蛋白质磷酸酶2A癌性抑制因子在CML患者外周血单个核细胞中的表达及意义

摘要:目的：观察蛋白质磷酸酶2A癌性抑制因子（CIP2A）在慢性髓细胞白血病（CML）患者外周血单个核细胞中的表达及意义。 方法：收集不同临床分期［CML-CP(慢性期)、CML-AP/BP（加速/急变期）］的41例CML患者和35例体检健康者外周血标本,分离单个核细胞,用RT-PCR检测CIP2A mRNA的表达,并对CML患者进行随访。 结果：CML-CP患者CIP2A mRNA阳性率为63.6％（14/22）,CML-AP/BP患者阳性率为68.4％（13/19）,两组差异无统计学意义（χ²=0.104,P>0.05）;健康人对照组CIP2A mRNA均为阴性。32例随访患者中,CIP2A mRNA阳性患者的死亡率为47.4％（9/19）,阴性患者死亡率为7.7％（1/13）,差异有统计学意义（χ²=3.960,P<0.05）。 结论: CML患者外周血单个核细胞中CIP2A呈高表达状态,可能CML发生相关。     

bcr/ab1 mRNA融合转录本水平与慢性粒细胞白血病演变关系

目的 检测不同病程慢性粒细胞白血病(CML)bcr/ab1 mRNA融合转录本表达水平,评价其在推断CML病情演变价值.方法 利用定量聚合酶链反应(PCR)检测患者不同病期骨髓单个核细胞bcr/ab1 mRNA融合转录本水平.结果 健康对照组0,CML慢性期0.34±0.03,慢性期治疗后0.10±0.03,加速期0.35±0.02,急变期为0.35±0.03,慢性期治疗前后差异无统计学意义,慢性期明显低于加速期和急变期. 结论 bcr/ab1 mRNA表达水平的改变与疾病演变关系密切.     

XIAP基因在慢性髓系白血病中的表达及临床意义

本研究旨在检测慢性髓系白血病(CML)患者XIAP基因mRNA的表达情况,以探讨其在CML病情进展及预后中的意义。应用染色体R显带技术及实时PCR技术对71例CML患者和10名健康者进行染色体核型分析及XIAP mRNA检测。结果表明,XIAP mRNA在CML的加速期和急变期的平均表达水平明显高于慢性期(p<0.01)。XIAP基因在不同核型组的平均表达水平无显著性差异。结论:CML患者加速期和急变期XIAP基因表达明显增高,XIAP基因与CML的病情进展密切相关。     

慢性粒细胞白血病患者外周血Bmi1 mRNA的表达水平

目的采用实时荧光定量PCR(Rt-PCR)检测Bmi1基因表达的方法,了解慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血Bmi1基因的表达水平。方法采用Rt-PCR方法检测CML患者41例和10例健康人外周血中Bmi1基因的表达水平。结果Rt-PCR的结果显示,基因Bmi1在健康人、CML患者慢性期、加速期及急变期中的表达相对值分别为0.544±0.233、1.624±0.632、3.021±0.923及3.561±1.005。CML患者中Bmi1的表达水平明显高于健康人(P0.05),加速期及急变期中Bmi1的表达水平明显高于慢性期,急变期Bmi1的表达水平明显高于加速期,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 Bmi1基因在CML外周血中有高水平的表达,是监测CML患者病情进展及判断预后有价值的分子标记物。     

白血病患者WT1基因表达及其临床意义观察

目的：观察WT1基因在白血病细胞中的表达及其临床意义，初步探讨WT1基因表达与白血病疗效关系。方法：采用逆转录～聚合酶链法(RT-PCR)检测治疗前47例各类型和白血病患者WT1基因的表达，并观察缓解后患者WT1基因表达的变化，并对33例WT1表达阳性者进行单链构象多态性分析(SSCP)分析。结果：急性白血病37例中30例(81．08％)WT1表达阳性，其中急性髓细胞白血病16／19例(84．21％)阳性，急性淋巴细胞白血病14／18例(77．78％)阳性；慢性粒细胞白血病(CML)急变期3／5例阳性，CML慢性期5例均阴性。WT1表达阳性对治疗缓解率无明显影响。对WT1表达阳性的21例急性白血病治疗后WT1表达动态观察，当获得完全缓解时，WT1表达转阴性；在白血病复发前及复发时，WT1表达转阳性。SSCP分析33例WT1阳性表达者第7～10外显子区PCR产物，未发现泳动异位条带。结论：WT1在急性白血病中表达阳性率较高；慢性粒细胞白血病慢性期未见WT1表达，急变期阳性率增高；WT1表达阳性对治疗完全缓解无明显影响。WT1基因作为泛白血病标志用于白血病微小残留病灶的检测有重要实用价值。     

bcr／abl mRNA融合转录本水平与慢性粒细胞白血病演变关系

目的检测不同病程慢性粒细胞白血病（CML）bcr／abl mRNA融合转录本表达水平．评价其在推断CML病情演变价值。方法利用定量聚合酶链反应（PCR）检测患者不同病期骨髓单个核细胞bcr／abl mRNA融合转录本水平。结果健康对照组0，CML慢性期0．34±0．03．慢性期治疗后0．10±0．（33，加速期0．35±0．02，急变期为0．35±0．03，慢性期治疗前后差异无统计学意义，慢性期明显低于加速期和急变期。结论bcr／abl mRNA表达水平的改变与疾病演变关系密切。     

急性髓细胞性白血病患者外周血单个核细胞CD28mRNA的表达

背景:大量研究显示,肿瘤患者外周血T细胞表面共刺激分子CD28蛋白表达存在差异,提示共刺激通路异常可能与恶性肿瘤的发生进展有关.目的:观察急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞共刺激信号分子CD28 mRNA在中的表达.方法:急性髓细胞性白血病患者80例,其中M0型7例,M1型6例,M2型18例,M3型15例,M4型17例,M5型9例,M6型8例.并根据急性白血病疗效标准将80例患者分为完全治愈组、缓解组、未缓解组.采用Taqman探针实时荧光定量PCR检测80例患者及76名健康人群外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达.结果与结论:急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞M1,M3和M4亚型中的CD28 mRNA表达量低于健康人群 (P < 0.05);急性髓细胞性白血病未缓解组中CD28 mRNA低于健康人群 (P < 0.05),完全治愈组和缓解组中CD28 mRNA表达与健康人群差异无显著性意义.说明急性髓细胞白血病患者外周血单个核细胞存在CD28 mRNA表达缺陷,并与临床分期、病情进展及预后有关.     

急性髓细胞性白血病患者外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达

背景：大量研究显示,肿瘤患者外周血T细胞表面共刺激分子CD28蛋白表达存在差异,提示共刺激通路异常可能与恶性肿瘤的发生进展有关。目的：观察急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞共刺激信号分子CD28 mRNA在中的表达。方法：急性髓细胞性白血病患者80例,其中M0型7例,M1型6例,M2型18例,M3型15例,M4型17例,M5型9例,M6型8例。并根据急性白血病疗效标准将80例患者分为完全治愈组、缓解组、未缓解组。采用Taqman探针实时荧光定量PCR检测80例患者及76名健康人群外周血单个核细胞CD28 mRNA的表达。结果与结论：急性髓细胞性白血病外周血单个核细胞M1,M3和M4亚型中的CD28 mRNA表达量低于健康人群（P〈0.05）;急性髓细胞性白血病未缓解组中CD28 mRNA低于健康人群（P〈0.05）,完全治愈组和缓解组中CD28 mRNA表达与健康人群差异无显著性意义。说明急性髓细胞白血病患者外周血单个核细胞存在CD28 mRNA表达缺陷,并与临床分期、病情进展及预后有关。     

SHP-1 mRNA在髓系白血病患者中的表达及临床意义

目的:探讨造血细胞磷酸酶(SHP-1)信使核糖核酸(mRNA)在髓系白血病患者中的表达及其与治疗效果和慢性髓系白血病(CML)临床分期的关系。方法:54例CML患者,30例初诊急性髓系白血病(AML)患者,10例非恶性肿瘤常规查体者做对照组(CG),应用SYBR Green荧光定量PCR的方法,检测骨髓或外周血单个核细胞中SHP-1 mRNA的表达情况。结果:CG、慢性髓系白血病慢性期(CP-CML)、进展期CML、AML组SHP-1 mRNA的相对表达水平分别为:1.15±0.62,4.96±1.76,2.60±0.90,0.45±0.20。CML患者SHP-1 mRNA表达水平较CG组表达水平显著增高(P0.05)。CML患者中,CP-CML患者的SHP-1 mRNA表达水平非常显著高于进展期CML患者(P0.0001)。AML患者较CG组SHP-1 mRNA表达水平明显降低(P=0.0442)。CP-CML患者伊马替尼(IM)治疗3个月时的治疗反应理想组初诊时SHP-1 mRNA表达水平为5.712±0.4476,非常显著地高于反应不佳或失败组4.044±0.3701(P=0.0090)。AML患者诱导化疗达完全缓解组(CR)初诊时SHP-1 mRNA表达水平为0.4984±0.05164,高于未完全缓解组(non-CR)0.3537±0.02388(P=0.0017)。结论:CML患者SHP-1 mRNA表达水平高于AML患者,且与CML疾病进展相关;初诊时SHP-1 mRNA表达水平可以作为预测CP-CML对伊马替尼早期治疗反应及AML患者诱导化疗效果的指标。     

白血病患者WT1基因表达的研究

目的：探讨WT1基因与白血病发病的关系和临床意义。方法：采用逆转录－巢式聚合酶链反应（RT－巢式PCR）方法检测了K562和HL－60两个白血病细胞系、49例急性白血病（AL）患者、33例慢性髓系白血病（CML）患者和25例正常对照的WT1基因表达。结果：K562和HL－60两个白血病细胞系、29例初治或复发AL患者中有21例、20例完全缓解（CR）期AL中有1例、18例CML急变期中有15例、5例CML加速期中有1例、10例CML慢性期患者中有1例表达WT1基因。WT1基因表达见于所有AL亚型，其相对水平与急性白血病的CR率有相关性。≥1．0的患者CR率低及生存期短。在CML中WT1基因表达表现出明显的阶段性，与慢性粒细胞白血病临床阶段及病情进展有关。结论：WT1基因表达与白血病发生有关，WT1基因高表达的患者CR率低、无病生存期短，可作为判断急性白血病预后和监测微量残留病的一项指标，也可作为CML急变的一项诊断指标。     

eIF4E在白血病中的表达及其临床意义

本研究旨在比较eIF4E在正常人和白血病患者中的表达水平,了解eIF4E是否在白血病的发生和发展中起到一定的作用。收集10例正常人和76例白血病患者的外周血细胞标本,76例患者包括39例急性髓系白血病,15例慢性髓系白血病和22例急性淋巴细胞白血病,分离标本中的白细胞,分别通过实时定量PCR和Western blot检测eIF4E在mRNA和蛋白质水平的表达变化。结果表明,就eIF4E mRNA绝对表达水平而言,在急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病及慢性髓系白血病急变期,其表达增高,与正常对照比较有显著性差异(P<0.05);在慢性髓系白血病慢性期,其表达水平无明显改变,在慢性髓系白血病加速期,其表达水平虽有所上调,但与正常对照无显著性差异。就eIF4E mRNA相对表达水平而言,在慢性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病及除M4、M5之外的急性髓系白血病中,其表达均无显著性变化。eIF4E蛋白质表达在急性髓系白血病、急性淋巴细胞白血病、慢性髓系白血病加速期和急变期中均有不同程度的增高,与正常对照比较有显著性差异(P<0.05)。结论:虽然eIF4EmRNA相对表达水平在大多数白血病中并无显著性改变,但是eIF4E mRNA绝对表达水平及其蛋白质水平在大多数白血病中均显著性上调。因此推测,eIF4E可能对白血病的发生和发展起到一定的作用,以它为靶点治疗白血病,尤其是复发和难治性白血病,可能是一条有希望的途径。     

初诊白血病患者溶血磷脂酸酰基转移酶基因表达研究

本研究旨在检测白血病患者溶血磷脂酸酰基转移酶-β（lysophosphatidic acid acyltransferase β,lpaat β）mRNA的表达水平,为lpaatβ靶向治疗在白血病中的应用提供理论基础。采用实时荧光定量PCR方法检测初治白血病患者lpaatβ mRNA的相对表达水平,分析其在各型白血病中的表达情况。结果,急性白血病（AL）患者lpaatβ mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）;急性髓系白血病（AML）患者lpaatβ mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）,且lpaatβ mRNA的表达水平与外周血白细胞计数（WBC≥20.0×109/L）、白血病细胞CD34表达呈正相关（p〈0.05）,与患者的髓外侵犯无明显相关性（p〉0.05）。除外急性早幼粒细胞白血病（APL）病例之外,lpaatβ mRNA的表达水平与AML患者的化疗敏感性呈负相关（p〈0.05）。慢性髓系白血病（CML）患者lpaatβ mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）。急性淋巴细胞白血病（ALL）患者lpaatβ mRNA的表达与正常对照组相比,差异无统计学意义（p〉0.05）。结论：AML、CML患者均存在着lpaatβ基因的超高表达。AML细胞产生的lpaatβ可能在AML细胞的异常增殖及化疗耐药中起着重要作用。     

CIAPIN1基因在白血病患者骨髓单个核细胞中表达的研究

本研究旨在检测CIAPIN1基因在白血病患者中的表达,探讨其在白血病中的作用。收集112例初治白血病患者的新鲜骨髓,用TRIzoL一步法提取细胞总RNA、合成cDNA、以β-actin为内参,应用实时定量PCR方法检测CIAPIN1mRNA的表达;实验中选择10例正常人的骨髓作为对照。结果表明:骨髓单个核细胞(MNC)中CIAPIN1mRNA在急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)和慢性髓系白血病(CML)患者中的表达均高于正常人(p<0.05);在慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者中的表达与正常人相比差异无统计学意义(p>0.05)。结论 :CIAPIN1基因在初治白血病患者MNC中表达升高,其表达上调在白血病的发病中可能有一定的作用。     

白血病患者WT1基因的表达及其临床意义

目的：探讨ＷＴ１基因在白血病细胞中的表达及其临床意义。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法测定Ｋ５６２、ＨＬ－６０、ＴＦ－１及Ｕ９３７四株白血病细胞系，４５例白血病患者，１５名正常人外周血及１０例非血液病患者正常骨髓细胞ＷＴ１基因的表达。结果：Ｋ５６２、ＨＬ－６０及ＴＦ－１三株白血病细胞系均高度表达ＷＴ１，而Ｕ９３７细胞系未测到ＷＴ１。急性髓系白血病（ＡＭＬ）２５例中２１例、急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）１１例中８例、慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）急性变者２例、慢性及加速期ＣＭＬ患者７例中１例ＷＴ１表达阳性。１５名正常人外周血及１０例非血液病患者正常骨髓细胞ＷＴ１基因表达阴性。结论：ＷＴ１基因在大多数急性白血病中表达，与白血病的病程发展可能有关，可作为检测白血病微量残留病的特异性标记。     

急性和慢性髓系白血病患者中螺旋酶抗原基因表达的研究(英文)

本研究旨在探讨螺旋酶抗原基因(HAGE)在急性髓系白血病(AML)和慢性髓系白血病(CML)中的表达状况和临床意义。应用实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测AML和CML患者骨髓单个核细胞中HAGE cDNA的表达。结果表明:74例AML患者中11例(14.8%)存在HAGE过表达(117.12%-9842.70%,中位434.96%);HAGE过表达患者年龄显著高于HAGE阴性者(中位年龄分别为67和45岁,p=0.001)。HAGE表达在单核细胞亚型AML(M4和M5,7/20,35.0%)中明显高于其它亚型AML(4/54,7.4%)(p=0.007)。28例核型正常的AML患者中8例(28.6%)呈HAGE过表达,而40例核型异常的AML中仅3例(7.5%)存在HAGE表达(p=0.041)。9/26例(34.6%)CML患者存在HAGE过表达,加速期和急变期患者中HAGE表达率(4/4,100%)明显高于慢性期患者(5/22,22.7%)(p=0.008)。结论:HAGE cDNA表达与AML单核细胞亚型类别相关,且与CML疾病进展相关。     

初治白血病患者april mRNA的表达研究

本研究旨在检测27例确诊白血病患者april mRNA的表达水平,为april分子靶向治疗在白血病中的应用提供理论基础。采用实时荧光定量PCR方法检测初治白血病患者april mRNA的相对表达水平,分析其在各型白血病中的表达变化。结果表明：急性白血病（AL）患者april mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（p〈0.05）;急性髓系白血病（AML）患者april mRNA的表达高于正常对照组,其差异有统计学意义（p〈0.05）,且april mRNA的表达水平与外周血白细胞计数（WBC≥20.0×109/L）呈正相关（p〈0.05）,与患者的髓外侵犯及CD34表达无明显相关性（p〉0.05）。除外急性早幼粒细胞白血病（APL）病例,april mRNA的表达水平与AML患者的化疗敏感性呈负相关（p〈0.05）。急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性髓系白血病（CML）患者april mRNA的表达与正常对照组相比,差异无统计学意义（p〉0.05）。结论：AML患者存在着april mRNA的过表达。AML细胞产生的APRIL蛋白可能在AML细胞的异常增殖及化疗耐药中起着重要作用。     

β-catenin基因在白血病患者中的表达及其临床意义

目的检测β-catenin在白血病患者中的表达，初步探讨其在白血病中的作用。方法采用半定量RT—PCR方法检测β-catenin在白血病患者中的表达，同时对部分标本应用免疫细胞化学检测其蛋白表达水平，结合临床资料分析其表达的意义。结果骨髓单个核细胞（MNC）中β-cateninmRNA在急性髓系白血病（AML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中的表达（中位值分别为0．7593、0．6415）均明显高于正常人（0．3597）（P值分别为0．001、0．016），也明显高于慢性粒细胞白血病（CML）慢性期患者（0．2571）（P值分别为0．001、0．008），但在AML和ALL之间差异无统计学意义（P〉0．05）。β-catenin在CML慢性期患者的表达与正常人相比差异无统计学意义，但是在急变和加速期患者（0．9152）中明显增高，与急性白血病水平相当。按照FAB分型，β-catenin在AMLM，亚型中高表达，而在M3中表达明显低于其他亚型。免疫细胞化学结果显示，正常MNC β-catenin主要分布于细胞膜和细胞质，而在白血病细胞中，除M3外几乎均可以在细胞核中检测到其程度不一的表达。患者年龄、白细胞计数、高危核型以及治疗反应与β-catenin均无显著相关，但在AML组β-catenin与CD34抗原表达有明显相关性。结论经典的Wnt／β-catenin信号传导途径有可能在急性白血病及CML急变和加速期中被激活。     

分化抑制因子nm23基因在急性白血病细胞中的表达及临床意义

目的 探讨分化抑制因子nm23在急性白血病细胞中的表达水平及临床意义。方法 应用RT-PCR半定量分析34例初诊急性白血病[22例急性髓系白血病(AML)，12例急性淋巴细胞白血病(ALL)]，9例临床完全缓解AML(AML-CR)，4例慢性粒细胞白血病(CML)患的骨髓标本中nm23-H1、nm23-H2的mRNA表达水平，并分析了其与一些临床指标的关系。结果 nm23-H1基因在急性白血病，尤其是粒-单核细胞及单核细胞白血病(M4,M5)中的表达水平明显增高；经化疗完全缓解后的AML患nm23基因表达显低于初诊AML患；在AML中，nm23-Hl的高表达与外周血白细胞计数、乳酸脱氢酶、CD7及髓外浸润等预后较差指标呈正相关性，而与特征性染色体异常如t(8；21)和t(15；17)呈负相关性。结论 nm23-Hl基因在急性白血病特别是粒．单核细胞白血病(M4,M5)中表达较正常人明显增高，可能是AML预后较差的一种标志。