测方法在沙门菌初筛中的应用比较

[目的]比较常规检测方法和新方法在沙门菌初筛中的阳性检出率。[方法]将健康体检人员的肛拭样品用SF增菌液增菌后转种WS平板、用SBG增菌液增菌后转种CHROMagar沙门菌显色平板,之后各挑取相应可疑菌落进行生化反应和血清凝集试验进行鉴定。[结果]6676件体检肛拭标本用两种方法分离后,SBG-CAS分离和SF-WS分离阳性检出率分别是1.03%和0.24%,用SBG-CAS分离的方法优于SF-WS分离的方法。[结论]用SBG增菌液增菌后转种CHROMagar沙门菌显色平板的方法,其阳性检出率明显高于SF增菌液增菌后转种WS平板,并且在平板上的菌落特征明显,极易辨认,方法也较易掌握。     

三种分离志贺氏菌属培养基单独和联合应用的效果比较

志贺氏菌属有多种选择性培养基 ,为提高志贺氏菌的检出率 ,我室于 1999年对沙门氏菌属志贺氏菌属琼脂 (ＳＳ) ,ＨｅＲｔｏｅｎ肠道菌琼脂 (ＨＥ)和伊红美兰琼脂 (ＥＭＢ)三种培养基进行了临床应用效果的比较 ,现报告如下。1　标本来源和方法将门诊腹泻病人粪便标本 2 10份分别同时接种于ＳＳ、ＨＥ和ＥＭＢ培养基平板上 ,36℃过夜培养 ,从每个平板上挑取 3～ 5个可疑菌落 ,分别转种克氏双糖 ,取可疑菌落做血清学鉴定。2　结果与分析　　表 1　 2 10份标本在三种培养基上检出志贺氏菌情况培养基 志贺氏菌检出阳性数 %ＳＳ/ＥＭＢ/ＨＥ联合 49…     

自生活饮用水中检出绿脓假单胞菌的调查

２００１年８月 ,在检测某电厂生活饮用水的委托样本时 ,我们发现了一种可疑菌 ,经反复验证 ,最后证实为绿脓假单胞菌。实验方法按国标ＧＢ４７８９—１９９４《食品卫生微生物检验》进行菌落总数测定。在营养琼脂培养４８ｈ后 ,发现培养基呈绿色的可疑菌落。将上述可疑菌于３７℃、２４ｈ分纯于普通平板 ,染色镜检 ,后转种柠檬酸盐培养基、硝酸盐培养基 ,明胶液化 ,做氧化酶试验 ,并置４２℃进行生长实验。水样菌落总数和可疑菌检验结果见表１。可疑菌的鉴定 :涂片染色 ,镜检为Ｇ-小杆菌 ,无芽胞 ,无荚膜。在普通琼脂平板上培养２４ｈ后 ,…     

自花生牛轧糖果中分离出EIEC-O152丧失毒力株

我们于１９９９年４月，从一份花生牛轧糖果中分离出一株ＥＩＥＣ—Ｏ１５２： Ｋ？丧失毒力株。该菌型别以丢失侵袭性质粒为特征在食品中的检出极为少见，现将结果报告如下：１结果１．１细菌分离鉴定 将检样接种于肠道增菌向扬中，经４２℃、２４ｈ增菌后，转种于ＳＳ、ＥＭＢ平板。本菌在增菌肉汤培养基中呈均匀混浊生长；在ＳＳ培养基上３７℃、２４ｈ后，形成直径１～２ｍｍ左右，粉色浑浊菌落，在ＥＭＢ平板上形成粉紫色浑浊菌落。分离菌经涂片染色、镜检为革兰氏阴性无芽胞杆菌。１．２生化反应 本菌氧化酶阴性，能还原硝酸盐，葡萄…     

某医院疾杆菌菌群的分布和耐药分析

细菌性痢疾 (简称菌痢 )是常见的肠道传染病 ,在我国的城乡发病率仍然很高。为了解无锡市近年来痢疾杆菌的菌群分布及耐药情况 ,以便为菌痢的防治提供一些对策 ,作者对菌痢患者的粪便标本进行一系列检查 ,现总结如下。1　材料和方法1 1　菌株来源　本院收治的各类腹泻病患者 ,具有典型或不典型痢疾症状 ,经细菌学检查证实为菌痢。1 2　检查方法　将标本 (病人粪便 )用划线法接种到ＷＳ平皿上 ,进行分离培养 ,同时将其转种ＧＮ增菌液增菌后将其接种于ＷＳ平皿 ,放入 37℃培养箱内培养 18～ 2 4ｈ ,根据菌落形态大小对可疑菌落进行涂片、革兰…     

感染性腹泻患者病原学监测结果报告

感染性腹泻病是我国急性传染病中发病数多，流行面广的一组疾病。为掌握我市腹泻病原学情况，我们于1995～1996年对市区医院肠道门诊腹泻患者进行了病原学监测。现将结果报告。1材料与方法1．1将保存于C──B运送培养基送至实验室后按不同要求接种SS琼脂、碱性陈水、氨苄青霉素碱性胨水．37℃培养过夜后SS平板则挑选可疑菌落转种三糖铁按常规法分高鉴定各病原菌，碱性胨水则转种4号琼脂分离鉴定致病性弧菌；氨苄青霉素碱性际水则转种氨苄青霉素SS琼脂按常规法分离气单胞菌、铜绿假单胞菌。1．2志贺氏菌属从沙门氏菌属诊断血清由兰州生物…     

血平板辅助检出急性腹泻患者粪便标本中O139霍乱弧菌

目的研究在使用广谱抗生素治疗后的急性腹泻患者粪便标本中,分离培养霍乱弧菌的方法。方法将使用抗生素治疗后的急性腹泻患者粪便标本在接种碱性蛋白胨水和TCBS平板、庆大霉素平板等进行常规细菌分离培养的同时,接种血平板辅助培养,于37℃培养10 h~12 h后挑取可疑菌落再转种碱性琼脂平板,于37℃继续培养。结果接种血平板37℃培养10 h后形成直径2 mm左右的可疑菌落,再转种碱性琼脂平板37℃继续培养10 h后分离得到O139霍乱菌株,而直接接种碱性蛋白胨水、TCBS平板和庆大霉素平板等常规方法分离培养12 h仍无菌生长。结论利用血平板辅助培养可提高使用广谱抗生素治疗后的急性腹泻患者粪便标本中霍乱弧菌分离培养成功率,减少因抗生素抑菌作用而导致的漏检。     

从腹泻病人大便检出1株与肠出血性大肠菌O157交叉凝集的舒伯特气单胞菌

20 0 0年 7月 ,从就诊重症腹泻患儿稀便中检出 1株与肠出血性大肠菌 (ＥＨＥＣ)Ｏ157交叉凝集的舒伯特气单胞菌。将粪便按常规接种于ＳＳ、麦康凯琼脂和血琼脂平板 ,35℃ 2 4ｈ后 ,均生长出扁平、无色、中等大小菌落的优势菌 ,血琼脂平板呈溶血。挑取单个菌落染色为革兰氏阴性杆菌 ,动力活泼。菌株氧化酶、触酶阳性 ,葡萄糖产酸不产气 ,麦芽糖、明胶、甘露糖、Ｖ Ｐ、枸橼酸盐、硝酸盐还原、赖氨酸脱羧酶、精氨酸脱羧酶阳性 ,甘露醇、靛基质、尿素、七叶苷、鼠李糖、乳糖、蔗糖、纤维二糖、阿拉伯胶糖、水杨素、山梨醇、肌醇、鸟氨酸脱羧酶…     

脐部感染所致新生儿败血症37例病原菌检测

为了解引起新生儿败血症的病原菌,以便合理应用抗菌药物,1998年对莱阳中心医院收治的37例因脐部感染引起新生儿败血症患儿进行脐部分泌物和血液培养,结果如下:1　材料与方法在患儿未用抗菌药物前,无菌手续抽取股静脉血5ｍｌ,注入加有50ｍｌ增菌液的三角烧瓶中,同时取脐部分泌物接种血平板,37℃培养。将血增菌瓶放于35℃温箱中,观察2～4ｄ,培养基变混、溶血时转种血平板,37℃培养24ｈ后与分泌物血平板同时观察菌落。取血平板上的单个菌落,按全国临床检验操作规程进行鉴定。药敏试验用Ｋ-Ｂ法,药敏纸片购自浙江省军区后勤部卫生防疫检验所。2…     

威隆气单胞菌引起严重腹泻一例

到目前为止 ,威隆气单胞菌 (Ａ .ｖｅｒｏｎｉｉ)引起人类肠道致病极为罕见。我院于 1999年 9月 17日从 1例严重腹泻患者的脓血便中分离出该菌。1.病历简介 :患者男性 ,30岁。当天出现发热、腹痛、腹泻、恶心、呕吐 ,脓血便等症状 ;经大便镜检 :红细胞 ( ) ,白细胞 ( ) ;初诊为细菌性腹泻。2 .细菌学鉴定 :将脓血便接种于血平板、麦康凯、ＳＳ培养基及碱性蛋白胨水增菌 6～ 8ｈ后分离于 4号琼脂平板35℃ 18ｈ培养。在 4号平板上菌落生长快 ,大而纯 ,呈中心黑色 ,边缘无色菌落 ,并排除霍乱弧菌 (埃尔托 )。接种在6 .5 %ＮａＣｌ中不生长。革…     

从健康带菌者粪便中检出3株产H2S大肠埃希氏菌的报道

通常实验室分离出的大肠埃希氏菌 ,多是不产H2 S的菌株。 1999～ 2 0 0 1年在从业人员健康带菌者调查中 ,检出 3株产H2 S的大肠埃希氏菌。1　对象与方法1 1　菌株来源　 3株菌分别于 1999～ 2 0 0 1年间 ,由福州市从业人员健康带菌者粪便分离检得 ,菌株编号分别为 99177(A)、2 0 0 0 2 9(B)、2 0 0 1139(C)。1 2　分离与鉴定　从业人员肛拭子经亚硒酸盐胱氨酸增菌液 (SC)增菌后 ,分离培养于沙门氏、志贺氏菌属琼脂 (SS)或胆硫乳琼脂 (DHL)平板 ,挑取红色及混浊不透明的菌落 ,分别接种于克氏双糖铁及赖氨酸 动力琼脂 ,并对分离菌进行…     

龙岩市5类食品中空肠和结肠弯曲菌监测

目的了解龙岩市部分市售食品中空肠和结肠弯曲菌的污染状况。方法在龙岩市新罗区北市场和韭菜园市场采集市售生畜禽肉类、生牛奶、生食蔬菜、鸡蛋、水产品5大类共180份食品样品。按照WHO推荐并作为《全国食品污染物监测相关实验室操作手册(食源性致病菌部分)》的弯曲菌检验方法,用加有生长促进剂和特定配方抗生素的布氏肉汤增菌,将增菌液划线接种至弯曲菌选择性琼脂CCDA平板,挑取可疑菌落转种在哥伦比亚血琼脂平板上纯化。纯化的可疑菌落做革兰染色镜检,湿片观察动力,同时做过氧化氢酶试验、氧化酶试验、马尿酸盐水解试验、吲哚乙酸酯试验等生化鉴定。结果检测5类180份食品,检出11株弯曲菌,检出率6.1%。其中生肉中检出10株,阳性率为为11.8%;水产品中检出1株,阳性率为3.3%。个别生肉MPN值达240 cfu/100 g。11株弯曲菌对1种抗生素的耐药性为54.5%,对2种抗生素的耐药性为36.4%,对3种抗生素的耐药性为18.2%。结论龙岩市生肉、水产品存在弯曲菌的污染。应加强禽畜养殖、屠宰、运输和加工过程的卫生管理,防止交叉污染,有效地预防和控制弯曲菌感染的暴发和流行。同时做好抗生素的管理和耐药性监测。     

鲜乳中单核细胞增生李斯特氏菌的检测

单核细胞增生李斯特氏菌(以下简称单增李氏菌)在自然界中广泛存在,该菌污染食品后可引起食物中毒。我们对鲜乳中单增李氏菌进行了检测。现将结果报告如下。1　材料与方法11　样品来源　鲜乳来自绍兴市各个乳品加工厂。12　增菌培养基为蛋白胨水(ｐｗ)、ＥＢ肉汤、ＬＢ1肉汤、ＬＢ2肉汤,选择性培养基为改良ＭｃＢｒｉｄｅ琼脂,以上培养基由浙江省卫生防疫站提供。微量生化培养基由浙江省军区后勤部提供。羊血琼脂平板自制。13　检验方法　增菌,鲜乳经ｐｗ及ＬＢ130℃24ｈ增菌后,取1ｍｌｐｗ培养物转种于50ｍｌＥＢ增菌液中,另取1ｍｌＬＢ1培…     

从某餐厅备用土豆丝中检出温和气单胞菌

20 0 0年 9月 ,济南市某餐厅发生一起食物中毒 ,虽因报告不及时 ,未能采集到中毒剩余食品 ,但从中毒餐次烹调菜肴所剩的土豆丝中检出有致病力的温和气单胞菌 ,现报告如下。1　菌株的分离鉴定与动物试验1.1　分离鉴定　将采集到的土豆丝 ,经营养肉汤、ＳＣ培养后 ,在ＳＳ平板上分离出较纯的可疑菌落。在对分纯菌落作出氧化酶试验及触酶试验阳性的基础上 ,将该菌落划线接种于ＢＵＧ平板 ,用Ｂｉｏｌｏｇ细菌鉴定仪(美国 )进行鉴定 ,同时做常规生化反应。1.2　动物试验　试验用小白鼠 (昆明种 )、家兔均由山东省卫生防疫站实验动物室提供。1.2 …     

沙门菌显色培养基在食品检测中的应用

[目的]了解沙门菌显色培养基检测食品沙门菌分离和初步鉴定的作用。[方法]将100株实验室保存的沙门菌及非沙门菌接种CAS和DHL培养基平板进行对比。同时取178份食品样品增菌后接种CAS和DHL平板做比较试验。[结果]沙门菌在CAS平板上呈现特定而典型的紫红色菌落,非沙门菌呈蓝色或无色菌落,食品样品中沙门菌的检出率为3.37%(CAS)和1.69%(DHL)。[结论]采用CAS选择性平板分离沙门菌具有直观易鉴别、减轻工作量和检出率较高等优点,适用于暴发性沙门菌感染引起的食物中毒检测。     

从变形杆菌蔓延生长中分离气单胞菌的方法探讨

目的了解不同培养基对变形杆菌、气单胞菌的生长情况的影响,为2种细菌在混合感染时分离纯化气单胞菌提供方法依据。方法选取实验室常用平板培养基分别划线接种变形杆菌和气单胞菌进行分离培养,观察2种细菌在不同平板上菌落生长形态和生化反应结果。结果实验室常用普通培养基对变形杆菌蔓延生长无抑制作用;接种SS、TCBS、EMB、沙门菌显色培养基、弧菌显色培养基能够抑制变形杆菌蔓延生长,但对气单胞菌生长有抑制作用;XLD平板能够有效抑制变形杆菌蔓延生长,变形杆菌在XLD平板上呈现中等大小、黄色、中心有黑色或无黑色菌落,而XLD平板对气单胞菌无抑制,培养基上出现中等偏大、无色半透明的扁平状菌落。结论变形杆菌和气单胞菌混合生长时,接种XLD平板得到2种不同生长形态的菌落,从而可以有效分离2种菌。     

从污水中检出O_(157)∶H7大肠杆菌

Ｏ157∶Ｈ7大肠杆菌是引起人类出血性结肠炎的主要致病菌菌。自1982年美国发现此致病菌以来,国内陆续在腹泻病人粪便和禽畜粪便中检出该致病菌。我们于1998年8月起对三明市区的各类污水进行了调查,现将结果报道如下。材料与方法　采集养猪场、屠宰场等7类污水共191份置灭菌盐水瓶中送检,按ＧＢ48-83进行总大肠菌群数测定。然后加入10%碳酸钠2ｍｌ混匀,再加入10%硫酸铁175ｍｌ混匀,静置1ｈ。取沉淀物5ｍｌ加入45ｍｌ肠道增菌肉汤增菌培养后接种于山梨醇麦康凯琼脂(ＳＭＡＣ)平板进行分离培养,每皿挑选5个以上无色半透明菌落,分别与Ｏ157及Ｈ7…     

自淡水鱼中分离出一株维隆氏气单胞菌

维隆氏气单胞菌(A.veronii),是1984NHi—ck-man—Brennev描述的一个新种,业经DNA—DNA杂交证实,已知本菌可致人类腹泻。国内仅上海、福建分别从腹泻病人和淡水中检出。1989年我们从淡水鱼(黑鱼)中检出一株维隆氏气单胞菌,现报道如下。 该菌为发酵型革兰氏阴性杆菌,36℃生长良好,在TCBS、营养琼脂、血平板上呈圆形、光滑、湿润、边缘整齐、中等大小的菌落,血平板上产生β溶血,菌落周围有透明的溶血环。氧化酶阳性,还原硝酸盐,可在无盐胨水和3％盐胨水中生长;36℃培养生化反应阳性的     

305例腹泻患儿空肠弯曲菌感染情况调查

空肠弯曲菌是人类腹泻的病原之一,我们对金华市中心医院儿科门诊的305例小儿急性腹泻患儿进行了空肠弯曲菌感染情况的调查,现将结果报告如下。 材料与方法 一、样本来源:样本采自金华市中心医院儿科门诊就诊的急性腹泻患儿的新鲜粪便,挑取部分直接接种于改良布氏琼脂血平皿上,放入用烛缸法保持无氧的铁盒内密封,2—3小时后送实验室待检。 二、菌株的分离和培养:将血平皿放入厌氧箱内,42℃48小时后取出,挑取可疑菌落镜检,然后转种于改良布氏琼脂血平皿上分纯,孵育24小时,挑取菌落分别做各项生化反应,把符合生化反应的菌株转种于0.17％布氏肉汤琼脂培养基上保存。