寻常性银屑病患者外周血单核细胞TLR4的表达及意义

目的：探讨寻常性银屑病患者外周血单核细胞Toll样受体4（Toll—likereceptor4，TLR4）的表达及其临床意义。方法：采用流式细胞术检测40例寻常性银屑病患者及30例正常人对照组外周血单核细胞TLR4的表达。结果：寻常性银屑病患者外周血中单核细胞TLR4的表达较正常人对照组明显增高（P〈0．01），而进展期的寻常性银屑病患者外周血中单核细胞TLR4的表达高于稳定期的患者的表达（P〈0．05）。结论：TLR4及其介导的天然免疫应答在银屑病发病机制中起重要作用，而寻常性银屑病患者外周血单核细胞TLR4表达与银屑病PASI评分无关，但与银屑病分期有关。     

寻常型银屑病患者外周血单个核细胞TLR4和NF—kBp65的表达

检测寻常型银屑病患者外周血单个核细胞T0Ⅱ样受体4（TLR4）和核转录因子xrap65（NF—xBp65）的表达。采用直接免疫荧光法定位并分别用流式细胞术及免疫细胞化学法检测22例寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4、NF—kBp65的表达，15名正常人做正常对照。结果：寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4的表达高于正常对照组（P〈0．05），而进行期寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4表达明显高于稳定期寻常型银屑病患者的表达（P〈0．05）。寻常型银屑病组和正常对照组，进行期寻常型银屑病组和稳定期寻常型银屑病组活化NF-kBp65的表达，各组之间差异无显著性（P〉0．05）。     

寻常性银屑病患者外周血CD14~+单核细胞TLR4的表达及其与TNF-α,IL-6的相关性

目的探讨寻常性银屑病患者外周血单核细胞Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)的表达及其与TNF-α,IL-6浓度的相关性,初步探讨TLR4在寻常性银屑病发病中的作用。方法采用流式细胞术检测30例寻常性银屑病患者外周血CD14+单核细胞TLR4的表达,并采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清TNF-α,IL-6的浓度。另取20例正常人作为对照组。结果寻常性银屑病患者外周血中单核细胞TLR4的表达、血清TNF-α,IL-6浓度较正常人对照组明显增高(P<0.01),TLR4表达与血清炎症因子TNF-α,IL-6浓度变化呈正相关(P<0.05)。结论TLR4及其介导的天然免疫应答在银屑病发病机制中起重要作用,其机制可能是通过上调TLR4的表达促使炎症因子产生和分泌而介导银屑病的发病。     

寻常型银屑病患者外周血单个核细胞TLR4和NF - кBp65的表达

检测寻常型银屑病患者外周血单个核细胞Toll样受体4(TLR4)和核转录因子кBp65(NF -кBp65)的表达.采用直接免疫荧光法定位并分别用流式细胞术及免疫细胞化学法检测22例寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4、NF- кBp65的表达,15名正常人做正常对照.结果:寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4的表达高于正常对照组(P＜0.05),而进行期寻常型银屑病外周血单个核细胞TLR4表达明显高于稳定期寻常型银屑病患者的表达(P＜0.05).寻常型银屑病组和正常对照组,进行期寻常型银屑病组和稳定期寻常型银屑病组活化NF-кBp65的表达,各组之间差异无显著性(p＞0.05).     

寻常性银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体和TNF-α受体mRNA表达的研究

目的 探讨寻常性银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体mRNA和TNF-α仅受体mRNA的表达及其在银屑病发病机制中的作用.方法 采集50例寻常性银屑病患者外周静脉血,分离单一核细胞后,以RT-PCR法检测其IFN-γ受体mRNA和TNF-α受体mRNA的表达,PASI评分法评估银屑病的严重程度.以24例正常人作对照.结果 50例银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体mRNA的表达均值为1.11±0.55,其中37例进行期患者为1.13±0.57,13例静止期患者为1.03±0.52,正常人对照组为0.72±0.17,银屑病患者显著高于正常人对照组(P=0.0034),进行期显著高于正常人对照组(P=0.008),而静止期与正常人对照组差异无统计学意义.正常人对照组和银屑病患者外周血单一核细胞TNF-α受体mRNA的表达水平差异无统计学意义.银屑病患者外周血单一核细胞IFN-γ受体mRNA表达水平与TNF-α受体mRNA表达水平及PASI值均无相关性.结论 IFN-γ受体mRNA在寻常性银屑病患者外周血单一核细胞中异常高表达,但与疾病的活动性无关.     

寻常性银屑病患者白介素-18水平的变化及其意义

目的探讨白介素（IL）-18在寻常性银屑病发病中的作用及其血清水平检测的临床意义。方法应用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测34例寻常性银屑病患者外周血清中IL—18及干扰素（IFN）-γ的水平,并动态观察治疗前后IL—18及IFN-γ的变化及其与寻常性银屑病患者病情活动指标之间的关系。结果寻常性银屑病患者治疗前血清中IL-18及IFN-γ的水平较正常人对照组显著增高（P〈0．01）,且IL—18及IFN-γ的水平与寻常性银屑病的分期有关,其中进行期患者组显著高于静止期患者组（P〈0．05）。治疗后血清中IL-18及IFN-γ较治疗前显著下降（P〈0．05）。IL-18的血清浓度变化与寻常性银屑病严重程度指数PASI评分有相关性（P〈0．05）,且与IFN-γ水平呈显著正相关（P〈0．05）。结论IL-18在寻常性银屑病的发病中可能起重要作用,血清IL-18的检测可作为反映寻常性银屑病病情活动的指标之一．     

寻常性银屑病外周血单一核细胞中T—bet和GATA-3的基因表达

目的 观察寻常性银屑病患者外周血单一核细胞(PBMCs)中Th1细胞转录因子T-bet和Th2细胞转录因子GATA-3的基因表达,探讨T-bet和GATA-3在寻常性银屑病发病机制中的意义.方法 采用双抗体夹心法(ELISA)检测寻常性银屑病患者血清中Th1型细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素(IL)-4的水平;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分析PBMCs中转录因子T-bet和GATA-3的基因表达.结果 寻常性银屑病患者血清中IFN-γ的水平明显高于正常对照组,IL-4的水平明显低于正常对照组(P均<0.05);患者PBMCs中转录因子T-bet的表达明显高于正常对照组,GATA-3的表达明显低于正常对照组(P均<0.05);患者血清IFN-γ浓度与T-bet表达水平呈明显正相关(r=0.803,P<0.05),与GATA-3的表达水平无相关性(r=-0.5244,P>0.05);血清IL-4浓度与T-bet和GATA-3的表达水平均无显著相关性(r分别为-0.072,0.452,P均>0.05).结论 Th1特异性转录因子T-bet可能通过调节Th1型细胞因子IFN-γ的产生,介导寻常性银屑病的发生和发展.     

寻常性银屑病患者外周血单一核细胞TLR2,TLR4,TLR9表达的初步研究

目的研究寻常性银屑病患者外周血单一核细胞(PBMCs)Toll样受体2(TLR2) mRNA,TLR4 mRNA和TLR9 mRNA的表达情况。方法采用实时荧光定量PCR方法检测30例寻常性银屑病患者(其中发病与感染相关者10例,与感染无关者20例)和25例正常人PBMCs内TLR2,TLR4,TLR9 mRNA的水平。结果与感染有关银屑病组、与感染无关银屑病组较正常对照组TLR9 mRNA水平差异有显著性(P值分别为0.036和0.016),与感染无关银屑病组与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05);TLR2和TLR4的水平在三组之间差异无显著性(P>0.05)。结论TLR9的表达在与感染相关银屑病患者中显著升高,提示感染因素,特别是细菌CpGDNA在寻常性银屑病中的作用可能通过TLR9介导。     

慢性荨麻疹患者外周血单个核细胞TLR2、TLR4表达及其与IL-5的相关性

目的：观察慢性荨麻疹患者单个核细胞表面TLR2、TLR4表达及其与血清IL-5的相关性;初步探讨TLR2、TLR4在慢性荨麻疹发病机制中的作用,为临床治疗提供新思路。方法：采用流式细胞仪检测49例慢性荨麻疹患者外周血单个核细胞TLR2及TLR4受体表达情况;用双抗夹心ELISA方法检测患者血清中IL-5浓度,与30例同期正常对照。结果：慢性荨麻疹患者外周血单个核细胞TLR2表达均明显高于正常对照,而TLR4表达与正常对照无明显差异（P〉0．01）,血清中IL-5浓度明显高于正常对照,TLR2表达与血清IL-5浓度呈正相关,TLR4表达与血清IL-5浓度呈无相关。结论：研究提示TLR2可能在慢性荨麻疹的发病中起重要作用,其机制可能是通过上调TLR2表达促进IL-5分泌来介导变态反应。     

银屑病患者外周血干扰素γ和白介素18的表达

目的 探讨进行期银屑病患者外周血干扰素γ(IFN-γ)和白介素18(IL-18)的表达和相关性,及各型银屑病患者外周血IFN-γ的表达变化。方法 进行期寻常性银屑病20例,红皮病性银屑病19例,脓疱性银屑病10例,采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中IFN-γ表达水平;对进行期寻常性银屑病患者,检测血浆中IL-18表达水平;检测葡萄球菌肠毒素(SEB)刺激下,进行期寻常性银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)上清液中IFN-γ和IL-18的表达水平。结果 进行期寻常性银屑病患者血浆IFN-γ水平为8.91±2.65,红皮病性银屑病为10.19±5.93,脓疱性银屑病为17.96±10.44,各型银屑病患者均高于正常人(5.70±2.82)。进行期寻常性银屑病患者血浆IL-18水平高于正常人。进行期寻常性银屑病患者PBMC在SEB刺激组IFN-γ和IL-18表达水平均高于空白对照组,且IFN-γ与IL-18表达水平呈显著正相关,r=0.55,P<0.05。结论 在银屑病的发病和进展中,检测IFN-γ的表达量,对早期判断银屑病病情进展、转归和治疗效果有指导意义。IL-18表达增高,推测IL-18可能也参与银屑病发病。     

中性粒细胞弹性蛋白酶在寻常型银屑病患者血清中的表达及意义

目的：探讨中性粒细胞弹性蛋白酶（neutrophi lelastase,NE）在寻常型银屑病发病中的作用和意义。方法：实验组寻常型银屑病患者40例,对照组40例,采用酶联免疫吸附法检测两组人群血清中NE的表达。结果：寻常型银屑病患者血清中NE的表达水平明显高于对照组（t=9．07,P〈0．01）,表达水平与病情严重程度相关（r=O．828,P〈0．01）。结论：NE在寻常型银屑病患者血清中高表达,且与疾病严重程度呈正相关。     

竹黄颗粒剂Ⅱ号对银屑病患者外周血单个核细胞转录因子T-bet/GATA3mRNA表达的影响

目的：探讨竹黄颗粒剂Ⅱ号对寻常型银屑病的作用机制。方法：36例寻常型银屑病患者，按随机数字表，分竹黄颗粒剂Ⅱ号治疗组（竹黄组）19例与银屑灵冲剂治疗组（银屑组）17例，分别于治疗前、后用RT—PCR技术检测外周血单个核细胞转录因子T—bet／GATA3 mRNA的表达，并以15例正常人作为对照组。结果：治疗后T—bet／GATA3 mRNA表达均显著改变（P〈0．05）；其中竹黄组效果优于银屑组（P〈0．01）。结论：竹黄颗粒剂Ⅱ号治疗银屑病有效的机制可能是通过降低患者T—bet／GATA3 mRNA的表达。     

银屑病患者皮损处γδT细胞受体γ链V区取用模式的初步研究

目的探讨银屑病患者皮损处γδT细胞的取用模式及其在银屑病发病中的作用。方法通过实时荧光定量PCR的方法检测18例寻常性银屑病患者和18例正常人皮肤及外周血PBMC中γδT细胞受体γ链V区基因(TRGV,T cell receptor gamma variable,亦称Vγ,TCRGV)的表达情况。结果寻常性银屑病组皮损中Vγ9的表达率为对照组皮肤的4.3倍,而对照组外周血PBMC中Vγ9的表达率为寻常性银屑病组的2.7倍,差异均有统计学意义(P=0.00003,0.0002)。对照组皮肤Vγ11的表达率为寻常性银屑病组皮损的3.5倍,差异有统计学意义(P=0.0003)。银屑病组和对照组比较外周血PBMC中Vγ11的表达率、皮肤及外周血PBMC中Vγ1-8和Vγ10的表达差异均无统计学意义(P均0.05)。结论寻常性银屑病患者皮损中γδT细胞Vγ9较正常人高表达,Vγ9+γδT细胞可能是银屑病患者真皮中有致病作用的γδT细胞的主要亚型;银屑病患者皮损中γδT细胞Vγ11较正常人低表达。对这一现象有必要进行深入研究。     

Toll样受体2在显性梅毒患者外周血中的表达

目的：研究CD14^＋单核细胞Toll样受体2（TLR2）在显性梅毒患者外周血中的表达，探讨其在梅毒发病机制中的作用。方法：采用双色免疫荧光抗体染色流式细胞仪检测32例显性梅毒患者外周血中TLR2的表达水平，并以20例正常人作为对照组。结果：①显性梅毒患者外周血中TLR2的表达水平显著低于正常对照组，差异有统计学意义（P〈0．001）；一期梅毒患者外周血中TLR2的表达水平明显低于二期梅毒患者，差异有统计学意义（P〈0．001）。②TRUST试验滴度≥1：8组的患者外周血TLR2的表达水平略高：TRUST试验滴度〈1：8组，但二组之间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。③显性梅毒患者外周血TLR2的表达水平与血清TRUST滴度不存在相关关系（P〉0．05）。结论：TLR2的表达水平低下提示梅毒患者可能存在细胞免疫功能失调和细胞免疫抑制。     

痤疮患者经异维A酸系统治疗后外周血CDl4＋单核细胞TLR2的表达变化

目的：探讨Toll样受体2（Tolllikereceptor2,TLR2）在寻常痤疮发病中的作用及异维A酸治疗痤疮的部分抗炎机制。方法：应用流式细胞术检测35例痤疮患者经异维A酸治疗前后外周血CDl4＋单核细胞TLR2的表达,并与对照组25例健康人进行比较。结果：未经治疗的痤疮患者外周血CDl4＋单核细胞TLR2表达明显高于对照组（t=10．63,P〈0．01）,治疗后TLR2的表达与对照组无明显差异（t=1．73,P〉0．05）。结论：TLR2的表达与痤疮的发病相关;异维A酸治疗后可明显减少外周血CDl4’单核细胞TLR2的表达,从而抑制炎症反应的发生。     

天疱疮患者血清白介素6、10、17、γ干扰素和外周血Th17细胞水平检测

目的 探讨寻常型天疱疮可能的细胞免疫机制。方法 用ELISA法检测33例寻常型天疱疮（PV）患者及34例正常人对照血清白介素6（IL-6）、白介素10（IL-10）、白介素17（IL-17）及γ干扰素（IFN-γ）水平。流式细胞仪检测10例PV患者及10例正常人对照外周血Th17细胞水平。结果 PV患者血清IL-6、IL-17水平高于正常人对照（P < 0.05）,IFN-γ、IL-10水平低于正常人对照（P < 0.05）。PV患者外周血中Th17细胞的百分比高于正常人对照（P < 0.05）。结论 IL-6、IL-10、IFN-γ、IL-17和Th17细胞与PV的发病可能有关。     

银屑病患者外周血CD4+T细胞内干扰素γ、白介素4表达与发病的关系

目的：探讨干扰素γ（IFN－γ）、白介素4（IL－4）表达在银屑病发病中的作用。方法：银屑病患者和正常人外周血经碘诺霉素和佛波酯刺激（同时加莫能呈抑制细胞因子向细胞外转移）后用三色荧光抗体染色；用流式细胞仪检测CD4^ T细胞内细胞因子IFN－γ、IL－4的表达情况。结果：未加刺激物时，银屑病患者与正常人外周血CD4^ ／IF－γ^ 细胞数量分别占0．79％、0．88％，CD4^ ／IL－4^ 细胞数量分别占1．92％、1．88％，两组间IFN－γ、IL－4的表达差异无显著性（P＞0．05）；经碘诺霉素和佛波酯刺激后银屑病患者CD4^ ／IFN－γ^ 细胞数量占21．69％，明显高于正常人对照组10．26％（P＜0．001），CD4^ ／IL－4^ 细胞数量分别占4．24％、4．40％，两组间差异无显著性（P＞0．05）。结论：未活化的CD4^ T细胞分泌的细胞因子极少。经抗原刺激后银屑病患者外周血Th1、Th2细胞分化失衡，导致IFN－γ异常表达，其在银屑病发病机制中起重要作用。     

尖锐湿疣复发患者外周血单核细胞Toll样受体3、4、9的表达及意义

目的：观察尖锐湿疣复发患者外周血单核细胞（PBMC）3种Toll样受体TLR3、TLR4和TLR9的表达情况。方法：采用双色免疫荧光抗体染色流式细胞术检测26例复发CA患者PBMC上TLR3、TLR4和TLR9的表达水平,并以30例正常人作为对照组。结果：复发尖锐湿疣患者PBMC上TLR4和TLR9的表达水平明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;而TLR3的表达水平,两组间无统计学意义（P〉0．05）。结论：人乳头瘤病毒（HPV）的反复感染可上调PBMC TLR4和TLR9的表达,TLR4和TLR9在尖锐湿疣的复发机制中可能起着重要作用。     

Trappin-2在银屑病患者血清及皮损中的检测及临床意义

目的：检测trappin-2蛋白在银屑病患者血清及皮损中的表达。方法：用双抗体夹心ELISA法,检测50例寻常性银屑病患者和16例脓疱性银屑病患者外周血,以及32例寻常性银屑病患者和10例局限性脓疱性银屑病患者皮损负压吸疱液中trappin-2蛋白表达水平。结果：寻常性银屑病患者外周血及皮损组织液中trappin-2蛋白表达水平显著高于对照组（P值均〈0．01）,其中进行期和稳定期寻常性银屑病患者外周血trappin-2蛋白的表达差异有统计学意义（P〈0．05）,且与患者相应的银屑病皮损面积和严重度指数（PASI）呈正相关。局限性和泛发性脓疱性银屑病患者外周血及皮损组织液中trappin-2蛋白的表达水平与对照组相比,差异亦有统计学意义（P〈0．05）,与寻常性银屑病患者比较差异无统计学意义,且与病情活动指数无线性相关。结论：trappin-2蛋白在寻常性银屑病和脓疱性银屑病发病机制中可能起重要作用。     

带状疱疹患者单一核细胞Toll样受体3和9的表达

目的　探讨Toll样受体TLR3和TLR9在带状疱疹发病机制中的作用。方法　采用流式细胞仪检测40例带状疱疹患者外周血单一核细胞（PBMC）上TLR3和TLR9的表达水平。16例正常人群为对照组。结果 带状疱疹患者PBMC上TLR3和TLR9的表达水平均明显高于正常人对照组（ P < 0. 01）。带状疱疹患者PBMC上TLR3和TLR9的表达水平与发病时间存在负相关关系（ r值分别为- 6.23,- 5.88, P值均 < 0. 01） ,但与性别、年龄无相关性。带状疱疹患者PBMC上TLR3和TLR9表达在各年龄组间（< 40岁, 40 ~ 50岁, > 50岁）,差异具有统计学意义（F = 3.410,P < 0. 01）,且< 40岁年龄组TLR3和TLR9的表达明显高于其他两组。结论　TLR3和TLR9可能参与带状疱疹发病。