水通道蛋白3、4、8在大鼠慢传输型便秘模型结肠黏膜中的表达

目的探讨水通道蛋白（AQP）3、4、8在大鼠慢传输型便秘（STC）模型中的表达情况。方法利用复方地芬诺酯灌胃的方法建立大鼠STC模型,采用RT—PCR方法测定STC组（16只）及对照组大鼠（16只）升、降结肠黏膜的AQP3、4、8mRNA表达情况。结果STC组与对照组升结肠、降结肠AQP3平均相对表达量分别为0．344和0．602（P〈0．05）、0．419和0．509（P〉0．05）：STC组和对照组升结肠、降结肠AQP4平均相对表达量分别为0．764和0．759（P〉0．05）、0．776和0．736（P〉0．05）;AQP8在实验组和对照组升降结肠中未见明显表达。结论AQP3在STC大鼠的升结肠黏膜中表达下调,对水吸收起调节作用：AQP4和AQP8的表达无明显变化。     

功能性便秘患者结肠黏膜水通道蛋白3和水通道蛋白9的表达及意义

目的研究功能性便秘患者结肠黏膜水通道蛋白3（AQP3）和水通道蛋白9（AQP9）的表达与分布情况．并探讨其与便秘的关系。方法采用免疫组化技术和Western印迹半定量检测法检测45例功能性便秘患者（试验组）和21例无便秘患者（对照组）结肠黏膜AQP3和AQP9，把AQP3和AQP9与相应内参蛋白β-actin的灰度值之比视为AQP3和AQP9的相对含量。结果免疫组化检测显示：AQP3主要表达在结肠黏膜顶部的吸收细胞．且主要分布于细胞膜的基底侧和腔面，杯状细胞少见阳性染色，AQP9主要表达在黏膜腔面的杯状细胞，且主要分布于细胞膜的基底侧。Western印迹检测结果：试验组和对照组升结肠AQP3灰度比平均值分别为0．905和0．798（P〈0．05）。AQP9灰度比平均值分别为0．544和0．543（P〉0．05）；试验组和对照组降结肠AQP3灰度比平均值分别为0．697和0．701（P〉0．05），AQP9灰度比平均值分别为0．575和0．732（P〈0．05）。结论功能性便秘患者升结肠黏膜AQP3表达高于非便秘者，而其降结肠AQP9表达则低于非便秘者；AQP3和AQP9含量的增减可能在便秘的发生发展过程中发挥了重要作用。     

结肠次全切除逆蠕动盲直吻合术和结肠全切除回直吻合术治疗慢传输型便秘的疗效比较

目的比较结肠次全切除、逆蠕动盲直吻合术和结肠全切除回直吻合术治疗重度顽固性慢传输型便秘的疗效,方法分析1999年至2005年间收治的37例单纯慢传输型便秘患者患者4年的随访资料,比较结肠次全切除、逆蠕动盲直吻合术（结肠次全切除组,17例）和结肠全切除、回直吻合术（结肠全切除组,20例）后的排便功能。结果两组患者术前一般资料差异无统计学意义（P〉0．05）。结肠次全切除组每天大便（2．4±0．9）次,显著低于结肠全切除组的每天大便（3．4±0．8）次（P=0．0014）。Wexner肛门失禁评分,结肠全切除组（4．3±1．8）高于结肠次全切除组（5．8±1．9）（P=0．0223）。结肠次全切除组患者术后钡灌肠结果显示盲肠及残余升结肠呈“储袋征”。结论与结肠全切除术相比,结肠次全切除、逆蠕动盲直吻合术可能是部分慢传输便秘患者更好的手术选择。     

腹腔镜与开腹结肠次全切除术（保留回盲部）治疗慢传输型便秘的效果比较

比较腹腔镜与开腹结肠次全切除术（保留回盲部）治疗慢传输型便秘（STC）的效果。回顾性分析2019年1月至2021年12月山东省立第三医院胃肠外科收治的STC患者的临床资料,根据治疗手术方式分为腹腔镜组和开腹组,患者随访至少1年,比较两组患者术前与术后1、3、6、12月Wexner便秘评分、胃肠生活质量评分、排便满意度。共入选59例STC患者,其中腹腔镜组27例,开腹组32例,两组患者年龄、性别比例、便秘病程、Wexner便秘评分等一般情况比较差异无统计学意义（P>0.05）。两组患者均成功行保留回盲部的结肠次全切除术。与开腹组相比较,腹腔镜组术中手术时间较长,术中出血量、术后住院时间、术后并发症发生率及排便满意度方面均优于开腹组（P<0.05）。两组患者术后1年Wexner便秘评分、胃肠生活质量评分、排便满意度较术前均显著改善（P<0.05）。术后1个月及术后3个月,腹腔镜组胃肠生活质量评分、排便满意度均较开腹组高,差异有统计学意义（P<0.05）。腹腔镜下结肠次全切除术（保留回盲部）治疗结肠传输障碍便秘安全、有效,并发症少,患者排便满意度高。     

全结肠旷置加回直逆蠕动侧侧吻合术治疗高龄慢传输型便秘

目的评估全结肠旷置、回直逆蠕动侧侧吻合术治疗高龄特发性结肠慢传输便秘的安全性和可行性。方法回顾性分析2009年5月至2011年9月间在武汉大学中南医院接受全结肠旷置、回直逆蠕动侧侧吻合术的13例高龄结肠慢传输型便秘患者的临床资料。结果13例患者中男5例,女8例,年龄63～82（平均74）岁,病程7～38（中位10）年。手术时间（55±4）min,术中出血量（30±2）ml,术后住院时间10～16（平均11．4）d,术后首次排粪时间为术后2N8（平均4）d。无手术意外及术后严重并发症发生。术后随访6～29（中位12）月。术后12个月患者每日排粪3-4次,无便秘复发或腹泻。术后14个月发生盲袢综合征1例。术后6个月,Wexner便秘评分较术前显著降低（5．4±2．1比22．8±3．3,P〈0．05）,胃肠道生活质量指数较术前显著提高（120．8±13．0比93．6±20．5,P〈O．05）。结论全结肠旷置、回直逆蠕动侧侧吻合术为高龄结肠慢传输便秘患者的一种安全、有效、简便的手术方式,可显著的缓解患者的临床症状。     

外科治疗顽固性慢传输性便秘的疗效评价

目的:研究顽固性慢传输性便秘（STC）外科治疗方法与结果。方法:回顾分析我院近几年来治疗STC 24例患者的临床资料。结果:18例患者接受全结肠切除术治疗，6例接受结肠次全切除术，其中14例合并有出口梗阻性便秘（OOC）的患者，术前都给予相关手术矫治，手术治愈率95.8％，术后大便次数平均为（3±1.9）次/d。腹胀由术前的75.0％降为12.5％。1例术后便秘症状复发。结论:结肠切除术是治疗STC的理想手术方式，为保证手术取得良好效果，对合并有OOC的患者术前应行积极矫治处理。     

腹腔镜结肠全切除回直肠吻合术治疗慢传输型便秘

目的评价腹腔镜结肠全切除回直肠吻合术治疗结肠慢传输型便秘（STC）的疗效。方法回顾性分析34例行腹腔镜结肠全切除回直肠吻合术的STC患者的临床及随访资料。结果本组患者手术时间170～230（平均185）min,术后肠蠕动恢复时间为17～72（平均32）h,住院时间9～14（平均11）d,出血量30～120（平均60）ml,切口平均长度5．4cm。术后6个月排便功能评定：正常26例（76．5％）,基本正常7例（20．5％）,不正常1例（3％）。结论腹腔镜下结肠全切除回直肠吻合术治疗STC是一种安全、有效且创伤小、恢复快的手术方式。     

腹腔镜辅助结肠次全切除在重度功能性便秘治疗中的应用

目的探讨腹腔镜辅助结肠次全切除（laparoscopic assisted subtotal colectomy,LASC）联合改良Duhamel手术治疗重度功能性便秘（severe functional constipation,SFC）的效果。方法2005年6月~2007年10月,我们对100例SFC患者行LASC联合改良Duhamel手术,在腹腔镜下完成全结肠游离,在下腹部做小切口进腹,行保留回盲部的结肠次全切除,升结肠直肠侧侧吻合。结果LASC完成98例,中转开腹2例。98例LASC腹腔镜下手术时间（76±23）min（48~125min）,总手术时间（170±42）min（140~225min）,术中出血量（35±18）ml（10~160ml）。术后肠道功能恢复时间（42±12）h（25~52h）,无切口感染、吻合口漏等并发症。术后1周内,2例轻度脱水,2例不全性小肠梗阻,经保守治疗缓解。96例无并发症者术后住院时间（7.0±1.5）d（5~11d）。术后1年,90例便秘症状均明显缓解（大便次数1~3次/d）,7例腹泻（大便次数4~6次/d）,3例有轻度便秘复发（大便次数2~3d一次）。术后1年胃肠生活质量（GIQOL）指数（109±20）分（满分144分）,而术前仅为（94±23）分。83例对排便频率感到满意。结论LASC联合改良Duhamel手术是治疗SFC的有效方法,LASC创伤小,对机体内环境影响少,患者术后恢复快,并发症少,符合损伤控制的理念,值得推广应用。     

雌激素受体β蛋白及其同分异构体在慢传输型便秘大鼠结肠中的表达

目的研究雌激素受体β（ERβ）蛋白及其同分异构体mRNA在慢传输型便秘（STC）大鼠结肠的表达。方法建立STC大鼠模型．采用RT-PCR及Western blot技术检测20只STC大鼠及20只对照组结肠ERβ蛋白及其同分异构mRNA的表达。结果rERβ2mRNA在STC大鼠及对照组结肠均有表达,redβ1、rERβ1δ3、rERβ1δ3,及rERβ1δ4mRNA在两组中均无表达．STC组rERβ2mRNA及蛋白表达量（0．31±0．03,0．57±0．15）低于对照组（0．55±0．05,0．99±0．15）,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论STC大鼠结肠ERβ蛋白及ERβ2mRNA表达量均低于对照组,提示ERβ参与STC的发病。     

术前贫血对人工髋关节置换手术及患者预后的影响研究

目的 探讨术前贫血对行人工髋关节置换手术治疗的股骨颈骨折患者手术及预后的影响，为临床早期干预提供参考依据。方法 回顾性分型2021年1月至2022年12月期间于本院行人工髋关节置换手术治疗的78例骨科患者临床资料，根据患者术前是否存在贫血将其进行分组，其中术前贫血者32例为观察组，46例术前无贫血者为对照组。记录两组患者手术时间、术中出血量、术后住院时间以及血红蛋白水平。评价两组患者术前、术后24 h时疼痛状况；评价两组患者术前、术后3 d、2个月时髋关节功能。记录两组患者住院期间并发症发生率以及输血率。结果 观察组患者手术时间为（102.69±23.58） min、术中出血量（160.25±29.74） mL，与对照组患者手术时间为（101.85±24.01） min、术中出血量（159.78±28.86） mL相比较，P>0.05。观察组患者术后血红蛋白水平为（93.45±8.37） g/L，明显低于对照组患者术后血红蛋白水平为（110.44±9.83） g/L,P<0.05。观察组患者术后输血率、并发症发生率明显高于对照组，P<0.05。观察组患者术后住院时间为...     

大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白2和水通道蛋白4表达的影响

目的 研究大黄总蒽醌对大鼠肾脏水通道蛋白（AQP）2、AQP4表达的影响及探讨大黄利尿机制。 方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组，大黄总蒽醌低、中、高剂量组，每组8只，分别给予不同剂量大黄总蒽醌灌胃，每天1次，共灌5 d。第4天测定大鼠24 h尿量，尿液Na+水平及尿渗透浓度。5 d后处死大鼠，腹主动脉取血，进行血液生化指标检测；并留取肾脏，用免疫组化、Western印迹和RT-PCR法检测肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达变化。 结果 与正常对照组比较，大黄总蒽醌中、高剂量组大鼠24 h尿量显著增加[(16.21±1.96) ml、(18.16±1.80) ml比（13.85±1.25）ml, P均＜ 0.05]，低剂量组大鼠尿量变化不明显；中、高剂量组大鼠肾脏AQP2蛋白及mRNA表达均显著下降（P均＜ 0.01），高剂量组大鼠肾脏AQP4蛋白及mRNA表达显著下降（P ＜ 0.01）；中剂量组大鼠AQP4蛋白表达下降（P ＜ 0.01），但mRNA表达无显著降低；低剂量组大鼠AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达无显著变化。 结论 大黄总蒽醌能降低大鼠肾脏AQP2、AQP4蛋白及mRNA表达水平，这可能是大黄产生利尿的机制之一。     

高原低氧环境下大鼠肾脏水通道蛋白2的表达及意义

目的 研究高原低氧环境下大鼠肾脏内髓水通道蛋白2（AQP2）mRNA及蛋白的表达。 方法 将40只雄性SD大鼠随机分为24 h、48 h、72 h及1周组，同时设立对照组（西宁地区）。将4个实验组由西宁地区（2260 m）带至青海大学可可西里高原医学研究基地(4600 m)，在不同时间点处死取材。用放射免疫法检测血浆抗利尿激素(AHD)浓度，Western印迹、实时定量PCR、免疫荧光等方法检测AQP2蛋白及mRNA的表达。 结果 暴露于高原低氧环境后，大鼠AHD水平首先呈下降趋势，24 h为（142.46±10.57）；48 h时达到最低水平，仅为对照组的28.5%[（86.94±6.49） μg/L比（302.53±10.48） μg/L]；后逐渐上升，72 h组为（169.65±11.15） μg/L，与对照组差异均有统计学意义（均P < 0.01）；1周时为（306.46±11.14） μg/L达到对照组水平。AQP2 mRNA的表达与AHD水平的变化相一致，初入高原后呈下降趋势，48 h时达到最低水平，后逐渐上升，24 h、48 h、72 h组与对照组差异均有统计学意义（分别为0.04±0.005，0.03±0.002，0.04±0.003比0.09±0.008，均P < 0.01），1周时为（0.09±0.01），达到对照组水平。AQP2蛋白表达与mRNA的表达变化一致。免疫荧光结果显示，对照组及1周组大鼠肾脏荧光强度表达一致，其余各组较低，48 h组荧光强度最低。 结论 在高原低氧环境下大鼠肾脏内髓AQP2 mRNA和蛋白的表达在缺氧早期呈下降趋势，后逐渐上升到正常水平，其改变可能和机体对缺氧的程度和高原低氧的习服过程有关。     

慢传输性便秘儿童结肠壁内脂肪酰胺水解酶的检测

目的 检测脂肪酰胺水解酶（FAAH）在慢传输性便秘（STC）患儿结肠壁内的表达及活性情况,并探讨其与儿童STC发生的关系.方法 取便秘组（21例）和对照组（15例）患者手术切下的结肠标本,应用免疫组织化学、Western blot及实时荧光定量PCR方法,对两组儿童结肠壁内FAAH的表达进行分析,并联合应用免疫荧光双重染色技术观察FAAH与大麻素受体1（CB1）的位置与分布,联合应用高压液相色谱技术对两组患儿结肠壁内FAAH的生物活性进行定量检测和分析.结果 便秘组升结肠、降结肠和乙状结肠肠壁中,Western印迹检测FAAH的蛋白表达分别为8.7±3.4、8.2±1.2和8.0±7.2,均弱于对照组的10.5±3.7、10.0±6.4和9.8±3.4,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;免疫组化和荧光定量PCR检测结果相同.FAAH在升结肠、降结肠和乙状结肠肠壁中的水解活性分别为（0.51±0.23）nmol·min^-1·mg^-1、（0.39±0.25）nmol·min^-1·mg^-1和（0.35±0.37）nmol·min^-1·mg^-1,低于对照组的（0.84±0.24）nmol·min^-1·mg^-1、（0.55±0.44）nmol·min^-1·mg^-1和（0.58±0.48）nmol·min^-1·mg^-1,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 STC患儿结肠壁内FAAH的表达降低,水解活性减弱;FAAH可能参与了儿童STC的发生.     

落新妇苷减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤的机制研究

目的 探讨落新妇苷对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的保护作用.方法 SD大鼠,分为Sham组(假手术组)、HIRI组(缺血再灌注组)、落新妇苷组(低剂量组、中剂量组、高剂量组),建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,分别于再灌注4h、8h、16h后取血液及肝脏标本.检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST);光镜下观察肝细胞显微结构变化;Western blot分析肝组织中HMGB1、TLR4、NF-kB、TNF-α的表达.结果 Sham组4h、8h、16 h的血清ALT为(58.11 ±4.81) U/L、(57.12±5.33) U/L、(57.63±4.54) U/L,HIRI组4h、8h、16 h的血清ALT为与(540.38±21.41) U/L、(831.21±20.11) U/L、(191.95±15.35) U/L,HIRI组与Sham组相比,血清ALT在4h、8h、16h均显著升高(P＜0.01).与HIRI组相比,不同剂量组的血清ALT水平在4h、8h、16h均显著降低,其中高剂量组4h、8h、16 h的ALT为(110.12±9.14) U/L、(168.56±11.52) U/L、(81.12±6.45) U/L,降低最明显(P＜0.01);Sham组4h、8h、16 h的血清AST为(167.16±11.55) U/L、(161.55±10.85) U/L、(168.41±11.26) U/L,HIRI组4h、8h、16h的血清AST为(978.83±19.82) U/L、(1514.36±25.22) U/L、(411.25±31.63) U/L,HIRI组与Sham组相比,血清AST在4h、8h、16 h均显著升高(P＜0.01),与HIRI组相比,不同剂量组的血清ALT水平在4h、8h、16 h均显著降低,其中高剂量组4h、8h、16 h的血清AST为(223.75±10.53) U/L、(412.14±23.59) U/L、(205.25±15.48) U/L,血清AST降低最明显(P＜0.01).光镜结果示药物组肝细胞损伤明显减轻.Western blot结果示:高剂量组HMGB1、TLR4蛋白的表达在4h、8h、16 h均较HIRI组显著下降(P＜0.05).高剂量组NF-kB、TNF-α蛋白的表达在术后8h、16 h较HIRI组显著下降(P＜0.05),但在术后4h与HIRI组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 落新妇苷预处理可减轻大鼠HIRI,其作用机制可能与下调HMGB1/TLR4/NF-kB/TNF-d轴,进而抑制炎症有关.     

水通道蛋白4调控恶性胶质瘤细胞凋亡的研究

目的 观察抑制胶质瘤细胞LN229中水通道蛋白4(AQP4)的表达对胶质瘤细胞凋亡的影响,探讨其分子机制.方法 利用小RNA干扰(siRNA)技术稳定转染恶性胶质瘤细胞株LN229并得到细胞克隆(实验组siAQP4/LN229和对照组scr/LN229),Western blot技术检测AQP4的蛋白表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的存活率;流式细胞术(FCM)检测细胞色素C(Cyt-C)含量的变化,并用Western blot检测Cyt-C、bcl-2及Bacl的变化.建立裸鼠皮下成瘤模型,接种siAQP4/LN229和scr/LN229两组细胞(每组20只),观察AQP4降表达对移植瘤生长的影响.结果 稳定转染LN229筛选出AQP4降表达的稳定克隆(clone 2),与对照组比较AQP4的表达明显降低,MTT比色法分别检测在6 d内两组细胞的存活率,第6天存活率分别为:scr/LN229组(587.00±4.68)%.siAQP4/N229组(317.00±26.30)%,差异有统计学意义(P＜0.05);应用流式细胞术检测发现Cyt-C的平均荧光强度分别为ser/LN229组(57.20±16.64),siAQP4/LN229组(468.80±46.90),差异有统计学意义(P＜0.05);在蛋白水平上,siAQP4/LN229组Cyt-C含量的相对灰度值(1.62±0.16)较scr/LN229组(0.83±0.29)显著升高,siAQP4/LN229组B8d含量(1.30±0.24)较ser/LN229组(0.56±0.21)显著增加,而siAQP4/LN229组bcl-2含量(0.53±0.03)较scr/LN229组(0.73±0.12)的表达明显降低(P＜0.05).裸鼠皮下成瘤实验显示第6周时,成瘤平均体积分别为对照组(402.67±34.27)mm3,实验组(65.15±32.12)mm3,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 AQP4能够调控胶质瘤细胞LN229的凋亡,其调节机制可能与Cyt-C的释放及凋亡相关基因Bad和bcl-2有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of apuaporin 4 (AQP4) on apoposis of LN229 glioblastoma cells by AQP4 small RNA interference (siRNA) technology and the molecular mechanism.Methods AQP4 expression was knocked down in LN229 glioblastoma cells by AQP4 siRNA (scr/LN229 and siAQP4/LN229 cells). The expression level of AQP4 protein in LN229 cells was detected by Western blotting. Stable clones were used to measure cells survival ratio (6 days) by methyl thiazol tetrazolium ( MTT) assay. Flow cytometry (FCM) was used to examine the content of cytochrome C in siAQP4/LN229 and scr/LN229. Western blotting was used to measure the levels of cytochrome C, bcl-2 and Bad. Nu/Nu mice were subcutaneously injected with siAQP4/LN229 and scr/LN229 cells to study the growth of tumor in the two groups (20 mice in each group). Results Western blotting showed that the expression of AQP4 was decreased significantly; MTT assay suggested that the survival ratio was decreased with deficiency of AQP4: the survival ratio of scr/LN229 was (587.00 ±4.68)%, and the ratio of siAQP4/N229 was (317. 00 ± 26. 30)% at sixth day (P＜0. 05). The mean fluorescence density of cytochrome C in scr/LN229 and siAQP4/LN229 by FCM was (57.2 ± 16.64) and (468.8 ±46.9) respectively (P＜0.05). The relative intensity of cytochrome C and Bad in siAQP4/N229 cells was ( 1. 62 ±0. 16) and (1. 30 ±0. 24) respectively, and that in scr/LN229 cells was (0. 83 ±0. 29) and (0. 56 ±0. 21) respectively (P＜0. 05). The intensity of bcl-2 in siAQP4/N229 cells (0.53 ±0.03) was decreased compared to scr/LN229 cells (0. 73 ± 0. 12) ( P ＜ 0. 05). The subcutaneous mouse xenograft model showed that the mean tumor volume of scr/LN229 group was (402. 67 ±34. 27) mm3, and that of siAQP4/N229 group was (65. 15 ±32. 12) mm3 at the 6th week. Conclusion AQP4 can regulate apoptosis of glioblastoma cell line LN229, which may be related with the release of cytocherome C, Bad and bcl-2.     

诱导型一氧化氮合成酶对同系大鼠移植肠运动功能的作用

目的 观察诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)对同系原位全小肠移植术后早期移植肠运动功能的影响.方法 分为对照组、移植组、L-NIL治疗组,每组12只大鼠.对照组行十二指肠造瘘术,另两组均行同系原位全小肠移植及十二指肠造瘘术,术后分别给予生理盐水、L-N6-(1-亚氨乙基)-赖氨酸(L-NIL).于术后2 d,各组取6只获取肠段行病理组织学检查,观察炎性损伤程度,并采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测iNOS mRNA及蛋白表达水平.各组另6只行小肠传输实验,观测小肠传输功能.结果 移植组呈明显炎性损伤改变,iNOS mRNA及蛋白表达水平(1.278±0.142)%,(56.33±5.16)%较对照组(0.066±0.016)%,(9.17±3.17%)上调(P＜0.01),较对照组小肠传输延迟(P＜0.01).L-NIL治疗组炎性损伤程度较移植组减轻,iNOS mRNA及蛋白表达水平(0.588±0.096)%,(26.17±4.14)%较移植组下调(P＜0.01),且小肠传输延迟有改善(P＜0.01).结论 iNOS在术后早期移植肠炎症损伤及其引发的肠运动功能障碍中可能起重要作用.     

烫伤早期脑水肿家兔脑组织水通道蛋白4表达与磁共振成像结果相关性研究

目的 观察水通道蛋白4(AQP4)在严重烫伤早期合并脑水肿家兔脑组织中的表达规律以及与磁共振成像(MRI)信号变化的联系,探讨严重烫伤早期脑水肿水的跨膜转运特征. 方法 将35只健康新西兰大白兔按照随机数字表法分为正常对照组(5只)及烫伤组(30只),其中烫伤组家兔均造成50％TBSAⅢ度烫伤(经病理切片证实存在脑水肿).伤后1、2 3、4、5、6h,烫伤组家兔(每时相点5只)行MRI颅脑检查并动态检测表观弥散系数(ADC)值；烫伤组家兔取额叶、顳叶及顶叶皮质,基底节区及小脑组织,采用免疫组织化学法及RT-PCR分别检测AQP4蛋白和AQP4 mRNA的表达.正常对照组家兔同上进行检测.对数据进行单因素方差分析,对AQP4蛋白与ADC值进行一元线性相关分析和Pearson线性相关分析. 结果 与正常对照组比较,伤后6h内烫伤组家兔MRI图像(T1加权像、T2加权像、扩散加权成像)未见明显改变,伤后4～6 h烫伤组家兔脑组织各部位中ADC值均明显降低(F值为0.492～2 271,P值均小于0.05).烫伤组家兔伤后2～6 h脑组织各部位中AQP4蛋白表达趋势大体一致,均明显高于正常对照组(0.164±0.022 -0.247±0.018),其中伤后3 h或4 h达高峰(0.237±0.042-0.306±0.026),F值为2.420～11.439,P值均小于0.05.AQP4蛋白在脑组织各部位的表达均与相应ADC值变化呈显著负相关,其r值为-0.489 - -0.337P ＜0.05或P ＜0.01.烫伤组家兔伤后各时相点脑组织各部位中AQP4 mRNA表达均明显高于正常对照组(F值为39.992～238.584,P值均小于0.05),伤后2h达高峰,且在脑组织各部位表达趋势大体一致. 结论 家兔严重烫伤后早期脑水肿(伤后6h以内)以细胞毒性脑水肿为主,AQP4可能在其形成过程中发挥重要作用.ADC值对于反映AQP4变化,进而无创、便捷评估脑水肿发展状况可能具有重要参考价值.     

失血性休克大鼠血管扩张刺激磷蛋白磷酸化在肠屏障功能障碍中的作用

目的 观察失血性休克大鼠血管扩张刺激磷蛋白(VASP)磷酸化在肠屏障功能障碍中的作用.方法 采用40只Wister大鼠,观察不同休克时相点(1、2、4 h)VASP磷酸化和肠屏障功能变化(以小肠黏膜组织形态、血浆D-乳酸含量反映),及VASP磷酸化激动剂环磷腺苷(cAMP)对休克2 h肠屏障功能的影响.结果 (1)正常组VASP磷酸化水平很低(0.021 ±0.004),休克1 h时增高(0.145 ±0.011)(P＜0.01),2 h后降低(0.108 ±0.010)(P＜0.01);休克1 h肠屏障功能变化不明显,2 h后肠屏障功能显著降低.(2)VASP磷酸化激动剂cAMP可增强休克2 h小肠上皮组织VASP磷酸化(0.169 ±0.030)(P＜0.01),减轻肠屏障功能损伤.结论 VASP磷酸化可能对失血性休克大鼠肠屏障功能有保护作用.     

尿毒症患者桡动脉盐皮质激素受体表达与血管钙化的关系

目的 探讨尿毒症患者动脉血管壁醛固酮-盐皮质激素受体（Ald-MR）表达情况与血管钙化的关系。 方法 以初次行动静脉内瘘术的60例尿毒症患者为对象。术中取桡动脉远心端0.5 cm,van Kossa染色检测血管钙化程度及评分后,将尿毒症患者分为无钙化、轻中度钙化、重度钙化3组（A、B、C组）。免疫组化法检测桡动脉壁MR、11β-羟基类固醇脱氢酶2（11β-HSD2）、核心结合因子α1（Cbfα1）、骨桥蛋白（OPN）、胶原Ⅰ（ColⅠ）表达,计算其吸光度（A）值。原位杂交法检测血管壁醛固酮合成酶2（CYP11B2）mRNA表达。对照组为同期行脾切除术的8例患者,取脾动脉,检测指标同尿毒症组。测定各组患者血清钙、磷、肌酐、甲状旁腺激素（PTH）等指标,对MR表达与钙化积分、骨相关蛋白表达进行Pearson相关分析。 结果 尿毒症患者动脉血管钙化发生率为31.67%（19/60）。A、B、C组分别为41例、11例、8例。对照组患者无血管钙化。免疫组化结果显示,MR、11β-HSD2在对照组均无明显表达;MR表达在A、B、C组中逐步增加,A值分别为728±84、806±133、1288±223,C组显著高于A组（P < 0.01）;11β-HSD2表达在A、B、C组分别为2098±215、3110±373、1607±300,B组最高,C组显著下降,与B组差异有统计学意义（P < 0.01）。骨相关蛋白OPN、Cbfα1、ColⅠ在对照组动脉壁无明显表达;在A、B、C组表达逐步增加,C组显著高于A组（9405±1701比4563±480,1125±592比553±102,754±1871比1821±241,均P < 0.01）,且3种骨相关蛋白分布位置均与van Kossa染色中钙化物质沉积部位一致。原位杂交结果显示各组患者和对照组动脉血管壁均无CYP11B2 mRNA表达。相关分析结果表明,桡动脉MR表达与血管钙化积分、OPN、Cbfα1、ColⅠ表达呈正相关,相关系数分别为0.469、0.312、0.413、0.379,P值分别< 0.01、<0.05、<0.01、<0.01。 结论 尿毒症患者动脉MR表达上调,并与钙化程度、骨相关蛋白表达上调呈正相关,提示尿毒症患者动脉Ald-MR系统活性增强可能是动脉钙化的重要机制。     

马钱子对人肝癌细胞生长的影响及其作用机制

目的 探讨马钱子对人肝癌细胞生长影响及作用机制.方法 体外培养人肝癌细胞SMMC-7721,分别加入5％、10％、20％的马钱子药物血清,噻唑蓝(MTT)比色法测定对人肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用.20％马钱子药物血清作用肝癌细胞SMMC-77210、24、48 h后,分别收集细胞,提取蛋白和总RNA,应用Westem blot和荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测Fas、Cyclin D1、PCNA蛋白和mRNA表达.结果 20％马钱子药物血清对人肝癌细胞72 h的生长抑制率为(54.94±8.19)％,与5％、10％浓度抑制率(19.928±7.653)％、(29.020 ±6.100)％比较差异有统计学意义(F=18.23,P＜0.01).药物血清作用24、48 h后,肝癌细胞SMMC-7721 Fas蛋白表达分别为(0.302±0.009)、(0.399±0.021),与对照组(0.226±0.022)比较,差异有统计学意义(F=68.25,P＜0.05);药物血清作用48 h后,肝癌细胞SMMC-7721 PCNA蛋白表达为(0.7457±0.0386),与对照组、24 h(0.8529±0.0099、0.9016±0.0139)比较,差异有统计学意义(P＜0.05);药物血清作用24、48 h后,肝癌细胞SMMC-7721 Cyclin D1 mRNA表达分别为0.045 680 ±0.038 130、0.026 714±0.019934,与对照组(0.145246±0.048543)比较,差异有统计学意义(F=8.671,P＜0.05);药物血清作用24、48 h后,肝癌细胞SMMC-7721 Cyclin D1蛋白表达,PCNA、Fas mRNA表达变化差异无统计学意义(F =68.25,P＞0.05).结论 马钱子具有抑制人肝癌细胞增殖作用,其抑制效应与药物血清浓度成正相关;通过上调肝癌细胞Fas蛋白和下调PCNA蛋白及Cyclin D1 mRNA表达,是马钱子抑制肝癌细胞增殖的机制之一.