精简平喘方不同制备方法对哮喘小鼠免疫功能影响

目的:探讨精简平喘方不同制备方法干预对哮喘小鼠免疫功能的影响。方法:以10%OVA/AL(OH)3致敏、5%OVA激发制成支气管哮喘小鼠模型,以精简平喘方的两种不同提取方法所得提取物为干预手段,于激发前开始给药,至激发结束取材。观察肺组织病理、外周血及BALF中EOS、Ig E,以及肺组织中IL-4、IFN-γ水平。结果:中药A(含挥发油)、B对哮喘模型小鼠EOS及总Ig E、肺组织IFN-γ、IL-4均有较为明显的干预作用,能够显著降低EOS、Ig E、IL-4,升高IFN-γ(均P0.05)。其中,低、中剂量中药A组对外周血EOS的降低作用优于同剂量中药B组(均P0.05),中药A高剂量优于低、中剂量组(均P0.05);中、高剂量中药A组对BALF中EOS的降低作用优于同剂量中药B组(均P0.05),中药A高剂量优于低、中剂量组(均P0.05);高剂量中药A组对外周血中Ig E的降低作用优于同剂量中药B组(P0.05),中药A高剂量优于低、中剂量组(均P0.05);中、高剂量中药A组对BALF中Ig E的降低作用优于同剂量中药B组(均P0.05),中药A高剂量优于低、中剂量组(均P0.05);中、高剂量中药A组对肺组织中IFN-γ的降低作用和IL-4的升高作用均优于同剂量中药B组(均P0.05),且优于中药A低、中剂量组(均P0.05)。结论:中药A、B对哮喘模型小鼠EOS及总Ig E、IFN-γ、IL-4均有较为明显的干预作用,能够显著调节上述指标,调节哮喘小鼠的免疫失衡。其中,中药A的干预效果总体优于中药B,以中、高剂量组优势更为突出。     

重组Der f1变应原诱导小鼠哮喘模型的建立

目的建立重组粉尘螨Ⅰ类变应原（Der f1）诱导BALB/c小鼠哮喘模型。方法 30只BALB/c小鼠随机分成3组：PBS阴性对照组、卵清蛋白（OVA）阳性对照组、重组Der f1模型组。用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中IgG1、IgG2α和IgE含量,ELISA法检测脾细胞培养上清液和支气管肺泡灌洗液（BALF）IL-2、IL-4、IL-5、IL-17和IFN-γ含量,计数BALF中细胞总数,同时切取小鼠未灌洗侧肺组织进行病理学观察。结果 OVA阳性对照组、重组Der f1模型组小鼠血清中IgG1、IgG2a和IgE含量,脾细胞上清液和BALF中IL-2、IL-4、IL-5、IL-17和IFN-γ含量与PBS阴性对照组相比差异均具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;OVA阳性对照组、重组Der f1模型组小鼠BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞（EOS）计数显著高于PBS组（P〈0.05或P〈0.01）。OVA阳性对照组和重组Der f1模型组小鼠肺部病理改变呈明显的变态反应性炎症。结论用重组Der f1能成功诱导BALB/c小鼠哮喘模型。     

诱导幼鼠食物过敏与哮喘发生的免疫学相关性研究

目的 研究早期诱导小鼠食物过敏与后期哮喘发生的免疫相关性及其肺部组织病理学改变.方法 6周龄断乳雌性BALB/c幼鼠(n:37)随机分为3组,分别为空白对照组(n=12),食物过敏组(n=13)和哮喘组(n=12).造模结束后各组均采用卵清蛋白(OVA)雾化激发,检测各组血清IgE水平、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子IL-4、INF-γ水平,计算BALF中炎性细胞与嗜酸性粒细胞(EOS)数量.取小鼠肺部组织做病理切片,观察支气管管壁厚度和EOS浸润.结果 食物过敏组与哮喘组血清IgE水平、BALF中IL-4水平、IL-4/INF-γ比值和EOS计数均显著高于空白对照组(P<0.05),哮喘组BALF中IL-4水平和EOS计数显著高于食物过敏组(P<0.05).而两组间IgE水平差异无统计学意义(P>0.05);食物过敏组与哮喘组BALF中IFN-γ水平显著低于空白对照组(P<0.05).肺组织病理观察显示,食物过敏组与哮喘组肺部组织嗜酸性细胞浸润均明显增加(P<0.05),支气管管壁增厚,哮喘组EOS浸润数显著高于食物过敏组(P<0.05).结论 食物过敏组和哮喘组模型均存在IgE介导的全身免疫应答增高,食物过敏所致的肺部Thl/Th2免疫失衡和炎性细胞浸润可能是后期哮喘发生的免疫学机制.     

小青龙汤合香砂六君子汤对过敏性哮喘小鼠气道反应性与细胞因子的影响

目的:探讨中药名方小青龙汤与香砂六君子汤的合方,对于小鼠过敏性哮喘模型气道反应性与细胞因子的影响。方法:将20只雌性BALB/c小鼠,随机平均分为正常对照组(control组)、哮喘模型组(OVA组)、中药合方低剂量组(LD组)、中药合方高剂量组(HD组)。OVA、LD、HD组使用卵清蛋白(OVA)腹腔注射致敏与雾化吸入激发以制作哮喘模型。在OVA激发结束后24 h以整体体积描记法检测小鼠气道反应性(Penh)。将小鼠犠牲后,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),计算嗜酸性颗粒细胞(EOS)所占比例,并将BALF经离心后取上清液,以酶联免疫吸附法(ELISA)测定其中白细胞介素-4,5,13(IL-4,IL-5,IL-13)与Ig E之含量变化。接着取小鼠肺叶支气管组织切片经HE染色后,以光学显微镜观察组织型态与炎性细胞浸润情况。结果:中药合方高、低剂量组之小鼠气道反应性(Penh)、BALF中EOS所占比例、BALF上清液中细胞因子(IL-4,IL-5,IL-13,Ig E)含量,与OVA组相比,均有显著下降(P0.05)。结论:小青龙汤合香砂六君子汤能有效降低哮喘小鼠的气道反应性,调控细胞因子含量水平,从而改善哮喘之气道炎性反应。     

芦荟多糖对卵清蛋白致敏小鼠的脱敏效果

目的:研究芦荟多糖对卵清蛋白(OVA)致敏小鼠的脱敏效果.方法:50只BABL/c小鼠随机分为5组,分别为正常组(A),模型组(B),小、中、高剂量组(C,D,E)组.采用OVA加Al(OH)3注射法复制小鼠OVA致敏模型,期间C,D,E组灌服不同剂量的芦荟多糖干预.24 d后检测小鼠受OVA激发后的反应、肺泡灌洗液(BALF)中总细胞及嗜酸性粒细胞(EOS)数量、肺组织丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)含量、血清特异性IgE,BALF及淋巴细胞培养液中的IL-4,IFN-γ含量.结果:芦荟多糖能够减轻致敏小鼠受OVA激发所引起的症状,能够下调BALF及淋巴细胞培养液中的IL-4水平,提升IFN-γ,降低肺泡灌洗液(BALF)中总细胞及EOS数量,使肺组织中与炎症相关的MDA及NO浓度降低,下调血清中特异性IgE.结论:芦荟多糖能够纠正致敏小鼠体内的免疫失衡,对致敏小鼠有一定的治疗作用.     

吸入糖皮质激素对哮喘小鼠肺部炎症和支气管肺泡灌洗液中白介素-12、干扰素-γ的影响

目的通过观察各实验组小鼠肺部炎症情况和检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子白介素-12和干扰素-γ(IFN-γ)的水平,探讨糖皮质激素对小鼠支气管哮喘的治疗作用机制。方法清洁级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组。以卵清蛋白致敏激发法建立哮喘小鼠模型。显微镜下观察肺组织病理切片;收集BALF,计算嗜酸性粒细胞(EOS)绝对计数百分比;用ELISA法测定BALF中IL-12和IFN-γ的水平,并做相关性分析。结果哮喘组小鼠BALF中白细胞总数、EOS数目和百分比分别与正常组、布地奈德组相比均明显增加(P<0.01),在正常组、布地奈德组之间比较差异无显著性(P>0.05)。哮喘组小鼠BALF中IL-12和IFN-γ水平分别与正常组和布地奈德组相比均减低(P<0.05),在正常组和布地奈德组对这两个指标进行比较差异无显著性(P>0.05)。各组小鼠BALF中IL-12和IFN-γ水平都呈正相关关系。结论布地奈德可促进IL-12和IFN-γ的表达,减轻肺部炎症,可能是糖皮质激素治疗哮喘的重要机制。     

白细胞介素-4、干扰素-γ及核因子-κB p65在解淀粉芽孢杆菌致BALB/c小鼠哮喘模型中的表达

目的探讨白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)与核因子-κB(NF-κB)p65在解淀粉芽孢杆菌致BALB/c小鼠哮喘模型中的表达及意义。方法 15只无特定病原体级BALB/c小鼠随机分为对照组、卵蛋白(OVA)组、解淀粉芽孢杆菌组(细菌组),每组5只。对照组小鼠以生理盐水致敏/激发;OVA组小鼠以0.2 g·L~(-1)OVA混合液致敏,并以25.0 g·L~(-1)OVA激发;细菌组小鼠以1013cfu·L~(-1)解淀粉芽孢杆菌致敏/激发。酶联免疫吸附试验测定各组小鼠血清IL-4、IFN-γ水平;免疫组织化学法检测小鼠肺组织中NF-κB p65表达。结果 OVA组和细菌组小鼠肺组织中NF-κB p65表达显著高于对照组(P<0.01),细菌组和OVA组小鼠肺组织中NF-κB p65表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。3组小鼠血清IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比较差异有统计学意义(F=90.59、435.09、117.37,P<0.01);OVA组和细菌组小鼠血清IFN-γ水平显著低于对照组(P<0.01),IL-4水平和IL-4/IFN-γ显著高于对照组(P<0.01);细菌组与OVA组小鼠血清IL-4、IFN-γ水平及IL-4/IFN-γ比较差异均无统计学意义(P>0.05)。直线相关分析显示,OVA组小鼠血清IL-4水平与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.87,P<0.01);肺组织中NF-κB p65蛋白表达与血清IL-4水平呈正相关(r=0.91,P<0.01),与血清IFN-γ水平呈负相关(r=-0.93,P<0.01)。细菌组小鼠血清IL-4水平与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.92,P<0.01);肺组织中NF-κB p65蛋白表达与血清IL-4水平呈正相关(r=0.97,P<0.01),与血清IFN-γ水平呈负相关(r=-0.81,P<0.01)。结论 IL-4、IFN-γ在哮喘发病中起作用,而NF-κB p65表达变化可影响IL-4、IFN-γ水平,NF-κB p65在哮喘炎症调控中发挥重要作用。     

IL-27对哮喘小鼠血清IgE的影响

目的研究IL-27对卵白蛋白（OVA）激发哮喘小鼠血清IgE的影响。方法 24 只雌性BALB/c小鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及IL-27组,每组8只。应用OVA建立哮喘模型,IL-27组小鼠应用1 μg IL-27（溶于 50 μl PBS中）滴鼻给药,ELISA法测定小鼠血清IL-4和 IFN-γ 浓度,荧光酶标法测定小鼠血清总IgE和OVA特异性IgE浓度;计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞数量。结果 IL-27 组小鼠血清IL-4浓度为（45.6±10.1）μg/L,明显低于哮喘组的（79.3±14.8）μg/L（P 〈 0.05）;IL-27 组小鼠血清IFN-γ浓度为（63.8±11.5）μg/L,明显高于哮喘组的（25.7±8.2）μg/L（P 〈 0.05）;IL-27组小鼠血清总IgE和OVA特异性IgE浓度分别为（2.77±0.51）KU/L、（0.48±0.09）KU/L,均明显低于哮喘组的（5.88±0.86）KU/L、（1.89±0.15）KU/L（P均〈0.05）;IL-27组小鼠 BALF中嗜酸粒细胞数量为（2.21±0.33）×107/L,明显低于哮喘组的（12.82 ± 2.17）×107/L（P 〈 0.01）。结论 IL-27可能通过促进IFN-γ合成、抑制IL-4合成,降低哮喘小鼠血清总IgE和OVA特异性IgE浓度,降低BALF中嗜酸粒细胞数量。     

肺炎链球菌3型多糖对支气管哮喘小鼠气道炎症及Treg/Th17细胞的影响

目的观察肺炎链球菌3型多糖(T3P)对支气管哮喘小鼠气道炎症以及Treg/Th17细胞的影响,探讨T3P对哮喘小鼠的免疫调节作用。方法 BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘组和T3P组,每组8只。哮喘组以卵清蛋白(OVA)致敏、气道激发建立哮喘模型,对照组以PBS代替,T3P组在OVA致敏前皮下注射T3P进行干预。观察小鼠肺组织病理改变,对支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞计数及分类,ELISA法检测血清OVA特异性IgE(OVA-IgE)以及BALF中白介素4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)、IL-10、IL-17浓度,实时荧光定量PCR法检测肺组织中转录因子Foxp3和RORγt mRNA表达水平,流式细胞术检测Treg和Th17细胞占CD4~+细胞百分比。结果 T3P组小鼠肺组织炎症反应程度弱于哮喘组,血清OVA-IgE,BALF中细胞总数、嗜酸粒细胞比例以及IL-4、IL-17浓度均低于哮喘组(P<0.05),IFN-γ、IL-10浓度高于哮喘组(P<0.05),小鼠肺组织Foxp3 mRNA表达水平及Treg占CD4~+细胞百分比均高于哮喘组(P<0.05),RORγt mRNA表达水平和Th17细胞占CD4~+细胞百分比均低于哮喘组(P<0.05)。哮喘组和T3P组小鼠肺组织Foxp3-mRNA/RORγt-mRNA比值及Treg/Th17细胞比例与BALF中嗜酸粒细胞数量呈负相关。结论 T3P可以通过抑制过敏原特异性IgE表达调节Th1/Th2、Treg/Th17细胞平衡,抑制气道炎症。     

桦褐孔菌多糖抗哮喘作用实验研究

目的探讨桦褐孔菌多糖对哮喘小鼠肺部炎症和Thl/Th2类细胞因子变化的影响.方法雄性BALB/c小鼠32只随机分成4组,即正常对照组、哮喘模型组和桦褐孔菌多糖(PIO)低、高剂量组各8只.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4、IL-5及γ干扰素(IFN-γ)含量,并观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变.结果与正常对照组相比,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数,IL-4和IL-5升高,而IFN-γ降低(P<0.05).PIO低、高剂量组小鼠BALF中炎症细胞数量和IL-4、IL-5水平明显降低,IFN-γ水平升高(P<0.05).结论桦褐孔菌多糖处理能明显减轻哮喘小鼠肺组织病理学改变.桦褐孔菌多糖对哮喘小鼠具有保护作用.     

Ⅰ型NKT细胞在哮喘小鼠气道炎症形成中的作用

目的:观察Ⅰ型NKT细胞在哮喘小鼠气道炎症形成中作用。方法:24只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组和过继转移组,每组8只;随机选取8只CD1d-/--BALB/c小鼠为CD1d-/-组。对照组和哮喘组、CD1d-/-组分别采用PBS和卵清白蛋白(OVA)致敏和激发,过继转移组采用OVA致敏,在第1次激发前24h给予Ⅰ型NKT细胞尾静脉注射。分别采用HE和PAS染色检测肺组织学和气道杯状细胞;姬姆萨染色检测支气管肺泡灌洗液(BALF)各细胞分类计数;ELISA法检测血清OVA特异性IgE和IgG1及BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平;流式细胞仪检测肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4+和IFN-γ+Ⅰ型NKT细胞的数量。结果:哮喘组小鼠肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4+和IFN-γ+Ⅰ型NKT细胞的数量明显高于对照组(均P<0.05);过继转移组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞增多,过继转移组小鼠BALF中嗜酸细胞数量、血清OVA特异性IgE和IgG1及BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平明显高于哮喘组(均P<0.05);CD1d-/-组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞增多,CD1d-/-组小鼠BALF中嗜酸细胞数量、血清OVA特异性IgE和IgG1及BALF中IL-4、IL-5和IL-13水平明显低于哮喘组,但明显高于对照组(均P<0.05)。结论:Ⅰ型NKT细胞可以增强哮喘小鼠气道炎症,但并不是哮喘小鼠气道炎症形成的必需因素。     

维吾尔药神香草对变应性哮喘小鼠细胞因子的影响

目的：观察维药神香草对变应性哮喘小鼠Thl和Th2型细胞因子的影响。方法：将雌性BALB／c小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组及神香草大、小剂量组。经用卵清白蛋白（OVA）、氢氧化铝、百白破疫苗联合致敏复制雌性BALB／c小鼠哮喘模型。于激发前灌胃给药，末次激发24h后，收集支气管肺泡灌洗液（BALF），以酶联免疫吸附法（ELISA法）测定BALF中白细胞介素-4（IL-4）和干扰素-γ／（IFN-γ）的水平，并计数嗜酸性细胞（EOS）。结果：与模型组比较，神香草治疗后哮喘小鼠BALF中IL-4的水平显著降低，EOS计数也明显减少：而IFN-1的水平显著增高。神香草大剂量组与地塞米松组之间各指标无明显差异。结论：神香草可抑制哮喘小鼠IL-4的分泌，纠正Thl／Th2型的细胞因子失衡，并抑制炎症细胞的汇集，对变应性哮喘有明显的干预作用。     

抗CD1d单克隆抗体对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的:观察抗CD1d单克隆抗体对鸡卵清白蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠气道炎症的影响。方法:将15只BALB/c小鼠随机分为抗CD1d单克隆抗体组、哮喘组和对照组,每组5只。抗CD1d单克隆抗体组、哮喘组和对照组分别采用OVA和PBS致敏和激发;抗CD1d单克隆抗体组在激发前1h尾静脉注射抗CD1d单克隆抗体,哮喘组和对照组以等量PBS代替。分别采用HE和PAS染色检测肺组织学和支气管杯状细胞数量;瑞氏-姬姆萨染色检测支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数和分类计数;ELISA法检测血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平;流式细胞术检测肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4~+和IFN-γ~+Ⅰ型NKT细胞的数量。结果:抗CD1d单克隆抗体组小鼠肺组织炎性细胞和气道基底膜杯状细胞减少;BALF中细胞总数和嗜酸性粒细胞数量明显减少、血清OVA特异性IgE和BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平明显低于哮喘组(均P<0.05)。抗CD1d单克隆抗体组小鼠肺Ⅰ型NKT细胞、IL-4~+和IFN-γ~+Ⅰ型NKT细胞数量明显低于哮喘组(均P<0.01)。结论:抗CD1d单克隆抗体可能通过抑制Ⅰ型NKT细胞活性减轻哮喘小鼠气道炎症。     

皮下注射大剂量卵白蛋白诱导小鼠哮喘免疫耐受模型的建立及机制初步研究

目的 腹部皮下注射大剂量卵白蛋白(ovalbumin,OVA)建立小鼠哮喘免疫耐受模型并对机制进行初步研究.方法 选择BALB/c小鼠18只为建模对象,按随机数字表法分为3组:哮喘免疫耐受模型组、哮喘对照组、正常对照组,每组6只.哮喘免疫耐受模型组予10 μg OVA于0、7d腹腔注射致敏,21 ～25 d持续5d予1 mg OVA腹部皮下注射诱导免疫耐受,35、36、37 d予1％ OVA雾化激发;哮喘对照组除了省去21 ～25 d OVA皮下注射诱导免疫耐受外,其余同哮喘免疫耐受模型组;正常对照组使用等量生理盐水致敏及激发.末次激发24 h内检测气道反应性,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)计数细胞总数及细胞分类计数,ELISA法检测血清OVA特异性IgE、BALF中IL-4、IFN-y、IL-10的表达,HE染色观察肺组织病理改变,流式细胞仪检测各组小鼠外周血Treg细胞占CD4+T淋巴细胞百分率情况.结果 哮喘免疫耐受模型组气道反应性、BALF中嗜酸性粒细胞计数、IL-4水平及血清OVA特异性IgE水平明显低于哮喘对照组,差异有统计学意义(P ＜0.05);BALF中IL-10明显高于哮喘对照组(P＜0.05);而BALF中IFN-γ水平与哮喘对照组差异无统计学意义;同时HE染色发现哮喘免疫耐受模型组肺组织炎症较哮喘对照组明显减轻;流式细胞技术检测发现外周血Treg细胞百分比明显高于哮喘对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 予致敏小鼠腹部皮下注射大剂量OVA可成功诱导小鼠哮喘免疫耐受形成,Treg及免疫抑制因子IL-10参与了免疫耐受的形成.     

伏九贴膏对哮喘小鼠NGF/TrKA及相关炎性因子表达的影响

目的观察辽宁中医药大学附属医院制剂"伏九贴膏"对哮喘小鼠血清中白介素4(interleukin-4,IL-4)、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)、相关免疫球蛋白E (immunoglobulin E,IGE)细胞因子以及肺组织内神经生长因子(nerve growth factor,NGF)和酪氨酸激酶A(tropomyosin receptor kinase A,TrKA)蛋白表达的影响,探讨其治疗哮喘的机制。方法 50只成年BALB/c小鼠随机分为A正常对照组、B哮喘模型组、C地塞米松组、D伏九贴高剂量组、E伏九贴低剂量组5组。卵清蛋白(ovalbumin,OVA)腹腔注射致敏,超声雾化吸入激发,建立哮喘模型。ELISA法检测血清中IL-4、总IGE、OVA特异性IGE和IFN-γ细胞因子的表达,HE染色和Masson染色观察病理改变,免疫组化观察肺组织中NGF、TrKA蛋白表达。结果与正常组相比,模型组NGF、TrkA和IL-4、总IGE、OVA特异性IGE表达均明显升高(P0. 05),IFN-γ表达降低(P0. 05);与模型组相比,地塞米松组和伏九贴高剂量组的NGF、TrkA和IL-4、总IGE、OVA特异性IGE表达均降低(P0. 05),IFN-γ表达升高(P0. 05),伏九贴膏低剂量组改变均不明显,差异均无统计学意义(P0. 05)。结论伏九贴膏通过下调NGF、TrKA蛋白的表达,抑制了IL-4、IGE的分泌,同时促进了IFN-γ的分泌,使TH1与TH2趋于平衡,从而缓解哮喘发作。     

林蛙油对哮喘缓解期模型小鼠气道炎症的影响

[目的]探讨林蛙油对哮喘缓解期模型小鼠气道炎症的作用及其可能机制.[方法]给予林蛙油小、大剂量组0.05,0.50g/kg林蛙油匀浆液.采用酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(IL)-4,IL-5及γ-干扰素(IFN-γ)水平的变化,观察BALF中炎性细胞和肺组织病理学改变.[结果]与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎性细胞计数、IL-4,IL-5水平均显著增高(P<0.05),IFN-γ水平显著降低(P<0.05).与哮喘模型组比较,林蛙油小、大剂量组小鼠BALF中炎性细胞计数、IL-4,IL-5水平均明显降低(P<0.05),IFN-γ水平显著增高(P<0.05).林蛙油小、大剂量组哮喘小鼠肺组织病理学改变明显减轻.[结论]林蛙油对哮喘模型小鼠具有保护作用,其机制可能与调节Th1/Th2平衡失调、减轻炎性细胞浸润有关.     

不同剂量致敏原对小鼠过敏性哮喘模型的影响

目的:研究不同剂量致敏原对小鼠过敏性哮喘模型的影响.方法:用不同剂量的鸡卵蛋白(OVA)致敏激发BALB/c小鼠,复制哮喘模型,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数、嗜酸粒细胞百分比,ELISA检测血清中OVA特异性抗体IgE、IgG2a和脾单核细胞培养上清中IL-4、IL-5、IL-12、IFN-γ的含量变化,常规病理切片观察肺内炎症情况.结果:10 μg组肺部炎症情况最明显,BALF白细胞总数(×105/ml)、嗜酸粒细胞百分比(％)、OVA特异性抗体IgE(U/ml)分别为(13.05±2.07,75.1±8.9和256.16±2.58),与0 μg组(2.78±0.21,0.5±0.5,3.16±0.75)、100 μg组(8.69±1.61,64.2±9.1,133.74±2.11)、1 000 μg组(4.17±0.36, 12.4±3.4, 32.07±1.96)相比差异性显著,且IL-4、IL-5升高以10 μg组明显,高剂量1 000 μg组IL-12、IFN-γ、IgG2a升高明显.结论:致敏原的剂量可能通过影响细胞因子的产生类型而影响小鼠哮喘模型表型的变化.     

五宝胶囊对哮喘小鼠肺泡灌洗液中Th1/Th2、Th17/Treg失衡及趋化因子的影响

目的观察民族药五宝胶囊对卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)所致的哮喘小鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF)中Th1/Th2、Th17/Treg失衡及趋化因子Eotaxin、IL-8、MCP-1的影响。方法BALB/c小鼠随机分为5组(正常组、模型组、地塞米松组、五宝胶囊低、高剂量组),采用OVA致敏和激发的方法复制哮喘模型。HE、PAS染色观察小鼠肺组织病理学变化,快速瑞氏-吉姆萨染色法观察BALF中各类炎症细胞数目,ELISA测定小鼠BALF中IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-10、Eotaxin、IL-8、MCP-1的含量。结果五宝胶囊能够显著减轻哮喘小鼠肺组织炎症浸润和黏液的分泌,降低各类炎症细胞数目及BALF中IL-4、IL-17A、Eotaxin、IL-8、MCP-1的生成(P0. 01,P0. 05),并能明显升高IFN-γ、IL-10的含量(P0. 01,P0. 05)。结论五宝胶囊可能通过调节BALF中Th1/Th2、Th17/Treg相关细胞因子平衡及抑制趋化因子Eotaxin、IL-8、MCP-1的生成来发挥防治哮喘的作用。     

诱导幼鼠食物过敏与哮喘发生的免疫学相关性研究

目的研究早期诱导小鼠食物过敏与后期哮喘发生的免疫相关性及其肺部组织病理学改变。方法6周龄断乳雌性BALB／c幼鼠（n=37）随机分为3组,分别为空白对照组（n：12）,食物过敏组（n=13）和哮喘组（n=12）。造模结束后各组均采用卵清蛋白（OVA）雾化激发,检测各组血清IgE水平、支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞因子IL-4、INF-γ水平,计算BALF中炎性细胞与嗜酸性粒细胞（EOS）数量。取小鼠肺部组织做病理切片,观察支气管管壁厚度和EOS浸润。结果食物过敏组与哮喘组血清IgE水平、BALF中IL-4水平、IL-4／INF-γ比值和EOS计数均显著高于空白对照组（P〈0．05）,哮喘组BALF中IL-4水平和EOS计数显著高于食物过敏组（P〈0．05）,而两组间IgE水平差异无统计学意义（P〉0．05）;食物过敏组与哮喘组BALF中IFN-γ水平显著低于空白对照组（P〈0．05）。肺组织病理观察显示,食物过敏组与哮喘组肺部组织嗜酸性细胞浸润均明显增加（P〈0．05）,支气管管壁增厚,哮喘组EOS浸润数显著高于食物过敏组（P〈0．05）。结论食物过敏组和哮喘组模型均存在IgE介导的全身免疫应答增高,食物过敏所致的肺部Th1／Th2免疫失衡和炎性细胞浸润可能是后期哮喘发生的免疫学机制。     

麻黄定喘汤对咳嗽变异性哮喘模型小鼠Th1/Th2类细胞因子水平的影响

[目的]探讨麻黄定喘汤对咳嗽变异性哮喘小鼠气道炎症和Th1/Th2类细胞因子水平的影响及其可能机制.[方法]取雄性BALB/c小鼠,以给予卵清蛋白溶液的方法建立咳嗽变异性哮喘模型,麻黄定喘汤小、大剂量组分别灌胃给予20,60mL/kg麻黄定喘汤.采用酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素4(IL-4),IL-5,IL-13及γ干扰素(IFN-γ)含量,并观察BALF中的炎性细胞计数变化和肺组织病理学改变.[结果]模型对照组小鼠BALF中炎性细胞计数及IL-4,IL-5,IL-13,IFN-γ水平均明显降低,与正常对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05).麻黄定喘汤小、大剂量组小鼠BALF中炎性细胞计数及IL-4,IL-5,IL-13水平显著降低,IFN-γ水平明显上升,与模型对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05).麻黄定喘汤明显减轻哮喘小鼠肺组织病理学改变,麻黄定喘汤小、大剂量组之间相比较,差异无统计学意义(P>0.05).[结论]麻黄定喘汤对咳嗽变异性哮喘小鼠具有治疗作用,其机制可能与调节IL-4/IFN-γ平衡失调、减轻炎性细胞浸润有关.