转化生长因子-β1、Clara细胞分泌蛋白16、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6与支气管肺发育不良的相关性研究

目的探讨转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、克拉拉细胞分泌蛋白16(clara cell secretory protein,CC16)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6 (krebs yon denlungen-6,KL-6)在支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)大鼠肺组织中的表达,以及这些蛋白的表达与肺细胞凋亡的关系。方法按随机数字表法随机将SD新生鼠随机分为对照组、模型组,模型组持续暴露在80%~85%氧中构建BPD模型,对照组始终暴露在空气中。每组在7 d,14 d,21 d时(简称为7 d模型组、14 d模型组、21 d模型组)随机选出8只新生鼠处死,留取5 m L血清。HE染色观察各组肺组织病理学改变,并分析辐射状肺泡计数(radial alveolar count,ROC),肺泡平均截距(mean linear intercept,MLI)。TUNEL染色检测各组肺组织中的细胞凋亡。ELISA检测各组新生鼠的血清中TGF-β1、CC16、KL-6的水平。Western blot检测各组肺组织中TGF-β1、CC16、KL-6的表达水平。同时分析肺组织中TGF-β1、CC16、KL-6的表达与肺组织细胞凋亡率的关系。结果与正常组相比,模型组肺组织随暴露氧时间的延长BPD损伤加剧,RAC、血清中CC16的水平以及肺组织中CC16的表达明显减少,MLI、细胞凋亡率、血清中TGF-β1、KL-6的水平,肺组织中TGF-β1、KL-6的表达明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,模型组新生鼠肺组织中TGF-β1、KL-6的表达与肺组织的细胞凋亡率呈正相关(r=0.977、0.970,均P=0.000),CC16的表达与细胞凋亡率呈现负相关(r=-0.982,P=0.000)。结论肺组织中TGF-β1、CC16、KL-6的表达与BPD肺组织的细胞凋亡密切相关。     

致死性高浓度氧对新生鼠发育和肺损伤的影响

目的探讨致死浓度氧(95%)与新生鼠肺发育及损伤的关系,建立支气管肺发育不良动物模型。方法将3dSD新生鼠随机分为高氧(95%)和空气氧组,并和成年鼠对照,观察记录体质量、身长;HE染色观察肺组织形态结构,做辐射状肺泡计数(RAC)。结果(1)高氧新生鼠和成年鼠死亡率分别为12.5%、35.2%,与正常空气氧组比较,新生鼠体质量(18.02±0.68vs13.24±0.59)和身长(8.83±0.25vs6.76±0.51)增长明显减少(P<0.05)。(2)高氧新生鼠RAC值为9.50±1.05,较正常同日龄新生鼠(13.00±1.79)明显减少(P<0.05),高氧成年鼠RAC值(12.67±2.25)比高氧新生鼠为高(P<0.05),跟正常空气组新生鼠差异不明显(P>0.05)。(3)10d新生鼠肺结构已接近成年鼠肺,高氧组新生大鼠可见肺泡壁较薄、结构简单化、数目明显减少,肺泡大小不均,有些肺泡融合、体积增加,部分间隔细胞增多,小血管扩张、充血;成年鼠高氧组肺间质水肿、肺间隔增厚、肺泡腔缩小,肺间隔伊红显色强度增强,肺泡腔内出现红细胞、巨噬细胞及脱落的肺上皮细胞。结论新生大鼠暴露于92%￣95%氧7d可致生长障碍和肺泡化阻滞,出现类似早产儿支气管肺发育不良的肺组织形态特征。     

骨髓间充质干细胞对高氧暴露新生大鼠肺损伤的干预作用

目的 研究大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)对高氧引致新生大鼠肺组织损伤的干预作用.方法 采用贴壁选择法分离、培养、扩增大鼠骨髓MSC,并以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)进行标记,注射前以磷酸盐缓冲液(PBS)稀释;32只3日龄SD大鼠随机分为4组:A、C组高氧(95%)暴露7 d后,腹腔分别注射含和不含5×104MSC的PBS各50μl;B、D组空气暴露7 d后,腹腔分别注射含和不含5×104MSC的PBS各50μl.于注射后72 h(13日龄)腹腔注射10%水合氯醛后放血处死,肺组织病理学检测辐射状肺泡计数(RAC);支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数检测白细胞及其中性粒细胞;ELASA法检测肺组织匀浆肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β含量.免疫组化双染法检测BrdU和肺泡表面活性物质结合蛋白a(sP-A)表达情况.结果 (1)RAC(个):4组比较差异有统计学意义(11.0±1.0、13.9±1.1、9.6±0.7、14.0±1.1,P=0.000);A、C组均明显低于D组(均P<0.05),A组高于C组(P<0.05).(2)BALF细胞计数:4组白细胞(105/ml:0.85 ±0.21、0.18±0.10、1.44±0.69、0.21±0.06)和中性粒细胞(105/ml:0.32±0.12、0.06±0.02、0.73±0.35、0.07±0.02)计数比较,差异均有统计学意义(均P=0.000);A、C组均明显高于D组(均P<0.05);A组均低于C组(均P<0.05).(3)肺组织匀浆TNF-α及IL-1β含量:4组肺组织匀浆TNF-α(pg/ml:173±20、34±4、224 ±42、35±4)及IL-1β含量(pg/ml:530±74、210±33、948±82、216±30)比较,差异均有统计学意义(均P=0.000);A、C组均明显高于D组(均P<0.05),A组低于C组(均P<0.05).(4)免疫组化:A、B组均有BrdU及SP-A阳性细胞,A组还可见免疫双染阳性细胞;C、D组仅见SP-A阳性细胞.结论 腹腔注射Msc对高氧暴露新生大鼠的肺损伤起保护作用,其保护作用涉及多种机制.     

叶酸对高血糖孕鼠胎鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 建立妊娠期糖尿病大鼠模型,孕期予以叶酸干预,观察叶酸对胎鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 将30只SD孕鼠随机分为3组:DM组(妊娠期高血糖模型组)、DM+FA组(妊娠期高血糖模型+叶酸干预组)、正常对照组(正常妊娠组),每组各10只.于妊娠第6天,DM组与DM+FA组大鼠一次性腹腔注射新配制1%链脲佐菌素(STZ)50 mg·kg-1,正常对照组予等量的柠檬酸纳-柠檬酸缓冲液.从妊娠第7天开始DM组、DM+FA组和正常对照组分别予等容量蒸馏水、叶酸(FA)1.2 mg·kg-1和等容量蒸馏水灌胃,直至妊娠结束.3组孕鼠均于妊娠第21日剖宫取胎,观察活胎数及死胎数,称量胎鼠体重,取胎鼠心脏制作标本.胎鼠心脏标本HE染色后光镜下观察组织结构的变化并计算病变积分,采用免疫组织化学法检测各组胎鼠心肌组织caspase-3蛋白表达,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的地高辛标记的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)检测各组胎鼠心肌细胞凋亡.结果 ①STZ干预前3组孕鼠血糖比较,差异无统计学意义(P>0.05),STZ干预后孕鼠血糖DM组、DM+FA组与正常对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01),DM组与DM+FA组相比,差异无统计学意义(P>0.05).②死胎率DM组、DM+FA组均显著高于正常对照组(P＜0.01),但DM+FA组较DM组显著降低(P<0.01).胎鼠体质量:DM组和DM+FA组均显著高于正常对照组(P<0.01),DM组和DM+FA组比较差异无统计学意义(P>0.05).③光镜下胎鼠心肌组织病变积分、胎鼠心肌组织中caspase-3蛋白阳性表达的平均光密度值及胎鼠心肌细胞凋亡率DM组、DM+FA组均显著高于正常对照组(P<0.01);但DM+FA组较DM组显著降低(P<0.01).结论 孕鼠妊娠期高血糖可引起胎鼠心肌细胞凋亡以及凋亡相关蛋白表达增多的改变,妊娠期补充叶酸对母鼠高血糖所导致的胎鼠心肌细胞凋亡有保护作用.     

脊髓小胶质细胞在糖尿病神经痛形成中的作用

目的:观察大鼠糖尿病神经痛模型中脊髓小胶质细胞的活化状态和P物质含量的变化及腹腔注射米诺环素后的效应。方法:48只Wistar雄性大鼠,12只为正常对照组(C组);其余单次腹腔注射STZ制备糖尿病模型。自注射STZ前1 d起,连续29 d,糖尿病大鼠注入米诺环素40 mg/kg(M4组)、20 mg/kg(M2组)、等量PBS(D组)。在注射STZ前1 d、注射STZ后7 d、14 d、21 d、28 d(t1～5)测定机械性缩足反射阈值MWT。在t5时处死大鼠取脊髓,免疫组化测定P物质含量,RT-PCR测定小胶质细胞标志性蛋白CR3表达。结果:与C组相比,D组MWT下降,P物质含量降低,CR3 mRNA表达增强(P<0.05);与D组相比,M4组MWT升高,M4组和M2组P物质含量升高,CR3 mRNA表达减弱(P<0.05);与M2组相比,M4组MWT和P物质含量均升高(P<0.05),CR3 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:糖尿病神经痛的形成依赖于脊髓内激活的小胶质细胞,P物质在该模型中含量减少,小胶质细胞活化被米诺环素抑制的同时,P物质含量增加并且神经痛得到了改善。     

链脲菌素性糖尿病大鼠模型对抗原引起的变应性气道炎症的影响

目的 :探讨 1型糖尿病对变应性气道炎症的干预作用及其机制。方法 :将 4 0只雄性SD大鼠分为 5组 ,每组 8只。A组 :腹腔注射链脲菌素 (STZ)建成 1型糖尿病模型 卵清蛋白 (OVA)雾化吸入激发 ;B组 :腹腔注射OVA致敏 雾化吸入激发 ;C组 :腹腔注射STZ OVA致敏 雾化吸入激发 ;D组 :OVA致敏 腹腔注射STZ 激发 ;E组为对照组。检测各组血清C肽水平、Ⅳ型白细胞介素 (IL 4 )和γ 干扰素 (IFN γ)水平 ,作支气管肺泡灌洗液 (BALF)的细胞计数和分类 ;收获右下叶肺组织 ,切片并进行HE染色 ,光学显微镜下观察各组气道炎症细胞浸润情况。结果 :经过注射STZ干预的C组和D组的气道炎症、BALF的细胞总数及分类细胞均较B组显著降低 (P <0 .0 5 ) ,同时血清IL 4水平也较B组下降 (P <0 .0 5 ) ,IFN γ水平则增高 (P <0 .0 5 )。结论 :STZ性糖尿病可以抑制抗原引起的气道炎症过程 ,并通过调节辅助性T淋巴细胞 1(Th 1)和Th 2相关细胞因子的水平而实现。     

姜黄素对高氧致新生鼠支气管肺发育不良的保护作用

目的 研究姜黄素对高氧暴露致新生鼠支气管肺发育不良的影响,探讨其作用机制.方法 给予出生6 h内的SD大鼠持续60%氧暴露14d建立肺损伤模型.通氧的同时予姜黄索100 ms/(kg·d)灌胃.观察肺组织病理学改变,进行辐射状肺泡计数(RAC),末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡.免疫组化和Western blot法检测肺组织活化半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达.结果 与空气对照组相比,随着氧暴露时间的延长,高氧组的大鼠出现肺发育停滞的典型病理表现:肺泡增大、结构简化,肺泡隔增厚.RAC明显减少,肺组织细胞凋亡明显增加,免疫组化和Western blot法均显示肺组织活化Caspase-3表达明显升高.姜黄素能改善损伤的肺病理结构,并在干预14d后使RAC显著增多,肺组织凋亡细胞显著减少,干预4d后肺组织活化Caspase-3显著降低.结论 姜黄素可减轻高氧暴露所致的BPD,可能是通过抗凋亡机制实现其保护作用.     

Nrf2激活对新生大鼠高氧致肺损伤的保护作用

目的 观察NF-E2相关因子2（Nrf2）激动剂对高氧致新生大鼠肺组织细胞凋亡的影响,探讨Nrf2激活是否对高氧致新生大鼠肺损伤具有保护作用。方法 将足月顺产SD 新生大鼠90只随机分为空气对照组( N组)、高氧组( O 组)和Nrf2组,每组各30只。O 组和Nrf2组新生鼠于出生后第1 d、第2 d分别腹腔注射生理盐水0.2 mL或Nrf2激动剂莱菔硫烷0.2 mL（30 mg/kg）,N组不予任何干预。O组和Nrf2组新生大鼠于第1次注射后置入氧体积分数>95%的高氧环境中持续饲养4 d,N组则持续于空气中饲养。3组新生大鼠麻醉后取肺组织,采用TUNEL染色比较3组新生大鼠肺泡细胞的凋亡指数(AI),采用免疫组化染色检测Nfr2在肺组织中的表达。结果 O组新生大鼠肺泡细胞AI值〔(28.8±3.0)%〕高于N组〔(0.7±0.6)%〕和Nrf2组〔(7.2±0.8)%〕,差异有统计学意义（P<0.01）。O组(926.80±130.51)和Nrf2组(1 038.40±151.12)肺组织Nrf2表达差异无统计学意义（P>0.05),但与N组(30.03±9.99)比较均明显增高,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 Nrf2激动剂可减少高氧致新生大鼠肺泡细胞凋亡,对高氧引起的肺损伤具有一定的保护作用。     

孕鼠腹腔注射脂多糖致新生鼠肺损伤模型的构建

目的:探讨孕鼠腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致新生鼠肺损伤模型的构建方法?方法: 孕18 d SD大鼠随机分为生理盐水对照组(control组)和LPS组,观察腹腔注射不同剂量LPS(2.5?2.0?1.5?1.0?0.5 mg/kg)与等量灭菌生理盐水后的孕鼠反应并统计孕鼠死亡率及流产率,依上述实验结果选定较低死亡率的LPS剂量?分别予孕鼠腹腔注射LPS(0.9?0.8?0.7?0.6?0.5 mg/kg)及等量灭菌生理盐水后记录各组新生鼠肺的病理评分?湿/干重比值(W/D)及肺组织中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α mRNA?白细胞介素(interleukin,IL)-1β mRNA和TNF-α蛋白的表达量?进一步研究LPS 0.7 mg/kg组中孕19 d胎盘?胎肺及新生鼠生后第1?4?7 d肺组织中炎症因子(TNF-α?IL-1β)mRNA表达量变化与组织病理改变?结果:①LPS组中随着药物剂量递减,孕鼠死亡率及流产率逐渐降低,当LPS剂量小于1.0 mg/kg时孕鼠死亡率及流产率降低至25%以下;②LPS 0.5~1.0 mg/kg时,与对照组比较,LPS< 0.7 mg/kg时新生鼠肺病理评分?W/D?组织TNF-α及IL-1β mRNA表达差异无统计学意义(P均> 0.05),LPS≥0.7 mg/kg时上述指标均显著升高,且差异有统计学意义(P均< 0.05);③孕鼠腹腔注射LPS 0.7 mg/kg时,胎盘?胎肺炎症因子较对照组显著升高,且LPS组新生鼠生后第1?4?7天肺组织中TNF-α?IL-1β mRNA表达水平均显著高于对照组(P均< 0.05)?结论: SD大鼠孕18 d腹腔注射0.7 mg/kg LPS可导致新生鼠肺病理损害?肺水肿,炎症因子TNF-α?IL-1β增高,并延续到生后7 d,是制备宫内感染新生鼠肺损伤模型稳定?可靠的方法?     

筛选妊娠糖尿病巨大儿大鼠模型的新方法

目的建立妊娠糖尿病巨大儿大鼠模型。方法SD雌性大鼠腹腔注射链脲佐菌素（streptozotoein，STZ）25mg／kg，之后与同系雄性大鼠合笼见栓者定为孕0d。孕6d测定血糖高出孕前20％者为模型组（M组），与正常对照组（C组）继续妊娠至孕21d行剖腹产术，分离胎鼠。结果M组胎鼠体重、身长、尾长均显著大于C组（均P〈0．001）、胎鼠血糖高于C组（P〈0．001）。结论腹腔注射25mg／kg STZ后挑选孕6d血糖高于孕前20％者可复制妊娠糖尿病巨大儿大鼠模型。     

姜黄素对新生大鼠卵巢卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响

目的：探讨姜黄素对新生大鼠卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响。方法：雌性SD大鼠分为母鼠灌胃组（受孕11.5d母鼠灌胃姜黄素（100mg·kg^-1·d^-1）直至分娩,分别取出生后1、2和4d龄雌仔鼠卵巢）,新生鼠腹腔注射组（正常出生1d龄雌仔鼠腹腔注射姜黄素（100mg·kg^-1·d^-1）,连续4d,分别取出生后2、4d龄卵巢）和对照组（以母、幼均未用药的正常同天龄新生鼠的卵巢为对照）。卵巢组织切片由苏木精-伊红染色,观察不同发育阶段的卵泡比例,TUNEL染色检测卵巢内卵母细胞凋亡情况。结果：在1d龄卵巢中,母鼠灌胃组未装配卵泡比例明显低于对照组（P〈0.05）,而原始卵泡的比例明显增加（P〈0.05）;在2d龄卵巢中,新生鼠腹腔注射组未装配卵泡比例明显低于对照组（P〈0.05）,而原始卵泡比例则明显高于对照组（P〈0.05）;在4d龄卵巢中,新生鼠腹腔注射组的原始卵泡比例显著下降（P〈0.05）。早期初级和发育卵泡比例显著升高（P〈0.05）。在1、2d龄卵巢中,母鼠灌胃组和新生鼠腹腔注射组卵母细胞TUNEL阳性率均明显低于对照组（P〈0.05）。结论：姜黄素能加快新生大鼠卵母细胞巢破裂,促进原始卵泡的发育启动,同时能抑制卵母细胞凋亡,可能有益于延长卵巢的生殖寿命。     

细胞凋亡与BCL-2在葛根素干预新生鼠缺血缺氧性脑损伤模型中的表达

目的探讨葛根素治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型的疗效.方法将28只7日龄SD大鼠随机分为四组.其中葛根素治疗组、生理盐水对照组、HIBD模型组各8只,均结扎右颈总动脉后吸入8%O22h,制成HIBD模型;假手术组4只.治疗组用葛根素1g/kg体重腹腔注射7d,对照组用生理盐水腹腔注射7d,HIBD模型组为空白对照.7d后处死,均采用原位末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡和SP染色BCL-2.结果假手术组可见少量凋亡细胞;HIBD模型组与生理盐水对照组细胞凋亡数显著多于葛根素治疗组,P＜0.01;BCL-2的免疫强度低于葛根素治疗组,P＜0.05.结论葛根素对细胞凋亡有抑制作用,对BCL-2蛋白的免疫强度有增强作用,证实其可治疗新生鼠缺氧缺血性脑损伤.     

产前单次应用地塞米松和氨溴索对胎鼠及子代鼠肺形态的影响

目的:探讨产前单次联合给药小剂量地塞米松和氨溴索对胎鼠及生后子代大鼠肺形态发育的影响?方法:36只孕鼠随机分成2组:地塞米松加氨溴索干预组(n=9)和生理盐水对照组(n=9)?在妊娠第17天,干预组腹腔注射地塞米松0.2 mg/(kg·d)加氨溴索100 mg/(kg·d),对照组腹腔注射等体积的生理盐水?取两组孕19天,生后3天,生后7天胎(仔)鼠肺组织,通过光镜和电镜技术,观察在大鼠肺发育的不同阶段两组肺组织形态发育差异?结果:①光镜下:孕19天干预组胎鼠肺每视野平均原始肺泡计数大于对照组(P < 0.05),平均原始肺泡腔面积大于对照组(P < 0.01),平均原始肺泡间隔厚度小于对照组(P < 0.01)?生后3天干预组仔鼠肺每视野平均囊泡表面积大于对照组(P < 0.05),平均囊泡间隔厚度小于对照组(P < 0.05),平均囊泡计数与对照组相比无显著差异(P > 0.05)?生后7天干预组仔鼠肺每视野平均肺泡表面积大于对照组(P < 0.05),平均肺泡间隔厚度小于对照组(P < 0.05),平均肺泡计数与对照组相比无显著差异(P > 0.05);②透射电镜观察:孕19天胎鼠肺干预组Ⅱ型肺泡上皮细胞绒毛发育较对照组密集完整,可见板层小体,对照组难见板层小体?生后3天及7天的仔鼠肺干预组和对照组均可见大量板层小体,但干预组较对照组板层小体染色深?致密,且可见大量线粒体等发达的细胞器?结论:小剂量地塞米松联合氨溴索产前单次用药,不仅能促进大鼠胎肺成熟,也可促进其生后一段时期的肺发育且未产生明显不良影响?     

氯胺酮和咪哒唑仑联合使用对乳鼠神经细胞凋亡的影响

目的　探讨联合使用氯胺酮和咪达唑仑对乳鼠神经细胞凋亡的影响。方法　新生 7日龄SD大鼠 2 4只 ,随机分成 4组 (n =6 ) :对照组 (C组 ) :腹腔注射生理盐水 (10ml·kg-1) ;K组 :腹腔注射氯胺酮 (2 0mg·kg-1) ;M组 :腹腔注射咪哒唑仑 (10mg·kg-1) ;K M组 :腹腔注射氯胺酮 (2 0mg·kg-1)和咪哒唑仑 (10mg·kg-1)。用药后2 4h ,用原位缺口末端标记法 (TUNEL法 )检测神经细胞的凋亡情况 ,免疫组织化学SP法检测Caspase 3的表达水平。结果　①对照组仅有少量的凋亡神经细胞。②与对照组相比 ,K组和M组的凋亡细胞及Caspase 3阳性细胞数明显增多 ,其中K组的凋亡细胞以皮层区多见 (P <0 0 5 ) ;M组的凋亡细胞以海马区多见 (P <0 0 5 )。两组在丘脑部位均可见较多的凋亡细胞 (P <0 0 5 )。③K M组的凋亡细胞及Caspase 3阳性细胞数明显多于对照组 (P <0 0 1) ,与K组、M组比较 ,差异有极显著性意义 (P <0 0 1)。结论　氯胺酮和咪哒唑仑联合使用可引起未成熟鼠脑明显的神经细胞凋亡 ,其机制可能与Caspase 3激活有关。     

角质细胞生长因子对高氧暴露下新生大鼠SP-A表达的影响

目的研究角质细胞生长因子(KGF)对高氧暴露下新生大鼠肺组织SP-A表达的影响。方法将生后3d的54只SD大鼠随机分为三组。A组:空气组,B组:高氧组,C组:KGF干预组。B、C组大鼠持续暴露于95%氧气中,C组于吸氧同时于背部皮下注射htKGF1mg/kg/d,连用3d后改为0.5mg/kg/d直至实验结束。A组和B组给予等量生理盐水。A组大鼠呼吸空气。于高氧暴露后3d、7d、14d取肺组织,采用免疫组化方法观察肺组织中SP-A表达的变化。结果B组高氧暴露3d时SP-A表达强度较A组增强(P0.05);高氧暴露7d时SP-A表达强度与A组相比较,差异无统计学意义(P0.05),高氧暴露14d时SP-A表达强度较A组和KGF组减弱,差异有统计学意义(P0.01)。SP-A在C组与A组在3d、7d、14d的表达无显著性差异。结论长时间暴露于高氧环境,使肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)受损,SP-A分泌随之减少,导致PS功能丧失,阻碍肺发育,KGF促进AECⅡ增殖和分化,增加肺表面活性物质合成与分泌,对胎肺的发育和分化具有重要作用。     

百草枯中毒致大鼠急性肺损伤时NF-κB抑制剂对中性粒细胞凋亡的影响

目的:探讨在百草枯(PQ)中毒所致大鼠急性肺损伤时NF-κB抑制剂(PDTC)对中性粒细胞凋亡的影响。方法:120只大鼠随机分为4组:1正常对照组(C组):腹腔注射生理盐水3ml/kg;2PDTC对照组(PC组):腹腔注射PDTC120mg/kg,半小时后腹腔注射生理盐水3ml/kg;3急性肺损伤组(L组):大鼠腹腔注射2%PQ(25mg/kg);4急性肺损伤+PDTC干预组(L+P组):腹腔注射PDTC(120mg/kg),半小时后腹腔注射2%PQ。后两组分别以腹腔注射PQ后的1d、3d、5d作为观测点,处死动物、取材,每个时间点16只大鼠。取肺组织HE染色来评价肺组织损伤情况;检测血清中TNF-α水平、肺泡灌洗液中PMN的NF-κBp65表达、PMN中胞浆蛋白IκBα的含量和中性粒细胞凋亡率。结果:肺组织病理结果显示,C组和PC组大鼠的肺组织结构基本完整。L组炎性细胞浸润明显增多,肺组织损伤程度加重。P+L组肺组织损伤程度较轻。L组血清TNF-α水平较C组显著增加,P+L组降低。L组3d时PMN的凋亡率最低(3.52±0.34)%,P+L干预组与相应时间点L各组相比凋亡率均增加。结论:百草枯中毒导致了大鼠急性肺损伤,在预先应用NF-κB抑制剂(PDTC)后,使延缓的中性粒细胞凋亡恢复正常,从而有效地减轻了百草枯中毒所致的κB大鼠急性肺损伤。     

FN及HA在高氧致新生鼠肺损伤中动态变化及其意义

目的:探讨纤维连接蛋白(FN)及透明质酸(HA)在高氧诱导新生鼠肺损伤发生中动态变化及意义。方法:将160只新生鼠随机分为实验组和对照组,每组80只,采用高浓度氧诱导的肺损伤模型,于实验后1,3,7,14,21d,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜中性粒细胞及肺组织含水量的变化,并应用酶联免疫吸附法测定肺组织FN及HA的含量。结果:与对照组比较,在实验组肺组织含水量1d增加(P<0.05),3d达高峰(P<0.01),7d仍高于正常(P<0.05);BALF中嗜中性粒细胞的水平7,14,21d均明显升高(P<0.01);而FN含量3d开始升高(P<0.05),7d达高峰(P<0.01),14d仍高于正常(P<0.05);HA含量1d开始升高(P<0.05),3d达高峰(P<0.01),7d仍高于正常(P<0.05)。结论:暴露高氧环境中新生鼠的肺组织FN及HA水平增加可能与早期肺泡炎性反应和肺间质水肿密切相关。     

长期应用糖皮质激素对新生大鼠肺泡形态结构及IGFBP-2的影响

目的:探讨长期应用糖皮质激素 (ICSs) 对新生大鼠肺形态结构及其对肺内胰岛素样生长因子结合蛋白2 (IGFBP-2) 表达的影响?方法:新生SD大鼠48只随机分为3组:对照 (CONT) 组 (雾化吸入生理盐水);雾化吸入布地奈德 (BUD) 组;腹腔注射地塞米松 (DEX) 组?每个干预组内设7 d给药组与14 d给药组?大鼠5日龄时开始干预,各组在连续给药7?14 d 后,测量大鼠体重及肺组织重量,计算肺系数,通过肺组织形态学分析评估肺发育程度,应用蛋白免疫印迹技术 (WB) 检测IGFBP-2在肺组织中的表达?结果:① 大鼠体重及肺系数:BUD组与CONT组体重间差异无统计学意义 (P > 0.05),但DEX组体重较CONT组明显下降 (P < 0.01)?BUD组肺系数低于CONT组 (P < 0.01)?给药14 d后,DEX组肺系数与CONT组间无统计学差异 (P > 0.05);② 肺组织形态学:BUD组?DEX组肺泡囊数量较CONT组减少 (P < 0.01),间隔变薄 (P < 0.01),囊腔增大 (P < 0.05),BUD组?DEX组肺泡形态学指标间无统计学差异(P > 0.05);③肺组织IGFBP-2蛋白表达:IGFBP-2在BUD组?DEX组表达强于CONT组?结论:长期应用糖皮质激素可抑制新生大鼠肺泡化过程,该现象可能与糖皮质激素上调IGFBP-2在肺组织中的表达有关?     

60%氧暴露对新生小鼠一般状态及肺病理形态学的影响

目的探讨中浓度氧（60％O2）暴露对新生小鼠发育中肺的影响。方法30只新生雌性KM小鼠,随机分为实验组和对照组,每组15只,实验组置于封闭氧箱中（60％O2）,对照组置于空气中（21％O2）,记录吸氧后2、7、14、21、28d小鼠体质量、肺组织病理改变以及辐射状肺泡计数（RAC）。结果实验组吸氧7d后体质量明显降低（P〈0．05）,苏木素一伊红染色下正常肺泡结构消失、肺泡融合、肺泡间隔增厚,RAC较对照组明显减少（P〈0．01）。结论持续较高浓度氧吸人可致新生小鼠生长障碍和肺泡化阻滞,出现类似人类支气管肺发育不良的肺部改变。     

川芎嗪对CVB3感染小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的 探讨川芎嗪对病毒性心肌炎(VM)小鼠心肌细胞凋亡的影响.方法 将50只BALB/c小鼠随机分为A、B、C、D、E 5组,每组10只.A组腹腔注射生理盐水0.5 mL;B、C、D、E组均腹腔注射柯萨奇病毒B组(CVB 3)0.5 mL诱导小鼠,建立VM模型.1 d后,A、B组给予腹腔注射生理盐水10 mg·kg-1,1次·d-1,连用7 d;C、D、E组分别腹腔注射盐酸川芎嗪注射液5 mg·kg-1、10 mg·kg-1、15 mg·kg-1,1次·d-1,均连用7 d;9 d 后处死小鼠.采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡;光镜下观察心肌病理变化;免疫组织化学技术检测各组小鼠心肌细胞中Fas/FasL蛋白的表达.结果 心肌病理变化:A组无病变;心肌病变积分B组明显高于C、D、E组(均P＜0.01);细胞凋亡:与A组比较,B、C、D、E组细胞凋亡指数明显升高(P＜0.01或P＜0.05),与B组比较C、D、E组细胞凋亡指数明显降低(P＜0.01);Fas/FasL蛋白阳性染色指数:B、C、D、E组均显著高于A组(P＜0.01或P＜0.05),C、D、E组显著低于B组(P＜0.01).结论 川芎嗪可通过下调病毒性心肌炎小鼠心肌细胞Fas/FasL蛋白表达,减少心肌细胞凋亡和心肌损伤.